BANCR在增生性瘢痕中的表達(dá)及其作用機制

[摘要]目的：探討B(tài)ANCR在人增生性瘢痕（Hypertrophic scar，HS）組織中的表達(dá)及其對HS成纖維細(xì)胞活性、凋亡及相關(guān)信號通路的影響。方法：獲取HS病理組織及正常皮膚組織，采用蘇木精-伊紅染色法及馬森染色觀察病理形態(tài)；實時熒光定量PCR（Real-time PCR，qRT-PCR）檢測HS組織及正常組織中BANCR相對表達(dá)量。提取人HS成纖維細(xì)胞，分為空白組（未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞）、BNACR siRNA組（細(xì)胞轉(zhuǎn)染BNACR siRNA）、negative control組（細(xì)胞轉(zhuǎn)染negative control）、pcDNA-BANCR組（細(xì)胞轉(zhuǎn)染pcDNA-BANCR）、pcDNA-NC組（轉(zhuǎn)染pcDNA-NC）。結(jié)果：HS組織中BANCR表達(dá)顯著高于人正常組織（P＜0.05）；與空白組相比，BNACR siRNA組活性降低，凋亡率升高（P＜0.05），與空白組相比，pcDNA-BANCR組細(xì)胞活性升高，凋亡率降低（P＜0.05）；與空白組相比，BNACR siRNA組細(xì)胞周期蛋白D1（CyclinD1）、細(xì)胞周期相關(guān)激酶4（Cyclin-dependent kinase 4，CDK4）、跨膜受體蛋白Notch-1（Notch1）蛋白水平降低，半胱天冬氨酸蛋白酶（Cysteinyl aspartate specific proteinases，Caspase）-3 、Caspase-9、蛋白水平升高，pcDNA-BANCR組CyclinD1、CDK4、Notch1蛋白水平升高，Caspase-3、Caspase-9蛋白水平降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：增生性瘢痕組織中BANCR表達(dá)升高，在人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中敲低BANCR可抑制細(xì)胞增殖，加快凋亡，研究機制可能與調(diào)控Notch1促進(jìn)caspase-3、caspase-9及抑制cyclinD1、CDK4表達(dá)相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]增生性瘢痕；成纖維細(xì)胞；BANCR；增殖；凋亡；半胱天冬氨酸蛋白酶；Notch1

[中圖分類號]R622" " [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A" " [文章編號]1008-6455（2025）06-0001-06

Expression and Mechanism of BANCR in Hypertrophic Scars

SUN Weijing， HAN Dezhi， LI Shijie， ZHAO Yue， SUI Fuqiang， FU Jiachen， DI Lixia

（ Department of Burns and Plastic Surgery， 969th Hospital of Joint Logistic Support Force， Hohhot 010051，

Inner Mongolia， China ）

Abstract： Objective" To investigate the expression of BANCR in human hypertrophic scar （HS） tissues and its effect on the activity， apoptosis and related signaling pathways of HS fibroblasts. Methods" HS pathological tissues and normal skin tissues were obtained， and the pathological morphology was observed by hematoxylin-eosin staining and Masson staining. Real-time quantitative PCR （qRT-PCR） was used to detect the relative expression of BANCR in HS tissues and normal tissues. Human HS fibroblasts were extracted and divided into blank group （untransfected cells）， BNACR siRNA group （cells transfected with BNACR siRNA）， negative control group （cells transfected with negative control）， pcDNA-BANCR group （cells transfected with pcDNA-BANCR）， pcDNA-NC group （transfected with pcDNA-NC）. Results" The expression of BANCR in HS tissues was significantly higher than that in human normal tissues （P＜0.05）. Compared with the blank group， the activity of BNACR siRNA group decreased and the apoptosis rate increased （P＜0.05）. Compared with the blank group， the cell activity of pcDNA-BANCR group increased and the apoptosis rate decreased （P＜0.05 ）. Compared with the blank group， the levels of CyclinD1， cyclin-dependent kinase 4 （ CDK4 ） and transmembrane receptor protein Notch-1 （Notch1） in the BNACR siRNA group were decreased， and the levels of cysteinyl aspartate specific proteinases （Caspase） -3， Caspase-9 and protein were increased. The protein levels of CyclinD1， CDK4 and Notch1 in pcDNA-BANCR group were increased， and the protein levels of Caspase-3 and Caspase-9 were decreased （P＜0.05 ）. Conclusion" The expression of BANCR in hypertrophic scar tissue is increased. Knockdown of BANCR in human hypertrophic scar fibroblasts can inhibit cell proliferation and accelerate apoptosis. The mechanism may be related to the regulation of Notch1 to promote caspase-3 and caspase-9 and inhibit cyclinD1 and CDK4 expression.

Key words： hypertrophic scar; fibroblasts; bANCR; proliferation; apoptosis; cysteine aspartic protease; notch1

瘢痕是皮膚組織真皮網(wǎng)狀層受損后愈合出現(xiàn)的產(chǎn)物，主要分為常規(guī)瘢痕、增生性瘢痕（HS）及瘢痕疙瘩等[1]。HS屬于臨床常見的病理學(xué)瘢痕，HS組織特點是膠原過度沉積、成纖維細(xì)胞異常增殖及血管密切增加，早期色紅質(zhì)硬且多伴隨瘙癢、灼痛等，在影響患者生理障礙的同時可造成負(fù)面心理，影響患者預(yù)后[2]。HS疾病臨床治療可包含手術(shù)、放療、冷凍等療法，但部分方法具有治療后復(fù)發(fā)及療效不明顯，因此尋找新的治療方法至關(guān)重要?，F(xiàn)階段，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，非編碼RNA被認(rèn)為可參與HS疾病的發(fā)生發(fā)展，其中長鏈非編碼RNA（LncRNA）是其中之一。BANCR是由Flockhart于2012年通過RNA-seq篩選出的LncRNA，被證實參與疾病的發(fā)生發(fā)展[3]。例如在胰腺癌[4]細(xì)胞中BANCR表達(dá)上調(diào)加快癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移；晶體上皮細(xì)胞中抑制BANCR表達(dá)后可減少細(xì)胞增殖[5]；在黑素瘤中BANCR表達(dá)上調(diào)調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路而減少腫瘤細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化[6]。但是關(guān)于BANCR在HS中作用及機制還需要進(jìn)一步了解，本文通過收集HS患者皮膚組織檢測BANCR表達(dá)，且通過對增生性瘢痕成纖維化細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，觀察對細(xì)胞增殖、凋亡及相關(guān)因子的影響，有望為相關(guān)研究提供參考依據(jù)。

1" 資料和方法

1.1 一般資料：選取2022年3月-2023年12月經(jīng)筆者醫(yī)院手術(shù)治療的52例HS患者作為研究對象。52例患者，其中男35例，女17例；年齡15～96歲，平均年齡（31.22±11.96）歲；病程2～19個月，平均病程（12.30±2.24）個月；瘢痕部位：面頸部27例，胸腹部16例，四肢9例；病因：手術(shù)20例，燒傷18例，痤瘡14例。本研究經(jīng)過筆者醫(yī)院倫理委員會審批（倫理號：2022006）。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《現(xiàn)代瘢痕學(xué)》[6]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②瘢痕呈紅色且隆起，伴有瘙癢且疼痛；③在筆者醫(yī)院接受規(guī)范治療；④年齡＞18歲；⑤病程1～5年；⑥術(shù)前30 d未經(jīng)過放療、激光等治療；⑦臨床資料齊全。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并惡變；②合并瘢痕疙瘩；③合并其他皮膚疾病；④瘢痕處感染者；⑤合并惡性腫瘤者。

1.2 標(biāo)本采集：手術(shù)過程中獲取HS病理全層組織2 g，同時取植皮時多余的正常全層組織2 g，均固定于10%的中性甲醛溶液中，乙醇脫水，二苯甲浸泡石蠟包埋，制定4μm切片后置于-80℃液氮保持備用。

1.3 蘇木精-伊紅（HE）染色及Masson染色

1.3.1 HE染色：將病理切片置于二甲苯中脫蠟，酒精脫水（70%～80%～90%～95%），自來水沖洗后，蘇木精染色，1%的鹽酸-乙醇分化，水洗藍(lán)化，1%的伊紅復(fù)染，酒精透水。

1.3.2 Masson染色：病理切片置于二苯甲浸泡20 min，梯度酒精（95%～90%～80%～70%）脫水，蘇木精染色，1%的鹽酸分化后麗春紅染色5～10 min，蒸餾水漂洗，苯胺藍(lán)染色，酒精脫水及中性樹脂封片。

1.4 qRT-PCR檢測組織中BANCR 相對表達(dá)量：取正常皮膚組織及HS組織樣本，研磨成勻漿，采用TRIzol試劑提取組織總RNA，將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，并以cDNA為模板制成總反應(yīng)體系（10μl），采用熒光定量PCR儀器檢測BANCR相對表達(dá)率，根據(jù)2-△△Ct值計算，以GAPDH為內(nèi)參。BANCR引物具體如下。F：5'-CGG GTC TAC GCC TAC GTC GTG CTT C-3'；5'-CAC AGC TCT GTG CGA TCC TGC TTG CTG-3；GAPDH：5'-AGA AGG CTG GGG CTC ATT TG-3'；5'-AGG GGC CAT CCA CAG TCT TC-3'。

1.5 HS成纖維細(xì)胞培養(yǎng)：取HS組織采用PBS沖洗3次，手術(shù)刀去除表皮及皮下組織，采用含有3%青霉素的PBS，反復(fù)沖洗組織2 min，將組織剪碎成1 mm3細(xì)小碎塊，PBS清洗2遍后放入37℃恒溫?fù)u床中消化2 h。采用1 ml移液槍吹散細(xì)胞懸液，采用濾網(wǎng)過濾2次。將裝有細(xì)胞懸液的離心管，按照1 000 r/min離心5 min，棄上清液加入5 ml的完全培養(yǎng)基，重懸細(xì)胞，在37℃、5%CO2及飽和濕度的孵箱中孵化24 h，按照1∶3進(jìn)行傳代，第2～4代用于后續(xù)實驗。

1.6 主要試劑和儀器：BNACR siRNA、negative control引物由中國上海生工生物工程股份有限公司合成；pcDNA-BANCR、pcDNA-NC質(zhì)粒由美國Invitrogen公司合成；1640完全培養(yǎng)基購自以色列BioLogicaL Industries公司，貨號：04-010-1A；Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑購自賽默飛公司，貨號：11668；胎牛血清、0.25%胰蛋白酶購自Corning公司，貨號35-015-CV、25-053-CL；細(xì)胞周期蛋白D1（cyclinD1）、細(xì)胞周期相關(guān)激酶4（Cyclin-dependent kinase 4，CDK4）、半胱天冬氨酸蛋白酶（Cysteinyl aspartate specific proteinases，Caspase）-3、Caspase-9、跨膜受體蛋白Notch-1（Notch1）抗體均購自Abcam公司，貨號：ab40754、ab108357、ab305667、ab198061、ab221603；Attune NxT流式細(xì)胞儀購自賽默飛世爾科技生命科學(xué)產(chǎn)品；DYY-6C蛋白電泳儀購自北京六一生物科技有限公司。

1.7 HS成纖維細(xì)胞鑒定：取對數(shù)生長細(xì)胞放入24個孔板中，孵育12 h，采用200μl槍頭取適量PBS溶液，洗滌2次，加入甲醛固定，30 min后用PBS洗滌3次，室溫封閉60 min，加入一抗孵育30 min后采用PBS洗滌，后加入二抗避光條件下孵育60 min，PBS洗滌5次，1次/分鐘，進(jìn)行細(xì)胞爬片，加入DAPI染色再進(jìn)行孵育，采用熒光顯微鏡下觀察。

1.8 BANCR轉(zhuǎn)染方法及分組：取對數(shù)生長的HS成纖維細(xì)胞，接種于6孔板中，細(xì)胞融合為50%按照Lipofectamine 2000說明書轉(zhuǎn)染，將BNACR siRNA、negative control、pcDNA-BANCR、pcDNA-NC轉(zhuǎn)染到細(xì)胞株中，37.5℃，5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)。12 h后將無血清培養(yǎng)基更換為完全培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，提取細(xì)胞RNA。分組：空白組（未轉(zhuǎn)染的HS成纖維細(xì)胞）、BNACR siRNA組（HS成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染BNACR siRNA）、negative control組（HS成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染negative control）、pcDNA-BANCR組（HS成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染pcDNA-BANCR）、pcDNA-NC組（HS成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染pcDNA-NC），采用qRT-PCR驗證轉(zhuǎn)染效率，同1.4方法。

1.9 MTT檢測細(xì)胞增殖：HS成纖維細(xì)胞接種于96孔板，6×103個細(xì)胞/孔，細(xì)胞貼壁24 h加入新鮮MTT溶液（5μg/μl）20微升/孔，培養(yǎng)4 h，小心吸棄上清液，加入二甲基亞砜150微升/孔，震蕩10 min。采用酶聯(lián)免疫檢測儀檢測490 nm波長處吸光度（OD）值，根據(jù)數(shù)據(jù)繪制細(xì)胞生長抑制率曲線。

1.10 末端脫氧核苷酸標(biāo)記法（TUNEL）檢測細(xì)胞凋亡：取轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞，進(jìn)行消化、離心，棄掉上清液后重懸細(xì)胞，以密度為1×105個/毫升接種于96孔板中，常規(guī)培養(yǎng)待細(xì)胞貼壁后，每孔加入0.5 ml 4%多聚甲醛溶液固定10 min，PBS溶液洗滌3次，將孔板放入0.1% Triton X-100的PBS中冰浴2 min，加入5μl TdT和450μl熒光標(biāo)記dUTP，然后根據(jù)TUNEL檢測說明書取TUNEL反應(yīng)液，將孔板浸入TUNEL反應(yīng)液中，恒溫下避光孵育1 h，PBS洗滌3次，加入DAPI染色液，37℃避光水浴5 min，PBS洗滌3次后用50%的甘油封片，在暗室中用熒光顯微鏡觀察、拍照，凋亡的細(xì)胞呈現(xiàn)藍(lán)色熒光，凋亡率=凋亡細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%。

1.11 免疫印跡檢測CyclinD1、CDK4、Caspase-3、Caspase-9、Notch1蛋白：磷酸鹽緩沖液清洗HS成纖維細(xì)胞，添加蛋白裂解液裂解細(xì)胞10 min，將2.0 ml的樣本收集至離心管中，10 000 r/min離心，離心30 min，60 s后提取上清液，每個樣本取25μl檢測蛋白濃度。按照樣本制備溶液，采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE）凝膠，計算初含50μg的蛋白所需的液體進(jìn)行上樣，開始電泳。當(dāng)Marker蛋白置于玻璃板底部時則停止跑膠。繼續(xù)轉(zhuǎn)膜，PVDF膜從轉(zhuǎn)膜槽中取出采用TBST漂洗5 min，加入稀釋后的一抗CyclinD1（1∶150）、CDK4（1∶100）、Caspase-3（1∶100）、Caspase-9（1∶100）、Notch1（1∶100），加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗（1∶1 000），孵育時間為2 h。避光環(huán)境下將顯影液加入PDCF膜，45 s，采用Image-Lab圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行成像和分析。

1.12 統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS 26.00統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計數(shù)資料以（%）表示，計量資料以（xˉ±s）的形式表示，組內(nèi)均采用配對樣本t檢驗，組間采用獨立樣本t檢驗，計數(shù)資料以[例（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2" 結(jié)果

2.1 HS組織病理結(jié)果：HE染色結(jié)果顯示，正常皮膚組織形態(tài)排列有序，而HS組織皮下膠原增生且排列紊亂，可見炎癥細(xì)胞浸潤；Masson染色結(jié)果顯示，與正常組織相比，HS組織可見明顯的膠原增生，見圖1。

2.2 qRT-PCR檢測HS組織中BANCR相對表達(dá)量：人正常皮膚組織及HS組織中BANCR相對表達(dá)量分別為（1.00±0.00）及（1.68±0.20），HS組織中BANCR表達(dá)顯著高于人正常皮膚組織（P＜0.05），見圖2。

2.3 HS成纖維細(xì)胞的鑒定：圖3A為原代HS成纖維細(xì)胞，圖3B為對數(shù)生長期第3代HS成纖維細(xì)胞，呈現(xiàn)梭形生長，圖3C為波形蛋白染色呈陽性綠色，經(jīng)DAPI復(fù)染成藍(lán)色。

2.4 各組HS成纖維細(xì)胞的BANCR轉(zhuǎn)染情況：空白組、BNACR siRNA組、negative control組、pcDNA-BANCR組、pcDNA-NC組的HS成纖維細(xì)胞的BANCR相對表達(dá)量分別為（1.00±0.00）、（0.44±0.05）、（0.96±0.03）、（1.54±0.12）及（1.01±0.02）（F=249.900，P＜0.001）。空白組、negative control組及pcDNA-NC組的BANCR表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與空白組相比，BNACR siRNA組BANCR降低，pcDNA-BANCR組BANCR升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），證明各組細(xì)胞BANCR轉(zhuǎn)染成功。見圖4。

2.5 各組HS成纖維細(xì)胞活性比較：各組HS成纖維細(xì)胞24 h、36 h、72 h及96 h的細(xì)胞活性存在時間、組間作用。24 h、36 h、72 h及96 h時，空白組、negative control組、pcDNA-NC組組間細(xì)胞活性比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；與空白組相比，BNACR siRNA組HS成纖維細(xì)胞活性降低（P＜0.05），與空白組相比，pcDNA-BANCR組細(xì)胞活性升高（P＜0.05），見表1。

2.6 各組HS成纖維細(xì)胞凋亡率比較：空白組、BNACR siRNA組、negative control組、pcDNA-BANCR組、pcDNA-NC組的HS成纖維細(xì)胞的凋亡率分別為（8.20±0.85）%、（25.40±3.17）%、（8.63±1.01）%、（3.07±0.06）%及（7.96±0.77）%（F=177.000，P＜0.001）?？瞻捉M、negative control組及pcDNA-NC組的細(xì)胞凋亡率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與空白組相比，BNACR siRNA組凋亡率升高，pcDNA-BANCR組凋亡率降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見圖5。

2.7 各組HS成纖維細(xì)胞cyclinD1、CDK4、Caspase-3、Caspase-9、Notch1蛋白水平比較：空白組、negative control組及pcDNA-NC組的CyclinD1、CDK4、Caspase-3、Caspase-9、Notch1蛋白水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與空白組相比，BNACR siRNA組cyclinD1、CDK4、Notch1蛋白水平降低，Caspase-3、Caspase-9蛋白水平升高，pcDNA-BANCR組cyclinD1、CDK4、Notch1蛋白水平升高，Caspase-3、Caspase-9蛋白水平降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2、圖6。

3" 討論

BANCR是其中一個備受關(guān)注的lncRNA，本研究旨在探討B(tài)ANCR在人增生性瘢痕組織中的表達(dá)情況，并研究其對HS成纖維細(xì)胞活性、凋亡及相關(guān)信號通路的影響，為相關(guān)研究提供有利依據(jù)。本文研究結(jié)果表明：通過HE染色和Masson染色觀察，發(fā)現(xiàn)HS組織中存在明顯的膠原增生和排列紊亂，以及炎癥細(xì)胞浸潤，與正常皮膚組織形態(tài)相比呈現(xiàn)出明顯的差異。此外，測定了正常組織和HS組織中BANCR的相對表達(dá)量。結(jié)果顯示，HS組織中BANCR的表達(dá)顯著高于正常組織，這表明BANCR在HS形成中可能扮演重要角色。BANCR以趨化因子配體11（CXCL11）基因作為調(diào)控靶點，BANCR過表達(dá)可通過調(diào)控CXCL11進(jìn)而加快腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移[7]。而在瘢痕組織中CXCL11呈現(xiàn)高表達(dá)，可以加快瘢痕組織血管生成，進(jìn)一步加快疾病發(fā)生發(fā)展[8]。本文認(rèn)為在HS產(chǎn)生過程中BANCR呈現(xiàn)過表達(dá)并可上調(diào)CXCL11活性加快炎癥反應(yīng)及瘢痕形成。本文研究結(jié)果顯示：對HS成纖維細(xì)胞中敲低BANCR可抑制細(xì)胞增殖，加快凋亡，而過表達(dá)BANCR則可逆轉(zhuǎn)這一現(xiàn)象，這說明在HS疾病過程中BANCR可以調(diào)控細(xì)胞活性參與疾病產(chǎn)生。在創(chuàng)傷或手術(shù)后，成纖維細(xì)胞被活化增殖和膠原蛋白的合成過程失去平衡，導(dǎo)致瘢痕組織的過度增生和擴展，形成HS[9-10]。因此，加快凋亡為HS的治療提供了新的思路。有研究表明，在胃癌細(xì)胞中沉默BANCR可降低細(xì)胞增殖及侵襲能力，研究機制與核因子（NF）-κB1表達(dá)受到抑制相關(guān)[11]。而NF-κB在HS成纖維細(xì)胞中表達(dá)升高，調(diào)控miR-21后可抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)凋亡[12]。細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶/絲裂原活化蛋白激酶（ERK/MAPK）可促進(jìn)HS成纖維細(xì)胞增殖，機制在于其被激活后可迅速轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核，加強應(yīng)答而加快細(xì)胞生長[13]。而在黑素瘤中BANCR可通過激活ERK/MAPK而加快細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移[14]。本文認(rèn)為在HS成纖維細(xì)胞中BANCR可調(diào)節(jié)相關(guān)信號通路而加快成纖維細(xì)胞活性，而敲除后則可改變這一現(xiàn)象，加快凋亡。

CyclinD1是確保細(xì)胞分化的關(guān)鍵周期蛋白，可與CDK4結(jié)合后形成復(fù)合體，并進(jìn)一步激活CDK4下游成視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白（Retinoblastoma protein，pRb）蛋白磷酸化，加強與轉(zhuǎn)錄因子（Recombinant E2F transcription factor，E2F）等轉(zhuǎn)路因子活性，啟動E2F下游信號細(xì)胞周期調(diào)控失衡，導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖[15]。Notch信號在創(chuàng)面愈合中具有重要作用，且發(fā)現(xiàn)在HS組織中高表達(dá)，并采用抑制劑后可下調(diào)角質(zhì)形成細(xì)胞中纖維化因子的產(chǎn)生，減少向肌層纖維細(xì)胞分化，減輕了瘢痕[16]。細(xì)胞增殖及凋亡是維持內(nèi)源性穩(wěn)定的關(guān)鍵，Caspase級聯(lián)反應(yīng)是細(xì)胞凋亡的重要因子，可通過激活Caspase-3、Caspase-9而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[17-18]。有研究表明，在HS成纖維細(xì)胞中通過抑制Notch1可降低CyclinD1、CDK4表達(dá)進(jìn)而遏制細(xì)胞分化，同時Caspase-3、Caspase-9表達(dá)明顯升高，認(rèn)為Notch1可通過降低線粒體膜電位促進(jìn)Caspase凋亡反應(yīng)發(fā)生[19]。本文研究結(jié)果顯示：敲低BNACR后HS成纖維細(xì)胞中CyclinD1、CDK4、Notch1蛋白水平降低，Caspase-3、Caspase-9蛋白水平升高，而pcDNA-BANCR組的這些蛋白水平則呈相反的趨勢，認(rèn)為調(diào)控BNACR表達(dá)對上述因子活性產(chǎn)生影響進(jìn)一步控制HS成纖維細(xì)胞活性。有研究表明，BANCR參與包括黑素瘤的發(fā)生和發(fā)展，在黑素瘤組織和細(xì)胞系中的表達(dá)較高，敲低BANCR抑制黑素瘤細(xì)胞增殖和侵襲，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并發(fā)現(xiàn)miR-204是BANCR的直接靶點，而Notch2是miR-204的直接靶點，BANCR可能通過抑制miR-204促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞生長，從而激活Notch2通路，增加致瘤性[20]。因此，本文認(rèn)為BANCR可通過調(diào)控Notch1進(jìn)而抑制CyclinD1、CDK4表達(dá)激活Caspase-3、Caspase-9表達(dá)而促進(jìn)HS成纖維細(xì)胞凋亡。

綜上所述，增生性瘢痕組織中BANCR表達(dá)升高，在人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中敲低BANCR可抑制細(xì)胞增殖，加快凋亡，研究機制可能與調(diào)控Notch1促進(jìn)Caspase-3、Caspase-9及抑制CyclinD1、CDK4表達(dá)相關(guān)。

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[收稿日期]2024-01-11

本文引用格式：孫偉晶，韓德志，李世杰，等.BANCR在增生性瘢痕中的表達(dá)及其作用機制[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2025，34（6）：1-6.