冬瓜種子粗提物對白菜種子萌發(fā)和幼苗生長的影響及其內(nèi)源抑制物分析

摘要：探究內(nèi)源抑制物對冬瓜種子萌發(fā)的影響，為揭示冬瓜種子的休眠原因及解除種子休眠的方法具有重要意義。以冬瓜種子為材料，采用系統(tǒng)溶劑分離法對冬瓜種子種皮和種胚的甲醇粗提液進(jìn)行分離得到不同有機(jī)相（石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相）和水相，測定各分離相的浸提液對白菜種子萌發(fā)及幼苗生長的影響；結(jié)合氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）技術(shù)和模擬研究法，分析冬瓜種子內(nèi)源抑制物種類、含量及有機(jī)化合物的抑制活性。采用55～75 ℃熱水浸泡30 min或250～1 000 mg/L GA3浸泡20～120 min，能有效解除冬瓜種子休眠。冬瓜種子的種皮和種胚分離得到的各分離相對白菜種子萌發(fā)和幼苗生長均有不同程度的抑制作用，其中乙酸乙酯相、甲醇相和乙醚相抑制作用最強(qiáng)。采用GC-MS技術(shù)檢測到冬瓜種皮、種胚分別存在34、39種有機(jī)化合物，主要為有機(jī)酸類、醇類等物質(zhì)，其中相對含量較高的有機(jī)化合物包括2-羥基吡啶、棕櫚酸、十八烷酸、2-羥基丙酸等物質(zhì)，研究結(jié)果可為冬瓜種子的休眠解除和休眠機(jī)制提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：冬瓜；休眠特性；內(nèi)源抑制物；GC-MS

中圖分類號(hào)：S642.301文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2024）11-0141-09

冬瓜（Benincasa hispida Cogn.）為葫蘆科冬瓜屬的一年生草本植物，原產(chǎn)于我國南部地區(qū)，是調(diào)節(jié)蔬菜淡季供應(yīng)的重要蔬菜，具有貨架期長、耐貯藏等優(yōu)點(diǎn)。冬瓜種子由種皮和種胚2個(gè)部分構(gòu)成，種皮堅(jiān)硬且厚，表面富含角質(zhì)層，泡水后不易下沉［1］。根據(jù)種皮形狀和結(jié)構(gòu)，可分為有棱扁籽和無棱光籽2種類型。

冬瓜繁殖方式主要是種子繁殖，但由于種子休眠或休眠解除不徹底，導(dǎo)致冬瓜育種過程中存在發(fā)芽率低、出苗不齊等問題，直接影響冬瓜的繁種與育種工作。種子休眠是指完整的具有生活力的種子在適宜的環(huán)境條件下不能正常萌發(fā)的現(xiàn)象［2］。種子休眠的原因復(fù)雜多樣，大體上可以分為外部因素和內(nèi)部因素。外部因素包括溫度、濕度、光、水分等。內(nèi)部因素包括種殼障礙、內(nèi)源抑制物等。內(nèi)源抑制物是由植物種子產(chǎn)生的某些化學(xué)物質(zhì)，通過影響種子生理活動(dòng)或代謝，從而抑制種子萌發(fā)。近年來，關(guān)于內(nèi)源抑制物的研究報(bào)道不斷增多。謝朋等研究發(fā)現(xiàn)，假色槭種子的種皮和種胚中存在內(nèi)源抑制物，種胚的抑制活性最強(qiáng)，是導(dǎo)致種子休眠期長、不易發(fā)芽的主要原因［3］。張躍進(jìn)等對黃精種子存在內(nèi)源抑制物的部位進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，種皮的抑制作用高于胚乳［4］。宋會(huì)興等的研究表明，四川省牡丹種皮和胚乳內(nèi)存在抑制物，隨著該物質(zhì)濃度增加，抑制作用增強(qiáng)［5］。另外，采用系統(tǒng)溶劑法對種子內(nèi)源抑制物進(jìn)行研究也有大量報(bào)道［6-8］。通過測定不同溶劑提取的斧形沙芥種子浸提液的活性，發(fā)現(xiàn)甲醇和乙酸乙酯抑制性較強(qiáng)［9］。返魂草種子中也存在內(nèi)源抑制物，不同浸提液抑制作用為甲醇浸提液依次強(qiáng)于乙醚浸提液和水浸提液［10］。GC-MS技術(shù)可用于對內(nèi)源抑制物進(jìn)行定性定量分析。Blake等利用GC-MS技術(shù)對歐洲白蠟種子內(nèi)源抑制物進(jìn)行鑒定，推測脫落酸（ABA）、吲哚乙酸（IAA）等物質(zhì)可能影響種子休眠［11］。朱銘瑋等通過GC-MS檢測油用牡丹品種鳳丹的種子生物活性，推測鳳丹種皮和種胚主要的抑制物是酚類物質(zhì)和有機(jī)酸類物質(zhì)［12］。

目前，關(guān)于冬瓜種子的研究主要集中在打破種子休眠［13-17］、種子純度［18-19］等方面，對種子內(nèi)源抑制物種類、相對含量等方面研究甚少。本研究以冬瓜種子為材料，對種子內(nèi)源抑制物進(jìn)行分離與鑒定，測定不同分離相的生物活性指標(biāo)，結(jié)合氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）技術(shù)和模擬研究法探究冬瓜種子種皮和種胚中提取的內(nèi)源抑制物種類、含量及有機(jī)化合物的抑制活性，以期為冬瓜種子休眠機(jī)制的深入研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2022年8—12月在福建省蔬菜遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。供試冬瓜種子取自福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所蔬菜研究中心，4 ℃儲(chǔ)藏備用。白菜種子品種為君川美格，購自福州農(nóng)嘉種子科技有限公司，純度≥95％，凈度≥98％，發(fā)芽率≥85％，含水量≤7％。

1.2 冬瓜形態(tài)指標(biāo)

隨機(jī)選取206粒成熟的冬瓜種子，使用游標(biāo)卡尺測量種子的長、寬、厚，取平均值。隨機(jī)選取冬瓜種子1 000粒，用1/1 000電子天平測定千粒重，3次重復(fù)。

1.3 冬瓜種子休眠解除方法

1.3.1 熱水對種子發(fā)芽的影響 隨機(jī)選取3組種子，每組50粒，分別用55、65、75 ℃熱水浸泡 30 min，蒸餾水處理的種子為對照，30 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，3次重復(fù)。于培養(yǎng)9 d后統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽率。

1.3.2 GA3處理對種子發(fā)芽的影響 隨機(jī)選取50粒種子，分別配制濃度為250、500、1 000 mg/L赤霉素（GA3）溶液，分別浸泡20、30、60、120 min，蒸餾水處理的種子為對照，30 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，3次重復(fù)。于培養(yǎng)9 d后統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽率。

發(fā)芽率=發(fā)芽種子數(shù)/種子總數(shù)×100％。

1.4 冬瓜種子內(nèi)源抑制物提取

選取飽滿的冬瓜種子，分別將種皮和種胚研磨成粉末。稱取種皮、種胚各10 g置于錐形瓶中，加入100 mL 體積分?jǐn)?shù)為80%的甲醇，4 ℃密閉浸提，浸提24 h，每隔24 h過濾上清液，重復(fù)3次，混合所有濾液。將粗提液利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，最終定容至100 mL。

1.5 冬瓜種子內(nèi)源抑制物分離

采用系統(tǒng)溶劑法對“1.4”節(jié)提取的冬瓜種子種皮和種胚甲醇粗提液進(jìn)行提取分離，粗提液分離為石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相和水相5個(gè)組分。將分離后所得的冬瓜種子各部分的有機(jī)相溶液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮蒸發(fā)，最后將上述有機(jī)相溶液用蒸餾水定容至100 mL，置于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6 冬瓜種子分離相生物活性測定

以白菜種子為內(nèi)源抑制物活性測定材料，其無休眠特性，易萌發(fā)。取“1.5”節(jié)提取的各有機(jī)相浸提液3 mL加入培養(yǎng)皿中進(jìn)行生物活性測定，每皿50粒白菜種子，待有機(jī)溶液完全蒸發(fā)后（除水相外），再向培養(yǎng)皿加入3 mL蒸餾水，以蒸餾水作為對照，3次重復(fù)。將培養(yǎng)皿于恒溫培養(yǎng)箱中（設(shè)置條件：溫度25 ℃、相對濕度70％、12 h光照/12 h黑暗），于培養(yǎng)48 h后統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率（以露出子葉為標(biāo)準(zhǔn)），72 h用直尺測量根長。

1.7 冬瓜種子分離相的GC-MS法鑒定

分別取冬瓜種子各有機(jī)相浸提液原液60 mL，濃縮蒸干，得到干物質(zhì)，再用相應(yīng)的有機(jī)溶劑溶解定容至2 mL，即得到濃縮樣品，樣品送至蘇州帕諾米克生物醫(yī)藥科技有限公司，鑒定條件：代謝物提?。阂迫颖?00 μL于2 mL EP管中，濃縮儀濃縮至盡干；在濃縮盡干的樣品中，加入80 μL甲氧胺吡啶溶液復(fù)溶，渦旋振蕩30 s，60 ℃孵育60 min；加100 μL BSTFA-TMCS衍生化試劑，渦旋振蕩30 s，70 ℃條件下孵育90 min，14 000 r/min 離心3 min，取上清液90～100 μL加入到檢測瓶中，并于24 h內(nèi)完成上機(jī)檢測。氣質(zhì)檢測：毛細(xì)管柱：DB-5MS；樣品分流比為1 ∶10；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；傳輸線和離子源溫度：320 ℃和230 ℃；升溫程序：50 ℃為初始溫度，持續(xù)0.5 min，以15 ℃/min 的速率上升到320 ℃，并在320 ℃停留9 min。

2 結(jié)果與分析

2.1 冬瓜種子形態(tài)指標(biāo)

冬瓜為一年生草本植物，莖上有茸毛，葉片寬大?；ㄆ跁r(shí)，花軸開出8 cm左右黃色花朵，雌雄同株。果實(shí)大小因品種而異，從數(shù)斤到數(shù)十斤均有。果實(shí)肉質(zhì)柔軟，味道清淡，可作蔬菜食用。果實(shí)成熟后，表皮變硬，具有極好的耐貯性。種子在果實(shí)中發(fā)育成熟，為黃色（圖1）。本試驗(yàn)所用種子為有棱扁籽，呈水滴狀。冬瓜種子形態(tài)基本統(tǒng)一，長約1.15 cm，寬約0.69 cm，厚約0.23 cm。

2.2 種子休眠解除方法

根據(jù)筆者所在課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，冬瓜種子屬于綜合性休眠，種皮機(jī)械束縛和內(nèi)源抑制物是造成休眠的重要原因。對于種皮束縛引起的休眠，通過熱水處理可以軟化種皮，增強(qiáng)種皮透性并浸出部分種內(nèi)萌發(fā)抑制物。內(nèi)源抑制物是由植物種子生產(chǎn)的化學(xué)物質(zhì)，它會(huì)阻礙種子的生理活動(dòng)，通過GA3處理可以平衡種子的內(nèi)源抑制物，刺激種子發(fā)育。通過休眠解除方法的試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證前期研究結(jié)果，為后續(xù)內(nèi)源抑制物的研究提供理論依據(jù)。

2.2.1 熱水對種子萌發(fā)的影響 由表1可知，55 ℃ 和65 ℃處理的冬瓜種子發(fā)芽率顯著高于對照。55 ℃處理后，種子發(fā)芽率最高，達(dá)81.11％。之后依次為65 ℃處理和75 ℃處理，發(fā)芽率分別為80.00％和43.33％。

2.2.2 GA3處理對種子發(fā)芽的影響 由表2可知，冬瓜種子經(jīng)不同濃度GA3和不同時(shí)間處理后，種子發(fā)芽率均有提升。種子經(jīng)過250 mg/L GA3不同時(shí)間處理后，發(fā)芽率均達(dá)到70％以上。250 mg/L GA3處理種子20 min和60 min后，發(fā)芽率分別達(dá)到7111％和80.00％。當(dāng)GA3濃度達(dá)到500 mg/L時(shí)，處理種子30 min和120 min后，發(fā)芽率較對照分別提高5002％和72.22％。1 000 mg/L GA3處理的種子發(fā)芽率隨浸種時(shí)間的增加整體呈升高趨勢，其中，1 000 mg/L GA3浸種120 min后發(fā)芽率最高，達(dá)9444％。

2.3 冬瓜種子不同分離相生物活性測定

2.3.1 各有機(jī)相對白菜種子萌發(fā)的影響 冬瓜種子的種皮和種胚各有機(jī)相對白菜種子萌發(fā)的影響結(jié)果如表3所示。種皮的石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相、水相的浸提液分別使白菜種皮發(fā)芽率較對照降低3.29、36.63、98.85、26.63、13.29百分點(diǎn)，只有石油醚相浸提液處理與對照無顯著差異；種胚的石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相、水相的浸提液使發(fā)芽率降低6.67、64.41、98.85、7577、7.60百分點(diǎn)，石油醚相浸提液處理、水相浸提液處理與對照相比差異不顯著，乙酸乙酯相浸提液處理的白菜種子發(fā)芽率為0。綜上，冬瓜種子的種皮浸提液各分離相的敏感性表現(xiàn)為乙酸乙酯相＞乙醚相＞甲醇相＞水相＞石油醚相，種胚浸提液各分離相的敏感性表現(xiàn)為乙酸乙酯相＞甲醇相＞乙醚相＞水相＞石油醚相。

2.3.2 各有機(jī)相對白菜生長的影響

2.3.2.1 各有機(jī)相對白菜根長的影響 由表4可知，各有機(jī)相對白菜根長抑制作用不同，冬瓜種子的種皮乙酸乙酯相浸提液對白菜根長抑制作用最強(qiáng)，達(dá)到100％。與對照相比，種皮的石油醚相、乙醚相、甲醇相、水相浸提液處理的白菜根長分別降低50.89％、55.38％、46.53％、33.06％。綜上，種皮浸提液各分離相的敏感性表現(xiàn)為乙酸乙酯相＞乙醚相＞石油醚相＞甲醇相＞水相。種胚同樣也是乙酸乙酯相浸提液處理的白菜根長抑制作用最為顯著，其次是甲醇相和石油醚相，白菜根長較對照分別降低62.29％、53.63％，而抑制作用最弱的是水相。對比相同分離相不同部位浸提液可以發(fā)現(xiàn)，除乙醚相外，其余各相的種胚浸提液抑制作用強(qiáng)于種皮浸提液。

2.3.2.2 各有機(jī)相對白菜苗的高影響 由表4可知，冬瓜不同部位有機(jī)相浸提液對白菜苗高生長作用效果不同。然而，各有機(jī)相浸提液較對照均有不同幅度的下降。冬瓜種子種皮的石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相和水相浸提液處理的白菜種子，它們的苗高較對照分別降低33.52％、4378％、100％、34.65％、27.83％，種皮浸提液各分離相的敏感性表現(xiàn)為乙酸乙酯相＞乙醚相＞甲醇相＞石油醚相＞水相。

對于冬瓜種子種胚的浸提液來說，乙酸乙酯相和甲醇相的浸提液顯著抑制白菜苗高生長，白菜苗高較對照分別降低100％和47.34％。與種皮對白菜苗高的影響相比，種胚對白菜苗高的抑制強(qiáng)度高于種皮，說明種胚中的物質(zhì)可能對苗高具有更強(qiáng)的抑制效果。同時(shí)，種皮和種胚浸提液均為乙酸乙酯相抑制作用最強(qiáng)，說明可能含有更多的抑制物存在于乙酸乙酯相中。

在冬瓜種子的種皮和種胚浸提液中，抑制白菜發(fā)芽率、根長和苗高生長排名前3的有機(jī)相主要為乙酸乙酯相、乙醚相和甲醇相，說明這3個(gè)有機(jī)相中的抑制物對植物生長有較強(qiáng)的抑制作用，而抑制物種類和含量則需要進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。

2.4 冬瓜種子各分離相浸提液的GC-MS鑒定

2.4.1 種皮相關(guān)有機(jī)相代謝產(chǎn)物分析 表5為冬瓜種皮中各有機(jī)相提取物的檢測分析結(jié)果。冬瓜種子的種皮乙酸乙酯相抑制作用最強(qiáng)，利用GC-MS技術(shù)，對種皮乙酸乙酯相中的提取物進(jìn)行檢測分析，相對含量較高的有機(jī)化合物有15種。冬瓜種皮乙酸乙酯相中鑒定的有機(jī)化合物種類主要有酮類物質(zhì)1種，仲辛酮（1.15％）；有機(jī)酸類物質(zhì)6種，包括棕櫚酸（12.83％）、十八烷酸（10.62％）、2-羥基丙酸（7.70％）、磷酸鹽（4.12％）、2-羥基戊酸（1.95％）、磷酸（1.29％）；醇類物質(zhì)5種，包括2-羥基吡啶（13.69％）、1，3-丙二醇（6.88％）、丙三醇（4.12％）、正辛醇（1.60％）、麥芽糖醇（1.13％）；脂類物質(zhì)1種，為單硬脂酸甘油酯（2.73％）；烷類物質(zhì)2種，包括十三烷（1.78％）和二十二烷（121％），含量為總峰面積的72.81％。

按照相同的方法對剩下的不同有機(jī)相的提取物進(jìn)行檢測分析。冬瓜種皮石油醚相中鑒定出的化合物以有機(jī)酸類化合物和醇類化合物為主，相對含量最高的6種物質(zhì)為2-羥基吡啶、棕櫚酸、十八烷酸、2-羥基丙酸、磷酸鹽、丙三醇。

冬瓜種皮乙醚相中鑒定的有機(jī)化合物包含有機(jī)酸類物質(zhì)7種、烷類物質(zhì)5種、醇類物質(zhì)5種、酮類物質(zhì)1種、脂類物質(zhì)1種，其中有機(jī)酸類物質(zhì)為棕櫚酸、十八烷酸、2-羥基丙酸、磷酸鹽、2-羥基戊酸等，相對含量39.28％，而脂類物質(zhì)含量僅占2％左右。

冬瓜種皮甲醇相鑒定出有機(jī)化合物22種，主要是有機(jī)酸類物質(zhì)，包括棕櫚酸、十八烷酸、2-羥基丙酸等物質(zhì)，相對含量合計(jì)20.67％。

2.4.2 種胚相關(guān)有機(jī)相代謝產(chǎn)物分析 表6為冬瓜種胚中各有機(jī)相提取物的檢測分析結(jié)果。冬瓜種子的種胚石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相和甲醇相鑒定出相對含量較高的有機(jī)物分別為20、21、16、24種。種胚石油醚相中鑒定的有機(jī)化合物相對含量較高的主要是有機(jī)酸類物質(zhì)（36.91％）和醇類物質(zhì)（24.46％）。其中，酮類物質(zhì)2-羥基吡啶含量最高，占14.60％；其次是棕櫚酸、十八烷酸和2-羥基丙酸，分別占13.37％、11.28％、7.19％。

冬瓜種胚乙醚相中以有機(jī)酸類物質(zhì)和醇類物質(zhì)為主，有機(jī)酸類物質(zhì)主要以棕櫚酸和十八烷酸為主，分別占12.74％、11.11％；醇類物質(zhì)主要以2-羥基吡啶、1，3-丙二醇和丙三醇為主，分別占1086％、4.80％和4.32％。冬瓜種胚乙醚相中提取的有機(jī)物數(shù)量多于種皮。與其他有機(jī)相相比，乙醚相有機(jī)化合物種類有所不同，它對白菜種子發(fā)芽起到的抑制作用僅次于乙酸乙酯相。

冬瓜種胚乙酸乙酯相含量較高的為2-羥基吡啶（12.89％）、棕櫚酸（12.52％）、十八烷酸（1050％）、2-羥基丙酸（7.49％）、1，3-丙二醇（5.63％）、丙三醇（4.50％）、磷酸鹽（4.48％）等。冬瓜種胚乙酸乙酯相含有的有機(jī)化合物種類不多，但對種子萌發(fā)的抑制作用最強(qiáng)，說明影響種子發(fā)芽和植物幼苗生長的抑制物可能多存在于乙酸乙酯相中。

冬瓜種胚甲醇相測定出的抑制物種類略高于其他有機(jī)相，其有機(jī)化合物主要為有機(jī)酸類物質(zhì)（24.98％），還包含糖類物質(zhì)、醇類物質(zhì)和酮類物質(zhì)等。

3 討論與結(jié)論

根據(jù)筆者所在課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，冬瓜種子屬于綜合性休眠，種皮機(jī)械束縛和內(nèi)源抑制物是造成休眠的重要原因。本研究發(fā)現(xiàn)，分別用55 ℃和65 ℃熱水浸泡冬瓜種子30 min，可提高種子發(fā)芽率，這與昌正興等的研究結(jié)果［16］相似。施加GA3會(huì)改變種子內(nèi)部物質(zhì)平衡，從而促進(jìn)種子萌發(fā)。本研究用250、500、1 000 mg/L GA3對冬瓜種子進(jìn)行不同時(shí)間的處理后，種子發(fā)芽率顯著提高，其中 1 000 mg/L GA3浸種120 min后種子發(fā)芽率最高。

系統(tǒng)溶劑分離法是常用于內(nèi)源抑制物研究的方法。鄒雨婷等采用該方法分離出綠山楂種子5個(gè)有機(jī)相并對其生物活性進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)乙醚相和甲醇相的抑制效果大于其他各有機(jī)相［20］。朱銘瑋等對丹鳳牡丹種皮和種胚的浸提液進(jìn)行分離，發(fā)現(xiàn)種皮和種胚的乙醚相、甲醇相及種皮的乙酸乙酯相對白菜抑制效果最強(qiáng)［12］。楊治華等研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)源抑制物是導(dǎo)致池杉種子休眠的主要原因，種皮的抑制物主要存在于石油醚相中［21］。本研究對冬瓜種子各部位甲醇粗提液進(jìn)一步分離后得到石油醚相、乙醚相、乙酸乙酯相、甲醇相和水相5個(gè)分離相，發(fā)現(xiàn)各有機(jī)相浸提液對白菜種子萌發(fā)和幼苗生長存在不同程度的抑制作用。綜合白菜發(fā)芽率和幼苗生長結(jié)果，認(rèn)為種皮和種胚的乙酸乙酯相、甲醇相和乙醚相的浸提液存在顯著的抑制作用，種胚甲醇相和乙醚相浸提液的抑制效果強(qiáng)于種皮，且3種浸提液對白菜幼苗根長的抑制效應(yīng)大于苗高，這與李櫻花等的研究結(jié)果［22-23］相似。

13世紀(jì)初，Albertus Magus發(fā)現(xiàn)種子延遲發(fā)芽與內(nèi)源抑制物有關(guān)。此后，國內(nèi)外學(xué)者對植物萌發(fā)抑制物展開了多方面的研究。Hoffmamn第1次從歐洲花楸果實(shí)中分離出有較強(qiáng)萌發(fā)抑制作用的花楸酸。王艷華在大山櫻的研究中發(fā)現(xiàn)，棕櫚酸、苯甲酸等是抑制種子休眠的重要物質(zhì)［24］。王浩宇等在關(guān)于加拿大紫荊種子內(nèi)源抑制物的研究中發(fā)現(xiàn)，鄰苯三酚可能是引起種子休眠的主要抑制物［25］。本研究在冬瓜種子的種皮、種胚分離出的不同有機(jī)相中分別發(fā)現(xiàn)34、39種有機(jī)化合物，包含有機(jī)酸類、醇類等較多種類的物質(zhì)。在抑制作用較強(qiáng)的乙酸乙酯相、甲醇相和乙醚相中，有機(jī)酸類物質(zhì)相對含量較高，而有機(jī)酸類也是已知的內(nèi)源抑制物質(zhì)。如韓寶瑞等對西洋參果肉中發(fā)芽抑制物的研究發(fā)現(xiàn)，乙酸等6種物質(zhì)對白菜發(fā)芽具有抑制作用［26］。張艷杰在南方紅豆杉種子休眠機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn)，十八烷酸、庚酸等物質(zhì)的抑制作用隨著濃度增大而增強(qiáng)［27］。

本研究表明，冬瓜種子具有內(nèi)源抑制物，各部位的分離相對白菜種子萌發(fā)和幼苗生長均產(chǎn)生了抑制作用，其中乙酸乙酯相、甲醇相和乙醚相3個(gè)有機(jī)相的抑制作用較強(qiáng)。經(jīng)GC-MS分析發(fā)現(xiàn)，冬瓜種子的種皮和種胚中存在不同種類的有機(jī)化合物，主要為有機(jī)酸類、醇類等物質(zhì)。

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