冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、Annexin Ⅱ水平及其與術后再狹窄的相關性

摘要 目的：分析冠狀動脈支架植入術病人血清基質金屬蛋白酶-3（MMP-3）、膜聯(lián)蛋白A2（AnnexinⅡ）水平及其與術后再狹窄的相關性。方法：選取唐山市中醫(yī)醫(yī)院2019年10月—2021年10月行冠狀動脈支架植入術的102例病人。術后隨訪1年，依據(jù)術后再狹窄發(fā)生情況分為無再狹窄組（80例）和再狹窄組（22例）。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清MMP-3、AnnexinⅡ表達水平，分析術后再狹窄與血清MMP-3、AnnexinⅡ的相關性。采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清MMP-3、AnnexinⅡ對冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的預測價值。結果：隨訪1年，102例病人術后再狹窄發(fā)生率為21.57%。再狹窄組血清MMP-3、AnnexinⅡ、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素（IL）-6、IL-8表達水平及Gensini評分、斑塊面積（PLA）、內(nèi)膜面積（IPA）較無再狹窄組明顯升高，最小管腔面積（MLA）、外彈力膜橫截面積（EEM-CSA）較無再狹窄組明顯減小，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Pearson相關性分析結果顯示，MMP-3與IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05），MMP-3與EEM-CSA呈負相關（P＜0.05），Annexin Ⅱ與TNF-α、IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05）。ROC曲線分析結果顯示，MMP-3、AnnexinⅡ聯(lián)合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的效能優(yōu)于單指標獨立預測（P＜0.05）。結論：冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、AnnexinⅡ水平異常高表達，與術后再狹窄的發(fā)生密切相關。

關鍵詞 冠狀動脈支架植入術；支架內(nèi)再狹窄；基質金屬蛋白酶-3；膜聯(lián)蛋白A2

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.20.024

基金項目 河北省中醫(yī)藥管理局資助項目（No.2021391）

作者單位 1.唐山市中醫(yī)醫(yī)院（河北唐山 063000），E-mail：smed2sm@163.com；2.唐山仁德醫(yī)療康復醫(yī)院

引用信息 夏文君，盧嘉成.冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、Annexin Ⅱ水平及其與術后再狹窄的相關性［J］.中西醫(yī)結合心腦血管病雜志，2024，22（20）：3776-3780.

冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。╟oronary atherosclerotic heart disease，CHD）是由于冠狀動脈發(fā)生病理性改變，動脈粥樣硬化引起動脈血流阻滯，導致心臟血流不足，繼發(fā)心肌缺血缺氧從而發(fā)生心力衰竭，嚴重影響人們生命健康，尤其是中老年人群^［1］。據(jù)統(tǒng)計，CHD是目前發(fā)病和致死率最高的疾病之一^［2］。治療CHD的主要措施為經(jīng)皮冠狀動脈介入術，但術后病人仍有較高的再狹窄率。目前國內(nèi)藥物洗脫支架應用廣泛，雖然一定程度減少了冠狀動脈急性夾層和閉塞的發(fā)生，但由于支架植入不可避免引起血管損傷，病人術后仍存在7%～10%再狹窄風險^［3］。因此，探尋一種評估冠狀動脈支架植入術后再狹窄發(fā)生的生物學指標，對病人預后具有重要意義。膜聯(lián)蛋白A2（Annexin Ⅱ）是一種鈣依賴性磷脂結合蛋白，研究表明，Annexin Ⅱ參與機體糖脂代謝，介導炎癥反應，與冠狀動脈粥樣硬化的形成有關^［4-6］?；|金屬蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）與CHD病人斑塊不穩(wěn)定有關，在斑塊破裂過程中發(fā)揮重要作用，參與CHD的發(fā)生發(fā)展過程^［7］。因此，本研究通過觀察我院102例行冠狀動脈支架植入術病人Annexin Ⅱ、MMP-3的表達水平與病人術后再狹窄的相關性，以期為早期診斷和治療術后再狹窄提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取唐山市中醫(yī)醫(yī)院2019年10月—2021年10月行冠狀動脈支架植入術的病人102例作為研究對象，男59例，女43例；體質指數(shù)（BMI）21.58～28.76（25.64±2.28）kg/m²；年齡56～80（68.75±8.68）歲；吸煙史58例，飲酒史40例。術后隨訪1年，根據(jù)是否發(fā)生再狹窄分為再狹窄組（22例）和無再狹窄組（80例）。再狹窄診斷標準^［8］：支架內(nèi)或支架附近5 mm范圍冠狀動脈造影顯示靶血管狹窄≥50%。所有病人術后接受常規(guī)抗血小板類藥物（阿司匹林、氯吡格雷）、他汀類藥物及β受體阻滯劑等藥物治療。本研究獲得唐山市中醫(yī)醫(yī)院倫理委員會審查通過，批件號：201904002。

1.2 納入與排除標準

納入標準：1）冠狀動脈造影、臨床癥狀均符合《冠狀動脈粥樣硬化性心臟病診斷標準》^［9］，CHD疾病類型包括非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）、ST段抬高型心肌梗死（STEMI）、不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）；2）冠狀動脈造影（CAG）顯示狹窄率≥75%；3）符合經(jīng)皮冠狀動脈介入術手術指征，初次接受藥物洗脫支架植入術；4）年齡55～80歲；5）無生命威脅；6）病人自愿簽署知情同意書。排除標準：1）既往冠狀動脈旁路移植手術史；2）合并良、惡性腫瘤；3）合并凝血功能障礙者；4）認知功能障礙，依從性差者；5）合并肝腎功能不全，嚴重心臟衰竭（射血分數(shù)＜35%）或其他類型心臟疾??；6）合并免疫功能障礙；7）多次冠狀動脈介入手術史或心臟搭橋史；8）病人臨床資料缺失或失訪。

1.3 方法

1.3.1 血清MMP-3、AnnexinⅡ水平檢測

抽取病人入院第2日清晨空腹外周肘部靜脈血3 mL，2 500 r/min離心15 min，吸取上清液置于凍存管中，于－80 ℃保存待測。使用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測MMP-3、AnnexinⅡ表達水平，試驗步驟按照試劑盒要求進行，試劑盒購自上海生工生物工程有限公司。

1.3.2 血脂、炎性因子指標檢測

血液樣本采集方法同1.3.1，使用全自動生化分析儀檢測三酰甘油（triglycerides，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）表達水平。通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細胞介素-8（interleukin-8，IL-8）表達水平，實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行，試劑盒購自上海生工生物工程有限公司。

1.3.3 冠狀動脈影像學指標檢測

采用Judkins法行CAG，并使用冠狀動脈Gensini評分法對每支血管病變程度進行評分，包括病變部位、支數(shù)及狹窄程度，采用血管病變程度得分與狹窄程度得分之積進行分級。輕度病變＜13分，中度病變13～42分，重度病變＞42分^［10］。采用冠狀動脈超聲成像導管和血管內(nèi)超聲（IVUS）系統(tǒng)測量病人支架內(nèi)及支架周圍血管狹窄情況，包括斑塊面積（PLA）、內(nèi)膜面積（IPA）、最小管腔面積（MLA）、外彈力膜橫截面積（EEM-CSA）。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 25.0軟件進行統(tǒng)計分析。符合正態(tài)分布的定量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間及進一步兩兩間的定量資料比較使用單因素方差分析和SNK-q檢驗；定性資料以例數(shù)、百分比（%）表示，組間比較采用χ²檢驗；Pearson相關性分析法分析血清MMP-3、AnnexinⅡ與冠狀動脈影像學指標及炎性因子的相關性；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清MMP-3、AnnexinⅡ水平單獨及聯(lián)合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的價值，曲線下面積（AUC）比較采用Z檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄發(fā)生情況

術后隨訪12個月，102病人中22例發(fā)生再狹窄，占21.57%（22/102），80例未發(fā)生再狹窄，占78.43%（80/102）。

2.2 兩組臨床資料比較

兩組性別、BMI、年齡、CHD疾病類型、吸煙史、飲酒史、合并糖尿病、合并高血壓、發(fā)病至接受動脈支架植入術時間、病變長度、病變內(nèi)徑、術后用藥類型比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），再狹窄組TG、TC、LDL-C表達水平較無再狹窄組升高，HDL-C表達水平較無再狹窄組降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

2.3 兩組影像學指標及炎性因子水平比較

再狹窄組血清MMP-3、AnnexinⅡ、TNF-α、IL-6、IL-8表達水平較無再狹窄組升高，Gensini評分、PLA、IPA較無再狹窄組增大，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。再狹窄組MLA、EEM-CSA小于無再狹窄組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.4 MMP-3、AnnexinⅡ與影像學指標及炎性因子的相關性

MMP-3與IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05），與EEM-CSA呈負相關（P＜0.05），AnnexinⅡ與TNF-α、IL-6、Gensini評分、IPA呈正相關（P＜0.05）。詳見表3。

2.5 ROC曲線分析MMP-3、AnnexinⅡ預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的價值

血清MMP-3預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的AUC為0.781，敏感度為81.82%，特異度為67.50%，截斷值為34.35 ng/μL（95%CI 0.688～0.857）；AnnexinⅡ預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的AUC為0.712，敏感度為77.27%，特異度為62.50%，截斷值為2.20 pg/mL（95%CI 0.614～0.797）；二者聯(lián)合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的AUC為0.858，敏感度為81.82%，特異度為82.50%，二者聯(lián)合預測冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄的效能明顯優(yōu)于單指標獨立預測（Z＝2.041，P＝0.041；Z＝2.362，P＝0.018）。詳見表4、圖1。

3 討 論

影響冠狀動脈介入術病人遠期預后的危險因素是術后再狹窄，如何有效降低再狹窄發(fā)生率是治療冠心病、心肌梗死等冠狀動脈疾病的重要挑戰(zhàn)。隨著支架技術的發(fā)展，冠狀動脈支架植入術可明顯降低病人術后再狹窄的發(fā)生率，但仍有部分病人會發(fā)生再狹窄^［11］。研究認為，冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄發(fā)生的主要機制是血管損傷后引起血管內(nèi)壁過度增生，與炎癥反應、血管內(nèi)皮損傷及平滑肌細胞遷移增殖等有關^［12-13］。本研究中102例病人術后經(jīng)12個月血管造影觀察顯示有22例病人發(fā)生再狹窄，術后再狹窄發(fā)生率為21.57%。因MMP-3、Annexin Ⅱ與血管內(nèi)皮損傷及心血管疾病存在相關性，故推測MMP-3、AnnexinⅡ與冠心病病人冠狀動脈支架植入術后再狹窄有關。

Annexin Ⅱ是一種鈣依賴性磷脂結合蛋白，與糖脂代謝過程有關，促進巨噬細胞遷移，誘導炎癥反應^［14］，介導TNF-α、IL-6和IL-8等多種細胞炎性因子產(chǎn)生，在動脈粥樣硬化病理過程發(fā)揮重要作用。冠心病病人血清AnnexinⅡ呈高表達，且隨著病人病情變化而變化^［15］。相關研究認為，AnnexinⅡ與血管內(nèi)膜形成有關，通過介導血管平滑肌細胞增殖和遷移，提高斑塊不穩(wěn)定性^［16］，與健康人群比較，頸動脈斑塊不穩(wěn)定病人血清AnnexinⅡ表達水平明顯升高^［17］?；|金屬蛋白酶家族在冠心病發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，能夠促進血小板聚集，形成斑塊，參與動脈血管重塑過程，MMP-3能夠激活基質金屬蛋白酶家族成員，增加斑塊不穩(wěn)定性，進而形成動脈粥樣硬化^［5］。研究證明，MMP-3水平是冠狀動脈疾病病人結局的獨立預測因子^［18］。基因多態(tài)性分析結果顯示，MMP-3基因啟動子可以發(fā)生自然變異，啟動子5A/6A與CHD易感性有關，增加CHD患病風險^［19］。本研究結果顯示，術后再狹窄病人血清MMP-3、AnnexinⅡ、TNF-α、IL-6和IL-8表達水平均明顯高于術后無再狹窄組，Pearson相關分析結果顯示，MMP-3、AnnexinⅡ與炎性因子TNF-α、IL-6呈正相關。提示血清MMP-3、AnnexinⅡ表達水平與冠狀動脈疾病發(fā)生及冠狀動脈支架植入術后再狹窄發(fā)生有關，分析原因可能與支架植入引起的血管內(nèi)膜損傷有關，內(nèi)膜損傷誘導局部產(chǎn)生炎癥反應^［20］，AnnexinⅡ促進巨噬細胞遷移，誘導炎性因子產(chǎn)生，同時促進平滑肌細胞遷移，MMP-3促進血小板聚集參與血管重塑過程，持續(xù)高水平AnnexinⅡ、MMP-3引起血管內(nèi)膜增生及不穩(wěn)定性斑塊形成，介導術后再狹窄發(fā)生。本研究ROC曲線分析顯示，血清MMP-3、AnnexinⅡ聯(lián)合對冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄具有較高預測效能。提示臨床檢測病人血清MMP-3、AnnexinⅡ水平預測病人術后再狹窄存在可行性。

診斷CHD病人術后再狹窄的金標準為CAG和IVUS，Gensini評分用于評估冠狀動脈血管狹窄程度，積分隨冠狀動脈狹窄程度加重而增加。PLA、IPA、MLA、EEM-CSA是IVUS檢查評估冠狀動脈狹窄的重要指標。冠狀動脈狹窄程度越嚴重，PLA、IPA越大，MLA、EEM-CSA越小^［21］。本研究結果顯示，再狹窄組Gensini評分、PLA、IPA明顯大于非再狹窄組，MLA、EEM-CSA明顯小于非再狹窄組；相關性分析顯示，AnnexinⅡ、MMP-3與Gensini評分、IPA呈正相關，與EEM-CSA呈負相關。提示AnnexinⅡ、MMP-3與術后冠狀動脈再狹窄發(fā)生關系密切，AnnexinⅡ、MMP-3可以作為早期預測術后再狹窄的血清標志物。研究還顯示，再狹窄病人血脂指標LDL-C、TG、TC表達水平明顯升高，異常血脂代謝與冠狀動脈支架植入術后病人再狹窄有關，支架植入操作引起血管內(nèi)皮損傷，LDL-C、TG、TC等脂類物質在血管內(nèi)皮下沉積，引起動脈粥樣硬化，從而發(fā)生再狹窄^［22］。研究表明，伴有高血壓史病人接受冠狀動脈支架植入術術后再狹窄發(fā)生率為血壓正常病人的2～5倍^［23］。冠狀動脈支架植入術后病人接受抗血小板聚集藥物、他汀類藥物等治療的同時，應關注血脂變化，相應增加降血脂治療，以更好地改善炎癥指標，抑制血管病變。

綜上所述，冠狀動脈支架植入術病人血清MMP-3、AnnexinⅡ水平異常高表達，與術后再狹窄的發(fā)生密切相關，聯(lián)合血清MMP-3、AnnexinⅡ對冠狀動脈支架植入術病人術后再狹窄具有較好預測效能。本研究局限性為未對病人血清MMP-3、AnnexinⅡ變化進行動態(tài)監(jiān)測，但對研究結果無顯著影響。

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（收稿日期：2023-03-07）

（本文編輯 王麗）