蜂膠的亞急性毒性研究

黃佳寧　陳秀錦　陳冠敏　林　澍

[摘要] 目的：研究蜂膠的毒性。方法：試驗動物按體重隨機分低、中、高及溶劑對照四組，給予不同濃度受試物，連續(xù)灌胃30天后，進行血常規(guī)、血生化機及病理學(xué)檢查。結(jié)果：各指標(biāo)與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：蜂膠對機體不存在毒副作用，可放心食用。

[關(guān)鍵詞] 蜂膠 大鼠 毒理學(xué)

蜂膠，是蜜蜂從一些植物的芽苞、枝干上采集來的樹脂,混入蜜蜂上腭腺的分泌物后和蜂蠟等形成的一種具有芳香味的粘性膠狀固型物。蜂膠包含復(fù)雜的化學(xué)組成，研究證明蜂膠中含有20余類、300多種天然成分，其中包括多種人體必需的微量元素、氨基酸、芳香化合物、黃酮類物質(zhì)，還有豐富的有機酸、萜烯類物質(zhì)、維生素、酶、多糖等具有生物活性的成分。具有抗菌消炎、 提高免疫，促進傷口愈合和組織修復(fù)、能改善血液循環(huán)有保護血管、抗癌等功能，近年來大量研究表明蜂膠對心血管病、糖尿病、腫瘤都有一定療效，已成為保健食品研究領(lǐng)域的熱點，那么長期服用蜂膠制品對人體是否有害呢？本研究通過亞急性毒性試驗，系統(tǒng)評價其對人體的毒性作用，為開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 受試物

蜂膠軟膠囊內(nèi)容物，成分：精制蜂膠25%、大豆油71%、蜂蠟1.5%、卵磷脂2.5%。推薦量2?！? g/粒。

1.2 實驗動物

試驗選用上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供的清潔級SD大鼠80只，雌雄各半，體重65～77g。許可證號：SCXK（滬）2007-0005。

1.3 飼養(yǎng)環(huán)境

福建省疾病預(yù)防控制中心SPF級動物實驗室，許可證號：SYXK(閩)2007-0006。

1.4 儀器

日立7060C全自動生化分析儀、SHANDON EXCELSIOR全自動密封脫水機、BM-VI生物組織冷凍包埋機、SHANDON Finesse325石臘切片機、CS-IV攤片烤片機、電熱鼓風(fēng)干燥箱、OLYMPUS BX-51研究型生物顯微鏡、美國雅培CELL-DUN3700血球分析儀、全自動染色機、電子天平。

1.5 試驗方法

各性別動物按體重隨機分成4組，每組各10只。試驗按受試物人日推薦量的25、50和100倍，設(shè)3個劑量組為0.83、1.66、3.33 g/kg BW。低、中、高劑量組分別按166、333、666 mg/mL濃度配制，另設(shè)大豆油為溶劑對照組，以經(jīng)口灌胃方式給予，灌胃體積為5.0 mL/kg BW。試驗期間動物單籠喂養(yǎng)，自由進食飲水，每天觀察動物形態(tài)，記錄飼料灑漏量，每周記錄一次體重和2次食物攝入量。喂養(yǎng)30天后，摘眼球采血作血常規(guī)及生化指標(biāo)測定，取出肝、腎、脾、睪丸稱重，并對肝、腎、脾、胃腸、睪丸、卵巢作病理學(xué)檢查。

1.6 觀察指標(biāo)

1.6.1動物的一般表現(xiàn)、體重、進食量、食物利用率。

1.6.2血常規(guī)及生化指標(biāo)：紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞分類、血紅蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素、肌酐、總膽固醇、甘油三酯、血糖、總蛋白、白蛋白。

1.6.3病理解剖：臟體比、大體觀察及病理組織學(xué)檢查（肝、脾、腎、胃腸、睪丸和卵巢）。

1.7 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法

實驗數(shù)據(jù)以SPSS軟件進行單因素方差分析。經(jīng)方差齊性檢驗，方差齊的實驗數(shù)據(jù)采用LSD法進行統(tǒng)計分析，方差不齊的實驗數(shù)據(jù)采用Tambane法進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 一般形態(tài)觀察該樣品三個劑量組的大鼠毛質(zhì)白、有光澤，外觀形態(tài)與對照組比較無區(qū)別，也無死亡現(xiàn)象。 2.2 動物體重增長與食物利用率由表1、2、3可見，各劑量組大鼠實驗結(jié)束時體重及體重增重、進食量、食物利用率與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 血常規(guī)檢查結(jié)果

由表4、5可見，三個劑量組大鼠的血紅蛋白、紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)和白細(xì)胞分類均在本實驗室正常值范圍內(nèi)。

2.4 血清生化檢驗結(jié)果由表6、表7可見，3個劑量組大鼠的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素、肌酐、總膽固醇、甘油三酯、血糖、總蛋白、白蛋白測定值均在本實驗室正常值范圍內(nèi)。

2.5 大鼠臟體比的影響由表8、9可見,各劑量組大鼠臟體比與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.6 病理組織學(xué)檢查

各劑量組動物大體檢查未發(fā)現(xiàn)明顯病變，且生化指標(biāo)未見異常，因此僅選對照組及高劑量組作組織病理學(xué)檢查。高劑量組動物肝、腎、胃腸、脾、睪丸、卵巢組織學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)特異性病變。

結(jié)果描述：①肝：正常肝小葉結(jié)構(gòu)存在，肝細(xì)胞無明顯腫脹，僅少數(shù)肝細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)少許細(xì)小的脂肪空泡，呈輕度脂肪變，這種脂變肝細(xì)胞呈散在小灶分布，范圍小。肝細(xì)胞無壞死改變。少數(shù)肝匯管區(qū)見淋巴細(xì)胞等炎細(xì)胞浸潤，無纖維組織增生，膽管未見異常。②腎：腎皮髓質(zhì)結(jié)構(gòu)清楚，腎小管上皮無腫脹變性，少數(shù)大鼠腎間質(zhì)中有灶性炎細(xì)胞浸潤，個別大鼠腎小管內(nèi)見少量透明管型，少數(shù)大鼠腎髓質(zhì)部見小囊腫。③脾：脾白髓、紅髓結(jié)構(gòu)清楚，白髓、紅髓無明顯擴張或萎縮現(xiàn)象。④胃和十二指腸：粘膜完整，無明顯出血、壞死、糜爛、潰瘍及炎細(xì)胞浸潤，無明顯腺體增生萎縮改變。⑤睪丸：曲細(xì)精管正常，可見各級生精細(xì)胞及成熟精子。個別間質(zhì)輕度水腫。⑥卵巢：發(fā)育正常，可見各級卵泡和成熟黃體。

以上病理學(xué)改變僅在個別動物中發(fā)生，各組標(biāo)本病理變化無明顯差異，因此認(rèn)為被檢臟器（肝、腎、脾、胃和十二指腸、睪丸或卵巢）未見與受試物有關(guān)的病理學(xué)改變（各組標(biāo)本病理變化詳見表10～16）。

3 小結(jié)與討論

試驗期間，各組動物生長活動正常。試驗結(jié)束時，樣品各劑量組動物體重、體重增重、進食量、食物利用率、臟體比與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。樣品各劑量組動物血常規(guī)、血生化均在本實驗室正常值范圍內(nèi)。對受檢臟器作組織病理學(xué)檢查，未見特異性病變。該試驗用的樣品是蜂膠軟膠囊內(nèi)容物，蜂膠和大豆油含量占96%以上，對照組設(shè)為大豆油溶劑對照組，從而消除了大豆油對試驗結(jié)果的影響，因此該試驗即為蜂膠的亞急性毒性研究。以上試驗結(jié)果證明蜂膠對機體不存在毒副作用，可放心食用。

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