絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者血清miR-27b-3p的表達(dá)及意義

[摘要]"目的"探討絕經(jīng)后女性血清miR-27b-3p與Ⅰ型前膠原氨基端前肽（N-terminal"propeptide"of"type"Ⅰ"procollagen，PINP）和Ⅰ型膠原C末端肽1（C-terminal"telopeptide"of"typeⅠcollagen"1，CTX-1）的相關(guān)性。方法"選取2022年2月至2023年2月于浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院就診的49例絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者為研究對象，根據(jù)測得T值將其分為骨質(zhì)疏松（osteoporosis，OP）組（T≤–2.5SD，26例）和骨量減少（osteopenia，OPn）組（–2.5SDlt;Tlt;–1.0SD，23例）。檢測并比較兩組患者的血清miR-27b-3p、PINP、CTX-1表達(dá)水平，分析血清P1NP和CTX-1與miR-27b-3p的相關(guān)性。結(jié)果"OP組患者的血清miR-27b-3p、PINP/CTX-1水平均顯著低于OPn組，PINP和CTX-1水平均顯著高于OPn組（Plt;0.05）；Pearson分析結(jié)果顯示，血清PINP和CTX-1水平與miR-27b-3p均呈負(fù)相關(guān)（Plt;0.05），PINP/CTX-1與miR-27b-3p呈正相關(guān)（Plt;0.05）。結(jié)論"血清miR-27b-3p水平可作為絕經(jīng)后女性骨形成的潛在標(biāo)志物。

[關(guān)鍵詞]"miR-27b-3p；骨代謝；絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松；Ⅰ型前膠原氨基端前肽；Ⅰ型膠原C末端肽1

[中圖分類號(hào)]"R274.9""""""[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]"A""""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.34.001

Expression"and"significance"of"serum"miR-27b-3p"in"patients"with"postmenopausal"osteoporosis

YE"Baisheng1，"YUAN"Yifeng2，"ZHOU"Hang1，"HUANG"Zhen1，"HUANG"Xudong1，"LI"Jinkun1，"SHI"Xiaolin2，"TANG"Binbin2

1.The"Second"School"of"Clinical"Medicine，"Zhejiang"Chinese"Medical"University，"Hangzhou"310053，"Zhejiang，"China;nbsp;2.Department"of"Orthopedics，"the"Second"Affiliated"Hospital，"Zhejiang"Chinese"Medical"University，"Hangzhou"310000，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"investigate"the"correlation"between"serum"miR-27b-3p"and"N-terminal"propeptide"of"type"Ⅰ"procollagen"（PINP）"and"C-terminal"telopeptide"of"typeⅠcollagen"1"（CTX-1）"in"postmenopausal"women."Methods"Forty-nine"patients"with"postmenopausal"osteoporosis"treated"in"the"Second"Affiliated"Hospital，"Zhejiang"Chinese"Medical"University"from"February"2022"to"February"2023"were"selected"as"study"objects."They"were"divided"into"osteoporosis"（OP）"group"（T≤–2.5SD，"26"cases）"and"osteopenianbsp;（OPn）"group"（–2.5SD"lt;"T"lt;"–1.0SD，"23"cases）."The"expression"levels"of"serum"miR-27b-3p，"PINP"and"CTX-1"in"two"groups"were"detected"and"compared，"and"the"correlation"between"serum"P1NP"and"CTX-1"and"miR-27b-3p"was"analyzed."Results"The"levels"of"serum"miR-27b-3p"and"PINP/CTX-1"in"OP"group"were"significantly"lower"than"those"in"OPn"group，"and"the"levels"of"PINP"and"CTX-1"were"significantly"higher"than"those"in"OPn"group"（Plt;0.05）."Pearson"analysis"showed"that"serum"PINP"and"CTX-1"levels"were"negatively"correlated"with"miR-27b-3p"（Plt;0.05），"while"PINP/CTX-1"was"positively"correlated"with"miR-27b-3p"（Plt;0.05）."Conclusion"Serum"miR-27b-3p"levels"may"serve"as"a"potential"marker"for"bone"formation"in"postmenopausal"women.

[Key"words]"miR-27b-3p;"Bone"metabolism;"Postmenopausal"osteoporosis;"N-terminal"propeptide"of"type"Ⅰ"procollagen;"C-terminal"telopeptide"of"type"Ⅰ"collagen"1

絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松（postmenopausal"osteoporosis，PMOP）主要是由于女性卵巢功能衰退，雌激素缺乏，成骨細(xì)胞（osteoblast，OB）和破骨細(xì)胞（osteoclast，OC）的骨代謝紊亂所致[1-2]。研究表明中醫(yī)藥可通過多種信號(hào)通路同時(shí)調(diào)控OC和OB分化，改善骨代謝紊亂，防治PMOP[3-4]。雙能X射線吸收法是目前公認(rèn)的診斷骨質(zhì)疏松（osteoporosis，OP）的金標(biāo)準(zhǔn)，而骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物可更早反映骨轉(zhuǎn)換的動(dòng)態(tài)[5]。骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物分為骨形成標(biāo)志物和骨吸收標(biāo)志物，國際骨質(zhì)疏松基金會(huì)首推Ⅰ型前膠原氨基端前肽（N-terminal"propeptide"of"type"Ⅰ"procollagen，PINP）和Ⅰ型膠原C末端肽（C-terminal"telopeptide"of"type"Ⅰ"collagen，CTX）這兩項(xiàng)指標(biāo)[6]。PINP可監(jiān)控OP的治療效果，其檢測結(jié)果不受激素干擾[7]。CTX作為骨吸收標(biāo)志物對OP有顯著的預(yù)測作用[8]。一系列微RNA（microRNA，miRNA）已被證實(shí)與骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物中的PINP和CTX存在相關(guān)性[9-10]。研究發(fā)現(xiàn)OC來源外泌體（osteoclast"derived"exosome，OC-Exo）內(nèi)miR-214-3p水平升高可抑制OB分化[11]。Tang""""等[12]報(bào)道OB來源外泌體內(nèi)的miR-433-3p可抑制Dickkopf-1蛋白表達(dá)以促進(jìn)OB分化。筆者前期研究發(fā)現(xiàn)miR-27b-3p可抑制OB內(nèi)Dickkopf-1蛋白表達(dá)來促進(jìn)成骨分化，強(qiáng)骨飲含藥血清可上調(diào)OC-Exo內(nèi)miR-27b-3p表達(dá)，減弱OC-Exo對OB的抑制作用[13]。為更好地將研究結(jié)果轉(zhuǎn)化到臨床實(shí)踐，本研究觀察絕經(jīng)后女性血清miR-27b-3p水平與骨代謝指標(biāo)的相關(guān)性，探討miR-27b-3p是否可作為PMOP的參考標(biāo)志物。

1""資料與方法

1.1""試劑和儀器

1.1.1""試劑""Trizol試劑（Invitrogen，上海，15596026），PINP酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme"linked"immunosorbent"assay，ELISA）試劑盒（mlbio，上海，ml038554），人CTX-1"ELISA試劑盒（mlbio，上海，ml028171），血清總RNA提取試劑盒（mlbio，上海，ml095275），RevertAid"First"Strand"cDNA"Synthesis"Kit（Thermo，上海，K1622），SYBR"Green"qPCR"Master（Roche，上海，4943914001-SR）。

1.1.2""儀器""pH計(jì)（Metter-Toledo"GmbH，LP115），電子天平（北京賽多利斯，CPA），磁力攪拌器（江蘇中大，T8-1），酶標(biāo)儀（Thermo，mμ1ISKANMK3），離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室，HI650），全自動(dòng)酶標(biāo)儀（Thermo"scientific，Multiskan"MK3），多功能電熱鍋（廣州PHEPELI，CRJ-130D-1）。

1.2""研究方法

1.2.1""臨床血清標(biāo)本收集""選取2022年2月至2023年2月于浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院就診的絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者為研究對象。參照世界衛(wèi)生組織推薦的OP診斷標(biāo)準(zhǔn)，通過雙能X射線吸收法測量患者T1～T4椎體骨密度，根據(jù)中國人正常參考值計(jì)算T值，4個(gè)椎體骨密度T值取平均值，若T≥–1.0SD屬正常；若–2.5SDlt;Tlt;–1.0SD為骨量減少（osteopenia，OPn）；若T≤–2.5SD為OP；T≤–2.5SD且伴有骨折者為嚴(yán)重OP。納入標(biāo)準(zhǔn)：①絕經(jīng)后女性，年齡51～91歲；②雙能X線骨密度儀（法國MEDILINK，MEDIXDR）測量髖部及腰部骨密度結(jié)果提示OP或OPn；③對本研究方案知曉并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近5年內(nèi)患有糖尿病、冠心病、惡性腫瘤及其他嚴(yán)重疾病者；②長期服用激素者；③拒絕采血者。研究共納入49例患者，根據(jù)測得T值將其分為OP組（T≤–2.5SD，26例）和OPn組（–2.5SDlt;Tlt;–1.0SD，23例）。本研究經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院倫理委員會(huì)審查并備案（倫理審批號(hào)：浙中醫(yī)大二院倫審2022研第043號(hào)-01）。

1.2.2""聚合酶鏈反應(yīng)""采集患者清晨空腹靜脈血2～3ml，離心，取上清液–80℃保存?zhèn)溆谩Ｍㄟ^血清總RNA提取試劑盒提取血清RNA。通過Quantus"Fluorometer測定RNA濃度。通過RevertAid"First"Strand"cDNA"Synthesis"Kit進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，然后將互補(bǔ)DNA通過SYBR"Green"qPCR"Master進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)，最后通過2-ΔΔCt計(jì)算相對水平。引物序列見表1。

1.2.3""ELISA檢測""分別采用PINP"ELISA試劑盒和CTX-1"ELISA試劑盒檢測血清PINP和CTX-1含量。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔。標(biāo)準(zhǔn)品孔加標(biāo)準(zhǔn)品50μl，空白孔加入50μl樣品稀釋液，樣本孔中加樣品稀釋液40μl及樣品10μl。用封板膜封板后置37℃溫育30min。棄液甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30s后棄去，重復(fù)5次，拍干。之后每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。用封板膜封板后置37℃溫育30min。洗滌，每孔加入顯色劑A"50μl，再加入顯色劑B"50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15min。最后每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)?？瞻卓渍{(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。

1.3""統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS"22.0和Prism"9軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料符合正態(tài)分布的以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（"）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；采用Pearson法分析數(shù)據(jù)相關(guān)性。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2""結(jié)果

2.1""兩組患者的血清miR-27b-3p水平比較

OP組患者的血清miR-27b-3p水平顯著低于OPn組（Plt;0.05），見圖1。

2.2""兩組患者的血清PINP和CTX-1水平比較

OP組患者的血清PINP和CTX-1水平均顯著高于OPn組（Plt;0.05），見圖2。

2.3""血清PINP和CTX-1水平與miR-27b-

3p的相關(guān)性分析

Pearson分析結(jié)果顯示，血清PINP和CTX-1水平與miR-27b-3p均呈負(fù)相關(guān)（Plt;0.05），見圖3。

2.4""血清PINP/CTX-1與miR-27b-3p的相關(guān)性分析

OPn組患者的PINP/CTX-1水平顯著高于OP組（Plt;0.05），提示OPn組患者具有成骨分化能力。Pearson分析結(jié)果顯示，PINP/CTX-1與miR-27b-3p呈正相關(guān)（Plt;0.05），見圖4。

3""討論

本研究對血清骨代謝標(biāo)志物PINP和CTX-1與miR-27b-3p進(jìn)行相關(guān)性分析。PINP反映成骨細(xì)胞合成骨的能力，不易受晝夜節(jié)律、飲食的影響，在靜脈穿刺后的血清中非常穩(wěn)定[14]。PINP可監(jiān)控OP的治療效果，判斷是否需要繼續(xù)或重啟抗OP治療[15]。CTX-1則必須在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集，其水平反映OC的骨吸收活性[14]。

近年來，對骨代謝或骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物與骨密度值、成骨或破骨活性因子的相關(guān)報(bào)道較多。本研究結(jié)果顯示miR-27b-3p表達(dá)水平間接反映成骨分化能力，通過與OPn患者比較，發(fā)現(xiàn)OP患者血清miR-27b-3p水平明顯更低。相關(guān)性分析提示miR-27b-3p與破骨分化標(biāo)志物和成骨分化標(biāo)志物均呈負(fù)相關(guān)，符合PMOP女性骨代謝異常的表現(xiàn)。研究報(bào)道PMOP患者的血清β-CTX、PINP水平較高[16-17]；束婷婷[18]"發(fā)現(xiàn)血清25羥維生素D水平降低及抗酒石酸酸性磷酸酶5b、PINP、β-CTX水平升高可能是發(fā)生PMOP的影響因素。PMOP患者血清內(nèi)骨硬化蛋白水平與PINP、β-CTX呈正相關(guān)，提示PMOP患者的wnt/β-"catenin通路被抑制[19-20]。Mosti等[21]發(fā)現(xiàn)力量訓(xùn)練可提高PMOP患者骨量，PINP/CTX-1升高提示骨形成。

然而PINP和CTX無法反映骨細(xì)胞活動(dòng)或骨膜沉積，且不能反映骨組織的質(zhì)量[22]。隨著技術(shù)的進(jìn)步，miRNA可能成為骨代謝的新型標(biāo)志物。近年來，研究報(bào)道m(xù)iRNA作為骨代謝標(biāo)志物具有臨床意義，miRNA可調(diào)節(jié)骨形成和骨吸收，有助于維持骨穩(wěn)態(tài)，參與細(xì)胞骨重塑[23]。異常的miRNA信號(hào)傳導(dǎo)可導(dǎo)致OP發(fā)生和發(fā)展[23-24]。骨代謝相關(guān)的miRNA在診斷PMOP中的作用初步體現(xiàn)，如hsa-miR-144-5p、hsa-miR-506-3p和hsa-miR-8068等可用作骨代謝的新型生物標(biāo)志物，參與骨代謝[25]。Perksanusak等[26]發(fā)現(xiàn)PMOP患者血清miR-21與骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物無關(guān)，但與骨密度水平呈正相關(guān)。參考Perksanusak等的研究，何至等[16]發(fā)現(xiàn)血清miR-21表達(dá)與血清β-CTX、PINP水平均呈負(fù)相關(guān)，miR-21參與PMOP的發(fā)生、發(fā)展。鮑鋒元等[27]報(bào)道PMOP組的miRNA-17/92a基因簇含量顯著低于OPn組和對照組，血清PINP、β-CTX水平顯著高于OPn組和對照組。miRNA-"17/92a基因簇與PINP和β-CTX均呈顯著負(fù)相關(guān)。Ramírez-Salazar等[28]對754個(gè)miRNA進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)miR-140-3p和miR-23b-3p可作為PMOP的潛在標(biāo)志物。Lu等[29]報(bào)道m(xù)iR-206/HDAC4通過調(diào)控OC增殖和凋亡，可作為新的診斷標(biāo)志物。Pepe等[30]通過觀察絕經(jīng)后OP、OPn和健康女性體內(nèi)細(xì)胞外泌體數(shù)量和質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)OP患者的OC-Exo數(shù)量增加，間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化水平減弱。

綜上，PMOP患者血清miR-27b-3p水平降低，其可作為絕經(jīng)后女性骨形成的潛在標(biāo)志物。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻(xiàn)]

[1] LEVIN"V"A，"JIANG"X，"KAGAN"R."Estrogen"therapy"for"osteoporosis"in"the"modern"era[J]."Osteoporos"Int，"2018，"29（5）："1049–1055.

[2] 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)."絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥（骨痿）中醫(yī)藥診療指南（2019年版）[J]."中醫(yī)正骨，"2020，"32（2）："1–13.

[3] TELLA"S"H，"GALLAGHER"J"C."Prevention"and"treatment"of"postmenopausal"osteoporosis[J]."J"Steroid"Biochem"Mol"Biol，"2014，"142："155–170.

[4] LIN"J，"ZHU"J，"WANG"Y，"et"al."Chinese"single"herbs"and"active"ingredients"for"postmenopausal"osteoporosis："From"preclinical"evidence"to"action"mechanism[J]."Biosci"Trends，"2017，"11（5）："496–506.

[5] 田琳琳，"馮正平."骨轉(zhuǎn)換生化標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J]."中國骨質(zhì)疏松雜志，"2022，"28（5）："755–759.

[6] 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)."骨質(zhì)疏松性骨折中醫(yī)診療指南[J]."中醫(yī)正骨，"2023，"35（1）："1–9.

[7] KREGE"J"H，"LANE"N"E，"HARRIS"J"M，"et"al."PINP"as"a"biological"response"marker"during"teriparatide"treatment"for"osteoporosis[J]."Osteoporos"Int，"2014，"25（9）："2159–2171.

[8] 翁睿，"李峰."骨轉(zhuǎn)換生化標(biāo)志物預(yù)測骨質(zhì)疏松性骨折的研究進(jìn)展[J]."老年醫(yī)學(xué)研究，"2023，"4（3）："53–56.

[9] KOCIJAN"R，"MUSCHITZ"C，"GEIGER"E，"et"al."Circulating"microRNA"signatures"in"patients"with"idiopathic"and"postmenopausal"osteoporosis"and"fragility"fractures[J]."J"Clin"Endocrinol"Metab，"2016，"101（11）："4125–4134.

[10] ZARECKI"P，"HACKL"M，"GRILLARI"J，"et"al."Serum"microRNAs"as"novel"biomarkers"for"osteoporotic"vertebral"fractures[J]."Bone，"2020，"130："115105.

[11] LI"D，"LIU"J，"GUO"B，"et"al."Osteoclast-derived"exosomal"miR-214-3p"inhibits"osteoblastic"bone"formation[J]."Nat"Commun，"2016，"7："10872.

[12] TANG"X，"LIN"J，"WANG"G，"et"al."MicroRNA-433-3p"promotes"osteoblast"differentiation"through"targeting"DKK1"expression[J]."PLoS"One，"2017，"12（6）："e0179860.

[13] 唐彬彬，"劉康，"吳連國，"等."強(qiáng)骨飲調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞外泌體影響成骨細(xì)胞分化的初步研究[J]."中國骨質(zhì)疏松雜志，"2020，"26（11）："1598–1603.

[14] SZULC"P，"NAYLOR"K，"HOYLE"N"R，"et"al."Use"of"CTX-1"and"PINP"as"bone"turnover"markers："National"Bone"Health"Alliance"recommendations"to"standardize"sample"handling"and"patient"preparation"to"reduce"pre-analytical"variability[J]."Osteoporos"Int，"2017，"28（9）："2541–2556.

[15] GILLETT"M"J，"VASIKARAN"S"D，"INDERJEETH"C"A."The"role"of"PINP"in"diagnosis"and"management"of"metabolic"bone"disease[J]."Clin"Biochem"Rev，"2021，"42（1）："3-10.

[16] 何至，"顏端國，"嚴(yán)林."絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患者血清miR-21和Smad7表達(dá)變化及其臨床意義[J]."山東醫(yī)藥，"2022，"62（1）："67–69，"77.

[17] WEN"Y，"LI"H，"ZHANG"X，"et"al."Correlation"of"osteoporosis"in"patients"with"newly"diagnosed"type"2"diabetes："A"retrospective"study"in"Chinese"population[J]."Front"Endocrinol"（Lausanne），"2021，"12："531904.

[18] 束婷婷."血清25羥維生素D、TRACP-5b、PINP、β-CTX在絕經(jīng)期骨質(zhì)疏松病人中的檢測意義[J]."實(shí)用老年醫(yī)學(xué)，"2022，"36（12）："1273–1276.

[19] 梁升，"李俊輝，"申晟."絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥婦女血清骨硬化蛋白、護(hù)骨素與骨密度、骨代謝指標(biāo)的相關(guān)性研究[J]."風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，"2022，"11（12）："12–15.

[20] 趙鵬飛，"許平安."絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患者血清SOST、OPN、Semaphorin3A水平與骨密度及骨代謝指標(biāo)的關(guān)系[J]."海南醫(yī)學(xué)，"2021，"32（9）："1136–1139.

[21] MOSTI"M"P，"KAEHLER"N，"STUNES"A"K，"et"al."Maximal"strength"training"in"postmenopausal"women"with"osteoporosis"or"osteopenia[J]."J"Strength"Cond"Res，"2013，"27（10）："2879–2886.

[22] GARNERO"P."New"developments"in"biological"markers"of"bone"metabolism"in"osteoporosis[J]."Bone，"2014，"66："46–55.

[23] BALOUN"J，"PEKACOVA"A，"WENCHICH"L，"et"al."Menopausal"transition："Prospective"study"of"estrogen"status，"circulating"microRNAs，"and"biomarkers"of"bone"metabolism[J]."Front"Endocrinol"（Lausanne），"2022，"13："864299.

[24] 王佳瑤，"王春慶."微小RNA作為骨質(zhì)疏松癥的診斷工具及治療靶標(biāo)的研究進(jìn)展[J]."中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，"2018，"20（12）："99–104.

[25] ZHAO"S"L，"WEN"Z"X，"MO"X"Y，"et"al."Bone-"metabolism-"related"serum"micrornas"to"diagnose"osteoporosis"in"middle-aged"and"elderly"women[J]."Diagnostics"（Basel），"2022，"12（11）："2872.

[26] PERKSANUSAK"T，"PANYAKHAMLERD"K，"HIRANKARN"N，"et"al."Correlation"of"plasma"microRNA-21"expression"and"bone"turnover"markers"in"postmenopausal"women[J]."Climacteric，"2018，"21（6）："581–585.

[27] 鮑鋒元，"徐繼平，"吳鳴，"等."miRNA-17/92a基因簇、P1NP和β-CTX在診斷絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中的應(yīng)用價(jià)值[J]."實(shí)用藥物與臨床，"2018，"21（12）："1350–1352.

[28] RAMíREZ-SALAZAR"E"G，"CARRILLO-PATI?O"S，"HIDALGO-BRAVO"A，"et"al."Serum"miRNAs"miR-140-"3p"and"miR-23b-3p"as"potential"biomarkers"for"osteoporosis"and"osteoporotic"fracture"in"postmenopausal"Mexican-"Mestizo"women[J]."Gene，"2018，"679："19–27.

[29] LU"Z，"WANG"D，"WANG"X，"et"al."MiR-206"regulates"the"progression"of"osteoporosis"via"targeting"HDAC4[J]."Eur"J"Med"Res，"2021，"26（1）："8.

[30] PEPE"J，"ROSSI"M，"BATTAFARANO"G，"et"al."Characterization"of"extracellular"vesicles"in"osteoporotic"patients"compared"to"osteopenic"and"healthy"controls[J]."J"Bone"Miner"Res，"2022，"37（11）："2186–2200.

（收稿日期：2024–06–25）

（修回日期：2024–11–10）