4%吡丙醚·氟蟲腈微囊懸浮-懸浮劑的高效液相色譜分析方法

黃燕羽，王 勤，戴梅玉，石偉山，周桂東

（江蘇艾津農(nóng)化有限責任公司，南京 211511）

吡丙醚（pyriproxyfen）是一種保幼激素類似物殺蟲劑，能抑制昆蟲成熟。其對煙粉虱、介殼蟲、小菜蛾、甜菜夜蛾、斜紋夜蛾、梨黃木虱、薊馬等有較好的防治效果，同時對公共衛(wèi)生領域中的蚊、蠅等害蟲也具有較好的防治效果[1-2]。氟蟲腈（fipronil）是一種新型苯基吡唑類高效、廣譜殺蟲劑，對蚜蟲、飛虱具有較好的殺蟲活性，具有觸殺、胃毒和內(nèi)吸作用，可用于水稻、棉花、玉米、蔬菜及果樹等多種作物的害蟲防治。關于吡丙醚單劑和氟蟲腈單劑的液相色譜檢測方法均有報道[3-4]，但是二者復配制劑在同一條件下的分析方法目前尚未見報道。本文建立了在同一液相色譜條件下分離測定吡丙醚和氟蟲腈的方法，為該復配制劑在同一條件下分離測定提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

LC-20AD高效液相色譜儀（自動進樣器），Labsolutions島津液相色譜工作站，日本島津公司；SPD-M20A紫外-可見檢測器；色譜柱：Shim-pack VP-ODS C18不銹鋼柱（250 mm×4.6 mm）；KH7200E超聲波清洗器；有機過濾器（微膜孔徑0.45 μm）。

DMF（分析純），乙腈（色譜純）；二次蒸餾水；吡丙醚標準品（質(zhì)量分數(shù)不小于98.5%）、氟蟲腈標準品（質(zhì)量分數(shù)不小于98.5%），上海市農(nóng)藥研究所；4%吡丙醚·氟蟲腈微囊懸浮-懸浮劑（其中吡丙醚1%、氟蟲腈3%），江蘇艾津農(nóng)化有限責任公司。

1.2 液相色譜操作條件

流動相：乙腈＋水（體積比75∶25）；柱溫：室溫；流量：1.2 mL/min；檢測波長：278 nm；進樣體積：10 μL；保留時間：氟蟲腈約為3.98 min，吡丙醚約為8.44 min。

上述液相色譜操作條件是典型的操作參數(shù)，可以根據(jù)不同的儀器特點和溫度條件，對給定的操作參數(shù)進行適當?shù)恼{(diào)整，以獲得最佳效果。典型的吡丙醚和氟蟲腈標準品和4%吡丙醚·氟蟲腈微囊懸浮-懸浮劑樣品高效液相色譜圖見圖1、圖2。

圖1 吡丙醚和氟蟲腈標準品高效液相色譜圖

圖2 4%吡丙醚·氟蟲腈微囊懸浮-懸浮劑樣品高效液相色譜圖

1.3 測定步驟

1.3.1 標準樣品的配制

稱取吡丙醚標準品0.05 g（精確至0.000 1 g）、氟蟲腈標準品0.15 g（精確至0.000 1 g），置于100 mL容量瓶中，用DMF超聲溶解，冷卻至室溫，用DMF定容至刻度，搖勻，記為A溶液。

從A溶液中吸取10 mL溶液置于100 mL容量瓶中，用DMF定容至刻度，即為吡丙醚、氟蟲腈標樣溶液。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取4%吡丙醚·氟蟲腈微囊懸浮-懸浮劑0.50 g（精確至0.000 1 g），置于100 mL容量瓶中，用DMF超聲溶解，冷卻至室溫，用DMF定容至刻度，搖勻，過濾待測。

1.3.3 測定

按上述液相色譜檢測條件，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標樣溶液，計算每針相對響應值的重復性，待相鄰兩針相對響應值的變化小于1%以后，按標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.3.4 計算

將測得的兩針試樣溶液和兩針標樣溶液中吡丙醚（或氟蟲腈）峰面積分別進行平均。試樣中吡丙醚（或氟蟲腈）的質(zhì)量分數(shù)w（%）按式（1）計算。

式中：A1為標樣溶液中吡丙醚（或氟蟲腈）峰面積的平均值，mAU·s；A2為試樣溶液中吡丙醚（或氟蟲腈）峰面積的平均值，mAU·s；m1為吡丙醚（或氟蟲腈）標準品的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；P為標準品中吡丙醚（或氟蟲腈）的質(zhì)量分數(shù)，%。

2 結果與討論

2.1 流動相的選擇

為使兩種組分能有效分離，并且分析時間相對合適，峰形尖銳，保留時間適中，根據(jù)吡丙醚和氟蟲腈的結構和性質(zhì)，對不同配比的乙腈和水流動相進行篩選。結果表明，流動相為乙腈＋水（體積比75∶25），流速1.2 mL/min，氟蟲腈的保留時間約為3.98 min，吡丙醚的保留時間約為8.44 min。

2.2 檢測波長的選擇

利用紫外-可見檢測器對吡丙醚和氟蟲腈溶液在190～360 nm范圍內(nèi)進行掃描。氟蟲腈和吡丙醚的紫外吸收譜圖分別見圖3、圖4。在278 nm波長時，氟蟲腈和吡丙醚均有較理想的吸收，且吸收比例合適，各種雜質(zhì)不影響氟蟲腈和吡丙醚的測定，因此選擇278 nm作為檢測4%吡丙醚·氟蟲腈微囊懸浮-懸浮劑方法的最佳吸收波長。

圖3 氟蟲腈紫外吸收譜圖

圖4 吡丙醚紫外吸收譜圖

2.3 分析方法的線性關系曲線

稱取吡丙醚標樣0.05 g、氟蟲腈標樣0.15 g（均精確至0.000 1 g）于100 mL容量瓶中，用DMF溶解并稀釋至刻度作為母液。用移液管分別移取4、7、10、13、16、19 mL于6個100 mL容量瓶中，用DMF稀釋至刻度，共配制6種不同質(zhì)量濃度的標樣溶液。待儀器穩(wěn)定后，分別進同樣體積的標樣，進行測定。以氟蟲腈、吡丙醚的質(zhì)量濃度為橫坐標，以相對應的峰面積為縱坐標繪制標準曲線（圖5、圖6）。方法線性關系良好。氟蟲腈和吡丙醚線性方程分別為y=6×106x＋3 799.8和y=7×106x＋1 175.8，相關系數(shù)均為0.999 9。

圖5 氟蟲腈標準曲線

圖6 吡丙醚標準曲線

2.4 分析方法的精密度

從同一樣品中稱取5個試樣，在上述色譜條件下進行分析，測得氟蟲腈、吡丙醚的標準偏差均為0.01，變異系數(shù)分別為0.32%、0.87%（表1）。

表1 分析方法的精密度試驗結果

2.5 分析方法的準確度

稱取5個已知含量的試樣于100 mL容量瓶中，分別加入1.3.1中配制的吡丙醚、氟蟲腈標準品溶液A 5 mL，用DMF超聲溶解，冷卻至室溫，用DMF定容至刻度，搖勻，測定本方法中氟蟲腈和吡丙醚的加標回收率。經(jīng)測定，氟蟲腈的回收率為99.49%～99.71%，平均回收率為99.57%；吡丙醚的回收率為99.52%～100.60%，平均回收率為100.02%。試驗結果見表2。

表2 分析方法的準確度試驗結果

3 結 論

用高效液相色譜法對4%吡丙醚·氟蟲腈微囊懸浮-懸浮劑進行了定性定量分析，結果表明，所采用的方法準確度和精密度較高，線性關系較好，具有簡便、快速、準確及分離效果好的優(yōu)點，能作為吡丙醚、氟蟲腈復配制劑的分析測定方法。