TP53INP2和SLCO2A1與分化型甲狀腺癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系

[摘要]"目的"探討腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)的核蛋白2（tumor"protein"p53"inducible"nuclear"protein"2，TP53INP2）和溶質(zhì)載體有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員2A1（solute"carrier"organic"anion"transporter"family"member"2A1，SLCO2A1）在分化型甲狀腺癌（differentiated"thyroid"carcinoma，DTC）中的表達(dá)及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。方法"選取2024年3月至5月于南京醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院行甲狀腺癌根治術(shù)的DTC患者80例，比較TP53INP2和SLCO2A1在DTC患者的癌組織、癌旁組織及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)，分析其與DTC患者臨床病理特征之間的關(guān)系。從癌癥基因組圖譜（The"Cancer"Genome"Atlas，TCGA）數(shù)據(jù)庫下載正常人甲狀腺和DTC組織的表達(dá)矩陣、臨床病理參數(shù)及預(yù)后資料，使用R軟件進(jìn)行基因集變異分析（gene"set"variation"analysis，GSVA），分析GSVA評分與DTC患者臨床病理特征及預(yù)后之間的關(guān)系。采用Kaplan-Meier法分析基因集GSVA評分與DTC患者無進(jìn)展生存（progress"free"survive，PFS）之間的關(guān)系。采用Cox單因素及多因素分析探討影響DTC患者預(yù)后的因素。結(jié)果"DTC患者癌組織及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的TP53INP2和SLCO2A1表達(dá)顯著降低（Plt;0.05）。GSVA評分與腫瘤侵襲、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和病理類型顯著相關(guān)（Plt;0.05）。GSVA評分低的DTC患者的PFS率顯著低于GSVA評分高者（P=0.002）。Cox多因素分析結(jié)果顯示腫瘤侵襲及GSVA評分低均是導(dǎo)致DTC患者預(yù)后不良的獨(dú)立影響因素（Plt;0.05）。結(jié)論"TP53INP2和SLCO2A1在DTC組織中表達(dá)降低，其表達(dá)降低與腫瘤侵襲、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后有關(guān)，或可成為DTC患者預(yù)后判斷的潛在靶點(diǎn)。

[關(guān)鍵詞]"TP53INP2；SLCO2A1；分化型甲狀腺癌；臨床病理特征

[中圖分類號]"R736.1""""""[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]"A""""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.34.008

Relationship"between"TP53INP2"and"SLCO2A1"with"clinicopathological"features"and"prognosis"of"differentiated"thyroid"carcinoma

WANG"Shijia，"WU"Wenze

Department"of"Thyroid"Surgery，"the"Third"Affiliated"Hospital"of"Nanjing"Medical"University，"Changzhou"213000"Jiangsu，"China

[Abstract]"Objective"To"investigate"the"expression"of"tumor"protein"p53"inducible"nuclear"protein"2"（TP53INP2）"and"solute"carrier"organic"anion"transporter"family"member"2A1"（SLCO2A1）"in"differentiated"thyroid"carcinoma"（DTC）"and"their"relationship"with"clinicopathological"features"and"prognosis."Methods"A"total"of"80"DTC"patients"who"underwent"radical"thyroidectomy"in"the"Third"Affiliated"Hospital"of"Nanjing"Medical"University"from"March"to"May"2024"were"selected."The"expression"of"TP53INP2"and"SLCO2A1"in"cancer"tissue，"paracancer"tissue"and"lymph"node"metastasis"tissue"of"DTC"patients"were"compared，"and"the"relationship"between"TP53INP2"and"SLCO2A1"with"clinicopathologic"features"of"DTC"patients"were"analyzed."Expression"matrix，"clinicopathological"parameters"and"prognostic"data"of"normal"thyroid"and"DTC"tissues"were"downloaded"from"The"Cancer"Genome"Atlas"（TCGA）"database，"and"gene"set"variation"analysis"（GSVA）"was"performed"using"R"software."The"relationship"between"GSVA"score"and"clinicopathological"features"and"prognosis"of"DTC"patients"was"analyzed."Kaplan-Meier"method"was"used"to"analyze"the"relationship"between"gene"set"GSVA"score"and"progress"free"survival"（PFS）"in"DTC"patients."Cox"univariate"and"multivariate"analysis"was"used"to"investigate"the"factors"affecting"the"prognosis"of"DTC"patients."Results"The"expressions"of"TP53INP2"and"SLCO2A1"in"cancer"tissues"and"lymph"node"metastasis"tissues"of"DTC"patients"were"significantly"decreased"（Plt;0.05）."GSVA"score"was"significantly"correlated"with"tumor"invasion，"lymph"node"metastasis，"distant"metastasis"and"pathological"type"（Plt;0.05）."The"PFS"rate"of"DTC"patients"with"low"GSVA"score"was"significantly"lower"than"that"of"those"with"high"GSVA"score"（Plt;0.05）."Cox"multifactor"analysis"showed"that"tumor"invasion"and"low"GSVA"score"were"independent"factors"leading"to"poor"prognosis"in"DTC"patients"（Plt;0.05）."Conclusion"The"expression"of"TP53INP2"and"SLCO2A1"is"decreased"in"DTC"tissues，"which"is"associated"with"tumor"invasion，"lymph"node"metastasis，"distant"metastasis"and"poor"prognosis，"and"may"be"a"potential"target"for"prognostic"judgment"in"DTC"patients.

[Key"words]"TP53INP2;"SLCO2A1;"Differentiated"thyroid"carcinoma;"Clinicopathological"feature

甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤之一[1]。根據(jù)病理學(xué)特征甲狀腺癌可分為乳頭狀癌、濾泡癌、髓樣癌及未分化癌；乳頭狀癌和濾泡癌合稱分化型甲狀腺癌（differentiated"thyroid"carcinoma，DTC），約占所有甲狀腺癌患者的85%～90%。手術(shù)是DTC的主要治療方式，手術(shù)后大部分患者預(yù)后良好[2-3]。局部晚期甲狀腺癌占所有DTC患者的5%左右，是DTC患者死亡的主要原因之一[4-5]。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是DTC患者復(fù)發(fā)的主要因素之一，60%～75%的DTC患者因淋巴轉(zhuǎn)移而導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)[6-8]。DTC患者局部進(jìn)展或淋巴轉(zhuǎn)移的機(jī)制尚不清楚。本研究擬探討腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)的核蛋白2（tumor"protein"p53"inducible"nuclear"protein"2，TP53INP2）和溶質(zhì)載體有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員2A1（solute"carrier"organic"anion"transporter"family"member"2A1，SLCO2A1）在DTC組織中的表達(dá)情況，分析其與DTC患者臨床病理特征及無進(jìn)展生存（progress"free"survive，PFS）的關(guān)系，旨在為闡明TP53INP2和SLCO2A1在DTC發(fā)生發(fā)展中的作用提供理論依據(jù)。

1""資料與方法

1.1""一般資料

選取2024年3月至5月于南京醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院行甲狀腺癌根治術(shù)的DTC患者80例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)后病理確診為DTC；②臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前未經(jīng)化療、放療或免疫治療；②伴有其他惡性腫瘤或其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病。患者男16例，女64例；年齡21～76歲。所有患者均對本研究知情同意并簽署知情同意書，本研究經(jīng)南京醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)（倫理審批號：[2024]KY013-01）。

1.2""TP53INP2和SLCO2A1"mRNA表達(dá)檢測

各取凍存標(biāo)本50mg，剪碎研磨，利用FreeZol"Reagent試劑盒（Vazyme，江蘇南京）提取總RNA，再逆轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)DNA。以互補(bǔ)DNA為模板進(jìn)行實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（realtime"fluorescence"quantitative"polymerase"chain"reaction，RT-qPCR）檢測每例樣本中TP53INP2、SLCO2A1的mRNA表達(dá)量。引物序列：TP53INP2-F：TTCGTGTCGGAGGAGG"ATGAAG，TP53INP2-R：AACCAGCTCTCGTCCAT"CAAGG；SLCO2A1-F：TCAAGAGGCTCCCTGGTG"GATT，SLCO2A1-R：CAGCAATGACGGAGGAGA"AGGT。內(nèi)參基因GAPDH的引物序列：GAPDH-F：GTCTCCTCTGACTTCAACAGCG，GAPDH-R：ACC"ACCCTGTTGCTGTAGCCAA。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.3""生物信息數(shù)據(jù)庫

從癌癥基因組圖譜（The"Cancer"Genome"Atlas，TCGA）數(shù)據(jù)庫中下載正常人甲狀腺和DTC組織的表達(dá)矩陣及臨床和預(yù)后資料，分析TP53INP2和SLCO2A1表達(dá)量與臨床病理特征及預(yù)后之間的關(guān)系。將TP53INP2和SLCO2A1定義為一個基因集，使用R軟件進(jìn)行基因集變異分析（gene"set"variation"analysis，GSVA），對TCGA數(shù)據(jù)庫中每個樣本進(jìn)行評分，分析基因集評分與臨床病理特征及預(yù)后之間的關(guān)系。

1.4""統(tǒng)計學(xué)方法

采用Prism"9軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（"）表示，比較采用獨(dú)立t檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M（Q1，Q3）]表示，比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)；計數(shù)資料以例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。采用Kaplan-Meier法分析基因表達(dá)水平對DTC患者PFS的影響；采用log-rank檢驗(yàn)進(jìn)行生存率比較；采用Cox比例風(fēng)險模型分析影響DTC患者預(yù)后的危險因素。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2""結(jié)果

2.1""TP53INP2、SLCO2A1的mRNA表達(dá)情況及與臨床病理特征的關(guān)系

癌組織中TP53INP2、SLCO2A1的mRNA表達(dá)顯著低于癌旁組織，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中TP53INP2、SLCO2A1的mRNA表達(dá)均顯著低于癌組織（Plt;0.05），見圖1。根據(jù)TP53INP2、SLCO2A1的mRNA表達(dá)量的中位數(shù)將患者分為低表達(dá)組和高表達(dá)組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TP53INP2"mRNA表達(dá)水平與腫瘤大?。≒=0.022）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（Plt;0.001）及腫瘤分期（P=0.038）相關(guān)；SLCO2A1"mRNA表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（Plt;0.001）、腫瘤部位（P=0.010）及腫瘤分期（P=0.019）相關(guān)，見表1。

2.2""TCGA數(shù)據(jù)庫中TP53INP2、SLCO2A1及基因集的mRNA表達(dá)情況及與臨床病理特征的關(guān)系

TP53INP2、SLCO2A1及基因集的mRNA在DTC癌組織、T3/T4期癌組織、合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織、高細(xì)胞型癌組織中的表達(dá)顯著降低（Plt;0.05），見圖2～圖5?；蚣治鼋Y(jié)果顯示，GSVA評分與腫瘤侵襲（Plt;0.001）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（Plt;0.001）、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（P=0.048）和病理類型（Plt;0.001）顯著相關(guān)，見表2。根據(jù)表達(dá)水平中位數(shù)將患者分為低表達(dá)組（246例）和高表達(dá)組（245例）。TP53INP2"mRNA表達(dá)水平與腫瘤侵襲（P=0.006）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（Plt;0.001）、病理類型（Plt;0.001）顯著相關(guān)，SLCO2A1"mRNA表達(dá)水平與腫瘤侵襲（Plt;0.001）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（Plt;0.001）、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（P=0.042）、病理類型（Plt;0.001）顯著相關(guān)，見表3。

2.3""TP53INP2、SLCO2A1及基因集與DTC患者PFS的關(guān)系

TP53INP2和SLCO2A1低表達(dá)組患者的PFS率顯著低于高表達(dá)組（Plt;0.05），GSVA評分低的DTC患者的PFS率顯著低于GSVA評分高者（P=0.002），見圖6。

2.4""影響DTC預(yù)后的危險因素分析

單因素分析顯示年齡（P=0.038）、腫瘤侵襲程度（P=0.001）、SLCO2A1表達(dá)（P=0.008）和GSVA評分（P=0.003）均是DTC患者PFS的影響因素。多因素分析結(jié)果顯示腫瘤侵襲（P=0.015）及GSVA評分低（P=0.016）均是導(dǎo)致DTC患者預(yù)后不良的獨(dú)立影響因素，見表4。

3""討論

局部晚期甲狀腺癌是指腫瘤明顯侵犯周圍器官及結(jié)構(gòu)的甲狀腺癌[9]。由于DTC對放化療不敏感，因此局部晚期DTC的治療仍以手術(shù)治療為主，R0切除對患者生存預(yù)后至關(guān)重要。與R2切除相比，R0切除可顯著延長患者的生存期，降低局部復(fù)發(fā)率。而R1切除術(shù)的患者，術(shù)后通過131I治療也可獲得良好的預(yù)后[9-10]。DTC的手術(shù)切除范圍包括原發(fā)腫瘤及轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)[11]。臨床上經(jīng)常進(jìn)行預(yù)防性頸淋巴結(jié)清掃以減少轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)[12-13]。研究表明廣泛開展預(yù)防性中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)清掃可導(dǎo)致甲狀旁腺功能損傷、喉返神經(jīng)損傷等并發(fā)癥[14-16]。因此，篩選出與DTC腫瘤侵襲或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子，將有助于合理

指導(dǎo)手術(shù)方案，使患者獲得一個更好的預(yù)后。

TP53INP2在骨骼肌和心臟等胰島素敏感組織中大量表達(dá)[17-18]。TP53INP2是一種具有雙重功能的蛋白，可調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄并增強(qiáng)饑餓誘導(dǎo)的自噬[19]。SLCO2A1是一種由12個跨膜結(jié)構(gòu)域組成的血漿膜轉(zhuǎn)運(yùn)體，主要定位于環(huán)氧合酶陽性的細(xì)胞[20]。TP53INP2和SLCO2A1在結(jié)直腸癌、膀胱癌、肺癌等腫瘤中被證實(shí)與腫瘤的發(fā)展或侵襲相關(guān)[21-23]。

本研究探討TP53INP2和SLCO2A1在DTC中的表達(dá)情況及其與DTC臨床病理特征之間的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)TP53INP2和SLCO2A1在癌組織及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中表達(dá)較低，TP53INP2表達(dá)與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分期相關(guān)，而SLCO2A1表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤部位及腫瘤分期相關(guān)。通過TCGA數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)，GSVA評分與腫瘤侵襲、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、病理類型和PFS相關(guān)。多因素分析結(jié)果顯示腫瘤侵襲和GSVA評分低均是導(dǎo)致DTC患者預(yù)后不良的獨(dú)立影響因素。

綜上所述，TP53INP2和SLCO2A1在DTC組織中表達(dá)降低，其表達(dá)降低與腫瘤侵襲、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后有關(guān)，或可成為DTC患者預(yù)后判斷的潛在靶點(diǎn)。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2024–09–21）

（修回日期：2024–11–08）