木聚糖酶碳水化合物結(jié)合結(jié)構(gòu)域研究進(jìn)展

劉亮偉，程潔，陳紅歌

河南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，鄭州 450002

木聚糖酶碳水化合物結(jié)合結(jié)構(gòu)域研究進(jìn)展

劉亮偉，程潔，陳紅歌

河南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，鄭州 450002

木聚糖酶含有催化活性結(jié)構(gòu)域，有時(shí)還含有非催化活性結(jié)構(gòu)域，促進(jìn)酶與底物結(jié)合，特別是與不溶性底物的結(jié)合及降解，稱為碳水化合物結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (CBM)，它們?cè)谀揪厶墙到膺^程中有重要作用。以下從 CBM來源，所屬家族類型、對(duì)不溶性底物結(jié)合特性、與底物結(jié)合的特定氨基酸、與催化結(jié)構(gòu)域間的連接肽、特別是對(duì)影響木聚糖酶穩(wěn)定性的5個(gè)方面進(jìn)行了綜述，說明CBM對(duì)木聚糖酶性質(zhì)有很大影響。自然界中碳水化合物結(jié)構(gòu)復(fù)雜、難以降解，所以認(rèn)識(shí)CBM相關(guān)性質(zhì)對(duì)研究其與木聚糖酶的協(xié)同作用、提高木聚糖酶活性有重要意義，并根據(jù)CBM屬性用于改造木聚糖酶相關(guān)性質(zhì)進(jìn)行了展望。

碳水化合物結(jié)合結(jié)構(gòu)域，木聚糖酶，底物結(jié)合，穩(wěn)定性

1 CBM家族

現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)很多種CBM，它們位于CD的N-端、C-端或兩端。它們氨基酸長度也不相同，真菌CBM有36個(gè)氨基酸，細(xì)菌CBM有時(shí)多達(dá)200個(gè)氨基酸。人們按照疏水性聚類方法把CBM分為不同家族，每個(gè)家族都有自己的特征，2005年分為42個(gè)家族[4]，至2009年12月增加到57個(gè)家族 (http://www.cazy. org/fam/acc_CBM.html#refs)[5]。絕大部分CBM屬于I、II、III家族 (表1)，其他家族只有少數(shù)幾個(gè)成員，有些家族只有一個(gè)成員。最簡單、分子量最小的CBM 主要來源于真菌纖維素酶，歸屬于CBM家族I，序列長度一般為33~36個(gè)氨基酸，其中研究最透徹的是里氏木霉Trichoderma reesei CBH I。CBM家族II成員較多，又進(jìn)一步細(xì)分為CBM2a、CBM2b兩個(gè)亞家族，它們的差別是 CBM2a含有一個(gè)由 8個(gè)氨基酸組成的環(huán) (Loop)，而CBM2b則不含這個(gè)環(huán)[6]；該家族的代表是糞肥纖維單胞菌Cellulomonas fimi CBM2a 和 熒 光 假 單 孢 菌 Pseudomonas fluorescens CBM，它們位于CD 的N端或C端，序列長度為95~108個(gè)氨基酸。CBM家族III主要來自產(chǎn)纖維素酶的細(xì)菌種類中，如厭氧嗜熱梭菌Clostridium thermocellum CBM 和食纖維梭菌 C. cellulororans CBM，它們的序列長度為150個(gè)氨基酸。其他是一些小的CBM 家族如：5家族的歐文氏桿菌Erwinia crysanthemi CBM[7]，10家族的熒光假單胞菌Pseudomonas fluorescens CBM[8]，它們的結(jié)構(gòu)都由β-sheet多肽組成。

表1 主要CBM家族類型Table 1 Major CBM family

復(fù)雜碳水化合物的降解需要纖維素酶和半纖維素酶協(xié)同作用，CBM不僅存在于纖維素酶中，而且也大量存在于半纖維素酶系中。半纖維素酶系中的木聚糖酶、甘露聚糖酶和其他酶類不降解纖維素底物，但是也含有與纖維素酶中CBM相似的結(jié)構(gòu)，這可能與碳水化合物中纖維素與半纖維素常常結(jié)合在一起有關(guān)。半纖維素酶中的 CBM與纖維素酶中的CBM功能相似，能夠結(jié)合纖維素，也起到細(xì)胞壁黏附、纖維素裝配、蛋白質(zhì)錨定等作用。Black發(fā)現(xiàn)CBM 和連接肽可以加強(qiáng)半纖維素酶降解復(fù)雜底物如植物細(xì)胞壁的能力[3]。木聚糖酶系主要由F/10家族和G/11家族木聚糖酶組成。F/10木聚糖酶常含有CBM，能夠加強(qiáng)酶與木聚糖特異性結(jié)合，有時(shí)也稱這類 CBM 為木聚糖結(jié)合結(jié)構(gòu)域(Xylan binding domain，XBD)。但是 G/11家族木聚糖酶則一般沒有CBM，這種現(xiàn)象可能反映了兩類木聚糖酶進(jìn)化時(shí)間的差異，G/11木聚糖酶可能比F/10木聚糖酶出現(xiàn)較晚[9]。海棲熱袍菌Thermotoga maritima 木聚糖酶A(Xyn10A) 是 F/10家族木聚糖酶，含有多個(gè)結(jié)構(gòu)域，在酶體N-端有2個(gè)重復(fù)的CBM22，在C-端有2 個(gè)重復(fù)的CBM9。以前將這兩個(gè)CBM9稱為C1、C2，每個(gè)結(jié)構(gòu)域序列長度為170個(gè)氨基酸，現(xiàn)在稱為CBM9-1和CBM9-2，其中后者離C-端最近[10]。CBM9-1和 CBM9-2相似性不高，通過生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)它們的氨基酸序列只有11%的一致性；進(jìn)一步對(duì)這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域進(jìn)行同源結(jié)構(gòu)模擬，發(fā)現(xiàn)它們有不同的空間結(jié)構(gòu) (圖 1)。反映出它們?cè)诿阜肿优c底物結(jié)合及酶分子穩(wěn)定性中的作用也不相同[10]。

圖1 CBM9-1和CBM9-2結(jié)構(gòu)Fig. 1 Structures of CBM9-1 and CBM9-2 from T. maritima (The structure was made by using Swiss-model software).

2 CBM對(duì)底物的結(jié)合

一般情況下，CBM不能增強(qiáng)酶分子對(duì)可溶性底物的催化活性，但是對(duì)不溶性底物的催化活性有特殊功能，多個(gè)CBM可以協(xié)同提高酶分子對(duì)不溶性底物的親和力，也能促進(jìn)酶降解不同底物的催化活性。CBM具有纖維素結(jié)合功能，如T. maritima木聚糖酶的CBM9-2能夠特異性結(jié)合纖維素和可溶性多糖的還原糖末端，這也是CBM的特有屬性[11]。F/10家族木聚糖酶常含有CBM，所以對(duì)可溶性和不溶性木聚糖都有分解能力。如橄欖綠鏈霉菌 Streptomyces olivaceoviridis木聚糖酶含有 CD 和 CBM，通過人工方法去掉CBM，它就不能降解不溶性木聚糖，但是并不影響對(duì)可溶性木聚糖的降解。通過結(jié)構(gòu)域移位將CBM放置在C. thermocellum 木聚糖酶CD N-端或C-端不影響對(duì)木聚糖的結(jié)合力，說明CBM在酶分子中的相對(duì)位置與結(jié)合木聚糖的功能關(guān)系不大[12]。通過截去T. maritima木聚糖酶XynA中不同長度的氨基酸，表明C-端CBM具有調(diào)節(jié)酶與微晶纖維素結(jié)合功能，單獨(dú)的CBM9-2也可以提高酶與纖維素結(jié)合能力。CBM9-1、CBM9-2與其他已知CBM序列相似性很低，屬于一種新的 CBM 種類[11]。將耐熱梭狀芽孢桿菌Clostridium stercorarium CBM6融合在嗜堿芽孢桿菌Bacillus halodurans 木聚糖酶C-端，提高了酶對(duì)不溶性燕麥木聚糖的水解活性，對(duì)可溶性木聚糖的水解活性則沒有太大影響，顯示CBM 的主要功能是提高酶分子對(duì)不溶性木聚糖的水解活性[13]。

3 CBM與底物的結(jié)合位點(diǎn)

CBM 主要功能是促進(jìn)木聚糖酶與不溶性底物結(jié)合，可促進(jìn)酶體結(jié)合無定型纖維素、微晶纖維素、不溶性燕麥木聚糖、大麥 β-葡聚糖等，結(jié)合底物親和力是CBM重要指標(biāo)。來源于同一菌種的CBM有相對(duì)一致的結(jié)構(gòu)，但是也有一些差別。通過定點(diǎn)突變和化學(xué)修飾方法尋找結(jié)合底物的氨基酸，人們發(fā)現(xiàn)不含CBM的Bacillus木聚糖酶，結(jié)合底物的氨基酸主要是 Trp5、Phe7、Tyr120、Tyr166、Trp199、Tyr261、Tyr293、Tyr311、Tyr314和Phe315[14]。而含有CBM的木聚糖酶，是通過CBM中的Trp和Tyr幾個(gè)芳香族氨基酸與底物結(jié)合，這些氨基酸組成一個(gè)平面結(jié)構(gòu)，能夠與纖維素底物表面的葡聚糖鏈結(jié)合[15-17]。CBM家族1、2a、3、5都有結(jié)合纖維晶體的表面，研究葡萄糖和纖維二糖結(jié)構(gòu)后，人們認(rèn)為CBM 通過帶電氨基酸間形成的氫鍵網(wǎng)絡(luò)、以及Trp175和Trp71的堆積作用與不溶性底物結(jié)合，微晶纖維素組成螺旋式樓梯狀結(jié)構(gòu)與 CBM 對(duì)應(yīng)表面結(jié)合，而Tyr8、Trp22、Trp24是CBM10家族結(jié)合底物的關(guān)鍵氨基酸[18]。研究發(fā)現(xiàn)CBM9-2全部結(jié)合在單糖、雙糖、寡糖的還原糖末端[10]，多于2個(gè)單糖的纖維寡糖不能增強(qiáng)CBM與底物的親合力，說明纖維二糖能夠占據(jù) CBM中與底物結(jié)合的所有氨基酸位點(diǎn)[11]，所以推測結(jié)合底物長度不多于纖維二糖。

4 CBM與催化結(jié)構(gòu)域之間的連接肽

CBM通過連接區(qū)域與CD相連，這個(gè)區(qū)域稱為連接肽 (Linker)。通常連接肽的序列長度為 6~9個(gè)氨基酸，有時(shí)不同木聚糖酶分子之間 linker 長度差異很大。一般情況下，不同酶分子之間連接肽序列同源性不高。這些linker富含Pro、Thr、Ser等氨基酸，其中Ser或Pro含量較多；它們能夠形成柔韌的絞鏈區(qū)，有助于不同結(jié)構(gòu)域形成有活性的空間構(gòu)象。纖維弧菌Cellvibrio japonicus木聚糖酶Xyn10C是由一個(gè)F/10家族的CD通過linker和CBM15相連組成的，晶體結(jié)構(gòu)顯示 linker是無規(guī)則卷曲線段，呈現(xiàn)出很高的柔韌性[19]。David等用NMR研究木聚糖酶Cex中連接肽結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)linker富含Pro和Thr，在納秒-皮秒尺度上顯示出高度變化的柔性，它能夠?qū)⒉煌Y(jié)構(gòu)域從空間上隔開。連接肽也有助于木聚糖酶通過CBM錨定于細(xì)胞壁上，促進(jìn)CD催化降解復(fù)雜底物[20]。

連接肽在結(jié)構(gòu)域融合過程中有重要作用，將葡聚糖酶Cel5Z同木聚糖酶XynX融合的過程中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)Cel5Z連接在XynX前面時(shí)，融合酶不顯示雙功能酶活性；而將Cel5Z連接在XynX后面時(shí)，融合酶則顯示出雙功能活性[21]。因此推測Cel5Z連接在XynX前面沒有活性，是由于 2個(gè)結(jié)構(gòu)域之間少了linker序列。因?yàn)槟揪厶敲负竺嬗胁煌L度的連接區(qū)域，轉(zhuǎn)化子pXC100 (Cel5Z連接在XynX后面) 含有CBD和SLD區(qū)域，轉(zhuǎn)化子pXC200 (Cel5Z連接在XynX后面) 也含有CBD區(qū)域，而轉(zhuǎn)化子pXC300 (Cel5Z連接在 XynX前面) 沒有顯示結(jié)構(gòu)域之間的linker區(qū)域。研究顯示，雙功能酶活性隨著結(jié)構(gòu)域間連接區(qū)域的縮短而相應(yīng)減少；說明將不同結(jié)構(gòu)域連接在一起時(shí)，linker會(huì)影響結(jié)構(gòu)域能否形成有活性的構(gòu)象[22]。不同序列的linker對(duì)酶活性也有較大影響，對(duì) linker序列優(yōu)化后，融合酶活性有較大提高[23]。說明連接肽影響融合酶的功能和活性，如果沒有可變化的連接肽，兩個(gè)結(jié)構(gòu)域就無法形成有活性的空間構(gòu)象。筆者認(rèn)為要想將Cel5Z連接在XynX前面有雙功能酶活性，必須在兩個(gè)結(jié)構(gòu)域之間加入合適的linker序列。

5 CBM對(duì)酶穩(wěn)定性的影響

人們發(fā)現(xiàn)某些微生物 (解糖高溫厭氧桿菌和熱纖梭菌) 所產(chǎn)木聚糖酶，去除其N-端CBM會(huì)顯著降低酶的穩(wěn)定性；而去除C-端CBM，一般不影響酶分子穩(wěn)定性，因此認(rèn)為酶分子中某些區(qū)域 (主要是N-端CBM) 對(duì)穩(wěn)定性起促進(jìn)作用，所以將這些區(qū)域稱為熱穩(wěn)定性結(jié)構(gòu)域 (Thermostable domain，TSD)，能夠提高酶分子的最適溫度 (Topt)，它們常常串聯(lián)在一起。嗜熱性細(xì)菌F/10木聚糖酶中普遍含有這種TSD，16種嗜熱性酶中TSD結(jié)合在CD的N端[13]。某些CBM既能夠升高酶分子的Topt，又能夠提高酶的穩(wěn)定性[24]。通過人工方法，將耐高溫放線菌Thermomonospora fusca木聚糖酶TfxA的N-端和高比活S. olivaceoviridis木聚糖酶XYNB的C-端融合在一起，融合酶穩(wěn)定性提高6倍[25]。Zhao等將C. stercorarium木聚糖酶Xyn10B截去不同長度，發(fā)現(xiàn)去掉CBM22后酶Topt從75℃降低到65℃；而去掉 CBM9對(duì)木聚糖和葡聚糖活性沒有太大影響。說明Xyn10B特性主要依賴于CBM22而不是CBM9，CBM22能顯著影響木聚糖酶和葡聚糖酶催化活性[4]。李相前等將海棲熱袍菌木聚糖酶 A的CBD融合在葡聚糖酶C-端，從而提高了葡聚糖酶的穩(wěn)定性[26]。

但是，TSD對(duì)酶的穩(wěn)定性作用還沒有得到完全證實(shí)。因?yàn)槭葻崦钢邪l(fā)現(xiàn)TSD不久，人們?cè)谑戎袦谻. fimi酶中發(fā)現(xiàn)了TSD同源序列，說明TSD不是嗜熱酶的特有結(jié)構(gòu)，從而使TSD的穩(wěn)定性作用受到質(zhì)疑。在瘤胃真菌Neocallimastix frontalis木聚糖酶中進(jìn)行結(jié)構(gòu)域融合，發(fā)現(xiàn)融合酶XYN3A4與親本酶XYN3和XYN3A的Topt都是50℃，融合酶最適溫度沒有提高，只是提高了融合酶對(duì)底物親合力和水解活性[27]。Sunna等刪除木聚糖酶 XynA中一些氨基酸片段，發(fā)現(xiàn)TSD與XBD功能相近，可以選擇性地親和可溶性木聚糖，與羥甲基纖維素有微弱結(jié)合力，也有一定穩(wěn)定性作用[28]。研究C. thermocellum木聚糖酶X6說明TSD也是一種CBM[29]。Shin等研究木聚糖酶XynX中TSD與CD的關(guān)系，表明該TSD既能增加酶與底物結(jié)合力，也能增加酶的穩(wěn)定性[12]。Abou-Hachem 等發(fā)現(xiàn)海洋紅嗜熱鹽菌Rhodothermus marinus木聚糖酶Xyn10A帶有CBM時(shí)，其變性溫度隨Ca2+濃度升高而增加，而去掉CBM變性溫度則下降[30]，說明CBM與酶的穩(wěn)定性有一定關(guān)系。但是，后續(xù)研究又出現(xiàn)了相反結(jié)果，融合 T. neapolitana CBM22后，增強(qiáng)了B. halodurans 木聚糖酶對(duì)不溶性木聚糖的水解能力，但是融合酶穩(wěn)定性下降了[31]。Mangala等融合C. stercorarium CBM VI后，B. halodurans 木聚糖酶Topt從野生型70℃降低到60℃[13]。Dias等研究C. thermocellum 木聚糖酶時(shí)，發(fā)現(xiàn)N-端結(jié)構(gòu)域的連接肽邊界區(qū)域提高了酶的穩(wěn)定性，由此推測 CBM22-1不是 TSD[32]。將褐色熱單孢菌Thermomonospora fusca木聚糖酶A的N-端序列替換黑曲霉Aspergillus niger木聚糖酶A對(duì)應(yīng)序列后，雜合酶的作用溫度為60℃，比野生型酶作用溫度有一定程度的升高[33]，說明邊界序列可能影響酶的穩(wěn)定性。

由此可見，CBM 與穩(wěn)定性的關(guān)系還存在爭議，筆者研究發(fā)現(xiàn)，木聚糖酶的穩(wěn)定性除了與其本身氨基酸序列有關(guān)[34-36]，還可能與CBM性質(zhì)不同有關(guān)。因此認(rèn)為不是所有CBM，而只是某些CBM能夠增加酶的穩(wěn)定性；另外，將CBM與催化活性結(jié)構(gòu)域相連時(shí)，沒有合適的連接肽也可能降低酶穩(wěn)定性；所以需要進(jìn)一步研究 CBM 對(duì)木聚糖酶穩(wěn)定性的影響。

6 展望

由CBM的性質(zhì)可知，木聚糖酶活性在很大程度上依賴于CBM，它能夠增加催化結(jié)構(gòu)域與底物的結(jié)合能力，是因?yàn)镃BM形成與底物結(jié)合的表面結(jié)構(gòu)、同時(shí)它們與催化結(jié)構(gòu)域之間的 linker使各個(gè)結(jié)構(gòu)域形成有活性的空間構(gòu)象；另外，某些CBM與穩(wěn)定性有關(guān)，提高木聚糖酶適應(yīng)高溫能力，這些特性可用于木聚糖酶性質(zhì)改造。

一方面，根據(jù)CBM親合不溶性底物特性，將單一催化結(jié)構(gòu)域連接 CBM增加酶對(duì)不溶性底物的降解作用。由于進(jìn)化原因，不是所有木聚糖酶都含有CBM，其中 G/11 木聚糖酶常含單一催化活性結(jié)構(gòu)域，對(duì)可溶性底物降解活性較高；但是沒有CBM，對(duì)不溶性底物降解活性較低。根據(jù)CBM結(jié)合并促進(jìn)酶對(duì)不溶性底物降解的活性，在酶分子改造中，通過人工方法將CBM與催化活性結(jié)構(gòu)域連接，可以提高對(duì)不溶性底物的催化活性。也可以用CBM改造木聚糖酶降解底物的特異性，以降解特殊類型的碳水化合物。另一方面，某些 CBM，特別是高溫菌的CBM 可能與酶穩(wěn)定性有關(guān)，可能提高中溫酶適應(yīng)高溫能力。在酶分子改造中，利用這些CBM提高單一催化結(jié)構(gòu)域的穩(wěn)定性。筆者正將嗜高溫菌海棲熱袍菌T. maritima CBM與中溫黑曲霉A. niger木聚糖酶 III進(jìn)行結(jié)構(gòu)域融合，以提高后者作用溫度和對(duì)不溶性底物的結(jié)合能力。A. niger木聚糖酶III是 G/11家族單一的催化活性結(jié)構(gòu)域，對(duì)可溶性底物有較高降解活性，但是對(duì)不溶性底物催化活性較低；同時(shí)它的Topt為50℃，穩(wěn)定性也較低，在54℃保溫30 min，酶活性則下降53%，不適應(yīng)工業(yè)生產(chǎn)的高溫環(huán)境[37]。通過結(jié)構(gòu)域融合方法可以給這個(gè)酶加上嗜高溫的CBM，結(jié)構(gòu)域融合是通過融合PCR將不同結(jié)構(gòu)域基因連接起來，在此過程中，融合PCR的自我延伸程序是擴(kuò)增融合基因的主要影響因素[38]。另外，各個(gè)結(jié)構(gòu)域需要形成有活性的空間構(gòu)象，合適 linker是影響結(jié)構(gòu)域折疊的重要因素，所以需要加入不同長度和種類的linker，以保證融合結(jié)構(gòu)域折疊成正確空間構(gòu)象。

通過綜述CBM的特性，說明CBM是影響木聚糖酶活性重要的非催化活性結(jié)構(gòu)域，CBM的相關(guān)特征可以用來改造木聚糖酶的性質(zhì)，開發(fā)具有新功能的木聚糖酶，以適應(yīng)催化復(fù)雜碳水化合物的需要。

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Xylanase carbohydrate binding module: recent developments

Liangwei Liu, Jie Cheng, and Hongge Chen
College of Life Science, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China

Besides the catalytic domain, some xylanases contained a non-catalytic domain which is named as carbohydrate binding module (CBM). CBM can be used to improve their binding-ability to insoluble substrates. We illustrated the importance of CBM by reviewing the source of CBMs, type of families, features of binding to insoluble substrates, specific amino acids involved in substrate-binding, linker peptides connecting the catalytic domain, and the effect of CBMs on xylanase thermostability. CBM is important for xylanase to break down complicate carbohydrates. Perspectives on engineering xylanase activity according to the characteristics of CBMs were given.

carbohydrate binding module, xylanase, substrate binding, stability

碳水化合物包括纖維素、半纖維素、淀粉類等物質(zhì)，半纖維素是僅次于纖維素的第二大可再生物質(zhì)。碳水化合物的降解在自然界物質(zhì)和能量循環(huán)中占有重要地位，與可再生能源緊密相關(guān)。然而，碳水化合物結(jié)構(gòu)復(fù)雜，這類物質(zhì)的降解需要復(fù)雜酶系。在絲狀真菌、好氧及厭氧細(xì)菌產(chǎn)生的纖維素降解酶中除含有催化活性結(jié)構(gòu)域外 (Catalysis domain，CD)，還含有一類非催化活性結(jié)構(gòu)域，能夠促進(jìn)纖維素酶體同微晶纖維素結(jié)合，所以這種結(jié)構(gòu)最初稱為纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (Cellulose binding domain，CBD)。隨著碳水化合物水解酶的深入研究，這種類似結(jié)構(gòu)越來越多，它們不僅存在于纖維素酶中，而且也存在于半纖維素降解酶和其他水解酶中。它們能夠促進(jìn)催化活性結(jié)構(gòu)域與碳水化合物的結(jié)合，現(xiàn)在將這類結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱為碳水化合物結(jié)合結(jié)構(gòu)域(Carbohydrate binding module，CBM)，也包括結(jié)合淀粉的結(jié)構(gòu)域[1]。CBM是組成酶的一個(gè)獨(dú)立區(qū)域，可以和一個(gè)或多個(gè) CD結(jié)合；可以是一個(gè)、兩個(gè)、或多個(gè) CBM 通過連接肽 (Linker) 串聯(lián)在一起與CD相連[2]；有時(shí)也會(huì)形成獨(dú)立的亞基結(jié)構(gòu)，如纖維素酶體中CBM亞基和CD構(gòu)成多功能酶復(fù)合體。CBM確切的生物學(xué)功能還不完全清楚，研究顯示它們能夠增加酶在底物附近聚集濃度，也可以通過非共價(jià)鍵作用方式將多糖底物斷裂開，從而增加酶的催化活性[3]。因?yàn)镃BM在促進(jìn)酶與底物結(jié)合、結(jié)合底物特異性、與 CD的連接、以及對(duì)碳水化合物水解酶穩(wěn)定性等方面都有重要作用，所以總結(jié)CBM相關(guān)屬性，對(duì)碳水化合物水解酶特別是對(duì)木聚糖酶活性的深入研究、酶的合理使用、及其相關(guān)性質(zhì)的分子改造都有重要意義。

October 10, 2009; Accepted: January 18, 2010

Supported by:National Natural Science Foundation of China (No. 30972123), Henan Science & Technology Fund (No. 092102110102).

Liangwei Liu. Tel: +86-371-63555175; Fax: +86-371-63579690; E-mail: llw321@yahoo.com.cn

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目 (No. 30972123)，河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目 (No. 092102110102) 資助。