乙肝兩對半和DNA聯(lián)合檢驗在乙肝診斷中的價值

摘要：目的 "研究乙肝兩對半與病毒DNA（HBV-DNA）聯(lián)合檢驗在乙肝診斷中的應(yīng)用價值。方法 "選取2020年1月-2023年1月余干縣中醫(yī)院確診的60例乙肝患者設(shè)為乙肝組，另取同期50名體檢健康者設(shè)為健康組，兩組均給予乙肝兩對半[乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗體（HBsAb）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗體（HBeAb）、乙肝核心抗體（HBcAb）]與HBV-DNA含量檢測，比較乙肝組與健康組乙肝兩對半與HBV-DNA測定結(jié)果，統(tǒng)計不同HBV-M模式的HBV-DNA測定結(jié)果，以綜合診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，分析并比較乙肝兩對半、HBV-DNA單獨檢驗及聯(lián)合檢驗對乙肝的診斷效能。結(jié)果 "乙肝組乙肝兩對半指標(biāo)（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）與HBV-DNA測定結(jié)果均高于健康組（P＜0.05）；不同HBV-M模式下HBV-DNA測定結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其含量由高至低依次為HBsAg+HBeAg+HBcAb＞HBsAg+HBeAb+HBcAb＞HBsAg+HBcAb＞HBsAg+HBsAb+HBeAb＞HBsAg+HBeAb＞HBsAg；乙肝兩對半與HBV-DNA聯(lián)合檢驗對乙肝的診斷準(zhǔn)確性、敏感度、特異度高于其單一檢驗（P＜0.05）。結(jié)論 "乙肝兩對半與HBV-DNA檢測在乙肝診斷中均具有確切參考價值，二者聯(lián)合檢測可發(fā)揮更高診斷效能。

關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒；乙肝兩對半；HBV-DNA

中圖分類號：R446.1 " " " " " " " " " " " " " " " " " " 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A " " " " " " " " " " " " " " DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2024.21.040

文章編號：1006-1959（2024）21-0169-04

Value of Combined Detection of HBV Antigen， Antibody and DNA in the Diagnosis of Hepatitis B

ZHANG Yongjun

（Department of Laboratory Blood Transfusion，Yugan County Hospital of Traditional Chinese Medicine，Yugan 335100，Jiangxi，China）

Abstract：Objective "To study the application value of combined detection of HBV antigen， antibody and viral DNA （HBV-DNA） in the diagnosis of hepatitis B.Methods "A total of 60 patients with hepatitis B diagnosed in Yugan County Hospital of Traditional Chinese Medicine from January 2020 to January 2023 were selected as the hepatitis B group， and 50 healthy people in the same period were selected as the healthy group. Both groups were detected HBV antigen， antibody [hepatitis B surface antigen （HBsAg）， hepatitis B surface antibody （HBsAb）， hepatitis B e antigen （HBeAg）， hepatitis B e antibody （HBeAb）， hepatitis B core antibody （HBcAb）] and HBV-DNA content. The results of HBV antigen， antibody and HBV-DNA in the hepatitis B group and the healthy group were compared. The results of HBV-DNA determination in different HBV-M models were statistically analyzed. Taking the comprehensive diagnosis results as the gold standard， the diagnostic efficacy of HBV antigen， antibody， HBV-DNA single test and combined test for hepatitis B was analyzed and compared.Results "The results of hepatitis B two half-and-half indicators （ HBsAg， HBsAb， HBeAg， HBeAb， HBcAb） and HBV-DNA determination in the hepatitis B group were higher than those in the healthy group （Plt;0.05）. There were significant differences in the results of HBV-DNA determination under different HBV-M modes （Plt;0.05）， while the content of HBV-DNA from high to low was HBsAg+HBeAg+HBcAbgt;HBsAg+HBeAb+HBcAbgt;HBsAg+HBcAbgt;HBsAg+HBsAb+HBeAbgt;HBsAg+HBeAbgt;HBsAg. The diagnostic accuracy， sensitivity and specificity of the combined test of hepatitis B and HBV-DNA were higher than those of the single test （Plt;0.05）.Conclusion "The HBV antigen， antibody and HBV-DNA detection have definite reference value in the diagnosis of hepatitis B， and the combined detection of the two can play a higher diagnostic efficiency.

Key words：Hepatitis B virus;HBV antigen， antibody;HBV-DNA

乙型肝炎（hepatitis B）為我國常見乙類傳染性疾病，由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus， HBV）感染引起，多伴有乏力、頭暈、食欲減退等癥狀表現(xiàn)，其病情進(jìn)展可引發(fā)肝功能損傷，導(dǎo)致肝硬化等不良結(jié)局，且具有較強(qiáng)的傳染性，對患者生存健康及公共衛(wèi)生安全均構(gòu)成了較大威脅，其疾病診斷尤為關(guān)鍵[1，2]?，F(xiàn)階段，乙型肝炎病毒標(biāo)志物（HBV-M、乙肝兩對半）與乙肝病毒-脫氧核糖核酸（HBV-DNA）均為乙肝常用檢測指標(biāo)，前者包括乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen， HBsAg）、乙肝表面抗體（hepatitis B surface antibody， HBsAb）、乙肝核心抗體（hepatitis B core antibody， HBcAb）、乙肝e抗原（hepatitis B virus e antigen， HBeAg）與乙肝e抗體（hepatitis B e antibody， HBeAb）五項，為乙肝首選篩查方案[3，4]；后者則屬于HBV復(fù)制與傳染的直接標(biāo)記物，是臨床判斷病毒復(fù)制的“金標(biāo)準(zhǔn)”，對乙肝病毒載量及傳染性均具有良好檢測價值[5，6]。近年來，隨著乙肝防治研究的不斷深入，臨床關(guān)于乙肝兩對半與HBV-DNA聯(lián)合應(yīng)用的相關(guān)報道日益增多，在此，本研究結(jié)合2020年1月-2023年1月余干縣中醫(yī)院確診的60例乙肝患者，觀察乙肝兩對半與HBV-DNA聯(lián)合檢驗在乙肝診斷中的應(yīng)用價值，旨在探究其臨床診斷作用，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 "選取2020年1月-2023年1月余干縣中醫(yī)院確診的60例乙肝患者設(shè)為乙肝組，其中男37例，女23例；年齡22～75歲，平均年齡（45.19±5.78）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；②病歷資料完整無誤；③近期未接受抗乙肝治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并急性肝炎等其他肝病患者；②惡性腫瘤者；③合并其他炎癥性疾病者；④妊娠及哺乳期患者。另取同期50名體檢健康者設(shè)為健康組，其中男31名，女19名；年齡23～68歲，平均年齡（45.22±5.81）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①體檢資料完整無誤；②肝功能指標(biāo)正常；③檢測配合度高。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠及哺乳期女性；②存在既往肝病史者。兩組受檢者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有受檢者均知情且自愿參加本研究，并簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1乙肝兩對半檢測 "所有受檢者均于檢驗前1 d晚8點后開始禁食，次日清晨取空腹靜脈血5 ml，離心處理（3000 r/min，10 min）后，取上清液行化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢驗，采用化學(xué)發(fā)光儀（上海科哲生化科技有限公司，型號：ELSD-5000KS型）完成檢測，所有操作均嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。參考值：HBsAg：0～0.25 ng/ml，HBsAb：0～10 mU/ml，HBcAb：0～0.2 NCU/ml，HBeAg：0～0.03 NCU/ml，HBeAb：0～2 NCU/ml，超出以上范圍評定為陽性。

1.2.2 HBV-DNA檢測 "取空腹外周血2 ml，行堿裂解法提取HBV-DNA，采用熒光定量PCR儀（美國伯樂公司，Bio-Rad CFX96型）進(jìn)行HBV-DNA檢測，程序：50 ℃變性2 min、94 ℃變性5 min、93 ℃復(fù)性30 s、60 ℃延伸1 min，共40個循環(huán)。完畢后，計算HBV-DNA病毒載量。參考值：HBV-DNA＜1×103 copies/ml為陰性，HBV-DNA≥1×103 copies/ml為陽性。

1.3觀察指標(biāo) "①比較乙肝組與健康組乙肝兩對半與HBV-DNA測定結(jié)果；②比較不同HBV-M模式的HBV-DNA測定結(jié)果；③以綜合診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，比較乙肝兩對半、HBV-DNA單獨檢驗及聯(lián)合檢驗對乙肝的診斷效能，包括診斷準(zhǔn)確性、敏感度、特異度。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 "采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（x±s）表示，組間行t檢驗或方差分析；計數(shù)資料以[n（%）]表示，組間行？字2檢驗對比。P＜0.05表明差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1乙肝組與健康組乙肝兩對半與HBV-DNA測定結(jié)果比較 "乙肝組乙肝兩對半指標(biāo)（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）與HBV-DNA測定結(jié)果均高于健康組（P＜0.05），見表1。

2.2不同HBV-M模式的HBV-DNA測定結(jié)果比較 "不同HBV-M模式下患者HBV-DNA測定結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=4.135，P=0.038），其含量由高至低依次為HBsAg+HBeAg+HBcAb＞HBsAg+HBeAb+HBcAb＞HBsAg+HBcAb＞HBsAg+HBsAb+HBeAb＞HBsAg+HBeAb＞HBsAg，見表2。

2.3乙肝兩對半、HBV-DNA單獨檢驗及聯(lián)合檢驗對乙肝的診斷效能分析 "乙肝兩對半與HBV-DNA聯(lián)合檢驗對乙肝的診斷準(zhǔn)確性、敏感度、特異度高于其單一檢驗（P＜0.05），見表3、表4。

3討論

HBV病毒顆粒由外殼與內(nèi)核組成，呈雙鏈環(huán)狀，多通過血液、體液及性接觸等途徑傳播，感染者血液或體液中均含有活躍的HBV病毒顆粒，其感染過程可激活宿主免疫系統(tǒng)，引發(fā)宿主對病毒的清除效應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致多種血清標(biāo)志物水平的升高[8，9]。其中，HBsAg為HBV病毒外殼的主要成分，HBeAg則屬于病毒內(nèi)核的主要成分，二者對HBV病毒的檢出具有積極作用，而HBsAb、HBeAb與HBcAb是宿主免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的抗體指標(biāo)，是提示乙肝免疫狀態(tài)與病情進(jìn)展的重要參數(shù)，以上指標(biāo)水平可有效反映HBV病毒在感染者體內(nèi)的存在與活動水平[10，11]。此外，HBV可長期存在于肝細(xì)胞中，其環(huán)境可加速病毒DNA轉(zhuǎn)錄為RNA，在逆轉(zhuǎn)錄機(jī)制下形成新的HBV-DNA，最終再次進(jìn)入細(xì)胞核完成基因組復(fù)制，達(dá)到繁殖增量目的[12，13]。HBV-DNA作為HBV病毒的遺傳物質(zhì)，是反映其復(fù)制與傳染強(qiáng)度的直接標(biāo)記物，其血清含量可有效顯示體內(nèi)的HBV攜帶狀態(tài)，對HBV的感染與復(fù)制強(qiáng)度具有較高診斷價值，在乙肝疾病活動度及病毒傳染性評估中可發(fā)揮積極作用[14，15]。

本研究結(jié)果顯示，乙肝組乙肝兩對半指標(biāo)（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）與HBV-DNA測定結(jié)果均高于健康組（P＜0.05），此結(jié)果表明乙肝患者與健康受檢者的乙肝兩對半、HBV-DNA指標(biāo)存在差異，前者測定結(jié)果明顯更高。分析認(rèn)為，HBV感染后，其病毒可與宿主免疫反應(yīng)相互作用，致使機(jī)體免疫系統(tǒng)激活，發(fā)揮病毒清除作用，同時產(chǎn)生抗體，對抗病毒感染，由此可引起血清HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb指標(biāo)的升高[16，17]。另一方面，HBV-DNA是反映HBV病毒載量的直觀參數(shù)，其數(shù)值可作為乙肝診斷的重要參考，相較于健康者，乙肝患者體內(nèi)HBV-DNA載量明顯更高。不同HBV-M模式下患者HBV-DNA測定結(jié)果存在差異（P＜0.05），其含量由高至低依次為HBsAg+HBeAg+HBcAb＞HBsAg+HBeAb+HBcAb＞HBsAg+HBcAb＞HBsAg+HBsAb+HBeAb＞HBsAg+HBeAb＞HBsAg，提示不同HBV-M模式的HBV-DNA含量存在差異。其中，HBsAg+HBeAg+HBcAb陽性為乙肝“大三陽”，其病毒處于活躍復(fù)制期，傳染性較強(qiáng)，HBV-DNA載量相對較高；HBsAg+HBeAb+HBcAb陽性為乙肝“小三陽”，HBsAg+HBcAb陽性則代表慢性乙肝的早期階段，HBsAg+HBsAb+HBeAb、HBsAg+HBeAb陽性多提示疾病進(jìn)入康復(fù)期階段，HBsAg陽性代表機(jī)體處于慢性感染階段，以上均處于病毒非復(fù)制活躍階段，HBV-DNA載量隨之降低[18，19]。由此可見，乙肝兩對半指標(biāo)與HBV-DNA定量存在一定相關(guān)性，臨床可借助其指標(biāo)變化，判斷病毒的復(fù)制情況，以評估疾病的傳染性強(qiáng)度。最后經(jīng)分析顯示，乙肝兩對半與HBV-DNA聯(lián)合檢驗對乙肝的診斷準(zhǔn)確性、敏感度、特異度高于其單一檢驗（P＜0.05），表明乙肝兩對半聯(lián)合HBV-DNA檢測在乙肝診斷中具有較高診斷效能。分析認(rèn)為，乙肝兩對半為乙肝的首選篩查指標(biāo)，但其檢測對象并不是病毒的致病物或傳染物，雖可反映乙肝病毒的存在，但無法量化病毒的復(fù)制情況，其單一檢驗無法完成疾病的最終診斷[20，21]。另一方面，HBV-DNA定量當(dāng)前僅可精確到數(shù)量級區(qū)間內(nèi)，其結(jié)果精確度有限，且易受到藥物治療或病毒變異等因素的影響，單用診斷價值有限[22，23]?；诖?，二者聯(lián)合可有效彌補(bǔ)其應(yīng)用不足，提高診斷效能。

綜上所述，乙肝兩對半與HBV-DNA檢測在乙肝診斷中均具有確切參考價值，二者聯(lián)合檢測可發(fā)揮更高診斷效能，在乙肝疾病的篩查、診斷、傳染性評估中均具有重要作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]李樂，廖昊，思蘭蘭，等.新型血清學(xué)標(biāo)志物在不同類型乙型肝炎病毒感染中的檢出特征分析[J].解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2023，48（2）：163-167.

[2]Mak LY，Wong DK，Pollicino T，et al.Occult hepatitis B infection and hepatocellular carcinoma： Epidemiology， virology， hepatocarcinogenesis and clinical significance[J].J Hepatol，2020，73（4）：952-964.

[3]劉曉紅，單穎，孫朝慶，等.HBsAg陰性伴HBcAb陽性患者血清HBV-DNA含量檢測對隱匿性乙型肝炎病毒感染的檢出價值[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2021，50（3）：362-365.

[4]張學(xué)平，邵宏偉，王靜.不同階段慢性HBV感染患者血清HBsAg定量值與血清HBV DNA水平相關(guān)性分析[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2021，28（1）：51-54.

[5]蔡正平，蔡雯，張士躍.聯(lián)合采用血清學(xué)和核酸檢測方法篩查HBV感染[J].中國國境衛(wèi)生檢疫雜志，2020，43（6）：435-438.

[6]季小美，夏偉蘭，陳麗芬.乙肝“大三陽”和“小三陽”產(chǎn)婦HBV-DNA表達(dá)及相關(guān)性研究[J].中國婦幼保健，2020，35（23）：4450-4452.

[7]王貴強(qiáng)，段鐘平，王福生，等.慢性乙型肝炎防治指南（2019年版）[J].實用肝臟病雜志，2020，23（1）：9-32.

[8]魏星，張艷杰，高德萱.慢性乙型肝炎患者不同臨床階段相關(guān)檢驗指標(biāo)分析[J].中國地方病防治，2020，35（4）：494-495，498.

[9]辛菊梅.慢性乙型肝炎及肝硬化患者HBsAg和HBV DNA定量，檢測的臨床意義[J].臨床輸血與檢驗，2020，22（2）：203-205.

[10]沙啟明.HBV-DNA載量水平與血清學(xué)標(biāo)志物分組模式及前S1抗原的關(guān)系[J].臨床與病理雜志，2022，42（1）：33-38.

[11]鄒卓林，謝新生.HBV-DNA定量與乙肝血清標(biāo)志物聯(lián)合檢測在乙肝中的應(yīng)用價值分析[J].中國地方病防治雜志，2019，34（6）：696-697.

[12]華琳，楊雅蕓，孫維羅，等.乙型肝炎患者ALT水平與HBV血清標(biāo)志物聯(lián)合檢測的應(yīng)用價值[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2019，29（18）：2746-2749，2753.

[13]陳賢坤，吳翠云.HBsAg及HBV DNA定量檢測在慢性乙型肝炎患者不同病程階段中的應(yīng)用價值[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2019，16（13）：1829-1831，1836.

[14]王亞東.乙型肝炎孕婦HBV血清標(biāo)志物與HBV DNA載量及ALT的相關(guān)性分析[J].傳染病信息，2019，32（3）：233-235.

[15]蔡興龍.乙肝患者血清HBeAg與HBV-DNA定量的相關(guān)性分析[J].河北醫(yī)學(xué)，2019，25（5）：820-823.

[16]楊傳信.PreS1抗原和HBV血清學(xué)標(biāo)志物與HBV DNA的相關(guān)性及臨床意義[J].臨床輸血與檢驗，2019，21（1）：53-55.

[17]馬麗玲，徐俊馳，吳敏娟，等.HBV-DNA與乙型病毒性肝炎血清標(biāo)志物的關(guān)系[J].江蘇醫(yī)藥，2018，44（11）：1279-1282.

[18]趙棉，張力，趙亞妮.HBV DNA定量與乙肝血清學(xué)標(biāo)志物定量聯(lián)合檢測乙肝病毒感染的效果分析[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2018，22（15）：37-40.

[19]侯玲，劉韌，龍訓(xùn)琴，等.乙型病毒性肝炎患者血清HBV DNA與HBeAg、HBsAg的相關(guān)性分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2018，15（7）：936-939.

[20]顧青青，吳東，顏學(xué)兵.乙型肝炎患者病毒復(fù)制指標(biāo)與乙肝標(biāo)志物及肝功能的相關(guān)性檢驗分析[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2018，24（6）：669-672.

[21]丁丞，黃晨陽，陳燦，等.傳染病示范區(qū)基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)HBV血清學(xué)標(biāo)志物檢測準(zhǔn)確率調(diào)查[J].中華臨床感染病雜志，2021，14（4）：266-271.

[22]馮變瑩，穆迪，黃平，等.乙肝五項血清標(biāo)志物、PreS1抗原和HBV-DNA聯(lián)合檢測在老年乙型肝炎患者診療中的應(yīng)用價值研究[J].老年醫(yī)學(xué)與保健，2020，26（4）：613-617.

[23]Cloherty G，Butler E，Kuhns M.Serum Hepatitis B Virus RNA as a Potential Diagnostic Biomarker During Chronic Hepatitis B Virus Infection[J].Clin Liver Dis （Hoboken），2019，13（3）：90-92.

收稿日期：2023-11-05；修回日期：2023-11-24

編輯/杜帆