人參皂苷Rh1 通過激活Nrf2/HO-1 信號(hào)通路對(duì)糖尿病小鼠腎臟損傷的改善作用

［摘 要］ 目的：探討人參皂苷Rh1對(duì)糖尿病 （DM） 小鼠腎損傷的保護(hù)作用，并闡明其作用機(jī)制。方法：應(yīng)用高脂高糖飼養(yǎng)佐以腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）法制備糖尿病腎臟疾?。―KD）模型。將48只C57/BL6 成模小鼠隨機(jī)分為模型組、核因子紅細(xì)胞2 相關(guān)因子2 （Nrf2） 抑制劑ML385 組（ML385 組）（30 mg·kg－1 ML385）、人參皂苷Rh1 組（G-Rh1 組）（30 mg·kg－1 人參皂苷Rh1） 和G-Rh1+ML385 組（30 mg·kg－ 1 人參皂苷Rh1+30 mg·kg－1 ML385），每組12 只，另外12 只C57/BL6 小鼠作為對(duì)照組。作用8 周后，全自動(dòng)分析儀檢測(cè)各組小鼠血清中空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN） 和血肌酐（Scr）水平及尿液中24 h 尿蛋白（24 h UP） 水平，并計(jì)算腎臟指數(shù)。試劑盒檢測(cè)各組小鼠腎組織中超氧化物歧化酶（SOD） 和乳酸脫氫酶（LDH） 活性及丙二醛（MDA） 水平，Western blotting 法檢測(cè)各組小鼠腎組織中Nrf2和血紅素加氧酶1（HO-1）蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：與對(duì)照組比較，模型組、ML385組和G-Rh1+ML385組小鼠血清中FBG 水平和腎臟指數(shù)均明顯升高（Plt;0. 01），G-Rh1 組小鼠血清中FBG水平明顯升高（Plt;0. 01）；與模型組比較，ML385 組小鼠腎臟指數(shù)明顯升高（Plt;0. 05），G-Rh1 組小鼠FBG 水平和腎臟指數(shù)均明顯降低（Plt;0. 05 或Plt;0. 01）；與G-Rh1 組比較，G-Rh1+ML385 組小鼠FBG 水平和腎臟指數(shù)均明顯升高（Plt;0. 01）。與對(duì)照組比較，模型組、ML385 組、G-Rh1 組和G-Rh1+ML385 組小鼠血清中BUN 和Scr 水平及尿液中24 h UP 水平均明顯升高（Plt;0. 01）；與模型組比較，ML385 組小鼠血清中BUN 水平及尿液中24 h UP 水平均明顯升高（Plt;0. 05），G-Rh1 組小鼠血清中BUN 和Scr 水平及尿液中24 h UP 水平均明顯降低（Plt;0. 01）； 與G-Rh1 組比較， G-Rh1+ML385 組小鼠血清中BUN 和Scr 水平及尿液中24 h UP 水平均明顯升高（Plt;0. 01）。與對(duì)照組比較，模型組、ML385 組、G-Rh1 組和G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中SOD 活性均明顯降低（Plt;0. 01），MDA 水平和LDH 活性均明顯升高（Plt;0. 01）；與模型組比較，ML385 組小鼠腎組織中SOD 活性明顯降低（Plt;0. 05），MDA 水平明顯升高（Plt;0. 05），G-Rh1 組小鼠腎組織中SOD 活性明顯升高（Plt;0. 01），MDA 水平和LDH 活性均明顯降低（Plt;0. 01）；與G-Rh1 組比較，G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中SOD 活性明顯降低（Plt;0. 01），MDA 水平和LDH 活性均明顯升高（Plt;0. 01）。與對(duì)照組比較，模型組、ML385 組、G-Rh1 組和G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均明顯降低（Plt;0. 05 或Plt;0. 01）；與模型組比較，ML385 組和G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1蛋白表達(dá)水平均明顯降低（Plt;0. 05），G-Rh1 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均明顯升高（Plt;0. 01）；與G-Rh1 組比較，G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均明顯降低（Plt;0. 01）。結(jié)論：人參皂苷Rh1可降低氧化應(yīng)激，改善腎功能，對(duì)DM小鼠腎臟損傷具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與激活Nrf2/HO-1 信號(hào)通路有關(guān)。

［關(guān)鍵詞］ 人參皂苷Rh1； 糖尿?。?腎損傷； 核因子紅細(xì)胞2 相關(guān)因子2； 氧化應(yīng)激

［中圖分類號(hào)］ R285. 5 ［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

糖尿病腎臟疾病（diabetic kidney disease，DKD） 是臨床上常見的一種慢性腎病， 其起病隱匿，形成機(jī)制涉及糖脂代謝紊亂、氧化應(yīng)激、炎癥和自噬凋亡等多方面因素，目前尚無特異性的治療措施，部分患者因難以控制的病情最終發(fā)展至腎衰竭，嚴(yán)重危害生命健康［1-2］。因此，探討DKD 的發(fā)病機(jī)制及其有效治療手段是目前臨床亟待解決的問題。研究［3］ 顯示：氧化應(yīng)激功能障礙是DKD 的一個(gè)關(guān)鍵觸發(fā)因素。核因子紅細(xì)胞2 相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2） 是調(diào)節(jié)和維持組織細(xì)胞內(nèi)氧化還原穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，其通過調(diào)控下游抗氧化基因谷胱甘肽過氧化物酶4 （glutathione peroxidase 4， GPX4） 和血紅素加氧酶1 （heme oxygenase-l，HO-1） 等轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)細(xì)胞氧化應(yīng)激，保護(hù)細(xì)胞免受過氧化損害。作為經(jīng)典抗氧化通路， Nrf2/HO-1 通路與DKD 有密切關(guān)聯(lián)。Nrf2 敲除的糖尿病（diabetes mellitus，DM）小鼠， HO-1 表達(dá)下調(diào)， 腎臟組織氧化損傷加重，而激活Nrf2 可以抑制氧化應(yīng)激進(jìn)而減輕DKD 的腎臟損傷［4-5］。目前， Nrf2/HO-1 信號(hào)通路已被作為防治DKD 的途徑之一，靶向氧化應(yīng)激成為DKD 潛在治療策略。在DKD 治療方面，中醫(yī)藥表現(xiàn)出多組分、多靶點(diǎn)和不良反應(yīng)少的優(yōu)勢(shì)，可通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 （transforming growth factor- β1，TGF-β1） 和Nrf2 等多種信號(hào)通路，發(fā)揮改善糖脂代謝紊亂、減輕氧化應(yīng)激和炎癥損傷、抗纖維化及調(diào)節(jié)自噬凋亡等多重作用［6-7］。同時(shí)，人參及其有效成分在防治DM 及其慢性并發(fā)癥的研究［8-10］ 日益增多。本課題組前期研究［11-13］ 顯示： 發(fā)酵紅參總皂苷能夠抑制高糖誘導(dǎo)的大鼠腎小管上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化，改善腎纖維化；人參皂苷Rh2 能夠降低DM大鼠組織氧化應(yīng)激水平和減少間質(zhì)纖維化，保護(hù)心肌和腎臟。但目前關(guān)于人參皂苷Rh1 對(duì)DKD 腎臟損傷防治作用的相關(guān)研究較少。本研究構(gòu)建DKD模型小鼠，探討人參皂苷Rh1 對(duì)DKD 的改善作用，并基于Nrf2/HO-1 信號(hào)通路進(jìn)一步闡明其作用機(jī)制，以期為DKD 的防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和新的思路。

1 材料與方法

1. 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要試劑和儀器 60只SPF級(jí)6周齡雄性C57/BL6 小鼠，體質(zhì)量20～24 g，購(gòu)自長(zhǎng)春億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司， 動(dòng)物生產(chǎn)許可證 號(hào)： SCXK （吉） 2018-0007。 鏈 脲 佐 菌 素（streptozotocin，STZ） 購(gòu)自美國(guó)Sigma 公司，Nrf2抑制劑ML385 購(gòu)自美國(guó)CSNpharm 公司， 人參皂苷Rh1 （純度為98%） 由吉林大學(xué)藥學(xué)院提供，血肌酐（serum creatinine，Scr）、尿素氮（blood ureanitrogen， BUN）、尿蛋白（urine protein， UP）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase， SOD）、丙二醛（malondialdehyde， MDA） 和乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase， LDH） 檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，兔抗Nrf2 和HO-1 抗體和羊抗兔二抗及ECL 超敏試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Proteintech 公司。蛋白電泳儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad 公司，全自動(dòng)酶標(biāo)儀購(gòu)自瑞士Tecan 公司，凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)自德國(guó)Analytikjena 公司。

1. 2 DKD 模型小鼠制備、分組和給藥 將 60 只C57/BL6 小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后，隨機(jī)選取其中的10 只小鼠作為對(duì)照組（給予普通飼料喂養(yǎng)），剩余50 只用于造模的小鼠給予高脂高糖飼料（常規(guī)飼料中加入10% 豬油、20% 蔗糖、2. 5% 膽固醇和1% 膽酸鈉） 喂養(yǎng)。喂養(yǎng)4周后，造模小鼠禁食不禁水12 h，按照50 mg·kg－1 腹腔注射STZ， 連續(xù)注射5 d， 而對(duì)照組小鼠僅注射等體積檸檬酸鹽緩沖液。在末次注射后的第7 天尾靜脈采血檢測(cè)空腹血糖（fastingblood glucose， FBG）水平， FBG≥16. 7 mmol·L－1者確定為DM 模型。除去2 只未成模小鼠（納入對(duì)照組）， 剩余DM 模型小鼠高脂高糖飼料繼續(xù)喂養(yǎng)4 周， 收集24 h 尿液， UP≥30 mg·dL－1 即為DKD模型小鼠。將48只DKD模型小鼠隨機(jī)分為模型組、ML385 組、人參皂苷Rh1組（G-Rh1組） 和G-Rh1+ML385組，每組12只，其中ML385 組、G-Rh1 組和G-Rh1+ML385組小鼠每日1次分別給予30 mg·kg－ 1ML385 腹腔注射、30 mg·kg－1 人參皂苷Rh1 灌服和30 mg·kg－ 1 人參皂苷Rh1 灌服+30 mg·kg－1ML385 腹腔注射，連續(xù)8 周，實(shí)驗(yàn)期間對(duì)照組和模型組小鼠僅灌服和注射等量生理鹽水。

1. 3 全自動(dòng)分析儀檢測(cè)各組小鼠血清中 FBG、BUN和Scr水平及尿液中24 h UP水平并計(jì)算腎臟指數(shù) 實(shí)驗(yàn)結(jié)束前 1 d，將各組小鼠稱質(zhì)量后放置于代謝籠內(nèi)收集24 h 尿液，在留尿期間小鼠禁食但不禁水， 留取離心后去除沉渣的尿液用于UP 檢測(cè)。各組小鼠在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)采用麻醉后眼球采血法收集血液，離心后留取血清于EP 管，-20 ℃保存以用于FBG、BUN 和Scr 水平的檢測(cè)。按照試劑說明書方法，應(yīng)用全自動(dòng)分析儀測(cè)定FBG、BUN、Scr和24 h UP 水平。將摘取的腎臟稱質(zhì)量后，計(jì)算腎臟指數(shù)。腎臟指數(shù)=腎臟質(zhì)量（mg）/體質(zhì)量（g）×100%。

1. 4 試劑盒檢測(cè)各組小鼠腎組織中 SOD 和 LDH活性及MDA水平 取各組小鼠腎組織用勻漿器制備成組織勻漿，2 000 r·min－1 離心20 min 后吸取上清液，嚴(yán)格按照相應(yīng)試劑盒說明書方法進(jìn)行操作，測(cè)定各組小鼠腎臟組織中SOD 和LDH 活性及MDA 水平。

1. 5 Western blotting 法檢測(cè)各組小鼠腎組織中Nrf2和HO-1蛋白表達(dá)水平 低溫條件下提取各組小鼠腎組織蛋白后采用BCA 法進(jìn)行定量。各組取含有50 μg 總蛋白待測(cè)樣品上樣電泳分離后，于冰水浴中100 V 電壓恒壓轉(zhuǎn)膜，通過共孵育用5% 脫脂牛奶封閉PVDF 轉(zhuǎn)膜上的非目的蛋白結(jié)合位點(diǎn)后，加入一抗，Nrf2 （1∶1 000） 和HO-1 （1∶1 000），4 ℃搖床孵育過夜，采用PBST 溶液振蕩洗膜后加入相應(yīng)的二抗，ECL 法顯色后凝膠成像拍照，采用Image J 軟件分析蛋白條帶灰度值，以GAPDH 為內(nèi)參，計(jì)算目的蛋白表達(dá)水平。目的蛋白表達(dá)水平=目的蛋白條帶灰度值/內(nèi)參蛋白條帶灰度值。

1. 6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用 SPSS 19. 0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組小鼠腎臟指數(shù)， 血清中FBG、BUN 和Scr 水平及尿液中24 h UP 水平，各組小鼠腎組織中SOD 和LDH 活性及MDA 水平，腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均符合正態(tài)分布，以x±s 表示，多組間樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析， 組間樣本均數(shù)兩兩比較采用SNK-q 檢驗(yàn)。以Plt;0. 05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2. 1 各組小鼠血清中FBG水平和腎臟指數(shù) 與對(duì)照組比較，模型組、ML385 組和G-Rh1+ML385 組小鼠血清中FBG 水平和腎臟指數(shù)均明顯升高（Plt;0. 01），G-Rh1組小鼠血清中FBG水平明顯升高（Plt;0. 01）。與模型組比較，ML385 組小鼠腎臟指數(shù)明顯升高（Plt;0. 05），血清中FBG 水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0. 05）， G-Rh1 組小鼠血清中FBG 水平和腎臟指數(shù)均明顯降低（Plt;0. 05或Plt;0. 01）。與G-Rh1 組比較，G-Rh1+ML385 組小鼠血清中FBG水平和腎臟指數(shù)均明顯升高（Plt;0. 01）。見表1。

2. 2 各組小鼠血清中 BUN 和 Scr 水平及尿液中24 h UP水平 與對(duì)照組比較，模型組、ML385組、G-Rh1 組和G-Rh1+ML385 組小鼠血清中BUN 和Scr 水平及尿液中24 h UP 水平均明顯升高（Plt;0. 01）。與模型組比較，ML385 組小鼠血清中BUN水平和尿液中24 h UP 水平均明顯升高（Plt;0. 05），血清中Scr 水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0. 05），G-Rh1 組小鼠血清中BUN 和Scr 水平及尿液中24 h UP 水平均明顯降低（Plt;0. 01）。與G-Rh1 組比較， G-Rh1+ML385 組小鼠血清中BUN 和Scr水平及尿液中24 h UP 水平均明顯升高（Plt;0. 01）。見表2。

2. 3 各組小鼠腎組織中SOD和LDH活性及MDA水平 與對(duì)照組比較，模型組、ML385組、G-Rh1組和G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中SOD 活性均明顯降低（Plt;0. 01）， MDA 水平和LDH 活性均明顯升高（Plt;0. 01）。與模型組比較， ML385 組小鼠腎組織中SOD 活性明顯降低（Plt;0. 05），MDA水平明顯升高（Plt;0. 05）， LDH 活性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0. 05），G-Rh1 組小鼠腎組織中SOD 活性明顯升高（Plt;0. 01），MDA 水平和LDH 活性均明顯降低（Plt;0. 01）。與G-Rh1 組比較，G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中SOD 活性明顯降低（Plt;0. 01）， MDA 水平和LDH 活性均明顯升高（Plt;0. 01）。見表3。

2. 4 各組小鼠腎組織中 Nrf2 和 HO-1 蛋白表達(dá)水平 與對(duì)照組比較，模型組、ML385組、G-Rh1組和G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均明顯降低（Plt;0. 05 或Plt;0. 01）。與模型組比較， ML385 組和G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均明顯降低（Plt;0. 05），G-Rh1 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均明顯升高（Plt;0. 01）。與G-Rh1 組比較， G-Rh1+ML385 組小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平均明顯降低（Plt;0. 01）。見圖1 和表4。

3 討 論

隨著DM 的日益增多， 由DKD 所導(dǎo)致的終末期腎衰竭已成為臨床迫切需要解決的問題。研究［1，6，14］ 顯示：高糖環(huán)境下的腎組織細(xì)胞增殖和分化，造成腎臟纖維化和功能紊亂，臨床上主要表現(xiàn)為進(jìn)行性腎功能障礙，早期以持續(xù)性蛋白尿?yàn)橹鳎砥趧t出現(xiàn)血清中Scr 和BUN 水平升高為主的腎功能衰竭表現(xiàn)。高糖環(huán)境下活性氧（reactiveoxygen species， ROS） 水平升高所引發(fā)的氧化應(yīng)激損傷是導(dǎo)致和加重DKD 的重要因素［15］。氧化應(yīng)激是指機(jī)體在內(nèi)外環(huán)境刺激下， 機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的ROS 引起的組織細(xì)胞反應(yīng)， 是機(jī)體內(nèi)氧化與抗氧化作用失衡的一種狀態(tài)，可直接或間接造成DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的氧化損傷，被認(rèn)為是機(jī)體衰老和各種疾病的危險(xiǎn)因素。在正常情況下，機(jī)體內(nèi)氧化代謝所產(chǎn)生的少量自由基可被自身抗氧化系統(tǒng)及時(shí)清除，而在持續(xù)高糖環(huán)境中，超氧陰離子、羥自由基和過氧化氫等ROS 自由基大量產(chǎn)生，通過在腎組織中積累進(jìn)一步破壞氧化平衡和抗氧化系統(tǒng)，導(dǎo)致腎組織氧化損傷［16-17］。本研究結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，模型組DKD 小鼠血清中FBG 水平和腎臟指數(shù)明顯升高，腎組織中LDH 活性和脂質(zhì)代謝過氧化最終產(chǎn)物MDA 水平明顯升高，而抗氧化酶SOD活性明顯降低，血清中Scr 和BUN 及24 h UTP 水平明顯升高，提示DKD 小鼠腎臟出現(xiàn)明顯氧化應(yīng)激損傷和腎功能障礙。

人參皂苷Rh1 為四環(huán)三萜達(dá)瑪烷型皂苷，是一種極性較小的次級(jí)皂苷，屬于人參三醇型。作為稀有皂苷，人參皂苷Rh1 在人參中含量極少，主要從紅參中提取分離， Rg1 和Re 等人參三醇型皂苷在高溫或酶解狀態(tài)下可轉(zhuǎn)化為Rh1。與基礎(chǔ)堿性皂苷Rg1 和Re 等比較，Rh1 更易于人體吸收，具有更豐富的生物學(xué)活性。研究［18-21］ 顯示：人參皂苷Rh1 可通過下調(diào)TGF-β1/Smad 信號(hào)通路減輕肝臟和腎臟纖維化；人參皂苷Rh1 可通過抑制腫瘤細(xì)胞C-C 趨化因子配體20 （C-C chemokine lizgand 20，CCL20）和異黏蛋白基因的表達(dá)， 調(diào)控乳腺癌細(xì)胞外滲侵襲，通過Wnt 通路抑制肺腺癌細(xì)胞增殖；人參皂苷Rh1 通過調(diào)節(jié)5'- 磷酸腺苷（adenosine 5'-monophosphate， AMP） 活化蛋白激酶（AMPactivatedprotein kinase，AMPK） /磷脂酰肌醇3 激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K） /蛋白激酶B（protein kinase B， Akt） 信號(hào)通路而改善DKD，通過抑制c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminalkinase，JNK） /P53 信號(hào)通路，減輕順鉑誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。此外，人參皂苷Rh1 可以通過不同途徑調(diào)節(jié)機(jī)體免疫活性， 抑制炎癥反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示： 人參皂苷Rh1 干預(yù)后， DKD 模型小鼠血清中FBG 水平和腎臟指數(shù)明顯降低，腎組織中SOD 活性升高，LDH 活性和MDA 水平降低，血清中Scr和BUN 水平及尿液中24 h UP 水平均明顯降低，提示人參皂苷Rh1 可降低FBG 水平， 減輕氧化應(yīng)激損傷，改善腎臟功能，對(duì)DKD 小鼠腎損傷具有保護(hù)作用。

Nrf2/HO-1 信號(hào)通路是氧化還原過程中的重要調(diào)控通路。正常生理狀態(tài)下， 細(xì)胞質(zhì)中的Nrf2 以復(fù)合體形式保持在相對(duì)穩(wěn)定的低水平狀態(tài)，當(dāng)受到ROS 等刺激后， 胞質(zhì)內(nèi)的Nrf2 與Kelch 樣ECH 相關(guān)蛋白1 （Kelch-liked ECH-associated protein 1，Keap1） 發(fā)生解耦聯(lián)，Nrf2 活化并轉(zhuǎn)入細(xì)胞核，通過Maf 蛋白介導(dǎo)與抗氧化反應(yīng)元件（anti-oxidantresponse element，ARE） 結(jié)合，激活下游靶基因轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生HO-1 和GPX4 等抗氧化酶，以維持機(jī)體氧化還原狀態(tài)平衡，發(fā)揮抗氧化損傷作用［22］。由Nrf2 介導(dǎo)的抗氧化通路紊亂是觸發(fā)組織細(xì)胞衰老和氧化損傷的驅(qū)動(dòng)力。研究［23-25］ 顯示：Nrf2/HO-1 通路與DKD、DM 心肌?。╠iabeticcardiomyopathy，DCM） 和DM 足潰瘍等DM 并發(fā)癥聯(lián)系密切，激活Nrf2/HO-1 信號(hào)通路可降低氧化應(yīng)激和炎癥因子釋放，改善DKD 大鼠腎臟和DCM 小鼠心肌損傷，并可促進(jìn)血管新生，減輕DM 足潰瘍。本研究結(jié)果顯示：DKD 小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1蛋白表達(dá)水平明顯降低，氧化應(yīng)激水平和腎功能障礙與Nrf2 抑制劑ML385 組相似，提示DKD 小鼠腎損傷與Nrf2/HO-1 信號(hào)通路抑制有關(guān)；給予人參皂苷Rh1 干預(yù)后，DKD 小鼠腎組織中Nrf2 和HO-1 蛋白表達(dá)水平升高，氧化應(yīng)激水平降低，腎功能障礙改善，而給予Nrf2 抑制劑ML385 后，G-Rh1 的上述保護(hù)作用被部分抑制，提示人參皂苷Rh1 可通過激活Nrf2/HO-1 信號(hào)通路，減輕DKD 小鼠腎臟損傷。

綜上所述，人參皂苷Rh1 能夠降低氧化應(yīng)激水平，有效地改善腎臟功能，對(duì)DKD 小鼠腎臟損傷具有保護(hù)作用， 其作用機(jī)制可能與其激活Nrf2/HO-1 信號(hào)通路、提高組織抗氧化水平有關(guān)。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：曲萌參與論文選題、數(shù)據(jù)整理和論文撰寫，黃睿參與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)收集和整理，鞠欣達(dá)和劉雨昕參與實(shí)驗(yàn)操作，夏吉辰和黃佳欣參與數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，于春艷參與數(shù)據(jù)核查，董志恒參與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和論文審校。

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