難治性肺炎支原體肺炎患兒外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9表達水平及臨床意義

摘要：目的 探討半乳糖凝集素-3（Galectin-3）、白細(xì)胞介素（IL）-1β、IL-9在難治性肺炎支原體肺炎（RMPP）患兒外周血中的表達情況及臨床意義。方法 選取確診為RMPP的132例住院患兒為RMPP組，另取同期128例普通肺炎支原體肺炎（GMPP）患兒為GMPP組。收集患兒C反應(yīng)蛋白（CRP）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、降鈣素原（PCT）等臨床資料。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測入組時Galectin-3、IL-1β、IL-9 表達水平；采用Pearson 或Spearman法分析RMPP患兒外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平與臨床因素的相關(guān)性；多因素Logistic回歸分析GMPP進展為RMPP的危險因素；受試者工作特征（ROC）曲線分析外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平對RMPP的預(yù)測價值。結(jié)果 RMPP組熱程、CRP、TNF-α、PCT、Galectin-3、IL-1β、IL-9、肺外并發(fā)癥比例高于GMPP組（P＜0.01）。相關(guān)性分析結(jié)果顯示Galectin-3、IL-1β、IL-9 水平與熱程、肺外并發(fā)癥、CRP、TNF-α、PCT 均呈正相關(guān)（P＜0.01）。Logistic回歸分析結(jié)果顯示，Galectin-3、IL-1β、IL-9升高是GMPP進展為RMPP的獨立危險因素（P＜0.05）。外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9及三者聯(lián)合預(yù)測GMPP進展為RMPP的曲線下面積（AUC）分別為0.852、0.813、0.812和0.949，聯(lián)合預(yù)測效能最高（P＜0.01）。結(jié)論 RMPP患兒外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平均異常升高，三者聯(lián)合檢測可作為評估GMPP進展為RMPP的重要指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：肺炎，支原體；半乳糖凝集素3；白細(xì)胞介素1β；白細(xì)胞介素9

中圖分類號：R725 文獻標(biāo)志碼：A DOI：10.11958/20250076

肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniaepneumonia，MPP）是一種以肺間質(zhì)性疾病為特征的非典型肺炎，主要通過呼吸道局部感染損害其他器官［1］。受當(dāng)前環(huán)境變化等因素影響，MPP的發(fā)病率不斷上升，且隨著大環(huán)內(nèi)酯類藥物在兒童MPP中的廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致支原體耐藥，部分兒童在治療1周后仍無法得到有效治療，進展為難治性MPP（refractoryMPP，RMPP）［2-3］。因此，在臨床工作中需要找到能快速準(zhǔn)確判定RMPP 和普通肺炎支原體肺炎（general MPP，GMPP）的預(yù)測因子，為MPP的臨床診治提供參考依據(jù)。半乳糖凝集素-3（Galectin-3）對免疫反應(yīng)具有多效性作用，近期其作為肺損傷的潛在標(biāo)志物和新型冠狀病毒感染的可能治療靶點引起了眾多學(xué)者關(guān)注［4］。機體遭受病原體感染后，其體內(nèi)炎癥介質(zhì)被激活，白細(xì)胞介素（IL）-1β、IL-9等促炎細(xì)胞因子持續(xù)表達和釋放，使機體炎癥進一步加重［5-6］。本研究對RMPP 及GMPP 患兒外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平進行測定，探討不同患兒上述指標(biāo)的表達差異，及各指標(biāo)對預(yù)測RMPP的價值，以期為RMPP的早期預(yù)防和治療提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2023年9月—2024年2月本院確診為RMPP的住院患兒132例作為RMPP組（臨床肺部感染評分≥6分的重癥患兒31例，臨床肺部感染評分＜6分的輕癥患兒101例），其中男76例，女56例，平均年齡（7.40±2.42）歲。另選取同期入院的GMPP患兒128例作為GMPP組，其中男72例，女56 例，平均年齡（7.25±2.30）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《諸福棠實用兒科學(xué)》［7］第7 版中MPP 的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中RMPP患兒為經(jīng)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素正規(guī)治療超過7 d后仍持續(xù)發(fā)熱，并伴隨MPP臨床特征。（2）患兒資料完整，均為漢族。（3）無反復(fù)呼吸道感染。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）先天性結(jié)締組織病、代謝病、心臟病或繼發(fā)性免疫缺陷癥者。（2）神經(jīng)系統(tǒng)急慢性疾病，嚴(yán)重臟器缺陷疾病者。（3）肺、支氣管、氣管發(fā)育不全者。（4）肺結(jié)核、彌漫性肺間質(zhì)疾病、支氣管擴張等其他肺部疾病者。（5）其他病原體混合感染者。本研究獲得倫理委員會批準(zhǔn)，倫理批號：202307-015，患兒監(jiān)護人均知情同意。

1.2 臨床資料收集 收集患兒入組時性別、年齡、住院時間、喘息、胸腔積液、胸膜增厚、肺部濕啰音情況，熱程、肺外并發(fā)癥（除呼吸系統(tǒng)外有其他系統(tǒng)受損表現(xiàn)）及C 反應(yīng)蛋白（CRP）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、降鈣素原（PCT）水平。

1.3 外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平檢測 收集所有患兒入院檢查空腹8 h以后外周靜脈血5 mL，離心收集上層血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測Galectin-3、IL-1β、IL-9水平。試劑盒分別購自上海信帆生物科技有限公司、南京森貝伽生物科技有限公司、上?？道噬锟萍加邢薰?。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 23.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以x±s表示，組間比較采用t 檢驗；計數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2 檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson 或Spearman 法；采用多因素Logistic 回歸分析GMPP 進展為RMPP的影響因素；受試者工作特征（ROC）曲線評價GMPP進展為RMPP 的預(yù)測價值，曲線下面積（AUC）比較采用Delong檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RMPP組和GMPP組臨床資料比較 GMPP組和RMPP組性別、年齡、住院時間、喘息、胸腔積液、胸膜增厚、肺部濕啰音比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。RMPP組熱程、CRP、TNF-α、PCT、肺外并發(fā)癥比例高于GMPP組（P＜0.01）。見表1。

2.2 RMPP組和GMPP組外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平比較 RMPP組外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平高于GMPP組（P＜0.01）。見表2。

2.3 RMPP患兒外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平與臨床因素的相關(guān)性 Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示RMPP患者外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平與熱程、CRP、TNF-α、PCT 水平呈正相關(guān)（P＜0.01）；Spearman 相關(guān)分析結(jié)果顯示RMPP 患者外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平與肺外并發(fā)癥呈正相關(guān)（P＜0.01），見表3。

2.4 GMPP 進展為RMPP 的影響因素分析 以患兒是否為RMPP 為因變量（是=1，否=0），Galectin-3、IL-1β、IL-9、熱程、肺外并發(fā)癥（無=0，有=1）、CRP、TNF-α、PCT 為自變量，進行Logistic 回歸分析。結(jié)果顯示，Galectin-3、IL-1β、IL-9 升高是GMPP 進展為RMPP 的獨立危險因素（P＜0.05）。見表4。

2.5 外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9 水平對RMPP 的預(yù)測價值 ROC 曲線分析結(jié)果顯示，外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9 單獨預(yù)測GMPP進展為RMPP 的AUC 均小于聯(lián)合預(yù)測（Z 分別為4.969、5.672、5.874，均P ＜ 0.01） ，見圖1、表5。

3 討論

盡管MPP是一種良性、自限性疾病，但一些患有MPP的兒童可能會病情惡化，且MPP患兒早期肺部表現(xiàn)特異性較差，難以與其他病原體引起的肺損傷區(qū)分，易發(fā)展為RMPP［8］。RMPP單用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療1周后患者的神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、腎臟、胃腸系統(tǒng)、皮膚和血液系統(tǒng)未見明顯改善，甚至有加重或有并發(fā)癥發(fā)生［9］。RMPP可導(dǎo)致患兒出現(xiàn)多器官功能衰竭，嚴(yán)重者可威脅生命［10］。因此，如何明確MPP的早期診斷并準(zhǔn)確評估其嚴(yán)重程度是當(dāng)前兒科學(xué)研究的重點。

既往研究顯示，CRP、PCT是感染和炎癥的高度敏感指標(biāo)，且MPP患兒CRP、PCT水平顯著升高［11］。盡管不同患兒的上述指標(biāo)存在差異，但臨床仍需結(jié)合其他細(xì)胞因子及臨床特征綜合考慮。本研究中Galectin-3、IL-1β、IL-9與上述指標(biāo)均存在相關(guān)性，提示本研究指標(biāo)在MPP中可能同樣發(fā)揮重要作用。Galectin-3屬于半乳糖凝集素家族中的嵌合體型蛋白，其作為一種促炎細(xì)胞因子，參與各種炎癥細(xì)胞表達，并影響細(xì)胞激活、轉(zhuǎn)運和炎性因子釋放［12］。Galectin-3在成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡巨噬細(xì)胞中高度表達，可調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞生命周期、血管生成和肺損傷后的修復(fù)反應(yīng)［13］。劉立宏等［14］研究發(fā)現(xiàn)，Galectin-3參與兒童MPP的發(fā)病機制。趙茜葉等［15］研究顯示，RMPP患兒支氣管肺泡灌洗液（BALF）中Galectin-3含量與中性粒細(xì)胞百分比呈正相關(guān)。在因肺炎支原體感染導(dǎo)致的RMPP中，Galectin-3可促進中性粒細(xì)胞募集至肺組織，并轉(zhuǎn)移至肺泡腔內(nèi)。本研究中RMPP患兒外周血Galectin-3的含量較高，且是GMPP進展為RMPP的獨立危險因素。分析認(rèn)為MPP患兒體內(nèi)過度的炎癥反應(yīng)會造成體內(nèi)炎性因子水平迅速增加，且患兒機體感染后會激活體內(nèi)的免疫系統(tǒng)，使免疫系統(tǒng)失衡，觸發(fā)多種宿主細(xì)胞合成和釋放Galectin-3，進一步誘導(dǎo)體內(nèi)免疫功能障礙和炎癥級聯(lián)反應(yīng)。而炎癥反應(yīng)的輕重與患兒病情的嚴(yán)重程度直接相關(guān)，因此，相比GMPP患兒，RMPP患兒外周血中釋放的Galectin-3更多；而Galectin-3水平升高可能通過募集免疫炎癥相關(guān)細(xì)胞至肺組織，進而促進RMPP進展。

IL-1β是IL-1細(xì)胞因子家族中研究最廣泛的細(xì)胞因子，作為一種關(guān)鍵的先天細(xì)胞因子，IL-1β對于免疫激活和促進炎癥過程至關(guān)重要［16］。朱麗臻等［17］研究發(fā)現(xiàn)，MPP患兒的IL-1β水平隨著疾病進展而表達升高。Del Valle等［18］研究表明，IL-1β等炎性因子可以預(yù)測新型冠狀病毒感染的嚴(yán)重程度和生存率。IL-9由外周血輔助性T細(xì)胞9（Th9）分泌產(chǎn)生，可參與免疫應(yīng)答，在多種感染性疾病、免疫性疾病中介導(dǎo)免疫反應(yīng)，進而影響疾病進展［19］。Xu等［20］研究發(fā)現(xiàn)，IL-9缺失可通過促進M2型巨噬細(xì)胞極化和巨噬細(xì)胞的吞噬，進而保護耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染。Jehn等［21］研究顯示，間質(zhì)性肺疾病患者BALF 淋巴細(xì)胞中IL-9 高表達。本研究結(jié)果中，IL-1β、IL-9均為GMPP進展為RMPP的影響因素。據(jù)此推測在MPP的疾病進展過程中，其他外源性病原體的感染可導(dǎo)致患兒體內(nèi)炎癥介質(zhì)被激活并大量表達，而過度表達的炎癥介質(zhì)可引發(fā)細(xì)胞凋亡，同時可進一步誘導(dǎo)IL-1β、IL-9等炎性因子合成和分泌，加重患兒機體內(nèi)的炎癥反應(yīng)，使更多炎性因子被活化，肺損傷加重，RMPP的發(fā)生風(fēng)險增加。ROC曲線結(jié)果顯示，Galectin-3、IL-1β、IL-9 聯(lián)合預(yù)測GMPP進展為RMPP的價值相較單指標(biāo)預(yù)測效能進一步提升。本研究的局限性在于：作為單中心研究，入組的患兒較少，且患兒病情的嚴(yán)重程度分布不均勻，對結(jié)果可能產(chǎn)生一定影響；采集用于分析的血液樣本并未控制在一天中的同一時間點。今后將針對上述不足加以完善。

綜上所述，RMPP 患兒外周血Galectin-3、IL-1β、IL-9水平較GMPP高，各指標(biāo)異常升高可能促進了RMPP的發(fā)生。Galectin-3、IL-1β、IL-9聯(lián)合檢測可輔助臨床預(yù)測GMPP進展為RMPP的發(fā)生風(fēng)險。

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（2025-01-08收稿 2025-01-24修回）

（本文編輯 李志蕓）