腦電圖結(jié)合miR-146a-5p預(yù)測阿爾茨海默病患者認(rèn)知功能障礙研究

[摘要]"目的"探討腦電圖定量參數(shù)結(jié)合血清微小核糖核酸（microRNA，miR）-146a-5p對阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s"disease，AD）患者認(rèn)知功能障礙的預(yù)測價值。方法"選取紹興市第七人民醫(yī)院2022年3月至2024年5月確診的96例AD患者，根據(jù)蒙特利爾認(rèn)知量表（Montreal"cognitive"assessment，MoCA）評分評估患者是否存在認(rèn)知功能障礙，40例存在認(rèn)知功能障礙的患者為發(fā)生組（MoCA評分lt;26分），56例認(rèn)知功能正常的患者為未發(fā)生組（MoCA評分≥26分），比較兩組患者的腦電圖定量參數(shù)、血清miR-146a-5p，采用Logistic回歸分析AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的危險因素，采用受試者操作特征曲線分析腦電圖定量參數(shù)、血清miR-146a-5p對AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的預(yù)測效能。結(jié)果"發(fā)生組患者的δ頻段、θ頻段、血清miR-146a-5p均較未發(fā)生組更低，發(fā)生組患者的β頻段、α頻段均較未發(fā)生組更高（Plt;0.05）。δ頻段、θ頻段、miR-146a-5p、年齡、受教育年限是AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的危險因素（Plt;0.05）。δ頻段、θ頻段、β頻段、α頻段、miR-146a-5p聯(lián)合預(yù)測AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的曲線下面積為0.908，δ頻段、θ頻段、β頻段、α頻段、miR-146a-5p聯(lián)合預(yù)測AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的敏感度較單獨檢測更高（Plt;0.05）。結(jié)論"δ頻段、θ頻段、血清miR-146a-5p降低、β頻段、α頻增高與AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙聯(lián)系密切，聯(lián)合檢測腦電圖定量參數(shù)、血清miR-146a-5p，可提高對認(rèn)知功能障礙的預(yù)測效能。

[關(guān)鍵詞]"腦電圖；微小核糖核酸-146a-5p；阿爾茨海默病；認(rèn)知功能障礙

[中圖分類號]"R749.1""""""[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]"A""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2025.05.007

Electroencephalograph"combined"with"miR-146a-5p"to"predict"cognitive"dysfunction"in"Alzheimer’s"disease"patients

CHEN"Jiaqi，"XIANG"Hongying，"LING"Yingchun

Department"of"Special"Inspection，"Shaoxing"Seventh"People’s"Hospital，"Shaoxing"312000，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"explore"the"predictive"value"of"electroencephalograph（EEG）"quantitative"parameters"combined"with"serum"microRNAs"（miR）-146a-5p"in"cognitive"dysfunction"in"patients"with"Alzheimer’s"disease"（AD）."Methods"A"total"of"96"AD"patients"diagnosed"in"Shaoxing"Seventh"People’s"Hospital"from"March"2022"to"May"2024"were"selected"to"assess"whether"the"patients"had"cognitive"impairment"according"to"the"Montreal"cognitive"scale"（MoCA）"score，"and"40"patients"with"cognitive"impairment"were"set"as"occurrence"group"（MoCA"scorelt;26points）."A"total"of"56"patients"with"normal"cognitive"function"were"set"as"non-developing"group"（MoCA"score≥26points）."Quantitative"electroencephalography"（EEG）"parameters"and"serum"miR-146a-5p"were"compared"between"the"two"groups."The"risk"factors"of"cognitive"dysfunction"in"AD"patients"were"analyzed"by"Logistic"regression，"and"receiver"operating"characteristic"curve"was"used"to"predict"efficacy"of"EEG"quantitative"parameters"and"serum"miR-146a-5p"on"cognitive"dysfunction"in"AD"patients."Results"The"δ"frequency"band，"θ"frequency"band，"and"serum"miR-146a-5p"levels"were"lower"in"occurrence"group"than"those"in"non"occurrence"group，"while"β"frequency"band"and"α"frequency"band"were"higher"in"occurrence"group"than"in"those"non"occurrence"group"（Plt;0.05）.δnbsp;frequency"band，"θ"frequency"band，"miR-146a-5p，"age，"and"years"of"education"were"risk"factors"for"cognitive"dysfunction"in"AD"patients"（Plt;0.05）."The"area"under"the"curve"（AUC）"of"predicting"cognitive"impairment"in"AD"patients"using"the"combination"of"δ"frequency"band，"θ"frequency"band，"β"frequency"band，"α"frequency"band，"and"miR-146a-5p"was"0.908."The"sensitivity"of"predicting"cognitive"impairment"in"AD"patients"using"the"combination"of"delta"frequency"band，"δ"frequency"band，"β"frequency"band，"α"frequency"band，"and"miR-146a-5p"was"higher"than"that"of"individual"detection（Plt;0.05）."Conclusion"The"decrease"in"δ"frequency"band，"θ"frequency"band，"serum"miR-146a-5p，"and"the"increase"in"β"frequency"band"and"α"frequency"are"closely"related"to"the"occurrence"of"cognitive"dysfunction"in"AD"patients."Combined"detection"of"EEG"of"electroencephalogram"and"serum"miR-146a-5p"can"improve"the"predictive"efficiency"of"cognitive"dysfunction.

[Key"words]"Electroencephalogram;"microRNA-146a-5p;"Alzheimer’s"disease;"Cognitive"impairment

阿爾茨海默病（Alzheimer’s"disease，AD）是一種多見于老年人的慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，臨床表現(xiàn)以精神行為異常、日常生活能力降低、記憶力減退、進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙為主[1]。認(rèn)知功能障礙的發(fā)生可降低AD患者的自理能力，現(xiàn)已成為臨床高度關(guān)注的公共衛(wèi)生問題之一[2]。腦電圖是臨床診斷AD的常用方法，通過定量檢測θ、δ、α等波頻，可對認(rèn)知功能障礙程度作出評價[3]。臨床研究表明腦電圖單獨檢測對認(rèn)知功能障礙診斷的敏感度較低，具有一定的局限性[4]。微小核糖核酸（microRNA，miR）是近年來臨床新發(fā)現(xiàn)的一種生物標(biāo)志物，在神經(jīng)細(xì)胞分化、增殖及凋亡等過程中發(fā)揮著重要作用，與學(xué)習(xí)、記憶等聯(lián)系密切[5]。血清miR-146a-5p異常低表達(dá)與神經(jīng)炎癥反應(yīng)聯(lián)系密切，而神經(jīng)炎癥反應(yīng)在一些神經(jīng)退行性疾病中起著重要作用，包括AD[6]。本研究旨在探討腦電圖定量參數(shù)結(jié)合血清miR-146a-5p對AD患者認(rèn)知功能障礙的預(yù)測價值。

1""對象與方法

1.1""研究對象

選取紹興市第七人民醫(yī)院2022年3月至2024年5月確診的96例AD患者，根據(jù)蒙特利爾認(rèn)知量表（Montreal"cognitive"assessment，MoCA）評分評估患者是否存在認(rèn)知功能障礙；40例存在認(rèn)知功能障礙者為發(fā)生組（MoCA評分lt;26分），56例認(rèn)知功能正常者為未發(fā)生組（MoCA評分≥26分）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國阿爾茨海默病癡呆診療指南》[7]"AD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)生組均滿足《2018中國癡呆與認(rèn)知障礙診治指南》[8]對認(rèn)知功能障礙的診斷標(biāo)準(zhǔn)；"""②年齡gt;45周歲，不限性別；③臨床資料齊全、完整；④腎、肝等臟器功能及心電圖未見異常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并腦外傷、腦出血等腦血管系統(tǒng)疾病者；②存在睡眠障礙者；③同期參與其他研究者；④合并全身嚴(yán)重感染性疾病者；⑤合并甲狀腺功能減退等代謝性疾病者；⑥近1個月服用過對認(rèn)知功能有影響的藥物者；⑦合并惡性腫瘤者；⑧合并抑郁癥、精神分裂癥等精神障礙疾病者；⑨存在毒品濫用史。本研究經(jīng)紹興市第七人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)（倫理審批號：2022-003-01）。

1.2nbsp;"檢測方法

1.2.1""腦電圖檢測""采用腦電圖機(jī)（深圳英智科技有限公司）檢查，儀器50μV（5mm）增益，45Hz高通濾波，0.3s時間常數(shù)，16bit精度，200Hz頻率，頭皮電阻在5000Ω以下，在兩側(cè)耳垂處放置電極片，電極片共計有16個。告知患者閉目、平穩(wěn)呼吸。在安靜狀態(tài)下檢測患者5min腦電信號，檢測并記錄δ頻段、θ頻段、β頻段、α頻段。

1.2.2""血清miR-146a-5p檢測""熒光定量"PCR"儀（深圳子科生物科技有限公司）。抽取受檢者5ml空腹靜脈血，離心5min，離心半徑10cm，離心速率1"2000轉(zhuǎn)/min，將上清液分離后保存在–80℃環(huán)境。取血漿樣本200μl，置入新的EP管中，加入裂解液"900μl，振蕩混勻30s，在室溫環(huán)境下放置5min，加入氯仿200μl，振蕩15s，室溫環(huán)境下放置5min，將EP管保存在4℃的環(huán)境下，離心15min，離心速率1"2000轉(zhuǎn)/min，分離上清液至新的EP管中，將2倍乙醇加入混勻，棄去上清液，加入乙醇漂洗液500μl，在室溫環(huán)境下靜置2min，離心30s，離心速率1"2000轉(zhuǎn)/min，棄去上清液。檢測RNA濃度、純度，反轉(zhuǎn)錄RNA為cDNA，以cDNA為模板，采用實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄–聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測miR-146a-5p表達(dá)量，miR-146a-5p引物序列：上游：5’-TGCGCTGAGAACTGAATTCCAT-3’，下游：5’-CCTACATCGCACCGGAGTCTG-3’，內(nèi)參U6引物序列：上游：5’-ACCATGGATGATGATATCGCC-3’，下游：5’-GCCTTGCACATGCCGG-3’。反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性20s、64℃變性30s、72℃退火34s，共循環(huán)45次；每例標(biāo)本均有3個平行反應(yīng)復(fù)孔，將U6作為對照，以2-△△CT法計算miR-146a-5p表達(dá)量。

1.3""觀察指標(biāo)

通過查閱病歷、問診等方式收集患者個人信息，包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、病程、受教育年限、婚姻狀況、飲酒、吸煙、糖尿病、高血壓、冠心病、高脂血癥、AD家族史。比較兩組患者的腦電圖定量參數(shù)、血清miR-146a-5p。

1.4""統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS"26.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（"）表示，組間比較采用t檢驗，不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M（Q1，Q3）]表示，組間比較采用秩和檢驗，計數(shù)資料以例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Logistic回歸分析AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的危險因素，采用受試者操作特征曲線（receiver"operating"characteristic"curve，ROC曲線）分析預(yù)測效能。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2""結(jié)果

2.1""兩組患者的腦電圖定量參數(shù)與miR-146a-5p水平比較

發(fā)生組患者的δ頻段、θ頻段均較未發(fā)生組更低，發(fā)生組患者的β頻段、α頻段均較未發(fā)生組更高。發(fā)生組患者的血清miR-146a-5p水平較未發(fā)生組更低（Plt;0.05），見表1。

2.4""AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的Logistic回歸分析

Logistic回歸分析結(jié)果表明，δ頻段、θ頻段、miR-146a-5p、年齡、受教育年限是AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的危險因素（Plt;0.05），見表2。發(fā)生組患者的年齡、受教育年限與未發(fā)生組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05），見表3。

2.3""腦電圖定量參數(shù)、血清miR-146a-5p對AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的預(yù)測效能

δ頻段最佳臨界值取1.06Hz、θ頻段最佳臨界值取8.13Hz，β頻段最佳臨界值取20.28Hz、α頻段最佳臨界值取21.39Hz，miR-146a-5p最佳臨界值取1.02時，δ頻段、θ頻段、β頻段、α頻段、miR-146a-5p聯(lián)合預(yù)測AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的曲線下面積（area"under"the"curve，AUC）為0.908，95%CI：0.856～0.951。δ頻段、θ頻段、β頻段、α頻段、miR-146a-5p聯(lián)合預(yù)測AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的敏感度較單獨檢測更高（Plt;0.05），見表4。

3""討論

近年來，隨著老年人口增多，AD發(fā)病率顯著增高，現(xiàn)已成為全球高度關(guān)注的公共衛(wèi)生問題之一[9]。老年人群隨著年齡的增大，臟器功能逐漸衰退，各類心腦血管疾病發(fā)病率顯著增高，易出現(xiàn)腦供血不足，血–腦脊液屏障功能減退以及神經(jīng)系統(tǒng)病變，最終誘發(fā)認(rèn)知功能障礙[10-11]。認(rèn)知功能障礙的發(fā)生進(jìn)一步加重AD患者的原發(fā)病，降低其自理能力與生存質(zhì)量。因此，及早對AD患者認(rèn)知功能障礙發(fā)生風(fēng)險做出準(zhǔn)確的預(yù)測與判斷至關(guān)重要。

腦電圖是臨床診斷腦部疾病的重要手段，通過定量檢測δ頻段、θ頻段、β頻段、α頻段，按照人體意識狀態(tài)、年齡、跛行等可對大腦功能作出評價[12]。miRNA具有時效性、區(qū)域性、特異性等特點，在神經(jīng)系統(tǒng)中大量表達(dá)，對高級神經(jīng)功能、腦組織發(fā)育及神經(jīng)元分化發(fā)揮重要作用[13-14]。miR-146a-5p是miRNA家族中重要的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)因子，對神經(jīng)遞質(zhì)及神經(jīng)內(nèi)分泌激素釋放具有調(diào)節(jié)作用，可影響神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育[15-16]。本研究發(fā)生組患者δ頻段、θ頻段、血清miR-146a-5p均較未發(fā)生組更低，發(fā)生組患者的β頻段、α頻段均較未發(fā)生組更高。提示δ頻段、θ頻段、血清miR-146a-5p降低和β頻段、α頻段增高與AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙關(guān)系密切。胡金雅等[17]研究顯示，認(rèn)知功能障礙患者的δ頻段、θ頻段較AD患者更低，與本研究結(jié)果接近。馬玉柱等[18]研究發(fā)現(xiàn)，AD患者的血清miR-146a-5p低表達(dá)與認(rèn)知功能障礙聯(lián)系密切。因此，臨床可將上調(diào)δ頻段、θ頻段、血清miR-146a-5p和下調(diào)β頻段、α頻段作為防治AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的靶點。

本研究δ頻段、θ頻段、miR-146a-5p、年齡、受教育年限是AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的危險因素，提示AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙與以上因素有關(guān)。分析原因可能為老年人隨著年齡的增長，認(rèn)知功能會逐漸減退，腦容量減少，神經(jīng)可塑性降低，腦部認(rèn)知功能區(qū)域神經(jīng)信號傳導(dǎo)受到一定影響，最終增加認(rèn)知功能障礙發(fā)生風(fēng)險[19-20]。受教育年限越短，神經(jīng)元數(shù)量越少，功能越差，大量的神經(jīng)元喪失，可影響患者認(rèn)知功能。而δ頻段、θ頻段、血清miR-146a-5p降低和β頻段、α頻段增高在本研究中已被證實與AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙有關(guān)，可推測當(dāng)δ頻段、θ頻段、血清miR-146a-5p降低和β頻段、α頻段增高，可影響神經(jīng)元分化，增加認(rèn)知功能障礙發(fā)生風(fēng)險。

綜上，本研究δ頻段、θ頻段、β頻段、α頻段、miR-146a-5p聯(lián)合預(yù)測AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的AUC是0.908，聯(lián)合預(yù)測AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的敏感度較單獨檢測更高。提示腦電圖參數(shù)及血清miR-146a-5p聯(lián)合應(yīng)用對AD患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙具有較高的預(yù)測效能，彌補(bǔ)單項檢測的不足，在AD患者預(yù)后評估中應(yīng)用前景廣闊。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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