海南江蘺揮發(fā)油化學(xué)成分的研究

（海南大學(xué)海南優(yōu)勢(shì)資源化工材料應(yīng)用技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南?？?70228）

海藻是海洋生物資源的重要組成部分，主要由藍(lán)藻、綠藻、紅藻和褐藻等4大藻類組成。據(jù)估計(jì)，世界海洋中約有24 000余種海藻。海南江蘺（Gracilaria hainanensis）為紅藻門（Rhodophycophyta）、紅藻綱（Florideophyceae）、杉藻目（Gigartinales）、江蘺科（Gracilariaceae）、江蘺屬（Gracilaria）海藻。海南江蘺的主要產(chǎn)地是中國(guó)海南及越南，屬于暖水性藻類，熱帶生長(zhǎng)。

海藻長(zhǎng)期生活在高鹽、缺氧的特殊環(huán)境里，且為了抵抗海洋微生物的感染和攝食生物的吞食，在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中海藻能合成一些有細(xì)胞毒性的次級(jí)代謝產(chǎn)物，如具有抗細(xì)菌、抗真菌、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤等的生理活性物質(zhì)［1－4］。

揮發(fā)油的提取方法有水蒸氣蒸餾法、索氏提取法及快速溶劑萃取法等。海南江蘺含有較多的多糖膠體，提取揮發(fā)油過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的泡沫，嚴(yán)重干擾了水蒸氣蒸餾的正常進(jìn)行。索氏提取法萃取時(shí)間長(zhǎng)，溶劑使用量大。快速溶劑萃取法（accelerated solvent extraction，ASE）具有萃取時(shí)間短、溶劑使用量少、萃取效率高等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于環(huán)境、食品、制藥和聚合物領(lǐng)域。

目前，海南江蘺揮發(fā)油化學(xué)成分活性物質(zhì)的提取及研究國(guó)內(nèi)還未見(jiàn)報(bào)道。為了尋找海南江蘺中有特殊活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物，作者采用快速溶劑萃取法萃取海南江蘺揮發(fā)油，利用氣質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)海南江蘺揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分析，擬為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用海南江蘺奠定基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料與儀器

海南江蘺于2013年12月采自海南文昌，經(jīng)過(guò)鑒定。

海南江蘺除去雜物、洗凈，于45 ℃烘干，粉碎過(guò)40目篩，保存于干燥瓶中，備用。

快速溶劑萃取儀，賽默飛世爾科技公司；氣質(zhì)聯(lián)用儀，德國(guó)安捷倫科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備

取全藻粉，經(jīng)過(guò)快速溶劑萃取儀萃取海南江蘺中的揮發(fā)油，得到淡黃色澄清液體，具有海藻芳香氣味，4℃冰箱保存。

1.2.2 化學(xué)成分分析

利用氣質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)海南江蘺揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分析。

色譜條件：19091N－133型彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×0.25mm，0.25μm）；柱溫為程序升溫，初始溫度90 ℃，以6 ℃·min－1升到240 ℃，載氣為高純度氦氣，載氣流量為1.0 mL·min－1，進(jìn)樣口溫度為240 ℃，分流比為100∶1。

質(zhì)譜條件：離子源為EI源，離子源溫度230℃，電子能量70eV，掃描范圍（m／z）為50～500aum，電離電壓1.2kV，進(jìn)樣量1.0μL。

2 結(jié)果與討論

采用快速溶劑萃取法從海南江蘺揮發(fā)油中分離出26個(gè)組分，海南江蘺揮發(fā)油總離子流圖譜如圖1 所示。

圖1 海南江蘺揮發(fā)油總離子流圖譜Fig.1 Ion chromatogram of Gracilaria hainanensis volatile oil

經(jīng)Agilent Mass Hunter化學(xué)工作站軟件檢索分析和查找相關(guān)質(zhì)譜文獻(xiàn)資料（圖2～4）［5－6］，確定了其中的26種化學(xué)成分，按峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算，得到揮發(fā)油中各化學(xué)成分的相對(duì)含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 海南江蘺揮發(fā)油化學(xué)成分分析Tab.1 Composition analysis of Gracilaria hainanensis volatile oil

由表1可知，海南江蘺揮發(fā)油中，2，5－二正丁基吡唑并［5，1－a］異喹啉、2－（2－苯并噻唑基）－5－甲氧基苯酚、1－（六氫吡咯烷嗪－3－亞基）－3，3－二甲基丁烷－2－酮、苯并嗎啉、5－氟－4－咪唑羧酸等5種化合物的相對(duì)含量較高，分別占24.5%、10.7%、10.5%、10.3、、9.5%。

圖2 苯并嗎啉的化學(xué)結(jié)構(gòu)式及質(zhì)譜圖Fig.2 Chemical structural formula and mass spectrum of 2，3－dihydro－1，4－benzoxazine

圖3 1－（六氫吡咯烷嗪－3－亞基）－3，3－二甲基丁烷－2－酮的化學(xué)結(jié)構(gòu)式及質(zhì)譜圖Fig.3 Chemical structural formula and mass spectrum of 1－（hexahydropyrrolizin－3－ylidene）－3，3－dimethyl－butan－2－one

3 結(jié)論

采用快速溶劑萃取法萃取海南江蘺（Gracilaria hainanensis）揮發(fā)油，利用氣質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分析，并利用質(zhì)譜圖進(jìn)行計(jì)算機(jī)檢索，共鑒定出海南江蘺揮發(fā)油中26種化合物，其中2，5－二正丁基吡唑并［5，1－a］異喹啉、2－（2－苯并噻唑基）－5－甲氧基苯酚、1－（六氫吡咯烷嗪－3－亞基）－3，3－二甲基丁烷－2－酮、苯并嗎啉、5－氟－4－咪唑羧酸等5種化合物的相對(duì)含量較高，分別占24.5%、10.7%、10.5%、10.3% 和9.5%。

圖4 2－（2－苯并噻唑基）－5－甲氧基苯酚的化學(xué)結(jié)構(gòu)式及質(zhì)譜圖Fig.4 Chemical structural formula and mass spectrum of 2－（2－benzothiazolyl）－5－methoxyphenol

［1］羅先群，王新廣，錢文斌，等.海南沿海二種海藻抗細(xì)菌生物活性物質(zhì)的提取抑菌活性的研究［J］.中國(guó)食品添加劑，2008，（5）：111－118.

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