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    白地霉和巢狀毛霉混合發(fā)酵腐乳后酵期理化性質(zhì)及風(fēng)味物質(zhì)研究

    2025-08-07 00:00:00陳晨任燕林陳中愛皮雨冉田娟劉秦明胡永金
    中國(guó)調(diào)味品 2025年7期
    關(guān)鍵詞:腐乳態(tài)氮總酸

    中圖分類號(hào):TS205.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1000-9973(2025)07-0047-08

    DOI:10.3969/j.issn.1000-9973.2025.07.007

    Study on Physicochemical Properties and Flavor Substances of Sufu Mixed Fermented by Geotrichum candidum and Mucor nidicola in Post Fermentation Period

    CHEN Chen,REN Yan-lin, CHEN Zhong-ai, PI Yu-ran, TIAN Juan,LIU Qin-ming,HU Yong-jin* (College of Food Science and Technology,Yunnan Agricultural University,Kunming 65O2o1,China)

    Abstract: Sufu is mixed fermented with the ratio of Geotrichum candidum to Mucor nidicola of 2:1 In view of the post fermentation period of sufu,the changes of physicochemical properties and flavor substances are investigated. The results show that the total acid content increases rapidly during 4~ 6 weeks of post fermentation,reaching 1.148g/100g at the 9th week of post fermentation. At the 3rd week of post fermentation,the protein content increases rapidly. At the 9th week of post fermentation,the content of water-soluble protein reaches 21.05g/100g ,and the content of amino acid nitrogen reaches (20 1.293g/100g ,The total free amino acid content of sufu at the beginning of post fermentation is 1.388mg/g and it increases rapidly at the 9th week of post fermentation,reaching 22.272mg/g ,among which,the content of aspartic acid and glutamic acid presenting umami increases obviously, giving umami and sweetness to sufu. The content of alcohols increases significantly,accounting for 56.18% ,and the content of esters also increases,accounting for 10.73% ,which gives a unique aroma to sufu, thus improving the quality of sufu.

    Key words: sufu; fermentation by mixed bacteria;post fermentation;physicochemical property; flavorsubstances

    腐乳(sufu)是以大豆為主要原料,通過磨漿煮漿制成豆腐后,再將豆腐劃坯、前發(fā)酵、拌料,經(jīng)后熟發(fā)酵制成的輔餐調(diào)味制品[1]。腐乳別稱霉豆腐、豆腐乳,西方國(guó)家又將其美稱為“中國(guó)奶酪”,是中國(guó)流傳千年的傳統(tǒng)民間特色美食[2]。與其他發(fā)酵大豆制品相比,腐乳獨(dú)特的生產(chǎn)工藝有效提高了大豆的生物學(xué)效價(jià)[3],使其風(fēng)味醇厚、濃香,口感滑潤(rùn)、細(xì)膩,營(yíng)養(yǎng)豐富[4]。腐乳富含多種代謝物,如風(fēng)味物質(zhì)和氨基酸等[5],此外,它是蛋白質(zhì)和鈣的良好來源,因此被認(rèn)為是一種健康食品[7]。腐乳生產(chǎn)發(fā)酵方式主要有自然發(fā)酵、單菌發(fā)酵和混菌發(fā)酵。由于自然發(fā)酵在生產(chǎn)上不易控制,單菌發(fā)酵效率較低,因而混菌發(fā)酵逐漸成為焦點(diǎn)。腐乳發(fā)酵主要包括前期發(fā)酵和后期發(fā)酵[8]。前酵期主要指經(jīng)過大豆的挑選清洗、浸泡研磨、過濾熬漿、壓塊成型制得豆腐,繼而將豆腐切成均勻的小方塊,在豆腐坯上接人菌種后發(fā)酵成毛坯的過程。后酵期主要指經(jīng)過前酵期發(fā)酵成型制得的豆腐毛坯,進(jìn)行搓毛后,加入白酒和各種輔料進(jìn)行腌制,再裝罐密封發(fā)酵成熟。此階段發(fā)酵周期較長(zhǎng),一般為 2~4 個(gè)月,更可長(zhǎng)達(dá)1年左右。

    本研究以白地霉和巢狀毛霉按 Ω2:Ω1 的比例混合發(fā)酵腐乳,針對(duì)混菌發(fā)酵后期的腐乳,以7d為一個(gè)周期測(cè)定其在不同時(shí)間段的水分含量、氨基酸態(tài)氮含量、總酸含量、水溶性蛋白質(zhì)含量的變化,利用全自動(dòng)氨基酸分析儀測(cè)定腐乳后酵開始時(shí)和后酵9周后腐乳中游離氨基酸的種類和含量,并采用GC-MS分別測(cè)定腐乳后酵開始時(shí)和后酵9周后腐乳中的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)。本研究為腐乳發(fā)酵方式及其品質(zhì)優(yōu)化提供了理論依據(jù),對(duì)傳統(tǒng)自然發(fā)酵的腐乳品質(zhì)提升具有重要意義。

    1材料與方法

    1.1 材料與試劑

    腐乳樣品:昆明市石林縣某農(nóng)家自制腐乳;菌種:云南省高校食品微生物資源與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;金龍魚菜籽油:上海嘉里食品工業(yè)有限公司;路南高粱酒:昆明竹興酒業(yè)有限公司;食鹽:云南省鹽業(yè)有限公司;棘椒粉、花椒粉、八角粉:購(gòu)自昆明大爾多超市。

    1.2 儀器與設(shè)備

    L8900氨基酸分析儀英國(guó)Biochrom公司;HC103鹵素水分測(cè)定儀南京曉曉儀器設(shè)備有限公司;AX223ZH/E電子天平奧豪斯儀器(常州)有限公司;Dragon-Lab 移液槍大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器(北京)有限公司;UV-1800紫外可見分光光度計(jì)翱藝儀器(上海)有限公司;SF-TDL-4A 高速離心機(jī)上海菲恰爾分析儀器有限公司;TSQ8000質(zhì)譜儀賽默飛世爾科技有限公司。

    1.3方法

    1.3.1腐乳發(fā)酵菌株的篩選純化和鑒定

    1.3.1.1采樣與菌種分離純化

    采取自然發(fā)酵而成的不同時(shí)間階段(3,5,7d)的腐乳毛坯。稱取 1g 毛坯樣品于 10mL 無菌生理鹽水中,搖蕩后制成不同濃度 10-2~10-8 的10倍梯度稀釋液。吸取 0.5mL 不同濃度梯度的稀釋液于凝固的孟加拉紅平板內(nèi),并使用涂布棒進(jìn)行涂布,使其在平板內(nèi)混合均勻?;靹蚝蟮怪闷桨澹ú煌♂尪茸?次平行),于 28°C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2~3d 。挑選生長(zhǎng)良好的單菌落,采用平板劃線法在孟加拉紅培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng),然后于 28°C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2~3d 。菌種純化3代后,轉(zhuǎn)接到試管斜面上培養(yǎng)2d,然后選取其中的白地霉和巢狀毛霉進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

    1.3.1.2 菌株的分子生物學(xué)鑒定

    選取能夠挑選單菌落并無雜菌生長(zhǎng)的平板送至北京擎科生物科技股份有限公司進(jìn)行DNA提取,R1菌株和R2菌株分別以IT(TCCGTAGGTGAACCTGCGG)和ITS4(TCCTCCGCTTATTGATATGC)為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng) 1% 瓊脂糖凝膠電泳分離,進(jìn)行18SrDNA基因測(cè)序。

    將菌株的基因測(cè)序結(jié)果與NCBI網(wǎng)站上的GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)經(jīng)BLAST程序進(jìn)行基因?qū)Ρ确治?,確定菌株的種屬后,選取同源性高的10株菌,利用高同源性的10株菌的基因序列進(jìn)行同源性分析,通過MegaX構(gòu)建菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹。

    1.3.2 腐乳的制備

    將豆腐切成 2cm×2cm×2cm 的小方塊,接入白地霉和巢狀毛霉比例為 2:1 、濃度為 106CFU/mL 的菌懸液后進(jìn)行發(fā)酵,取發(fā)酵成熟后的豆腐毛坯,先進(jìn)行搓毛處理,然后將毛壞四周浸潤(rùn)在 56% vol路南高梁白酒中,隨后瀝出毛坯。將事先稱量的 10% 食鹽、 7% 辣椒面、 2% 花椒面 .1% 八角粉(以毛坯重量計(jì))混合均勻后,將毛坯四周裹上輔料進(jìn)行拌料腌制處理,隨即將拌好料的腐乳毛坯整齊地碼放在事先用白酒消毒的罐子中,然后倒入事先煉熟并冷卻涼透的菜籽油(菜籽油需淹沒過所有豆腐坯),蓋上蓋子后,將腐乳于常溫下密封保存2個(gè)月,期間每7d為一個(gè)周期取樣用于后續(xù)理化指標(biāo)的測(cè)定。

    1.3.3 理化指標(biāo)分析檢測(cè)

    水分含量按照GB5009.3—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定》中的方法進(jìn)行測(cè)定[9]??偹岷堪凑誈B12456—2021《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總酸的測(cè)定》中的方法進(jìn)行測(cè)定[10]。氨基酸態(tài)氮含量按照GB5009.235—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸態(tài)氮的測(cè)定》中的方法進(jìn)行測(cè)定[11]。水溶性蛋白質(zhì)含量按照GB5009.5—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》中的方法進(jìn)行測(cè)定[12]。

    1.3.4游離氨基酸的測(cè)定

    采用L8900全自動(dòng)氨基酸分析儀對(duì)后酵剛開始時(shí)的腐乳以及后酵第9周時(shí)的油腐乳進(jìn)行游離氨基酸含量的測(cè)定。

    待測(cè)樣品前處理:稱取 2g 腐乳樣品,加水定容至50mL 容量瓶中,混勻過濾后,吸取 20mL 待測(cè)液于離心管中,加人 20mL5% 磺基水楊酸溶液混勻,在 6000g 離心力下離心 10min ,吸取上清液 20mL 在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸干,加人 1mL 檸檬酸鈉緩沖液溶解后用 0.45μm 濾膜過濾上樣。

    采用外標(biāo)法測(cè)定樣品中游離氨基酸含量,氨基酸在分離柱分離后與芘三酮反應(yīng),生成物能被分光光度計(jì)檢測(cè),脯氨酸檢測(cè)波長(zhǎng)為 440nm ,其他氨基酸檢測(cè)波長(zhǎng)為570nm 。氨基酸含量參照GB5009.124—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸的測(cè)定》中的方法進(jìn)行測(cè)定[13]。

    1.3.5 揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的測(cè)定

    利用GC-MS對(duì)后酵剛開始時(shí)的腐乳以及后酵第9周時(shí)的油腐乳中的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)分析。使用得到的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)總離子流圖,利用GC-MS對(duì)揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行檢索定性分析,保留SI和RSI大于700的結(jié)果,利用揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的CAS號(hào)對(duì)其進(jìn)行鑒定[14]。

    待測(cè)樣品前處理:將 5g 樣品裝人 15mL 樣品瓶?jī)?nèi),SPME萃取頭在氣相色譜口于溫度 270°C 下老化1h,將老化后的萃取頭插入樣品瓶頂空處, 60°C 水浴萃取 60min 。萃取結(jié)束后插人GC-MS氣相層析的注射口,使用不分流模式熱解析揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)。

    1.3.6 腐乳的成熟標(biāo)準(zhǔn)

    目前腐乳的成熟度多以總酸、氨基酸態(tài)氮的含量作為判斷依據(jù)[15]。成熟腐乳的基本理化指標(biāo)見表1。

    表1成熟腐乳評(píng)價(jià)指標(biāo)

    Table1 Evaluation indexes of mature sufu

    1.3.7 腐乳的感官評(píng)價(jià)

    腐乳的感官評(píng)價(jià)是評(píng)價(jià)腐乳品質(zhì)的重要指標(biāo)之一,腐乳的感官評(píng)價(jià)表參照萬(wàn)紅芳[16]的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)并稍作改動(dòng),包括腐乳的色澤、香氣、滋味、質(zhì)地,本次共有10名同學(xué)進(jìn)行感官評(píng)價(jià),感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見表2,滿分為100分。

    表2腐乳的感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)Table2 Sensory evaluation standards of sufu
    續(xù)表

    1.3.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法

    使用Design-Expert11軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,使用Origin9.0、Excel2020進(jìn)行制表繪圖,數(shù)據(jù)結(jié)果以平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菌種的分離與鑒定

    從采集的3種不同發(fā)酵時(shí)間階段的路南腐乳的毛坯樣品中共篩選出5株優(yōu)勢(shì)菌株,其中包括3株霉菌,2株酵母菌,見圖1。選擇優(yōu)勢(shì)發(fā)酵菌株R1和R2進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

    圖1分離菌種的菌落形態(tài)
    Fig.1Colony morphology of isolated strains

    2.2 菌株基因序列測(cè)定

    以菌株的基因序列為模板,R1菌株和R2菌株分別以ITS1和ITS4為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物進(jìn)行 1% 瓊脂糖凝膠電泳分離,18SrDNAPCR電泳結(jié)果見圖2。

    圖2兩株菌的PCA擴(kuò)增凝膠電泳圖 ig.2Gel electrophoretogram ofPCA amplificatior of two strains

    由圖2可知,菌株有較清晰明亮的特異性條帶,由此可進(jìn)行基因序列測(cè)定。

    2.3菌株發(fā)育樹的建立

    根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察結(jié)合同源性比對(duì),確立菌株R1為Geotrichumcandidum,菌株R2為Mucornidicola。根據(jù)同源性比對(duì)結(jié)果,采用MegaX對(duì)菌株建立系統(tǒng)發(fā)育樹,R1和R2菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹分別見圖3和圖4。

    2.4腐乳后酵期水分含量和總酸含量的變化

    圖3R1菌株系統(tǒng)發(fā)育樹圖4R2菌株系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.4 Phylogenetic tree of strain R2圖5腐乳發(fā)酵過程中水分含量和總酸含量變化 Fig.5 Changes of moisture content and total acidcontent duringfermentation of sufu

    由圖5可知,腐乳前酵過程中水分含量較高,毛坯樣品的水分含量保持在 72.39% ,后酵 1~4 周期間壞體的水分含量大幅度降低,由 72.39% 降至 58.81% ,原因是后酵過程中食鹽、白酒、輔料的加入導(dǎo)致蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,水分從蛋白孔徑中滲出。后酵 4~6 周期間,水分含量持續(xù)下降,保持在 57.4% 左右,后酵 7~9 周期間水分含量變化減緩并逐漸保持穩(wěn)定,符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。后酵剛開始時(shí)總酸含量較低,為 0.158g/100g 。后酵4周內(nèi)總酸含量增加較緩慢,后期隨著各種酶系的活性不斷提高以及微生物種間的協(xié)同作用,總酸含量迅速增加,由后酵4周時(shí)的 0.444g/100g 增加到后酵6周時(shí)的 0.809g/100g ,而后酵7周后總酸含量增速減緩,原因是微生物分解代謝了部分酸類物質(zhì),導(dǎo)致總酸含量增速減緩。后酵9周時(shí)總酸含量為 1.148g/100g ,未超過國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的 1.3g/100g ,且后續(xù)發(fā)酵過程接近尾聲,總酸含量變化逐漸趨于平緩。

    Fig.3Phylogenetic tree of strain R12.5腐乳后酵期氨基酸態(tài)氮含量和水溶性蛋白質(zhì)含量的變化圖6腐乳發(fā)酵過程中氨基酸態(tài)氮含量和水溶性蛋白質(zhì)含量的變化Fig.6 Changes of amino acid nitrogen contentand water-soluble proteincontent duringfermentation of sufu

    由圖6可知,后酵過程中腐乳的氨基酸態(tài)氮含量呈現(xiàn)不斷上升的趨勢(shì),主要原因是在腐乳發(fā)酵過程中,菌株分泌的蛋白酶促使蛋白質(zhì)分解成肽、氨基酸等小分子物質(zhì),從而致使氨基酸態(tài)氮含量不斷上升。在后酵4周內(nèi)氨基酸態(tài)氮含量上升較緩慢,行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每 100g 腐乳中氨基酸態(tài)氮含量不低于 0.42g 即達(dá)到基本成熟[7],在后酵4周時(shí)氨基酸態(tài)氮含量為 0.441g/100g ,此時(shí)氨基酸態(tài)氮含量已經(jīng)基本達(dá)到行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中成熟腐乳的要求。后酵4周后氨基酸態(tài)氮含量增速較快,當(dāng)腐乳后酵9周時(shí),氨基酸態(tài)氮含量達(dá)到最大值 1.293g/100g 。在腐乳后酵剛開始時(shí)水溶性蛋白質(zhì)含量偏低,為 4.81g/100g 在腐乳后酵過程中,水溶性蛋白質(zhì)含量持續(xù)上升,在后酵3周時(shí)快速上升,此時(shí)水溶性蛋白含量為 11.62g/100g ,最終在后酵9周時(shí)水溶性蛋白含量達(dá)到 21.05g/100g 。

    2.6腐乳發(fā)酵過程中游離氨基酸變化分析

    表3游離氨基酸組分分析

    Table3 Analysis of free amino acid components
    續(xù)表

    腐乳后酵剛開始時(shí)氨基酸總含量為 1.388mg/g 其中必需氨基酸含量為 0.996mg/g ,占氨基酸總含量的 71.76% ,含量最高的為蛋氨酸,其次依次為異亮氨酸、亮氨酸,這3種游離氨基酸含量達(dá)到 0.748mg/g ,占氨基酸總含量的 53.89% 。后酵過程中,腐乳的總游離氨基酸含量快速上升,達(dá)到 22.272mg/g ,遠(yuǎn)高于一般市售腐乳的游離氨基酸含量,其中必需氨基酸含量達(dá)到12.456mg/g ,占氨基酸總含量的 55.93% ,含量最高的為異亮氨酸,其次為蛋氨酸、亮氨酸、脯氨酸、谷氨酸,其含量均在 2mg/g 以上。后酵9周時(shí)呈現(xiàn)鮮味的天冬氨酸和谷氨酸含量出現(xiàn)較大增幅[18且含量較高,分別為1.426,2.213mg/g ,鮮味更突出。另外,后酵剛開始時(shí)腐乳中的苦味氨基酸含量較高,其能夠賦予毛坯獨(dú)特的滋味,而后酵9周時(shí)腐乳中呈現(xiàn)鮮甜味的氨基酸含量大幅升高,致使腐乳的滋味更加美味協(xié)調(diào)。

    2.7毛坯與成熟腐乳揮發(fā)性風(fēng)味成分組分比較
    Fig.7Flavor substancediagram of sufu blank
    圖7腐乳毛坯風(fēng)味物質(zhì)圖譜圖8成熟腐乳風(fēng)味物質(zhì)圖譜
    表4揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)分析Table4 Analysis of volatile flavor substances
    Fig.8Flavor substance diagram of mature sufu
    續(xù)表
    續(xù)表

    注:“—”表示未檢出。

    圖9毛坯與成熟腐乳揮發(fā)性風(fēng)味成分組分比較 Fig.9 Comparison of volatile flavor components between blank and mature tofu

    腐乳中含有多種揮發(fā)性化合物,對(duì)感官品質(zhì)非常有益[19]。由表4可知,后酵剛開始時(shí)腐乳中共檢出74種揮發(fā)性化合物,包括醇類16種、酯類5種、酸類2種、酚類8種、酮類5種、醛類1種、烯烴類5種、烷烴類11種、呋喃類及其他類21種。經(jīng)后酵9周后腐乳中共檢出82種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),包括醇類17種、酯類16種、醛類9種、酸類2種、酚類1種、酮類3種、烯烴類11種、烷烴類13種、呋喃類及其他類10種,表明原料可顯著增加腐乳中風(fēng)味化合物的種類和含量。

    腐乳后酵開始時(shí)共檢出醇類16種,占揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的 15.17% 。后酵9周后共檢出醇類17種,占 56.18% ,其中乙醇含量大量提高,主要是在拌料期間加入的高度白酒浸入腐乳,由后酵剛開始時(shí)的 0.99% 上升到 10.93% 。另外,芳樟醇含量極高,其能賦予腐乳特殊的花香味和甜香味[20]。對(duì)比后酵過程中腐乳中的酯類物質(zhì)可知,酯類物質(zhì)的種類和含量隨后酵的進(jìn)行而升高。在腐乳后酵剛開始時(shí),酯類物質(zhì)的種類較少且含量較低,而后酵9周后總共檢出16種酯類,相對(duì)含量占 10.73% ,其原因是醇類物質(zhì)發(fā)生酯化反應(yīng)生成了酯類物質(zhì),致使生成大量酯類物質(zhì)。在腐乳后酵過程中,脂肪酸分解成游離脂肪酸,在酶的催化作用下游離脂肪酸與乙醇發(fā)生酯化反應(yīng)生成具有香氣的脂肪酸酯類物質(zhì)[21]。

    醛類是通過氨基酸的Strecker降解以及酯類物質(zhì)的過氧化和降解兩條途徑產(chǎn)生的[22],腐乳后酵開始時(shí)由于其前體物質(zhì)較少,無法大量生成醛類物質(zhì)。由于后酵9周后腐乳中氨基酸含量大幅提高,且酯類物質(zhì)含量也有所提高,能夠生成醛類物質(zhì),最終檢出醛類9種。腐乳中烴類物質(zhì)主要有烯烴和烷烴兩大類,后酵開始時(shí)檢出烴類物質(zhì)16種,相對(duì)含量偏高。后酵9周后檢出烴類物質(zhì)24種,隨著發(fā)酵時(shí)間的增加,烴類物質(zhì)含量逐漸降低,原因是烴類物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定且易氧化。后酵開始時(shí)腐乳中檢出較高的酚類物質(zhì)和吲哚等,酚類物質(zhì)主要賦予腐乳臭味,使其呈現(xiàn)出腐乳的特征氣味。腐乳后酵9周后檢出具有特殊茴香氣味的茴香腦[23],脂肪在腐乳后酵過程中降解生成己酸、辛酸等游離脂肪酸,賦予腐乳奶油味、脂肪味[24];苯丙氨酸在酶的作用下能夠分解代謝成苯乙醇和苯甲醛,它們分別賦予腐乳花甜香和堅(jiān)果味[25]。整體來看,腐乳的主體風(fēng)味物質(zhì)為醇類和酚類物質(zhì),賦予腐乳特征香氣,能使其香氣濃郁,呈現(xiàn)良好的風(fēng)味。

    2.8腐乳感官評(píng)定結(jié)果

    圖10感官評(píng)定雷達(dá)圖Fig.1o Sensory evaluation radardiagram

    從感官品評(píng)結(jié)果來看,后酵8周時(shí)腐乳評(píng)分最高,后酵10周與后酵8周時(shí)評(píng)分較接近,后酵6周時(shí)評(píng)分最低。3種不同發(fā)酵時(shí)間的腐乳在色澤上的差異不大,都具有較好的色澤外觀;另外,發(fā)酵8周以上的腐乳的香氣和滋味更佳,各種輔料和腐乳能達(dá)到協(xié)調(diào),香氣濃郁,滋味可口,而發(fā)酵6周的腐乳香氣略微不足。后酵10周和后酵6周時(shí)腐乳的質(zhì)地與后酵8周時(shí)的腐乳相比要差些。6周發(fā)酵時(shí)間短,質(zhì)地不夠細(xì)膩且偏硬,不易涂抹,而10周發(fā)酵時(shí)間偏長(zhǎng),導(dǎo)致腐乳的質(zhì)地偏軟塌,發(fā)酵8周左右其質(zhì)地更佳,且結(jié)合理化指標(biāo)發(fā)酵可達(dá)到成熟,由此可見,混合發(fā)酵也可縮短發(fā)酵周期,2個(gè)月左右發(fā)酵即可達(dá)到成熟。

    3 結(jié)論與展望

    混菌發(fā)酵的腐乳在后酵9周后能夠達(dá)到成熟,其總酸含量為 1.148g/100g ,氨基酸態(tài)氮含量為 1.293g/100g ,水溶性蛋白質(zhì)含量為 21.05g/100g ,后酵8周時(shí)腐乳的感官評(píng)分最高,達(dá)88.1分,且滿足成熟腐乳行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),說明混菌發(fā)酵可以在不影響品質(zhì)的前提下縮短發(fā)酵周期。腐乳后酵9周后總游離氨基酸含量達(dá)到 22.272mg/g ,腐乳后酵剛開始時(shí)共檢測(cè)出74種風(fēng)味物質(zhì),腐乳后酵9周后風(fēng)味物質(zhì)更復(fù)雜,共檢測(cè)出82種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)。腐乳的主體風(fēng)味物質(zhì)為醇類和酚類物質(zhì),其賦予腐乳特征香氣,能使其香氣濃郁,呈現(xiàn)良好風(fēng)味。

    優(yōu)化發(fā)酵條件后的腐乳中游離氨基酸含量高于市售腐乳,風(fēng)味層次豐富,具有較高的食用價(jià)值。同時(shí)采用混菌發(fā)酵方式,縮短了其發(fā)酵周期,蛋白質(zhì)降解效率高,進(jìn)而降低了生產(chǎn)周期,提高了企業(yè)的利潤(rùn)率。由于混合發(fā)酵的腐乳風(fēng)味品質(zhì)較好,因此可以進(jìn)一步分析檢測(cè)混合菌種發(fā)酵過程中的營(yíng)養(yǎng)成分、生物胺等,明確微生物間的群體感應(yīng)和代謝途徑,為投人生產(chǎn)提供較全面、系統(tǒng)的理論指導(dǎo)和數(shù)據(jù)支撐。

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