恩施山區(qū)魚腥草揮發(fā)油的化學(xué)成分分析

瞿萬云，譚志偉，余愛農(nóng)，莫海彬，袁 超

(湖北民族學(xué)院 化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院，湖北 恩施 445000)

魚腥草為三白草科植物蕺菜(HouttuyniacordataThunb)的全草,別名側(cè)耳根、臭根草、魚鱗草等.具清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋等功效，用于痰熱喘咳、熱淋、熱痢、癰腫等癥.揮發(fā)油是其主要活性成分，常以揮發(fā)油配成注射液供臨床使用，對上感、支氣管炎、扁桃體炎、中耳炎、咽喉炎等有良好療效[1～3].魚腥草的嫩葉及根還作為特色山野蔬菜食用，是人們喜歡的菜肴.目前，大量人工栽培魚腥草進入市場，廣泛用于食用和藥用.其揮發(fā)油的化學(xué)組分及相對含量與野生魚腥草有何差異，人工栽培魚腥草能否達到野生的藥效，文獻有過報道[4～7]，但較粗略.作者用水蒸汽蒸餾法提取兩種魚腥草的揮發(fā)油，并用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對其揮發(fā)性化學(xué)成分進行分離和鑒定，并比較兩種魚腥草揮發(fā)油的化學(xué)組分及相對含量，為進一步開發(fā)利用恩施山區(qū)豐富的魚腥草資源提供實驗依據(jù).

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

魚腥草為新鮮品，人工栽培魚腥草和野生魚腥草均于2008年11月購于恩施菜市(由湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院中醫(yī)系教授袁德培鑒定)；無水乙醚(AR)；蒸餾水.揮發(fā)油提取器；美國HPGC6890/MS5975氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS).

1.2 揮發(fā)油的提取

將魚腥草根洗凈并切碎，稱取500 g裝入揮發(fā)油提取器中，按《中國藥典》2005年版一部附錄揮發(fā)油測定法(Ⅰ法)提取揮發(fā)油6.0 h，分取油層，以乙醚定容至2.0 mL.

1.3 GC-MS分析條件

氣相色譜條件：色譜柱為HP-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm)彈性石英毛細管柱；升溫程序：從40℃開始，保溫5 min，以15℃/min的速度升至250℃,保溫6 min.汽化室溫度260℃；載氣：高純氦氣；載氣流量：6.3 mL/min；分流比為5∶1.進樣量：1 μL.質(zhì)譜條件：質(zhì)譜的電離方式為EI，電子能量70 eV，離子源溫度200℃；溶劑延遲3.0 min,倍增器電壓1 023 V，掃描范圍為50～550 amu.

2 結(jié)果與分析

在上述條件下，將魚腥草揮發(fā)油進行GC-MS分析，得到魚腥草揮發(fā)性化學(xué)成分的總離子流圖，見圖1和圖2.按面積歸一化法計算各峰峰面積的相對百分比含量，并通過GC-MS分析和NIST05標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫自動檢索，對檢測結(jié)果進行人工核對，并參考有關(guān)文獻，確認揮發(fā)油中各化學(xué)成分，結(jié)果見表1.

圖1 人工栽培魚腥草揮發(fā)性化學(xué)成分的總離子流圖

圖2 野生魚腥草揮發(fā)性化學(xué)成分的總離子流圖

表1魚腥草揮發(fā)性化學(xué)成分分析結(jié)果

Tab.1 Analytical results of volatile chemical constituents inHouttuyniacordataThunb

序號化合物分子式分子量峰面積/%野生栽培12-甲基-5-異丙基二環(huán)[3,1,0]-2-己烯(Bicyclo[3.1.0]hex-2-ene,2-methyl-5-(1-methylethyl))C10H161360.110.232α-蒎烯(α-Pinene)C10H161367.279.1132-溴-噻吩(Thiophene,2-bromo-)C4H3BrS1630.170.424莰烯(Camphene)C10H161361.862.325檜烯(Sabinen)C10H161365.5810.846β-蒎烯(β-Pinene)C10H1613618.1615.497β-月桂烯(β-Myrcene)C10H16136—15.7781-甲基-4-異丙基-1,3-己二烯(α-萜品烯)(1,3-Cyclohexadiene,1-methyl-4-(1-methylethyl)C10H161360.240.5791-甲基-4-異丙基苯(Benzene,1-methyl-4-(1-methyleth-yl)-)C10H141320.080.1210檸檬烯(Limonene)C10H161365.756.8011β-羅勒烯(Ocimene)C10H161360.090.26

續(xù)表1

表1 魚腥草揮發(fā)性化學(xué)成分分析結(jié)果

續(xù)表2

表1 魚腥草揮發(fā)性化學(xué)成分分析結(jié)果

由表1可知，野生魚腥草的揮發(fā)油中共檢出70種揮發(fā)性化合物，占總峰面積的94.94%，其成分主要為各種萜類化合物，占總峰面積的55.58%，酯類化合物占19.07%，酮類物質(zhì)占12.02%，其它成分還有烴、酸和醇類化合物等，約占8.27%.含量較高的成分是：β-蒎烯(18.16%)、甲基正壬酮(9.57%)、癸酸乙酯(9.47%)、α-蒎烯(7.27%)、乙酸龍腦酯(5.80%)、檸檬烯(5.75%)、檜烯(5.58%)等；人工栽培魚腥草的揮發(fā)油中共檢出52種揮發(fā)性化合物，占總峰面積的97.71%，其成分主要為各種萜類化合物，占總峰面積的66.08%，酮類化合物占13.48%，酯類化合物占5.90%，烴類化合物占5.17%，其它成分還有酸、苯和醚類化合物等，約占7.09%.含量較高的成分是：β-月桂烯(15.77%)、β-蒎烯(15.49%)、甲基正壬酮(12.66%)、檜烯(10.84%)、α-蒎烯(9.11%)、檸檬烯(6.80%)等.二者揮發(fā)油中所含的主要化學(xué)成分有差異，但均含有活性成分甲基正壬酮、α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯，它們在野生魚腥草及人工栽培魚腥草揮發(fā)油中的含量之和分別為30.75%、32.06%，表明人工栽培魚腥草揮發(fā)油的藥效能夠達到野生魚腥草揮發(fā)油的藥效.

在恩施野生魚腥草及人工栽培魚腥草揮發(fā)油中均未發(fā)現(xiàn)文獻報道[4～7]的抗菌成分癸酰乙醛(魚腥草素)，可能是在提取揮發(fā)油時，加熱使癸酰乙醛氧化為癸酰乙酸，后者極易脫羧降解為甲基正壬酮；也有可能與魚腥草的產(chǎn)地及采收季節(jié)有關(guān).

3 結(jié)論

用水蒸汽蒸餾法提取恩施山區(qū)野生魚腥草及人工栽培魚腥草揮發(fā)油，并用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用儀對其揮發(fā)油化學(xué)組分進行分離和鑒定.分離并鑒定出人工栽培魚腥草揮發(fā)油中52種成分，占總峰面積的97.71%，其主要化學(xué)成分為：β-月桂烯、β-蒎烯、甲基正壬酮、檜烯、α-蒎烯、檸檬烯等；野生魚腥草揮發(fā)油中70種成分，占總峰面積的94.94%，其主要化學(xué)成分為：β-蒎烯、甲基正壬酮、癸酸乙酯、α-蒎烯、乙酸龍腦酯、檸檬烯、檜烯等.人工栽培魚腥草和野生魚腥草揮發(fā)油的化學(xué)成分有差異，但主要的活性成分總含量基本一致.了解魚腥草揮發(fā)油的化學(xué)成分，為拓展其在食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域中的應(yīng)用提供了實驗依據(jù).

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