碳酸氫鈉浸提－鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷的注意事項(xiàng)

程樂明　陳　良　劉建雷　劉松峰　柳聽海

摘要介紹了碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗比色法測(cè)定石灰性和中性土壤有效磷的注意事項(xiàng)，以供參考。

關(guān)鍵詞Olsen法；測(cè)定；土壤有效磷；注意事項(xiàng)

中圖分類號(hào)S153.61文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼B文章編號(hào) 1007-5739（2009）03-0205-01

國(guó)家農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中，采用碳酸氫鈉浸提－鉬銻抗比色法（Olsen法）測(cè)定石灰性土壤中（中性及酸性土可參照使用）的有效磷含量（其中操作規(guī)程以下簡(jiǎn)稱規(guī)程），其中校準(zhǔn)曲線或回歸方程較易做出或求出，因此也較容易測(cè)定。但是，要提高其測(cè)定準(zhǔn)確性，減輕勞動(dòng)量還需要注意以下幾點(diǎn)。

（1）所用的試劑要按規(guī)程要求準(zhǔn)確配制。一是選用質(zhì)量合格的儀器、藥品、試劑、純水，要求測(cè)定者首先對(duì)要使用的儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，在試劑的配制中注意觀察藥品、試劑、純水的顏色，發(fā)現(xiàn)異常要查找原因；二是精確稱取或量?。蝗前匆?guī)程要求的步驟順序配制，調(diào)節(jié)酸堿度。但需要說明的是：①該規(guī)程要求的鉬銻抗顯色劑，稱取的抗壞血酸（C6H8O6左旋，旋光度+21°－22°）0.5g溶于100mL鉬銻貯備液中測(cè)定的結(jié)果，土壤有效磷含量要低于稱取1.5g抗壞血酸溶于100mL鉬銻貯備液中測(cè)定的結(jié)果。②配制磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液的KH2PO4 要選用優(yōu)級(jí)純的，而且要經(jīng)過105℃烘干2h，并冷卻后再稱取配制。

（2）所需試劑要按規(guī)程要求保存與使用。鉬銻貯備液要盛放于棕色瓶中，避光存放；鉬銻抗顯色劑要現(xiàn)用現(xiàn)配。

（3）所用的器械要反復(fù)沖洗干凈，有的還要干燥。測(cè)定中所用的（刻度、胖肚）吸管、塑料瓶、瓶蓋、漏斗、三角瓶、容量瓶、瓶塞、比色皿要反復(fù)沖洗干凈，塑料瓶、瓶蓋、漏斗、三角瓶需烘干后再用。

（4）要嚴(yán)格土液比、溫度、振蕩頻率及振蕩時(shí)間。由于這4個(gè)方面對(duì)浸提出的磷含量有至關(guān)重要影響，因此一定要嚴(yán)格控制。①要嚴(yán)格土液比。即風(fēng)干土樣準(zhǔn)確稱取2.50g（電子天平先預(yù)熱30min，再校準(zhǔn)后使用），加入的碳酸氫鈉浸提劑準(zhǔn)確量取50.00mL。②要嚴(yán)格浸提溫度?？砂呀釀┫确旁诤銣兀?5±1）℃的環(huán)境中，調(diào)溫至（25±1）℃，再加入到稱取的待測(cè)土樣塑料瓶中；振蕩要使用恒溫水浴振蕩機(jī)，先使水溫調(diào)至（25±1）℃，并保持該水溫振蕩。③嚴(yán)格振蕩頻率及時(shí)間。使用恒溫水浴振蕩機(jī)振蕩，振蕩頻率應(yīng)調(diào)為（180±20）rpm，振蕩時(shí)間為（30±1）min后，立即過濾。

（5）盛有風(fēng)干土樣的塑料瓶，在加入浸提劑后，要蓋緊瓶蓋，搖勻后再振蕩。

（6）過濾要使用無(wú)磷定量濾紙，若發(fā)現(xiàn)濾液混濁，要重新過濾。

（7）在吸?。咳。?、稱取所需試劑、溶液、藥品時(shí)，不僅質(zhì)量（體積）要準(zhǔn)，而且不能污染和相互污染。

（8）在吸取5.00mL鉬銻抗顯色劑加入盛有系列溶液或浸提液的容量瓶中時(shí)，要緩慢加入，并慢慢搖動(dòng)，排出CO2氣體，再用純水定容搖勻。要避免試液溢出。

（9）定容搖勻后的待測(cè)系列溶液或試樣溶液，顯色溫度要保持在20℃以上，若室內(nèi)溫度過低，可放置于30～40℃的恒溫箱中保溫30min（溫度要一致），使其充分顯色，取出冷卻后再比色測(cè)定。

（10）測(cè)定吸光度的1cm光徑比色皿，可用稀鹽酸浸泡一夜，再依次用自來水、純水沖洗干凈，泡于純水中待用，若長(zhǎng)期不用應(yīng)放置于干燥盒內(nèi)。

（11）測(cè)定吸光度的比色皿，在出廠時(shí)應(yīng)經(jīng)過配對(duì)。未配對(duì)的，測(cè)定人員可將其刷洗干凈后，自行配對(duì)，從中選用經(jīng)調(diào)零后吸光度相差±0.001A的比色皿，最好選擇吸光度一致的比色皿。使用時(shí)要使光滑面對(duì)準(zhǔn)光路，操作人員操作時(shí)要手持毛面，擦拭干凈外面的液體后，再放入比色槽內(nèi)。

（12）測(cè)定前應(yīng)確保紫外－可見分光光度計(jì)能夠正常使用。①要配備合適的穩(wěn)壓器，并接地線，使電壓穩(wěn)定，周圍無(wú)振動(dòng)干擾。②光路要對(duì)正。可先在比色槽內(nèi)不放比色皿，檢查其吸光度是否一致，不一致的要進(jìn)行調(diào)整。③要先遇熱30min，再測(cè)定吸光度。

（13）測(cè)定時(shí)刷洗干凈的比色皿，要先用待測(cè)試液沖刷幾遍，再倒入待測(cè)試液測(cè)定吸光度（若此時(shí)仍有小的CO2氣泡，要用手指輕彈出后再測(cè)定）；測(cè)定后倒出試液，用純水沖刷幾遍，再倒入下一個(gè)待測(cè)試液（要先用該試液沖刷后）進(jìn)行測(cè)定。

（14）據(jù)資料介紹，可采用紫外－可見分光光度計(jì)，在波長(zhǎng)880nm處比色，測(cè)定吸光度，而不必使用活性炭進(jìn)行脫色，以減少勞動(dòng)量。但在實(shí)際測(cè)定中，若不加入1g無(wú)磷活性炭，在波長(zhǎng)700nm處比色，測(cè)定結(jié)果偏低。

（15）如果土壤有效磷含量較高，可吸取5.00mL浸提溶液，另外再吸取5.00mL碳酸氫鈉浸提劑，以保持顯色時(shí)溶液的酸度。計(jì)算結(jié)果按所取浸提液的分取倍數(shù)計(jì)算。

（16）每批樣品進(jìn)行測(cè)定，要做空白試驗(yàn)、平行試驗(yàn)，并帶一個(gè)參比樣（參比樣可自制）。以檢測(cè)測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，不準(zhǔn)確的要查找原因，重做。

（17）要做好土樣稱取、過濾、吸取轉(zhuǎn)移、測(cè)定結(jié)果的紀(jì)錄，并且每一項(xiàng)操作都要認(rèn)真核對(duì)，避免人為出錯(cuò)。

參考文獻(xiàn)

[1] 全國(guó)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心.土壤分析技術(shù)規(guī)范（第二版）[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006.