肝細(xì)胞癌 SCT征象與 V EGF表達(dá)關(guān)系的研究

河南省焦作市人民醫(yī)院病理科(焦作 454000) 陸曉彭 春

肝細(xì)胞肝癌是目前發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一,腫瘤細(xì)胞的生長營養(yǎng)的提供、轉(zhuǎn)移的通路都依賴腫瘤血管的生成。腫瘤細(xì)胞能分泌多種血管活性物質(zhì),直接或間接地作用于血管間皮細(xì)胞,促進(jìn)腫瘤組織的血管的生成。在評價肝癌血管生成方面,目前研究較多的即血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF),其高表達(dá)與肝癌的形態(tài)特征、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為密切相關(guān)。我們研究了肝細(xì)胞肝癌的SCT征象,測定了 VEGF蛋白表達(dá)強(qiáng)度,來探討其相關(guān)性,現(xiàn)分析報告如下。

材料與方法

1 病例選擇 選擇手術(shù)切除并經(jīng)病理證實的原發(fā)性肝細(xì)胞癌 42例,共 45個癌灶。術(shù)前均行動靜脈雙期 SCT掃描,SCT掃描前和手術(shù)前末進(jìn)行抗腫瘤治療。 其中男 37例,女 5例,年齡 32～ 74歲,平均 48.8歲。

2 SCT檢查 所有病例術(shù)前均經(jīng)GEHispeedadvantageRP22螺旋 CT機(jī)行增強(qiáng)后動靜脈雙期掃描,動脈期延遲 20～ 30s,靜脈期延遲 60～70s,一次屏氣,范圍從膈頂至肝下緣。 120 kV,220 mAs,螺距為 1～ 1.5 mm,掃描時間為 0.6～ 1.0s(每層)。對比劑總量 75～ 120 ml(1.5ml/kg體重),注射速度 2.5～ 3.0ml/s。

3 SCT表現(xiàn)特征 分組標(biāo)準(zhǔn):分析評價所有病灶的 SCT表現(xiàn)特征,主要包括腫瘤大小、包膜形成、侵襲危險性、強(qiáng)化類型、肝硬化等。

3.1 癌灶大小 直徑小于等于 3.0cm為小肝癌組,大于 3.0cm為大肝癌組。

3.2 包膜情況 分為包膜完整,包膜不完整和無包膜兩組。

3.3 高侵襲危險性組 ①肝門淋巴結(jié)、腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;②門脈癌栓;③主癌灶周圍存在數(shù)目不等的子灶。

3.4 SCT強(qiáng)化類型(動脈期) ①均勻強(qiáng)化:病灶呈明顯的均勻強(qiáng)化;②不均勻強(qiáng)化和(或)環(huán)狀強(qiáng)化:病灶呈不均勻斑片狀強(qiáng)化,其內(nèi)見較多點線狀血管影和(或)病灶呈完整或不完整環(huán)狀強(qiáng)化,其內(nèi)無或僅見少許點狀強(qiáng)化血管影。

3.5 肝硬化 肝左右葉比例失調(diào),尾葉增大,左葉正常、縮小或增大,增大常局限于外側(cè)段,肝裂增寬,肝門區(qū)擴(kuò)大,膽囊位置變形,肝表面凹凸不平,脾大,腹水,側(cè)枝循環(huán)血管擴(kuò)張。

4 病理學(xué)和免疫組織化學(xué) 所有病灶取材后經(jīng)10%中性福爾馬林液固定常規(guī)石蠟包埋,4 μm連續(xù)切片,隨機(jī)取出 1張做 HE染色,Edmondson四級法進(jìn)行分級,每例收集 6張,1張 HE染色,其余免疫組化備用。免疫組織化學(xué) SP法染色步驟按試劑說明書進(jìn)行,以陽性切片為陽性對照,以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照。V EGF陽性判定標(biāo)準(zhǔn):胞漿呈棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞,高倍鏡下隨機(jī)取 5個高倍視野,以平均陽性細(xì)胞數(shù)≥25%為陽性,陽性細(xì)胞數(shù) ＜25%為陰性。

5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用雙盲法,由兩位高年資放射科醫(yī)師分別閱片,對肝細(xì)胞肝癌的螺旋 CT征象進(jìn)行分析,并將結(jié)果與病理和 VEGF表達(dá)進(jìn)行對照。意見不一致時,參照上級醫(yī)生的意見。所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行分析,計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗,等級相關(guān)資料采用 Spearman進(jìn)行相關(guān)分析,以P＜0.05為有顯著性差異,P＜0.01為有極顯著性差異。

結(jié) 果

1 VEGF免疫組化結(jié)果 VEGF在 HCC中表達(dá)于細(xì)胞漿內(nèi),呈片狀或散在分布,以胞漿中出現(xiàn)粗大棕黃色顆粒為陽性表達(dá),HCC中 VEGF蛋白陽性表達(dá)率為57.78%。

2 肝細(xì)胞肝癌 SCT征象和 VEGF蛋白表達(dá)關(guān)系

見附表。

附表 HCC的 SCT表現(xiàn)特征與 VEGF蛋白的表達(dá)情況及相關(guān)關(guān)系

討 論

肝細(xì)胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是我國發(fā)生率居于第 3位的惡性腫瘤[1],影像醫(yī)學(xué)是目前發(fā)現(xiàn)和診斷 HCC的重要方法,其主要手段包括 CT檢查、磁共振成像及超聲檢查等。近年來,多層快速螺旋CT掃描技術(shù)、高場強(qiáng)磁共振成像及超聲技術(shù)的突飛猛進(jìn),探討 HCC醫(yī)學(xué)影像表現(xiàn)與 HCC生物學(xué)行為的關(guān)系已成為可能和必要,尤其是關(guān)于 HCC的生長、轉(zhuǎn)移方式和血液供應(yīng)等相關(guān)生物學(xué)特性與影像學(xué)表現(xiàn)特征之間的聯(lián)系成為研究熱點[2,3]。

腫瘤血管生成是確保腫瘤增殖、營養(yǎng)供應(yīng)和代謝物排除的病理生理基礎(chǔ)。以 VEGF為核心的血管生長因子在腫瘤的生長、浸潤、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用,并具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、加速血管形成的作用。研究證明[4,5]:VEGF是誘導(dǎo)腫瘤血管形成作用最強(qiáng)、特異性最高的調(diào)控因子,亦為目前可知的提高血管通透性最強(qiáng)的因子,通過與其酪氨酸激酶受體結(jié)合發(fā)揮作用。新生的腫瘤血管不能在 CT、MR圖像上直接顯示,但由于腫瘤血管增生導(dǎo)致腫瘤組織細(xì)胞外間隙的容量、灌流和毛細(xì)血管通透性均明顯增加。此外,注射對比劑后組織衰減系數(shù)取決于組織的血流量和血管外液量。因此,影像上強(qiáng)化的組織生理學(xué)基礎(chǔ)與腫瘤血管新生物是可能的,也是可靠的,并可間接推測 VEGF的表達(dá)[6]。

在本研究中發(fā)現(xiàn):SCT圖像上 HCC腫瘤大小、侵襲危險性、強(qiáng)化類型分別與 VEGF表達(dá)之間有相關(guān)性,HCC包膜形成狀態(tài)和癌灶周圍組織有無肝硬化與VEGF蛋白表達(dá)之間無相關(guān)性。分析其原因:①HCC腫瘤體積越大,說明腫瘤細(xì)胞增殖越快,血液供應(yīng)就越豐富,V EGF表達(dá)強(qiáng)度就越強(qiáng)。②本實驗結(jié)果顯示SCT圖像上高侵襲危險性組 VEGF表達(dá)強(qiáng)度較強(qiáng)。進(jìn)一步證實了 HCC高侵襲危險組隨著腫瘤分化越差,越容易復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。③由于肝臟雙重血供及多數(shù)肝癌主要系肝動脈供血,較少或不接受門靜脈供血的特點,本研究選用動脈期 HCC病灶的強(qiáng)化特點進(jìn)行分析。研究顯示,均勻強(qiáng)化組 VEGF表達(dá)低于不均勻、環(huán)狀強(qiáng)化組,提示均勻強(qiáng)化組惡性度較低,預(yù)后較好。④本研究認(rèn)為,包膜形成并非 HCC本身的組織病理學(xué)變化,而是由于腫瘤組織生長引起的纖維組織增生和腫瘤組織對周圍肝組織壓迫所致;其二由于分辨率的原因,SCT無法顯示較薄的包膜結(jié)構(gòu)而造成的,均可導(dǎo)致從腫瘤包膜的完整性來分析腫瘤組織的增殖和生長情況是不可靠的,而需結(jié)合腫瘤包膜內(nèi)的血運(yùn)情況[7]。⑤CT表現(xiàn)與臨床癥狀和肝功能紊亂可以不一致,因此 CT征象僅能反映有明顯表現(xiàn)的一部分病例。說明了 SCT上診斷肝硬化的不可靠性,肝硬化的診斷需依據(jù)臨床上的指標(biāo)。HCC有無肝硬化與 VEGF蛋白表達(dá)之間無相關(guān)性。 Kwak等[8]研究也認(rèn)為,組織學(xué)級別及肝炎類型與 VEGF表達(dá)無關(guān)。

總之,SCT圖像是組織病理學(xué)特征的直接的客觀的反映,根據(jù) SCT圖像上的 HCC表現(xiàn)特征可以推論VEGF蛋白的表達(dá)情況,為 HCC的診斷、治療方案的選擇及預(yù)后判斷提供更切實的理論依據(jù)。

[1] 湯釗猷 ,余業(yè)勤.原發(fā)性肝癌流行病學(xué)與預(yù)防[M].上海:上海醫(yī)科大學(xué)出版社,1999:86-88.

[2] William W,LiP.Tumorangiogenesismolecular pathology therapeutic targeting and ima-ging[J].Acad Radiol,2004,13(7):800.

[3] Katherine W,Christopher RB,Peter N,et al.Evaluation of tumor angiogenesis with U S:I-maging,Doppler,and contrast agents.Acad Radiol,2000,16(7):824.

[4] KimYB,ParkYN,Park C,et al.Increased proliferation activities of vasculare ndothelial cells and tumor cells in residual hapatocellular carcinoma following transcatheter arterial embolization[J].Histopathology,2001,38(2):160.

[5] EbeltJ,Neid M,TannapfelA,et al.Prognostic significance of proliferation markers in hep-atocelluar carcinoma(HCC)[J].Zentralbl Chir,2000,125(7):597.

[6] 夏兆云.肝細(xì)胞癌影像表現(xiàn)及其相關(guān)的分子生物學(xué)基礎(chǔ)[J].武警醫(yī)學(xué),2006,17(8):613-615.

[7] 陳衛(wèi)霞,閔鵬秋 ,周翔平,等.肝細(xì)胞癌螺旋 CT增強(qiáng)雙期掃描邊緣強(qiáng)化與病理對照研究 [J].中華放射學(xué)雜志,2002,36(2):152-156.

[8] Kwak BK,Shim HJ,Park ES,et al.Hepatocellular carcinoma correlation between vascular endothelial growth factorlevel and degree ofenhancementby multiphase contrast enh anced computed tomography[J].Invest Radiol,2001,36(8):487.