虱螨脲及其復(fù)配制劑對(duì)環(huán)境昆蟲(chóng)的急性毒性和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

中圖分類(lèi)號(hào)：S482.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-060X（2025）05-0072-07

引用格式：李偉，盧賽男，石璞，等.虱螨脲及其復(fù)配制劑對(duì)環(huán)境昆蟲(chóng)的急性毒性和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2025（5）：72-78.DOI：10.16498/j.cnki.hnnykx.2025.005.014

Abstract：Thisstudyaimstodeterminethetoxicefectsandrisksoflufenuronanditsompoundpreparationstothreeenviroental insectspeciesteicittooactfo）oellecatactdd Apis mellifera （feeding method and drip method） was tested. The median lethal rate （LR₅₀） and median lethal dose （LD₅₀） were calculated， and the risks were assessed with consideration to the recommended dosages in the field.Theresults showed that 15% lufenuron SC， 20% （20號(hào) thiamethoxam + lufenuron SC， 30% chlorfenapyr + lufenuron SC，and 12% avermectin + lufenuron SC had the LR₅₀ of gt;100 ，59.79，14， and 6.21g a.i. ?m² on C. septempunctata and29，58，0.44，and 3.32ga.i./hm² on T. japonicum，respectively. The four treatmentsshowed the LD₅₀ of 35.470， 0.022，3.330， and 0.080μg a.i./bee，respectively，foracuteoral toxicity on A .mellifera，demonstratinglow，igh，moderte， and high toxicity， respectively. The four treatments showed the LD₅₀ of gt;100 ，0.026，390，and 0.004μg a.i./bee，respectively， for acute contact toxicity on A mellifera，withlow，high，high，andhigh toxicity，respectively.Theriskassessmentresultsshowedthat 15% lufenuron SC was only unacceptable for T. japonicum in the farmland， and 20% thiamethoxam + lufenuron SC was acceptable for C. septempunctata. Outside the farmland， 30% chlorfenapyr + lufenuron SC was acceptable for C_? ，septempunctata， and 12% avermectin + lufenuron SC was acceptable for C. septempunctata and T. japonicum.Therefore，during the fowering period of plants，compound preparations of lufenuron shouldbavoddasuchaspoibleandthseoffenonditsompoudpreparatiosinthaseareaofasituales shouldbeprohibited.Inthereleaseareaof predatorynatural enemies， 15% lufenuron SC and 20% thiamethoxam + lufenuron SC can beused inmoderation.

Keywords：lufenuron;Coccinellaseptempunctata;Trichogramma japonicum;Apismellifera;toxicity;riskassessment

隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率的不斷提升，農(nóng)作物種植密度增加、連作現(xiàn)象普遍，導(dǎo)致害蟲(chóng)危害日趨嚴(yán)重，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)構(gòu)成巨大威脅。在此背景下，化學(xué)藥劑施用作為見(jiàn)效快、成本低的防治手段，成為當(dāng)前應(yīng)對(duì)蟲(chóng)害的主要方式。盡管農(nóng)藥在保障農(nóng)業(yè)穩(wěn)產(chǎn)增產(chǎn)方面發(fā)揮著不可替代的作用，但由于存在使用劑量不當(dāng)、噴灑方式不科學(xué)等問(wèn)題，不僅會(huì)對(duì)土壤、水體等生態(tài)環(huán)境造成污染，還可通過(guò)食物鏈富集等途徑威脅人類(lèi)健康。研究發(fā)現(xiàn)，我國(guó)每年農(nóng)藥施用量達(dá)50萬(wàn) ～60 萬(wàn)t，其中約 80% 的化學(xué)農(nóng)藥在施用后會(huì)直接進(jìn)入環(huán)境，在大氣、土壤和水體等介質(zhì)間遷移擴(kuò)散，對(duì)非靶標(biāo)生物構(gòu)成潛在風(fēng)險(xiǎn)[1]。例如：施騰飛等[2研究表明，氟啶蟲(chóng)胺腈可能會(huì)破壞蜜蜂的先天免疫系統(tǒng)；魏杰等[研究指出， 8% 甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽可溶液劑對(duì)家蠶、蜜蜂和赤眼蜂存在不可接受的暴露風(fēng)險(xiǎn)；趙玲等試驗(yàn)結(jié)果顯示，22% 噻蟲(chóng)嗪·高效氯氟氰菊酯懸浮劑對(duì)蜜蜂和家蠶的急性毒性分別為高毒和劇毒；尹春峰等[5]研究表明， 37.5% 噠螨靈·噻蟲(chóng)胺懸浮劑和 25% 味蟲(chóng)胺·唑蟲(chóng)酰胺懸浮劑同時(shí)表現(xiàn)出對(duì)捕食性和寄生性天敵的不可接受風(fēng)險(xiǎn)。值得注意的是，低劑量的農(nóng)藥暴露即使不會(huì)立即導(dǎo)致環(huán)境生物的急性死亡，但仍然會(huì)對(duì)環(huán)境生物產(chǎn)生多維度的負(fù)面影響。例如，新煙堿類(lèi)殺蟲(chóng)劑不僅會(huì)降低非靶標(biāo)生物的繁殖率和生長(zhǎng)速率，還會(huì)減弱其運(yùn)動(dòng)活性，干擾神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)并破壞生物代謝平衡，嚴(yán)重時(shí)甚至可能造成DNA損傷[]。因此，在農(nóng)藥研發(fā)與應(yīng)用過(guò)程中，開(kāi)展對(duì)非靶標(biāo)生物的安全性評(píng)價(jià)至關(guān)重要，這一環(huán)節(jié)不僅能系統(tǒng)評(píng)估農(nóng)藥對(duì)環(huán)境生物的潛在影響，還能為制定科學(xué)的農(nóng)藥配施方案提供依據(jù)。

虱螨脲（Lufenuron）是一種苯甲?；孱?lèi)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，通過(guò)抑制昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)體內(nèi)幾丁質(zhì)合成酶活性來(lái)阻斷昆蟲(chóng)蛻皮過(guò)程中表皮質(zhì)的形成，進(jìn)而達(dá)到防害效果，兼具胃毒與觸殺雙重功效，可防治鱗翅目和刺吸式口器等多種類(lèi)害蟲(chóng)[]。例如：虱螨脲對(duì)草地貪夜蛾3齡幼蟲(chóng)有較好的毒殺作用，田間750倍藥液處理下防效高達(dá) 93.07%^[8] ，該藥劑主要通過(guò)降低幼蟲(chóng)體內(nèi)幾丁質(zhì)含量和幾丁質(zhì)酶活性來(lái)發(fā)揮作用，且對(duì)幾丁質(zhì)酶基因表達(dá)具有顯著干擾作用；虱螨脲對(duì)棉鈴蟲(chóng)2＼～5齡幼蟲(chóng)也具有較高的胃毒活性，當(dāng)田間施用濃度為450、 600mL/hm² 時(shí)，其對(duì)棉鈴蟲(chóng)的防效分別為 89.3% 和 90.2%^[10] ；虱螨脲還能夠顯著影響小菜蛾的產(chǎn)卵量、卵孵化率、存活率及成蟲(chóng)壽命，從而有效遏制其種群增長(zhǎng)[]。此外，研究發(fā)現(xiàn)虱螨脲與其他藥劑復(fù)配使用時(shí)表現(xiàn)出協(xié)同增效作用。例如：虱螨脲與噠螨靈復(fù)配可增強(qiáng)對(duì)柑橘全爪螨的防控效果[12]；虱螨脲與甲氧蟲(chóng)酰肼混配不僅能提高對(duì)甜菜夜蛾的防效，還可顯著抑制其生長(zhǎng)發(fā)育及繁殖[13]；虱螨脲與蟲(chóng)螨腈復(fù)配劑對(duì)甘藍(lán)甜菜夜蛾的防治效果均高于單劑處理[14]。虱螨脲復(fù)配組合對(duì)害蟲(chóng)所展現(xiàn)的優(yōu)良防治效果極大地拓寬了虱螨脲的應(yīng)用范圍。當(dāng)前我國(guó)農(nóng)藥登記數(shù)據(jù)顯示，處于登記有效期內(nèi)的虱螨脲原藥有25種，單劑制劑有61種，混配制劑有195種[15]

盡管虱螨脲具有廣闊的應(yīng)用前景，但其對(duì)環(huán)境生物的安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估不容忽視?，F(xiàn)有研究表明，虱螨脲對(duì)非靶標(biāo)生物的影響因藥劑殘效期和劑型毒性差異等因素而不同。戴真松等[研究表明，用虱螨脲1500倍液噴施桑樹(shù)后第2天開(kāi)始采葉飼喂2＼～5齡家蠶，各齡家蠶就眠時(shí)均不能正常蛻皮并最終死亡，即使在施藥90d后采葉飼喂，蠶就眠時(shí)仍出現(xiàn)蛻皮障礙進(jìn)而導(dǎo)致死亡。崔光睿等[]發(fā)現(xiàn)，不同劑型的虱螨脲對(duì)蚯蚓的毒性較低，而對(duì)家蠶來(lái)說(shuō)，其懸浮劑的毒性為中等毒性，乳油和水分散粒劑的毒性均為高毒性。復(fù)配制劑的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估則更為復(fù)雜，需要考慮不同組分之間的相互作用及其對(duì)環(huán)境生物的綜合影響。例如：甲氰菊酯和高效氯氰菊酯復(fù)配劑對(duì)搖蚊幼蟲(chóng)的行為抑制效應(yīng)明顯強(qiáng)于單一成分[8]；嘧菌酯單獨(dú)使用時(shí)對(duì)意大利蜜蜂無(wú)顯著影響，但其與丙硫菌唑和腈菌唑混配時(shí)會(huì)使工蜂采集能力下降 43%^[19] ；丁醚脲·溴蟲(chóng)腈、丁醚脲·苯丁錫及丁醚脲·苯丁錫·溴蟲(chóng)腈混劑對(duì)朱砂葉螨的毒殺能力均高于單一成分，但單劑和混配制劑對(duì)家蠶的毒性無(wú)明顯差異[20]。目前，關(guān)于虱螨脲及其復(fù)配制劑對(duì)環(huán)境昆蟲(chóng)的毒性效應(yīng)及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)的相關(guān)報(bào)道較少。因此，研究以虱螨脲及其復(fù)配制劑為供試藥劑，對(duì)意大利蜜蜂（ApismelliferaL.）、捕食性天敵七星瓢蟲(chóng)（Coccinellaseptempunctata）和寄生性天敵稻螟赤眼蜂（Trichogrammajaponicum）開(kāi)展急性毒性試驗(yàn)，并結(jié)合田間施藥數(shù)據(jù)進(jìn)行初級(jí)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以期為虱螨脲的科學(xué)使用提供參考。

1 材料與方法

1 試驗(yàn)材料

1供試蟲(chóng)源（1）七星瓢蟲(chóng)。成蟲(chóng)引種于湖南省長(zhǎng)沙市長(zhǎng)沙縣春華鎮(zhèn)，引入后采用蠶豆蚜蟲(chóng)飼養(yǎng)，經(jīng)純化、擴(kuò)繁后用于試驗(yàn)。飼養(yǎng)環(huán)境溫度為（ 25±2 ） C ，濕度為 60%～90% ， _{L：D=16h：8h} 光照強(qiáng)度為 1200～2000Lx 。產(chǎn)卵后及時(shí)收集卵塊置于冰箱保存，將同批次卵塊集中孵化，選擇運(yùn)動(dòng)活性良好、健康和形態(tài)大小一致的2齡幼蟲(chóng)用于毒性試驗(yàn)。（2）稻螟赤眼蜂。蜂卡購(gòu)于湖南省水稻研究所，將蜂卡集中孵化后用于試驗(yàn)，孵化溫度為（ 25±2Γ）9C 濕度為 60%～80% ，避光。使用羽化 48h 內(nèi)的成蜂用于毒性試驗(yàn)。（3）意大利蜜蜂。意大利蜜蜂由益陽(yáng)市資陽(yáng)區(qū)博采蜜蜂養(yǎng)殖專(zhuān)業(yè)合作社提供，于試驗(yàn)前1d清晨采集，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)馴養(yǎng) 24h 以上，環(huán)境溫度為（ 25±2 ） °C 、濕度為 50%～70% ，黑暗培養(yǎng)，選擇大小一致、行為活躍且健康的成年工蜂進(jìn)行試驗(yàn)。2供試藥劑與試劑試驗(yàn)藥劑詳細(xì)信息見(jiàn)表1；毒性試驗(yàn)參比試驗(yàn)藥劑為樂(lè)果原藥（湖南海利常德農(nóng)藥化工有限公司）；純丙酮（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；蔗糖水（ 500g/L ）和蜂蜜水，實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)配現(xiàn)用。

3儀器與裝置主要儀器與裝置包括：萬(wàn)分之一電子天平（日本島津制作所株式會(huì)社，AUY220型）、自動(dòng)滾膜機(jī)（佛山市南海港洋機(jī)電設(shè)備有限公司，WY-009型香腸機(jī)改裝）、人工氣候箱（寧波賽福實(shí)驗(yàn)儀器有限公司，PRX-250B型）、移液器（法國(guó)Gilson，P1000）、微量點(diǎn)滴儀和蜂籠等。

2 試驗(yàn)方法

2.1七星瓢蟲(chóng)急性毒性試驗(yàn)采用風(fēng)險(xiǎn)最大化原則進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)置 15% 虱螨脲懸浮劑染毒劑量為 100gai./hm² ，復(fù)配制劑（均為懸浮劑，下同）染毒劑量如下： 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲（133.33、95.24、68.03、48.59、 34.71gai./hm² ）； 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲（5.00、2.50、25、0.625、0.312ga.i./hm2）; 12% 阿維菌素·虱螨脲（13.33、9.52、6.80、4.86、3.47ga.i/hm2）將虱螨脲及其復(fù)配制劑分別配制成系列濃度，移至指形管（ 0.50mL ，內(nèi)壁面積 37.5cm² ，下同）中，用自動(dòng)滾膜機(jī)制成藥膜管，得到系列梯度染毒劑量。同時(shí)，設(shè)置空白對(duì)照和丙酮溶劑對(duì)照，以樂(lè)果原藥為參比藥劑，劑量為 0.20gai./hm² 。每染毒劑量為1個(gè)處理，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)引入10頭七星瓢蟲(chóng)2齡幼蟲(chóng)，用紗布和橡皮筋封口，放置于人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)觀察，溫度（ 25±2 ） C ，相對(duì)濕度 60%～ 90% ， _{L：D=16h：8h} ，光照強(qiáng)度 1 200～2 000Lx 。試驗(yàn)期間以蠶豆蚜蟲(chóng)飼喂七星瓢蟲(chóng)，飼喂前需將殘余活蚜蟲(chóng)和取食后的蚜蟲(chóng)尸體清理干凈，以保證瓢蟲(chóng)充分接觸藥膜，飼喂量應(yīng)滿(mǎn)足瓢蟲(chóng)取食需求。當(dāng)空白對(duì)照組中 80% 的蛹完成羽化后，再觀察3d結(jié)束試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)束后還未羽化的蛹計(jì)入死亡數(shù)中[21]。

2.2稻螟赤眼蜂急性毒性試驗(yàn)根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置虱螨脲懸浮劑及復(fù)配制劑染毒劑量如下： 15% 虱螨脲（2.67、90、36、0.97、 0.69ga.i./hm² ）； 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲 （3.33，2.38，70，21，0.87ga.i.hm²）; 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲（2.00、00、0.500、0.250、0.125ga.i./hm² ） 12% 阿維菌素·虱螨脲（6.67、4.76、3.40、2.43、 74ga.i./hm² ）；設(shè)置空白對(duì)照和丙酮溶劑對(duì)照。按照2.1中的方法制備系列梯度染毒劑量的藥膜管。每染毒劑量為1個(gè)處理，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)引入（ 100±10 ）頭赤眼蜂。待赤眼蜂在藥膜管中爬行1h后，將其轉(zhuǎn)移至無(wú)藥管中培養(yǎng)觀察，試驗(yàn)期間飼喂 10% 蜂蜜水，用黑布和橡皮筋封口，放置于人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)觀察，溫度（ 25±2 ） C ，相對(duì)濕度 70%～80% ，黑暗培養(yǎng)。藥劑處理 24h 后調(diào)查并記錄赤眼蜂的死亡數(shù)和中毒癥狀，以燈光照射下輕敲管壁赤眼蜂未動(dòng)為死亡判定標(biāo)準(zhǔn)[22]

2.3意大利蜜蜂急性毒性試驗(yàn)（1）急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)。采用飼喂法進(jìn)行急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)前蜜蜂需禁食 ^2h ，以保證試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)蜜蜂處于饑餓狀態(tài)。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)置虱螨脲懸浮劑及復(fù)配制劑的染毒劑量，具體如下： 15% 虱螨脲（50.0、467、34.72、28.94、 24.11μg a.i./蜂）； 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲（0.05、0.033、0.022、0.015、 0.0099μgai/ 蜂）； 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲（ 10.00，5.00，2.50，25，0.625μga.i./ 蜂）；12% 阿維菌素·虱螨脲（ 0.200，0.111，0.0617，0.0343 0.0190μg a.i/蜂）。以樂(lè)果原藥為參比藥劑，劑量為（ $0 . 8 0 0 ＼ 、 0 . 4 0 0 ＼ 、 0 . 2 0 0 ＼ 、 0 . 1 0 0 ＼ 、 0 . 0 5 0 ＼ ＼mu ＼mathrm { g ＼ a i } . |$ 蜂）。同時(shí)，設(shè)置空白對(duì)照，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)10只蜜蜂，采用飼喂器飼喂 100μL 帶毒蔗糖水，待蜜蜂取食完全后將蜂籠轉(zhuǎn)移至人工氣候室中培養(yǎng)觀察，溫度（ 25±2 ） C ，相對(duì)濕度 50%～70% ，黑暗條件下培養(yǎng) 48h （2）急性接觸毒性試驗(yàn)。用氮?dú)饴樽砻鄯?，采用點(diǎn)滴法進(jìn)行急性接觸毒性試驗(yàn)。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)置虱螨脲懸浮劑及復(fù)配制劑的染毒劑量，詳細(xì)劑量如下： 15% 虱螨脲（限度試驗(yàn)， 100.0μg a.i./蜂）；

20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲（ 0.05，0.036，0.026，0.018，0.013 μg a.i./蜂）; 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲（5.00、2.50、25、0.625、 0.312μg a.i./蜂）; 12% 阿維菌素·虱螨脲（0.010，0.00714，0.00510，0.00364，0.00260μga.i./ 蜂）。因 15% 虱螨脲懸浮劑含量較低且限度試驗(yàn)需配制的藥劑濃度較高，為保證藥劑溶解，對(duì)每只蜜蜂采用點(diǎn)滴 2μL 處理，其他藥劑為點(diǎn)滴 1μL 處理。以樂(lè)果原藥為參比藥劑，劑量為（0.800、0.400、0.200、0.100、 0.050μg a.i/蜂）。同時(shí)，設(shè)置空白對(duì)照和丙酮溶劑對(duì)照，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)10只蜜蜂。染毒后將蜂籠轉(zhuǎn)移至人工氣候室中培養(yǎng)觀察，溫度（ 25±2 ） C ，相對(duì)濕度 50%～70% ，黑暗條件下培養(yǎng)48h 。各處理中如新增死亡數(shù)超過(guò)3只蜜蜂，則需延長(zhǎng)試驗(yàn)周期，最長(zhǎng)不超過(guò) 96h 。采用不含藥劑的50% 蔗糖水進(jìn)行飼喂，并每天觀察蜜蜂的中毒癥狀和死亡情況，以用毛筆輕觸蜜蜂身體無(wú)反應(yīng)為死亡判定標(biāo)準(zhǔn)[23]。

2.4初級(jí)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估藥劑對(duì)七星瓢蟲(chóng)和稻螟赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估依據(jù)NY/T2882.7—2016進(jìn)行。根據(jù)虱螨脲及其復(fù)配制劑的田間施藥量和施藥次數(shù)，依照公式（2）和（3）分別計(jì)算農(nóng)田內(nèi)和農(nóng)田外的預(yù)測(cè)暴露量（PER，簡(jiǎn)寫(xiě)為P），再與兩種天敵昆蟲(chóng)的毒性終點(diǎn)半致死用量 LR₅₀ 比較，依據(jù)公式（4）和（5）分別計(jì)算七星瓢蟲(chóng)和稻螟赤眼蜂在農(nóng)田內(nèi)、農(nóng)田外的危害商值（HQ，簡(jiǎn)寫(xiě)為H）以判斷風(fēng)險(xiǎn)是否可接受：當(dāng) H?5 時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)可接受；當(dāng) Hgt;5 時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)不可接受。

P_in=A×M

式中： P_in 為農(nóng)田內(nèi)預(yù)測(cè)暴露量（ gai./hm² ）；P_off 為農(nóng)田外預(yù)測(cè)暴露量（ ）； A 為推薦農(nóng)藥有效成分單位面積最高施藥量（ gai./hm² ）； M 為多次施藥因子（因試驗(yàn)中各藥劑均施藥1次， M=1 ）；P 為農(nóng)藥漂移因子； V 為農(nóng)藥植被分布因子（因缺少實(shí)測(cè)值數(shù)據(jù)，采用默認(rèn)值5）。

式中： H_in 為農(nóng)田內(nèi)危害商值； H_off 為農(nóng)田外危害商值； U 為不確定因子（采用默認(rèn)值5）；R為毒性終點(diǎn)半致死用量 LR₅₀ 。

藥劑對(duì)意大利蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法如下：以暴露場(chǎng)景為噴施場(chǎng)景，采用農(nóng)藥單次最高施藥劑量作為暴露量。使用蜜蜂急性經(jīng)口或接觸毒性較高的半致死劑量（ LD₅₀ ）為預(yù)測(cè)無(wú)效應(yīng)劑量（PNED），參照公式（6）計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)商值（ RQ_sp ，簡(jiǎn)寫(xiě)為 R_sp ）：當(dāng)R_sp?1 時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)可接受；當(dāng) R_spgt;1 時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)不可接受。

式中： A 為推薦的單位面積農(nóng)藥最高施藥劑量（ gai./hm² ）； D 為經(jīng)口或接觸的半致死劑量 LD₅₀ （ μga.i./ 蜂）。

3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件中的Probit回歸方法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)算毒力回歸方程、 LR₅₀/LD₅₀ 值及 95% 置信限。

2 結(jié)果與分析

2.1 虱螨脲及其復(fù)配劑對(duì)七星瓢蟲(chóng)的急性毒性

試驗(yàn)過(guò)程中，空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組的七星瓢蟲(chóng)未出現(xiàn)異常情況，均完全羽化；樂(lè)果原藥處理的七星瓢蟲(chóng)死亡率為 56.67% ，處于 40%～80% 范圍內(nèi)，符合NY/T3088—2017的規(guī)定，表明供試批次七星瓢蟲(chóng)可滿(mǎn)足毒性試驗(yàn)要求。

4種殺蟲(chóng)劑對(duì)七星瓢蟲(chóng)急性接觸毒性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。 15% 虱螨脲懸浮劑（限度試驗(yàn)）處理組的七星飄蟲(chóng)未出現(xiàn)明顯中毒癥狀；而其他復(fù)配劑處理組的七星瓢蟲(chóng)均有明顯的中毒癥狀，試驗(yàn)初期（1＼～3d）的中毒癥狀較明顯，主要表現(xiàn)為取食抑制、逃避、吐液和蜷縮等，且染毒劑量越大其癥狀越明顯。試驗(yàn)第7天，空白對(duì)照和溶劑對(duì)照組的七星瓢蟲(chóng)出現(xiàn)化蛹現(xiàn)象，但還未蜷縮成形；試驗(yàn)第11天開(kāi)始，空白對(duì)照和溶劑對(duì)照組的七星瓢蟲(chóng)出現(xiàn)羽化現(xiàn)象；試驗(yàn)結(jié)束時(shí)， 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑處理組中仍有未羽化的七星瓢蟲(chóng)，且羽化后的成蟲(chóng)中存在軟殼現(xiàn)象。結(jié)合 LR₅₀ 分析，各藥劑對(duì)七星瓢蟲(chóng)的毒性由高到低依次為 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑 gt;12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑 gt;20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑 gt;15% 虱螨脲懸浮劑。

2.2虱螨脲及其復(fù)配劑對(duì)稻螟赤眼蜂的急性毒性

因稻螟赤眼蜂較小而容易死亡，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組中的赤眼蜂平均死亡率分別為 6.78% 和 5.12% ，因此毒性終點(diǎn)采用校正死亡率進(jìn)行分析。4種殺蟲(chóng)劑對(duì)稻螟赤眼蜂的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑對(duì)稻螟赤眼蜂的毒性最高，其 LR₅₀ 值小于1：LR₅₀ 結(jié)果顯示，各藥劑對(duì)赤眼蜂的毒性由高到低依次為 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑 gt;15% 虱螨脲懸浮劑 gt;20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑 gt;12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑。

2.3虱螨脲及其復(fù)配劑對(duì)意大利蜜蜂的急性毒性

試驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)照組的意大利蜜蜂未出現(xiàn)異常和死亡現(xiàn)象。經(jīng)口毒性試驗(yàn)中，參比藥劑的結(jié)果顯示，LD₅₀（24h） 為 0.189μga.i./ 蜂， 95% 置信限為 0.153～ 0.277μg a.i./蜂（在 0.10～0.35μg： a.i./蜂范圍內(nèi)）。接觸毒性試驗(yàn)中，參比藥劑的結(jié)果顯示， LD₅₀ （ 為0.206μg a.i./蜂， 95% 置信限為 0.151～0.281μga.i./ 蜂（在 0.10～0.35μg a.i./蜂范圍內(nèi)）。上述結(jié)果均符合GB/T31270.10—2014的要求，說(shuō)明供試意大利蜜蜂蜂群符合試驗(yàn)要求。經(jīng)觀察可知，試驗(yàn)期間中毒意大利蜜蜂表現(xiàn)出活動(dòng)抑制、蜷縮、身體發(fā)黑等癥狀。

經(jīng)口毒性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。試驗(yàn)期間，意大利蜜蜂未出現(xiàn)拒食現(xiàn)象，各處理均取食完全，各藥劑對(duì)意大利蜜蜂的經(jīng)口毒性由高到低依次為 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑 gt;12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑 gt; 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑 gt;15% 虱螨脲懸浮劑

接觸毒性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。各藥劑對(duì)意大利蜜 蜂的接觸毒性由高到低依次為 12% 阿維菌素·虱螨 脲懸浮劑 gt;20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑 gt;30% 蟲(chóng)螨 腈·虱螨脲懸浮劑 gt;15% 虱螨脲懸浮劑。

2.4各藥劑對(duì)3種非靶標(biāo)生物的初級(jí)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果

通過(guò)測(cè)量距耕地邊界 1m 或果園邊界 3m 處沉 積量，確定 15% 虱螨脲懸浮劑、 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨 脲懸浮劑、 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑和 12% 阿 維菌素·虱螨脲懸浮劑4種藥劑的漂移因子分別為 2.77% 、 8.02% 、 2.77% 和 29.20% 。

各藥劑對(duì)七星瓢蟲(chóng)、稻螟赤眼蜂和意大利蜜蜂的初級(jí)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果見(jiàn)表6。在七星瓢蟲(chóng)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，4種藥劑在農(nóng)田外場(chǎng)景下對(duì)七星瓢蟲(chóng)的風(fēng)險(xiǎn)均可接受；在農(nóng)田內(nèi)場(chǎng)景下， 15% 虱螨脲懸浮劑和20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑對(duì)七星瓢蟲(chóng)的風(fēng)險(xiǎn)可接受，另外兩種藥劑的風(fēng)險(xiǎn)不可接受；其中， 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑的風(fēng)險(xiǎn)最高。在稻螟赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，農(nóng)田外場(chǎng)景下， 15% 虱螨脲懸浮劑和12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑對(duì)稻螟赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)可接受； 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑和 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑對(duì)稻螟赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)不可接受，危害商值略高于邊界值5；農(nóng)田內(nèi)場(chǎng)景下，4種藥劑對(duì)稻螟赤眼蜂的風(fēng)險(xiǎn)均不可接受。在意大利蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，僅 15% 虱螨脲懸浮劑對(duì)蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)可接受。

3 討論與結(jié)論

復(fù)配制劑在農(nóng)藥市場(chǎng)中占據(jù)重要地位，殺蟲(chóng)劑的復(fù)配使用不僅能夠提高防效、拓寬防治譜和降低成本[24]，還可以延緩害蟲(chóng)抗藥性的發(fā)展。試驗(yàn)中，虱螨脲單劑及3種復(fù)配制劑對(duì)3種非靶標(biāo)生物的毒性存在差異。對(duì)七星瓢蟲(chóng)而言， 15% 虱螨脲懸浮劑的染毒劑量已超過(guò)限度劑量，但供試七星瓢蟲(chóng)未出現(xiàn)明顯中毒癥狀；虱螨脲分別與3種藥劑混配后，復(fù)配劑對(duì)七星瓢蟲(chóng)的毒性均有不同程度的提高，毒性增幅排序?yàn)椋?30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑 gt;12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑 gt;20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑。對(duì)稻螟赤眼蜂而言， 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑的 LR₅₀ 最低（ 0.44ga.i./hm² ），毒性最強(qiáng)； 12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑的 LR₅₀ 最高（ 3.32ga.i./hm² ），毒性最弱；與虱螨脲單劑比較，虱螨脲·噻蟲(chóng)嗪和虱螨脲·阿維菌素復(fù)配制劑對(duì)稻螟赤眼蜂的聯(lián)合毒性均有所降低，但虱螨脲·蟲(chóng)螨腈復(fù)配劑對(duì)稻螟赤眼蜂的聯(lián)合毒性明顯增強(qiáng)。魏杰等[25]以七星瓢蟲(chóng)和螟黃赤眼蜂作試驗(yàn)生物，采用藥膜法對(duì) 5% 阿維菌素、 30% 噻蟲(chóng)嗪、 1% 印楝素、 15% 唑蟲(chóng)酰胺和 5% 虱螨脲進(jìn)行了急性接觸毒性測(cè)試，結(jié)果表明，對(duì)七星瓢蟲(chóng)的毒性由高到低排序?yàn)?5% 阿維菌素 gt;1% 印楝素 gt;15% 唑蟲(chóng)酰胺 gt;30% 噻蟲(chóng)嗪 gt;5% 虱螨脲，對(duì)螟黃赤眼蜂的毒性由高到低排序?yàn)?5% 阿維菌素 gt;30% 噻蟲(chóng)嗪 gt;1% 印楝素 gt;15% 唑蟲(chóng)酰胺 gt; 5% 虱螨脲。筆者對(duì)七星瓢蟲(chóng)的毒性排序結(jié)果與魏杰等的研究結(jié)果類(lèi)似，但對(duì)赤眼蜂的毒性排序結(jié)果與魏杰等的研究結(jié)果存在較大差異，可能是因?yàn)楣┰嚦嘌鄯涞钠贩N不同。

而對(duì)意大利蜜蜂而言，經(jīng)口和接觸毒性試驗(yàn)均以虱螨脲單劑的毒性最低，其中單劑接觸試驗(yàn)為限度試驗(yàn)，其毒性低于經(jīng)口毒性； 30% 蟲(chóng)螨腈·虱螨脲懸浮劑和 12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑對(duì)意大利蜜蜂的接觸毒性均高于經(jīng)口毒性；復(fù)配制劑的毒性遠(yuǎn)高于虱螨脲單劑，其中虱螨脲·噻蟲(chóng)嗪和虱螨脲·阿維菌素復(fù)配劑的毒性更高，可能與這2種成分對(duì)蜜蜂的毒性較高有關(guān)。前人研究發(fā)現(xiàn)，噻蟲(chóng)嗪對(duì)意大利蜜蜂的經(jīng)口毒性（ 蜂）和接觸毒性（ 0.0363μgai./ 蜂）均屬于高毒[2，噻蟲(chóng)嗪對(duì)明亮熊蜂、地熊蜂和短舌熊蜂也有較高毒性[27]，可見(jiàn)其對(duì)不同蜜蜂種群均具有高毒性；阿維菌素對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性為 蜂，毒性較高，蜜蜂長(zhǎng)期接觸較低濃度的阿維菌素同樣會(huì)損害其運(yùn)動(dòng)能力[28]。筆者對(duì)蜜蜂的毒性試驗(yàn)研究結(jié)果與前人研究結(jié)論基本吻合。

復(fù)配制劑具有雙重效應(yīng)，其在有效防治害蟲(chóng)的同時(shí)，也可能加劇對(duì)非靶標(biāo)生物的危害。與單劑相比，復(fù)配制劑對(duì)非靶標(biāo)生物的危害可能更小，例如本研究中 12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑對(duì)蜜蜂的經(jīng)口毒性（ 0.08μg a.i./蜂）略弱于文獻(xiàn)[28]報(bào)道的單劑阿維菌素經(jīng)口毒性（ 0.007μga.i./ 蜂）。然而單一的毒性數(shù)據(jù)并不足以準(zhǔn)確判斷藥劑對(duì)環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)危害程度，在實(shí)際風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，只有將毒性試驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)合田間用藥量、生物種群豐度和風(fēng)險(xiǎn)商值等進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)才能準(zhǔn)確判斷風(fēng)險(xiǎn)接受程度。

農(nóng)藥環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是我國(guó)農(nóng)藥登記資料中不可缺少的一部分，能指導(dǎo)科學(xué)合理用藥并保護(hù)環(huán)境生物少受或免受危害。試驗(yàn)中，3種復(fù)配藥劑對(duì)稻螟赤眼蜂和意大利蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)多為不可接受，僅 12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑對(duì)稻螟赤眼蜂（農(nóng)田外場(chǎng)景）的風(fēng)險(xiǎn)可接受；在對(duì)意大利蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，僅虱螨脲單劑風(fēng)險(xiǎn)可以接受， 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑和 12% 阿維菌素·虱螨脲懸浮劑的風(fēng)險(xiǎn)商值高達(dá)4545.45和10227.00，可能是因?yàn)橐獯罄鄯鋵?duì)這兩種藥劑敏感，其基因組中缺乏解毒酶基因，所以更容易受到藥害[29]。在對(duì)七星瓢蟲(chóng)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，農(nóng)田外場(chǎng)景下的風(fēng)險(xiǎn)均可接受；農(nóng)田內(nèi)場(chǎng)景下，僅15% 虱螨脲懸浮劑和 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑的風(fēng)險(xiǎn)可接受。

對(duì)于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估不可接受的藥劑，可以通過(guò)實(shí)際監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)和更復(fù)雜的模型來(lái)進(jìn)行更高級(jí)、更準(zhǔn)確的評(píng)估。如需使用風(fēng)險(xiǎn)不可接受的藥劑，施用時(shí)可采取相應(yīng)的降風(fēng)險(xiǎn)措施，如降低劑量、避開(kāi)環(huán)境生物等。對(duì)于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中可接受的藥劑，在使用中同樣不能忽視其對(duì)環(huán)境生物的潛在危害，特別是慢性中毒現(xiàn)象會(huì)對(duì)非靶標(biāo)益蟲(chóng)的生理和生態(tài)行為造成多方面的影響。例如，百菌清可導(dǎo)致意大利蜜蜂幼蟲(chóng)和蛹的死亡率增加，使幼蟲(chóng)發(fā)育速率減緩，具有顯著的慢性毒性效應(yīng)[30]。此外，低濃度農(nóng)藥雖無(wú)急性致死效應(yīng)，但也應(yīng)關(guān)注其對(duì)有益生物的亞致死效應(yīng)和毒性累積效應(yīng)，如低濃度的氟啶蟲(chóng)酰胺可顯著延長(zhǎng)七星瓢蟲(chóng)幼蟲(chóng)的蟲(chóng)態(tài)期，導(dǎo)致成蟲(chóng)壽命降低和產(chǎn)卵繁殖能力下降[31]

綜合毒性試驗(yàn)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，建議在植物花期內(nèi)避免使用虱螨脲復(fù)配制劑，在寄生性天敵釋放區(qū)禁止使用虱螨脲及其復(fù)配制劑，在捕食性天敵釋放區(qū)可以適量使用 15% 虱螨脲懸浮劑和 20% 噻蟲(chóng)嗪·虱螨脲懸浮劑。

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（責(zé)任編輯：彭靜瀾）