不同存放環(huán)境中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面微生物分析

摘 要：動(dòng)物剝制標(biāo)本數(shù)量迅速提升，但存放環(huán)境對(duì)其表面微生物影響的研究較少。文章應(yīng)用高通量測(cè)序技術(shù)，對(duì)存放于不同環(huán)境的動(dòng)物剝制標(biāo)本表面微生物進(jìn)行檢測(cè)分析，為動(dòng)物剝制標(biāo)本的維護(hù)和預(yù)防性消殺提供一定的理論依據(jù)，以期達(dá)到更好的防護(hù)效果。

關(guān)鍵詞：動(dòng)物剝制標(biāo)本；存放環(huán)境；高通量測(cè)序；真菌；細(xì)菌

DOI：10.20005/j.cnki.issn.1674-8697.2025.06.006

動(dòng)物剝制標(biāo)本是生物學(xué)研究和自然科學(xué)普及的重要材料，是自然類(lèi)博物館的主要藏品之一。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和公眾文化知識(shí)需求的迅速增長(zhǎng)，公眾對(duì)自然科學(xué)、生態(tài)系統(tǒng)方面的知識(shí)需求越來(lái)越大，自然類(lèi)博物館建設(shè)工作也取得了迅猛發(fā)展。動(dòng)物剝制標(biāo)本因造型逼真、生動(dòng)活潑贏(yíng)得了觀(guān)眾的喜愛(ài)，具有極高的收藏、研究、展覽和科普教育價(jià)值，成為自然類(lèi)博物館的優(yōu)先收藏對(duì)象①。受保存條件和陳展環(huán)境影響，動(dòng)物剝制標(biāo)本表面附著了很多塵埃甚至雜物，特別是蟲(chóng)卵和真菌、細(xì)菌等微生物，它們短暫或永久地殘留在標(biāo)本上，對(duì)標(biāo)本本身、觀(guān)眾和工作人員都有一定的安全隱患②。動(dòng)物剝制標(biāo)本表面害蟲(chóng)、熏殺劑殘留等相關(guān)研究已有報(bào)道，但對(duì)標(biāo)本表面微生物的相關(guān)研究較少。因此，本文以華南農(nóng)業(yè)博物館館藏動(dòng)物剝制標(biāo)本為研究對(duì)象，分析庫(kù)房、展柜和開(kāi)放性微縮景觀(guān)內(nèi)標(biāo)本表面真菌和細(xì)菌的種類(lèi)及多樣性，為動(dòng)物剝制標(biāo)本和陳展環(huán)境預(yù)防性保護(hù)提供參考。

1 動(dòng)物剝制標(biāo)本表面微生物樣品采集及測(cè)序

華南農(nóng)業(yè)博物館主建筑于1935年建成，為廣州市文物保護(hù)單位。雖全館采用恒溫恒濕系統(tǒng)，但因房屋本身結(jié)構(gòu)問(wèn)題，偶現(xiàn)溫濕度不穩(wěn)定情形。文中所使用剝制標(biāo)本皆由同一標(biāo)本公司于2016年左右制作、交付，并于2019年7月統(tǒng)一采用溴甲烷熏蒸消殺。2019年10月，部分標(biāo)本展陳于展柜和開(kāi)放性微縮景觀(guān)內(nèi)，其余標(biāo)本存放于庫(kù)房，存放環(huán)境如圖1所示。庫(kù)房溫度設(shè)置為20 ℃，展廳溫度設(shè)置為20～26 ℃，相對(duì)濕度均設(shè)置為50%～60%。本文所使用動(dòng)物剝制標(biāo)本編號(hào)、類(lèi)別和存放環(huán)境如表1所示。

2023年7月，采用無(wú)菌植絨棉簽對(duì)標(biāo)本全表面進(jìn)行輕輕梳理，擦涂標(biāo)本表面，后將棉簽頭存放于無(wú)菌離心管中，液氮速凍后-80 ℃保存。采用轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（internal transcribed spacer，ITS）序列全長(zhǎng)檢測(cè)樣品中真菌的多樣性，引物序列③為“F：CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA；R：TCCTCCGCTTATTGATATGC”；采用核糖體16S V3+V4區(qū)域基因序列檢測(cè)樣品中細(xì)菌的多樣性，引物序列為“338F：ACTCCTACGGGAGGCAGCA；806R：GGACTACHVGGGTWTTAAT”，高通量測(cè)序由百邁克生物科技有限公司完成。

2 結(jié)果和分析

2.1 真菌ITS全長(zhǎng)分析

真菌中非編碼區(qū)ITS序列具有較高的豐富度和分辨率，且相對(duì)變化較大，種間差異明顯，能夠反映出種屬間甚至菌株間的差異，目前已被廣泛應(yīng)用于真菌多樣性及系統(tǒng)發(fā)育分析④。樣品測(cè)序并通過(guò)Barcode識(shí)別后，共獲得113241條序列，每個(gè)樣品至少產(chǎn)生11861條，平均數(shù)值為12582條。序列過(guò)濾后在97.0%的相似度水平下進(jìn)行聚類(lèi)、獲得OTUs（即分類(lèi)操作單元，每個(gè)OTU對(duì)應(yīng)于一種代表序列），進(jìn)行多樣性分類(lèi)學(xué)分析、多樣性分析和功能預(yù)測(cè)分析。利用維恩圖展示每組樣品之間共有和特有OTUs的數(shù)目，直觀(guān)地表現(xiàn)樣品間OTUs的重合情況，并結(jié)合OTUs所代表的物種，找出不同環(huán)境中的共有和特有真菌。從維恩圖（圖2左）可以看出，庫(kù)房中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌的OTU數(shù)目為224個(gè)，展柜中標(biāo)本表面真菌的OTU數(shù)目為457個(gè)，開(kāi)放性微縮景觀(guān)中標(biāo)本表面真菌的OTU數(shù)目為505個(gè)。庫(kù)房中標(biāo)本表面真菌的種類(lèi)明顯少于展柜和開(kāi)放性微縮景觀(guān)，且開(kāi)放性微縮景觀(guān)中的數(shù)量最多。相對(duì)豐度較高優(yōu)勢(shì)真菌門(mén)類(lèi)主要有子囊菌門(mén)（Ascomycota）、擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota）和羅茲菌門(mén)（Rozellomycota），其相對(duì)豐度占比分別為57.86%～67.38%、10.03%～21.35%、4.06%～23.80%。Shannon多樣性指數(shù)（圖2右）也顯示，庫(kù)房中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌的多樣性最低，開(kāi)放性微縮景觀(guān)中標(biāo)本表面真菌的多樣性最高，二者差異顯著（p=0.019）。

從不同存放環(huán)境中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌差異物種示意圖（圖3）可以看出，相對(duì)豐度較高且不同環(huán)境中差異顯著的動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌物種主要有Mycothermus thermophilus（一種嗜熱桿菌）、Melanocarpus albomyces（一種嗜熱真菌）、Aspergillus heterocaryoticus（一種曲霉屬真菌）、Pichia kluyveri 克魯維畢赤酵母、Ophiocordyceps sinensis 蟲(chóng)草真菌、Coprinellus sclerocystidiosus（一種假鬼傘屬真菌）、Olpidium brassicae（蕓苔油壺菌）、Vishniacozyma carnescens 卡恩斯維希尼克氏酵母、Acrophialophora levis 光滑端梗霉菌、Stolonocarpus gigasporus、Diutina catenulata、Aspergillus sydowii 聚多曲霉菌、Cladosporium endophytica（一種枝孢屬真菌）、Aspergillus costaricensis（一種曲霉屬真菌）、Scopulariopsis alboflavescens（一種帚霉屬真菌）、Fusicolla ossicola、Lophiotrema rubi、Talaromyces sayulitensis（一種籃狀菌屬真菌）、Stachybotrys chlorohalonata（一種葡萄穗霉屬真菌）。從圖3還可以直觀(guān)地看出，主要差異真菌物種中，庫(kù)房中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌的相對(duì)豐度遠(yuǎn)低于展柜和開(kāi)放性微縮景觀(guān)內(nèi)標(biāo)本。19個(gè)可鑒定到種的優(yōu)勢(shì)真菌中，除Vishniacozyma carnescens、Aspergillus sydowii、Fusicolla ossicola、Talaromyces sayulitensis四種真菌在展柜內(nèi)標(biāo)本表面的相對(duì)豐度最高外，其余真菌均為在開(kāi)放性微縮景觀(guān)中標(biāo)本表面相對(duì)豐度最高。

通過(guò)FUNGuild（Fungi Functional Guild）對(duì)標(biāo)本表面真菌按照營(yíng)養(yǎng)方式進(jìn)行分類(lèi)和表型預(yù)測(cè)，將可信度為“Highly”和“Probable”的物種挑選出來(lái)進(jìn)行可視化，結(jié)果如圖4所示，可直觀(guān)看出，不同存放環(huán)境中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型差異較大。開(kāi)放性微縮景觀(guān)內(nèi)標(biāo)本表面真菌營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型檢測(cè)量最多，展柜內(nèi)次之，庫(kù)房最少。開(kāi)放性微縮景觀(guān)內(nèi)動(dòng)物剝制標(biāo)本表面豐度最高的真菌營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型（相對(duì)豐度＞3%）主要為動(dòng)物內(nèi)生真菌、植物病原真菌、糞便腐生真菌、動(dòng)物病原真菌、動(dòng)物寄生真菌、木腐生真菌；展柜中標(biāo)本表面真菌主要營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型為植物病原真菌、動(dòng)物病原真菌、動(dòng)物內(nèi)生真菌、木腐生真菌、糞便腐生真菌、未鑒定腐生真菌、外生菌根真菌；庫(kù)房中標(biāo)本表面真菌主要營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型為糞便腐生真菌、未鑒定腐生真菌、植物病原真菌、寄生真菌。庫(kù)房?jī)?nèi)動(dòng)物剝制標(biāo)本表面未檢出動(dòng)物寄生真菌、木腐生真菌、內(nèi)生菌根真菌、土壤腐生真菌和葉腐生真菌，且糞便腐生真菌、植物病原真菌、植物腐生真菌的檢出種類(lèi)比另外兩種環(huán)境中少。展柜內(nèi)標(biāo)本表面獨(dú)有某些內(nèi)生菌根真菌、糞便腐生真菌。開(kāi)放性微縮景觀(guān)中動(dòng)物標(biāo)本表面獨(dú)有某些內(nèi)生菌根真菌、植物病原真菌，但也缺少一些動(dòng)物病原真菌、杜鵑花類(lèi)菌根、植物腐生真菌。

2.2 細(xì)菌16S rRNA V3+V4區(qū)域分析

采用Illumina NovaSeq 6000對(duì)細(xì)菌16S rRNA V3+V4區(qū)域多樣性進(jìn)行高通量測(cè)序，測(cè)序結(jié)束后去除barcode、兩端引物以及部分低質(zhì)量序列，去噪，雙端序列拼接并去除嵌合體序列，在97.0%的相似度水平下進(jìn)行聚類(lèi)、獲得OTUs，并進(jìn)行多樣性分析、差異分析及功能預(yù)測(cè)分析等。測(cè)序數(shù)據(jù)顯示，各樣本Raw Tags數(shù)據(jù)量位于5萬(wàn)條至8萬(wàn)條之間，平均數(shù)據(jù)量約為7.6萬(wàn)條，且各樣本稀釋曲線(xiàn)均趨于平緩，說(shuō)明數(shù)據(jù)量充足。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，共檢出47個(gè)細(xì)菌門(mén)，其中主要優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門(mén)為Proteobacteria 變形菌門(mén)、Firmicutes 厚壁菌門(mén)、Bacteroidota 擬桿菌門(mén)、Acidobacteriota 酸桿菌門(mén)和Actinobacteriota 放線(xiàn)菌門(mén)，這5個(gè)細(xì)菌門(mén)的相對(duì)豐度總和占78%以上。此外，Chloroflexi 綠彎菌門(mén)、Patescibacteria 互養(yǎng)菌門(mén)、Gemmatimonadota 芽單胞菌門(mén)和Cyanobacteria 藍(lán)菌門(mén)相對(duì)豐度亦較高，占比均超1%。

不同環(huán)境中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面細(xì)菌門(mén)水平相對(duì)豐度及分布如圖5所示，部分菌門(mén)差異較明顯。變形菌門(mén)（Proteobacteria）的相對(duì)豐度均超25%；庫(kù)房環(huán)境最低，為25.03%；開(kāi)放性微縮景觀(guān)最高，為31.47%。厚壁菌門(mén)（Firmicutes）的相對(duì)豐度均超過(guò)20%，庫(kù)房環(huán)境最高，為31.51%，遠(yuǎn)高于展柜（21.19%）和開(kāi)放性微縮景觀(guān)（22.09%）。擬桿菌門(mén)（Bacteroidota）的相對(duì)豐度庫(kù)房環(huán)境最高，為15.17%。酸桿菌門(mén)（Acidobacteriota）、放線(xiàn)菌門(mén)（Actinobacteriota）的相對(duì)豐度展柜環(huán)境最高，分別為14.73%和9.83%。

使用QIIME2軟件，對(duì)樣品Alpha多樣性指數(shù)進(jìn)行評(píng)估，計(jì)算菌群豐富度指數(shù)、多樣性指數(shù)和測(cè)序深度指數(shù)，具體結(jié)果數(shù)據(jù)如表2所示。菌群豐富度指數(shù)ACE數(shù)據(jù)顯示，展柜中標(biāo)本表面細(xì)菌的種類(lèi)最多，開(kāi)放性微縮景觀(guān)中標(biāo)本表面細(xì)菌的種類(lèi)最少，但差異未達(dá)到顯著水平。Shannon多樣性指數(shù)顯示，開(kāi)放性微縮景觀(guān)中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面細(xì)菌菌群的多樣性最高，展柜中次之，庫(kù)房中的多樣性最低。本分析中Coverage值均高0.99以上，說(shuō)明本次分析結(jié)果有效反映了測(cè)序樣本中微生物的情況。

通過(guò)BugBase方法對(duì)不同環(huán)境中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面優(yōu)勢(shì)細(xì)菌功能及生物可解釋表型進(jìn)行分析，可將細(xì)菌分為Aerobic 好氧型、Anaerobic 厭氧型、Facultatively Anaerobic 兼性厭氧型、Gram Negative 革蘭氏陰性、Gram Positive 革蘭氏陽(yáng)性、Potentially Pathogenic 潛在致病性、Contains Mobile Elements 移動(dòng)元件、Forms Biofilms 生物膜形成、Stress Tolerant 脅迫耐受等九個(gè)類(lèi)型。圖6顯示了細(xì)菌主要類(lèi)型及表型，可以看出庫(kù)房中細(xì)菌以厭氧型、革蘭氏陽(yáng)性菌相對(duì)含量最高，展柜中細(xì)菌以好氧型、革蘭氏陰性菌為主，開(kāi)放性微縮景觀(guān)中潛在性致病菌的相對(duì)含量最高。開(kāi)放性微縮景觀(guān)中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面潛在性致病細(xì)菌主要為Achromobacter 無(wú)色桿菌屬、Dok59、Thermomonas 嗜熱單胞菌屬和Xanthomonadaceae" 黃單胞菌科、Sinobacteraceae" 華桿菌科、Enterobacteriaceae 腸桿菌科。展柜中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面潛在性致病菌的屬主要為Achromobacter 無(wú)色桿菌屬、Dok59、Thermomonas 嗜熱單胞菌屬和Sinobacteraceae 華桿菌科、Methylocystaceae 甲基孢囊菌科、Xanthomonadaceae 黃單胞菌科。庫(kù)房中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面潛在性致病菌主要為Dok59、Thermomonas 嗜熱單胞菌屬和Enterobacteriaceae 腸桿菌科、Xanthomonadaceae 黃單胞菌科、Sinobacteraceae 華桿菌科。

3 討論

3.1 動(dòng)物剝制標(biāo)本表面有害物質(zhì)的檢測(cè)及預(yù)防

動(dòng)物標(biāo)本在動(dòng)物分類(lèi)、動(dòng)物區(qū)系、生物多樣性、保護(hù)遺傳學(xué)等教學(xué)、科研和科普教育方面具有重要的價(jià)值，特別是精美完整的動(dòng)物剝制標(biāo)本，兼具科學(xué)、藝術(shù)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。一些特殊的珍稀動(dòng)物剝制標(biāo)本，因極度稀缺而成為寶貴的自然遺產(chǎn)⑤?，F(xiàn)今動(dòng)物剝制標(biāo)本的保有量和展出量均大幅提升，部分自然類(lèi)博物館甚至擁有上萬(wàn)件動(dòng)物剝制標(biāo)本。但受制作時(shí)間、制作方式、存放環(huán)境等因素影響，部分動(dòng)物剝制標(biāo)本的保存狀態(tài)堪憂(yōu)，影響了標(biāo)本使用，可能還會(huì)對(duì)觀(guān)眾造成一定影響。因此，很多學(xué)者對(duì)動(dòng)物剝制標(biāo)本影響較大的溫濕度、光源、重金屬殘留、病蟲(chóng)害等進(jìn)行研究。如丁寧系統(tǒng)分析了館藏動(dòng)物剝制標(biāo)本病蟲(chóng)害、殺蟲(chóng)劑殘留元素等方面情況，提出對(duì)博物館自然標(biāo)本預(yù)防性保護(hù)的原則及措施的建議⑥。溫彬等人對(duì)館藏動(dòng)物剝制標(biāo)本脫毛、開(kāi)裂、蟲(chóng)蛀等修復(fù)工作進(jìn)行研究⑦。何亮綜述了館藏動(dòng)植物標(biāo)本蟲(chóng)害種類(lèi)及蟲(chóng)害滅殺方法⑧。許永賢探析了動(dòng)物標(biāo)本制作過(guò)程中的有害物質(zhì)及預(yù)防措施⑨。動(dòng)物剝制標(biāo)本的損壞是多種因素相互作用的結(jié)果。目前很多動(dòng)物剝制標(biāo)本長(zhǎng)期暴露在外，溫濕度和光照對(duì)其影響很大，灰塵也會(huì)使標(biāo)本變得灰暗陳舊，影響觀(guān)眾的參觀(guān)體驗(yàn)，且有些灰塵本身就呈酸性或堿性，與空氣中的水汽結(jié)合易損害標(biāo)本，甚至灰塵中還帶有大量的微生物和蟲(chóng)卵，為標(biāo)本和觀(guān)眾健康帶來(lái)潛在的危害⑩。

3.2 文博方面擴(kuò)增子高通量測(cè)序的應(yīng)用

擴(kuò)增子高通量測(cè)序是一種高靶向性分析特定基因組區(qū)域中基因變異的方法，其利用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因組的特定區(qū)域，進(jìn)行高通量測(cè)序，分析序列中的遺傳變異等信息。核糖體基因主要包括16S rRNA、18S rRNA和轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)ITS等，廣泛存在于所有細(xì)胞生物體中，且具有一系列由非常保守到高變的區(qū)域，可以反映不同樣品在細(xì)菌、真菌、古菌等組成的微生物群落之間的差異，對(duì)研究不同環(huán)境中微生物群落組成及動(dòng)態(tài)變化有重要的指導(dǎo)作用，因此常被用作多樣性調(diào)查的標(biāo)記基因k。馮虎元、武發(fā)思團(tuán)隊(duì)等已采用擴(kuò)增子測(cè)序技術(shù)在石質(zhì)文物，尤其是對(duì)露天石窟寺表面微生物多樣性和功能的分析，取得一系列進(jìn)展，為壁畫(huà)、彩塑等文物的生物退化與防治和觀(guān)眾數(shù)量控制提供了科技理論支撐l。王亞麗團(tuán)隊(duì)利用高通量測(cè)序技術(shù)分析古沉船飽水木材樣品的原核微生物群落多樣性，探討飽水木材的原核微生物降解機(jī)制，為出水文物的保護(hù)提供新思路m。部分文物已采用擴(kuò)增子高通量測(cè)序方式對(duì)表面或內(nèi)部微生物進(jìn)行檢測(cè)與分析，但尚未見(jiàn)應(yīng)用于動(dòng)物剝制標(biāo)本的報(bào)道。

3.3 動(dòng)物剝制標(biāo)本表面微生物高通量檢測(cè)

本文選用同一家標(biāo)本制作公司采用相同工藝制作的動(dòng)物剝制標(biāo)本，該批標(biāo)本近乎同時(shí)交付、滅菌后分別存放于庫(kù)房、展柜和開(kāi)放性微縮景觀(guān)環(huán)境中，前期處理相對(duì)一致。對(duì)樣本ITS序列全長(zhǎng)和16S rRNA V3+V4序列進(jìn)行高通量測(cè)序，檢測(cè)分析不同存放環(huán)境中動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌和細(xì)菌分布情況。結(jié)果顯示，不同存放環(huán)境中，標(biāo)本表面真菌和細(xì)菌的多樣性、種類(lèi)、功能皆有較大差異；且與預(yù)想一致，開(kāi)放性微縮景觀(guān)內(nèi)標(biāo)本表面真菌和細(xì)菌的種類(lèi)和多樣性均最高，展柜內(nèi)次之，庫(kù)房中最低。動(dòng)物剝制標(biāo)本表面豐度最高的真菌營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型主要為動(dòng)物內(nèi)生真菌、動(dòng)植物病原真菌、動(dòng)物寄生真菌和糞便、木腐生真菌等，潛在性致病細(xì)菌主要為無(wú)色桿菌屬、Dok59、嗜熱單胞菌屬和黃單胞菌科、華桿菌科、腸桿菌科、甲基孢囊菌科。對(duì)動(dòng)物剝制標(biāo)本進(jìn)行維護(hù)和預(yù)防性消殺時(shí)，可針對(duì)處理主要微生物，以達(dá)到更好的防護(hù)效果。

雖然相關(guān)生物技術(shù)發(fā)展迅速，但微生物的種類(lèi)數(shù)量異常龐大，人們對(duì)其認(rèn)知依然有限，很多尚未能鑒定到種屬，功能更是未知。如需進(jìn)一步分析標(biāo)本表面真菌和細(xì)菌的絕對(duì)含量和確定主要微生物的確切功能，還須檢測(cè)微生物的絕對(duì)豐度，并結(jié)合微生物培養(yǎng)組學(xué)、宏基因組學(xué)、宏蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)等技術(shù)聯(lián)合分析。動(dòng)物剝制標(biāo)本表面真菌和細(xì)菌與其存放環(huán)境息息相關(guān)，要定量或定性分析標(biāo)本表面微生物與博物館觀(guān)眾數(shù)量間的關(guān)聯(lián)，還需監(jiān)測(cè)館內(nèi)空氣微生物的實(shí)時(shí)濃度、空氣懸浮顆粒物的實(shí)時(shí)濃度、采集空氣微生物樣本和觀(guān)眾數(shù)量等。盡管擴(kuò)增子高通量測(cè)序技術(shù)在文博方面的應(yīng)用仍受限制，需不斷創(chuàng)新和發(fā)展，但運(yùn)用新型生物技術(shù)為藏品的預(yù)防性保護(hù)和可持續(xù)管理提供科技支撐必將成為未來(lái)新趨勢(shì)。

注釋

①溫彬，楊敬.館藏動(dòng)物剝制標(biāo)本修復(fù)及預(yù)防性保護(hù)研究：以山西博物院為例[J].博物院，2023（2）：128-136；張波.館藏剝制動(dòng)物標(biāo)本常見(jiàn)有害殘留物及其檢測(cè)技術(shù)概述[J].科學(xué)教育與博物館，2015，1（2）：150-155；鄭永鋒.自然博物館野生動(dòng)物標(biāo)本展陳工作的應(yīng)用性研究[J].文化產(chǎn)業(yè)，2021（20）：128-131；葉楊，張波，張銳，等.館藏剝制動(dòng)物標(biāo)本害蟲(chóng)防治法的研究進(jìn)展[J].文物保護(hù)與考古科學(xué)，2015，27（3）：96-107.

②溫彬，楊敬.館藏動(dòng)物剝制標(biāo)本修復(fù)及預(yù)防性保護(hù)研究：以山西博物院為例[J].博物院，2023（2）：128-136；丁寧.館藏自然標(biāo)本的預(yù)防性保護(hù)：以廣東省博物館為例[J].自然科學(xué)博物館研究，2018，3（2）：74-83.

③④吳悅妮，馮凱，厲舒禎，等.16S/18S/ITS擴(kuò)增子高通量測(cè)序引物的生物信息學(xué)評(píng)估和改進(jìn)[J].微生物學(xué)通報(bào)，2020，47（9）：2897-2912.

⑤張廣.館藏動(dòng)物剝制標(biāo)本的管理及預(yù)防性保護(hù)[J].自然科學(xué)博物館研究，2023，8（1）：56-64.

⑥丁寧.館藏自然標(biāo)本的預(yù)防性保護(hù)：以廣東省博物館為例[J].自然科學(xué)博物館研究，2018，3（2）：74-83；丁寧.館藏動(dòng)物標(biāo)本殺蟲(chóng)劑殘留物元素檢測(cè)分析[J].文物保護(hù)與考古科學(xué)，2021，33（2）：74-83；丁寧.嶺南地區(qū)博物館藏品蟲(chóng)害調(diào)查報(bào)告[J].博物院，2018（2）：94-103.

⑦溫彬，楊敬.館藏動(dòng)物剝制標(biāo)本修復(fù)及預(yù)防性保護(hù)研究：以山西博物院為例[J].博物院，2023（2）：128-136.

⑧何亮.動(dòng)植物標(biāo)本在陳列環(huán)境中的蟲(chóng)害防治研究[J].自然博物，2017（1）：116-123.

⑨許永賢.探析動(dòng)物標(biāo)本制作有害物質(zhì)及預(yù)防[J].中國(guó)畜禽種業(yè)，2017，13（6）：18-19.

⑩袁超.天津國(guó)家海洋博物館館藏剝制動(dòng)物標(biāo)本的養(yǎng)護(hù)管理工作初探[J].自然博物，2021，6（00）：168-173.

k吳悅妮，馮凱，厲舒禎，等.16S/18S/ITS擴(kuò)增子高通量測(cè)序引物的生物信息學(xué)評(píng)估和改進(jìn)[J].微生物學(xué)通報(bào)，2020，47（9）：2897-2912；武發(fā)思，李潔.石質(zhì)文物微生物研究現(xiàn)狀與展望[J].石窟與土遺址保護(hù)研究，2022，1（4）：14-33.

l武發(fā)思，李潔.石質(zhì)文物微生物研究現(xiàn)狀與展望[J].石窟與土遺址保護(hù)研究，2022，1（4）：14-33；武發(fā)思，蘇敏，田恬，等.文化遺產(chǎn)微生物研究方法進(jìn)展[J].微生物學(xué)雜志，2019，39（3）：71-83.

m王亞麗.微生物分子生態(tài)學(xué)技術(shù)在文物保護(hù)中應(yīng)用的進(jìn)展[J].文物保護(hù)與考古科學(xué)，2012，24（3）：108-111；王亞麗.明代古沉船飽水木材的原核微生物多樣性分析[J].生物資源，2021，43（5）：518-525.