血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2水平與2型糖尿病病人并發(fā)頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系

摘要 目的：探討血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2（LCN-2）水平與2型糖尿?。═2DM）病人并發(fā)頸動(dòng)脈粥樣硬化（CAA）的相關(guān)性。方法：選取2019年2月—2022年2月我院內(nèi)分泌科收治的175例T2DM的病人作為T2DM組，根據(jù)是否合并CAA將分為CAA組（80例）和單純T2DM組（95例），另選取于門診體檢的健康志愿者70名作為對(duì)照組。所有受試者均檢測(cè)血清LCN-2水平，分析LCN-2與T2DM并發(fā)CAA的關(guān)系、LCN-2診斷T2DM并發(fā)CAA的價(jià)值。結(jié)果：T2DM組血清LCN-2水平高于對(duì)照組（P＜0.05），CAA組血清LCN-2水平高于單純T2DM組（P＜0.05）。高低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、LCN-2是T2DM病人并發(fā)CAA的危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。聯(lián)合LDL-C、HbA1c、LCN-2診斷T2DM并發(fā)CAA的受試者工作特征曲線下面積為0.924，高于單獨(dú)LDL-C、HbA1c、LCN-2診斷的0.631，0.668，0.736（Z值分別為6.712，6.324，5.322，P＜0.05）。結(jié)論：T2DM并發(fā)CAA病人血清LCN-2水平增高，是T2DM并發(fā)CAA的危險(xiǎn)因素，可作為CAA的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。

關(guān)鍵詞 2型糖尿??；頸動(dòng)脈粥樣硬化；脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2；低密度脂蛋白膽固醇；糖化血紅蛋白

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.13.027

2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）是臨床常見的以糖脂代謝紊亂、胰島素抵抗為特征的慢性內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，心血管疾病是T2DM的常見合并證，隨著T2DM病程的延長(zhǎng)，心血管疾病患病率不斷增長(zhǎng)，據(jù)統(tǒng)計(jì)T2DM病人患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)是普通人群的10倍，頸動(dòng)脈粥樣硬化（carotid atherosclerosis，CAA）是心血管疾病發(fā)生和進(jìn)展的危險(xiǎn)因素，可預(yù)測(cè)T2DM病人未來(lái)心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)［1］。頸動(dòng)脈斑塊形成是晚期動(dòng)脈粥樣硬化的標(biāo)記，通過(guò)超聲測(cè)量頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度（carotid intima-media thickness，CIMT）是臨床評(píng)估CAA的無(wú)創(chuàng)和可靠的標(biāo)志物，越來(lái)越多的研究也證實(shí)T2DM病人CIMT明顯高于一般人群，CIMT增加與心血管狹窄以及不良心血管事件風(fēng)險(xiǎn)增加顯著相關(guān)［2］。識(shí)別T2DM病人CAA及研究其潛在機(jī)制對(duì)預(yù)防心血管事件、早期干預(yù)至關(guān)重要。脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2（lipocalin-2，LCN-2）是一種新型脂肪細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)糖脂和能量代謝的作用，與肥胖、T2DM及心血管疾病均密切相關(guān)［3］。本研究擬檢測(cè)T2DM病人血清LCN-2水平，分析LCN-2與T2DM病人并發(fā)CAA的關(guān)系，以期為CAA早期診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2019年2月—2022年2月我院內(nèi)分泌科收治的175例T2DM的病人作為T2DM組，其中，男101例，女74例；年齡51～75（62.51±5.07）歲；體質(zhì)指數(shù)23～26（25.01±0.62）kg/m2。另選取于門診體檢的健康志愿者70名作為對(duì)照組，其中，男39名，女31名；年齡50～74（61.57±5.14）歲；體質(zhì)指數(shù)21～23（22.51±0.41）kg/m2。兩組性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），T2DM組體質(zhì)指數(shù)高于對(duì)照組（P＜0.05）。本研究已經(jīng)獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南（2017年版）》中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］；首次診斷為T2DM；＞18歲；入組前暫未接受降糖及抗動(dòng)脈粥樣硬化治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：1型糖尿病、妊娠糖尿病等其他類型的糖尿?。桓喂δ懿蝗毙灾匕Y肝炎、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶或天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶＞正常上限的1.5倍）和腎功能不全［血肌酐≥115μmol/L或腎小球?yàn)V過(guò)率＜60 mL/（min·1.73 m2）］；甲狀腺功能減退癥；急性感染、惡性腫瘤、精神病病人。

1.3 CIMT檢測(cè)、CAA病情評(píng)估及分組

所有T2DM病人住院后均采用SSA-660A高分辨率B型超聲診斷儀（日本東芝）進(jìn)行頸動(dòng)脈超聲檢查，血管專用探頭頻率為12 MHz。病人平躺，頭偏向一側(cè)，暴露頸部，探頭涂抹耦合劑于橫切面掃描頸總動(dòng)脈、頸動(dòng)脈球部和頸內(nèi)動(dòng)脈，然后于縱切面以不同角度進(jìn)行掃描，測(cè)量頸總動(dòng)脈分叉遠(yuǎn)端1 cm處CIMT，取3次測(cè)量的平均值，其中，CIMT＜1 mm為正常，≥1 mm為增厚，根據(jù)CIMT評(píng)估CAA嚴(yán)重程度［5］：0級(jí)為CIMT無(wú)增厚且內(nèi)膜光滑；1級(jí)為CIMT無(wú)增厚且內(nèi)膜不光滑，但無(wú)斑塊形成；2級(jí)為CIMT 1.0～1.2 mm，無(wú)斑塊形成；3級(jí)為存在１個(gè)斑塊；4級(jí)為存在≥2個(gè)斑塊。根據(jù)是否合并CAA將病人分為CAA組（3級(jí)或4級(jí)，80例）和單純T2DM組（0～2級(jí)，95例）。

1.4 LCN-2檢測(cè)

采集所有病人入組后當(dāng)日（對(duì)照組體檢當(dāng)日清晨）空腹靜脈血3 mL注入干燥試管，取血液凝固后上層液，3 000 r/min，離心5 min獲取血清，采用Varioskan LUX多功能酶標(biāo)儀（美國(guó)賽默飛公司）檢測(cè)樣本450 nm處吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)濃度確定樣品LCN-2水平，試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Ramp;D公司。

1.5 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

T2DM病人入組后完善常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，取血清樣本，采用AU5800全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司）檢測(cè)總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triacylglycerol，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterin，LDL-C），丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、血肌酐（serum creatinine，Scr）水平。穩(wěn)豪倍易型血糖儀（美國(guó)強(qiáng)生公司）檢測(cè)空腹血糖（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG）水平，BKI2200全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)空腹胰島素（fasting insulin，F(xiàn)INS）水平，JL-760糖化血紅蛋白分析儀檢測(cè)糖化血紅蛋白（hemoglobin A1c，HbA1c）水平，計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)（homeostasismodel assessment insulin resistance，HOMA-IR）。

1.6 臨床資料的收集

收集T2DM病人年齡、性別、體質(zhì)指數(shù)、吸煙史、飲酒史、基礎(chǔ)疾病、收縮壓、舒張壓以及上述實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，通過(guò)基線資料比較分析T2DM病人并發(fā)CAA的危險(xiǎn)因素，以及LCN-2在T2DM并發(fā)CAA中的診斷價(jià)值。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)性檢驗(yàn)采用Kolmogorov-Smirnov法，符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用配對(duì)或獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。定性資料以例數(shù)、百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。多因素Logistic回歸分析T2DM并發(fā)CAA的危險(xiǎn)因素，受試者工作特征曲線（receiver operator characteristics curve，ROC）分析LCN-2診斷T2DM并發(fā)CAA的價(jià)值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清LCN-2水平比較

T2DM組血清LCN-2水平為（7.34±2.09）μg/L，對(duì)照組為（3.02±0.62）μg/L，兩組血清LCN-2水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t＝16.979，P＜0.05）；CAA組血清LCN-2水平為（8.21±1.15）μg/L，單純T2DM組為（6.61±1.23）μg/L，兩組血清LCN-2水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t＝8.830，P＜0.05）。

2.2 T2DM病人并發(fā)CAA的單因素分析

CAA組年齡、體質(zhì)指數(shù)、高脂血癥比例、TC、TG、LDL-C、FPG、HbA1c、HOMA-IR均高于單純T2DM組（P＜0.05）。詳見表1。

2.3 T2DM病人并發(fā)CAA的Logistic回歸分析

將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)作為自變量，以CAA為因變量，賦值見表2。采用向后逐步法排除無(wú)關(guān)變量（P＞0.05），最終高LDL-C、HbA1c、LCN-2是T2DM病人并發(fā)CAA的危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。詳見表3。2.4 LCN-2診斷T2DM并發(fā)CAA的價(jià)值分析

LDL-C、HbA1c、LCN-2診斷T2DM并發(fā)CAA的曲線下面積（ACU）為0.631，0.668，0.736，根據(jù)上述Logistic回歸方程建立回歸預(yù)測(cè)模型，聯(lián)合檢測(cè)＝6.231＋0.503×LDL-C＋0.695×HbA1c＋0.674×LCN-2，經(jīng)ROC分析結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測(cè)診斷T2DM并發(fā)CAA的AUC為0.924，高于單獨(dú)檢測(cè)（Z值分別為6.712，6.324，5.322，P＜0.05）。詳見表4和圖1。

3 討 論

心血管疾病是T2DM病人死亡和殘疾的主要原因，包括冠狀動(dòng)脈疾病、腦血管疾病和外周血管疾病，據(jù)統(tǒng)計(jì)全球范圍內(nèi)約32.2%的T2DM病人并發(fā)心血管疾病，因心血管疾病死亡人數(shù)約占所有T2DM病人死亡人數(shù)的50%［6］。CAA是T2DM病人發(fā)生心血管疾病的主要原因，也是心血管疾病發(fā)生的早期階段［7］。CAA多由內(nèi)皮功能障礙介導(dǎo)的慢性血管炎癥引起，具有脂質(zhì)沉積、局灶性內(nèi)膜增厚、平滑肌細(xì)胞增殖和斑塊形成等特點(diǎn)，CAA發(fā)病機(jī)制尚未明確，但研究發(fā)現(xiàn)與脂質(zhì)代謝紊亂、內(nèi)皮功能障礙、炎癥以及氧化應(yīng)激等多種因素有關(guān)，其中內(nèi)皮功能障礙是CAA發(fā)展的早期關(guān)鍵步驟，可引起血管痙攣、血栓形成、巨噬細(xì)胞遷移浸潤(rùn)和炎癥，從而導(dǎo)致CAA，因此有必要明確CAA的相關(guān)危險(xiǎn)因素及生物學(xué)標(biāo)志物［8］。

LCN-2屬于脂質(zhì)運(yùn)載蛋白超家族成員，也稱為中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白，由位于9號(hào)染色體9q34.11基因編碼，在中性粒細(xì)胞、肝細(xì)胞、肺、骨髓、脂肪組織、巨噬細(xì)胞等中表達(dá)，可運(yùn)輸類固醇、脂肪酸、類視黃醇、前列腺素和激素等小分子和疏水性分子，LCN-2在感染和炎癥部位由中性粒細(xì)胞顆粒釋放，通過(guò)從細(xì)菌鐵載體中螯合鐵起到抑菌作用，通過(guò)結(jié)合N-甲?；琢虬滨?亮氨酰-苯丙氨酸和白三烯B4發(fā)揮促炎特性，LCN-2還可與基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）相互結(jié)合形成LCN-2/MMP-9復(fù)合物，并上調(diào)MMP-9表達(dá)，促使腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移，除此之外，LCN-2在細(xì)胞分化、凋亡、炎癥、腎損傷和肝損傷等許多生理病理過(guò)程中發(fā)揮重要作用［9］。同時(shí)LCN-2在調(diào)節(jié)能量、胰島素敏感性、葡萄糖和脂質(zhì)代謝方面發(fā)揮關(guān)鍵作用，研究表明，LCN-2在肥胖［10］、2型糖尿?。?1］病人中上調(diào)，且與體質(zhì)指數(shù)［10］、腰圍、高糖化血紅蛋白和HOMA-IR呈正相關(guān)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)［11］。LCN-2與動(dòng)脈粥樣硬化也密切相關(guān)，現(xiàn)有研究顯示動(dòng)脈粥樣硬化病灶內(nèi)活性MMP-9增加，并通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定，LCN-2則通過(guò)穩(wěn)定MMP-9活性，促使纖維帽降解和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定［10］。與無(wú)癥狀病人相比，有癥狀動(dòng)脈粥樣硬化病人血清LCN-2水平更高［12］，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中LCN-2 mRNA表達(dá)也增高［13］。

本研究結(jié)果顯示，CAA組血清LCN-2水平增高，高水平LCN-2是T2DM并發(fā)CAA的危險(xiǎn)因素，說(shuō)明LCN-2參與T2DM并發(fā)CAA的發(fā)病過(guò)程，可作為T2DM并發(fā)CAA的生物學(xué)標(biāo)志物。推測(cè)LCN-2參與T2DM病人并發(fā)CAA的機(jī)制為：首先，T2DM病人持續(xù)高血糖引起晚期糖基化終產(chǎn)物（advanced glycation end-products，AGEs）產(chǎn)生增加［14］，AGEs通過(guò)糖基化終產(chǎn)物受體-還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-活性氧途徑導(dǎo)致主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中磷脂酰肌醇3-激-蛋白激酶B和c-Jun氨基末端激酶磷酸化，進(jìn)而誘導(dǎo)LCN-2表達(dá)上調(diào)，促使主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞遷移［15］；其次，LCN-2通過(guò)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、IL-8、單核細(xì)胞趨化蛋白1等促炎介質(zhì)表達(dá)，誘導(dǎo)局部促炎反應(yīng)，損傷血管內(nèi)皮功能，促使動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成［13］。本研究ROC分析結(jié)果顯示，LCN-2診斷T2DM病人并發(fā)CAA的AUC為0.736，表明LCN-2在診斷T2DM病人并發(fā)CAA方面具有一定價(jià)值?；貧w分析結(jié)果顯示，LDL-C、HbA1c與T2DM病人并發(fā)CAA也存在密切關(guān)系，說(shuō)明高血脂和血糖控制不良可促使CAA發(fā)生。當(dāng)聯(lián)合LDL-C、HbA1c和LCN-2時(shí)診斷T2DM病人并發(fā)CAA的AUC明顯提高，表明LCN-2結(jié)合血脂和血糖指標(biāo)可為臨床CAA診斷提供更可靠的信息。

綜上所述，T2DM并發(fā)CAA病人血清LCN-2水平增高，高水平LCN-2與T2DM病人CIMT增厚及CAA的發(fā)生有關(guān)，是診斷CAA的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。本研究局限之處在于未動(dòng)態(tài)觀測(cè)LCN-2水平，LCN-2與臨床降糖、降血脂及抗動(dòng)脈粥樣硬化治療反應(yīng)以及未來(lái)心血管事件的關(guān)系尚待進(jìn)一步探討。

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（收稿日期：2022-09-12）

（本文編輯鄒麗）

通訊作者 李國(guó)華，E-mail：13975230208@qq.com

引用信息 崔立全，李國(guó)華.血清脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2水平與2型糖尿病病人并發(fā)頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2024，22（13）：2441-2445.