血清中血管生長因子以及生長抑素在乳腺癌中的表達(dá)

賈巖峰 張文清 劉杰 張香梅

乳腺癌已經(jīng)成為全球女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，全世界每年約有120萬婦女患乳腺癌，50萬人死于乳腺癌。隨著生活水平的提高，我國乳腺癌發(fā)病率和死亡率都迅速上升，它是女性腫瘤中發(fā)病率最高的一種疾病，從20世紀(jì)70年代末開始，乳腺癌一直居全球女性惡性腫瘤之首［1］，調(diào)查顯示，我國每年有4萬人死于乳腺癌，成為城市女性的“第一殺手”。因此對乳腺癌治療前后相關(guān)物質(zhì)的表達(dá)進(jìn)行觀察比較對正確估計乳腺癌的預(yù)后，推進(jìn)乳腺癌的新的治療成為關(guān)鍵的一步。近年來血清中血管生長因子以及生長抑素在乳腺癌中的表達(dá)的研究逐漸成為一個新的熱點(diǎn)。

1 材料方法

1.1 儀器和試劑 人VEGF定量ELISA試劑盒、ELISA試劑盒均為上海森雄科技實業(yè)有限公司產(chǎn)品。

試劑盒組成:①96孔微孔板:一塊，已包被抗人VEGF/EGF/b-FGF單抗;②樣品稀釋液:一瓶;③第一抗體工作液:一瓶;④酶標(biāo)抗體工作液:一瓶;⑤底物稀釋液:一瓶;⑥終止液(2molH2SO4):一瓶;⑦洗滌液(經(jīng)20倍濃縮的PBS+表面活性劑):一瓶，pH=7.2～7.4;⑧標(biāo)準(zhǔn)品:二管(凍干粉):6400pg/ml(VEGF);⑨OPD片:三片;⑩坐標(biāo)紙:一張。

對象:本研究對59名女性乳腺癌患者血清VEGF及SS進(jìn)行檢測。其中未手術(shù)者14例，根治術(shù)后初治患者21例，病情進(jìn)展轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)者19例，治療后病情穩(wěn)定超過1年者5例。在出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的患者中，僅有骨轉(zhuǎn)移的5例，出現(xiàn)內(nèi)臟轉(zhuǎn)移的有11例。患者年齡30～75歲(其中52歲以下32例，52歲及以上者27例)。

樣本采集:所有患者均在晨起空腹時抽取全血3ml，置入普管。4℃ 2000rpm×10min離心，取上清液分裝后即置于-20℃冰箱保存待測。放化療后的血清樣本均在患者治療后3～4周采集，然后進(jìn)行VEGF定量ELISA測定。并對59例乳腺癌標(biāo)本進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測，觀察SS陽性的例數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 利用SAS系統(tǒng)，進(jìn)行χ2檢驗，得出結(jié)果。

2 結(jié)果

59例乳腺癌患者本次治療后血清VEGF和SS均明顯下降。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

VEGF(Vascularendothelialgrowthfactor，血管內(nèi)皮生長因子)為肝素結(jié)合分子，在體外及體內(nèi)均有很強(qiáng)的血管生成作用。VEGF也被稱作血管通透因子，它具有特異性血管內(nèi)皮絲裂原以及血管通透因子的活性，是由細(xì)胞分泌的二聚體蛋白質(zhì)。它能夠刺激內(nèi)皮細(xì)胞遷移，增加血管的通透性，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖以及新生血管的存活。它在內(nèi)皮細(xì)胞形成管腔時發(fā)揮作用，與血管島、血管形成和造血有關(guān)?，F(xiàn)代觀點(diǎn)認(rèn)為腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移均依賴于腫瘤血管形成。血管的生長使腫瘤能獲得足夠的營養(yǎng);新生血管形成后腫瘤灶局部快速播散，增強(qiáng)腫瘤灶的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力［2］。因此，血管形成在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用，已成為腫瘤治療的新靶點(diǎn)之一。

表1 放化療后血清中各測量值的分布

VEGF在乳腺癌組織的表達(dá)為50%左右，在發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的病例中，VEGF表達(dá)更高，可達(dá)90%以上。本研究對象主要為治療后乳腺癌患者，從術(shù)后患者病情進(jìn)展以及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的情況來判斷血清中以VEGF為主的包括b-FGF和EGF在內(nèi)的生長因子的意義。已有較多研究證明VEGF在乳腺癌組織表達(dá)與正常乳腺組織存在明顯差異。

生長抑素(SS)是一種含有14個氨基酸的環(huán)狀多肽類激素，它是第一個被闡明結(jié)構(gòu)的抑制性促垂體激素。它的生理作用主要是抑制生長激素、胃泌素、促胰液素和胰高血糖素的釋放，因此被一些學(xué)者稱之為“內(nèi)分泌系統(tǒng)的總開關(guān)”［3］。動物實驗表明，SS及SS類似物具有拮抗腫瘤的作用，這是由于SS能夠抑制促進(jìn)腫瘤增殖的生長因子［4］。SS除了本身所具有的正常生理作用外，還能夠直接或間接地抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn)在誘導(dǎo)鼠乳癌的同時，用生長抑素的類似物，奧曲肽可使腫瘤形成的數(shù)目及增殖程度明顯減少和降低。

本研究結(jié)果顯示，SS在乳腺良性腫瘤和乳腺癌中的檢出率差異性顯著(P＜0.05)，在乳腺癌中，隨著病理類型惡性程度的遞增，SS的表達(dá)強(qiáng)度逐漸減弱，各類型間比較具有顯著性差異(P＜0.05)。本實驗得出:SS表達(dá)程度強(qiáng)的乳癌的預(yù)后好于SS表達(dá)弱的乳癌。這也說明SS在乳腺癌的發(fā)展過程中可能起著局部防御，延緩腫瘤發(fā)展的作用［5］。

綜上所述，SS在乳腺癌中的表達(dá)是機(jī)體發(fā)生于病灶局部的一種反應(yīng)，它降低了乳腺癌細(xì)胞的增殖活性，延緩了腫瘤的發(fā)展。SS在乳腺癌中的檢測，可彌補(bǔ)臨床和病理學(xué)檢查的不足，其指標(biāo)可成為指導(dǎo)治療和分析預(yù)后的參考因素，血清VEGF及SS隨著乳腺癌患者病情進(jìn)展而升高，可聯(lián)合檢測作為患者隨訪的指標(biāo)。

［1］余宏迢，劉復(fù)生，鄭香齡.乳腺腫瘤診治圖譜.河南科學(xué)技術(shù)出版社，1996:52.

［2］Harlozinska A. Progress in molecular mechanisms of tumor metastasisand angiogenesis. Anticancer Res，2005，25: 3327-3333.

［3］黃廣建.生長抑素在腫瘤診治中的應(yīng)用.國外醫(yī)學(xué)外科學(xué)分冊，1996，23(21):84.

［4］Reisine T. Somatosation receptors. Am J Physiol，1995，269: 813.

［5］趙榮華，王元和，陳騰，等.大腸癌患者癌旁黏膜中ss及其分泌細(xì)胞的變化和意義.中華外科雜志，1997，35(5):268.