果酒中苯甲酸的檢測能力驗(yàn)證實(shí)施及應(yīng)用評價(jià)

摘 要：為評價(jià)實(shí)驗(yàn)室測定苯甲酸的技術(shù)能力，特組織實(shí)施此次能力驗(yàn)證。本次能力驗(yàn)證以果酒作為質(zhì)控樣品，樣本發(fā)放前通過了穩(wěn)定性及均勻性檢驗(yàn)，結(jié)果評價(jià)采用Z比分?jǐn)?shù)法。本次能力驗(yàn)證活動(dòng)共有228家實(shí)驗(yàn)室參加，滿意結(jié)果實(shí)驗(yàn)室220家，占比96.5%；可疑結(jié)果實(shí)驗(yàn)室4家，占比1.75%；不滿意結(jié)果實(shí)驗(yàn)室4家，占比1.75%。同時(shí)針對本次驗(yàn)證結(jié)果做出技術(shù)分析及實(shí)驗(yàn)室提升建議。

關(guān)鍵詞：苯甲酸；能力驗(yàn)證；食品安全

Proficiency Testing of Benzoic Acid in Fruit Wine and Its Application Assessment

TIAN Ye1， WANG Le2*

（1.Zhangdian District Disease Prevention and Control Center， Zibo 255000， China;

2.Technical Center of Jinan Customs， Jinan 255014， China）

Abstract： In order to evaluate the technical capability of laboratory determination of benzoic acid， this capability verification is organized and implemented. This proficiency test used fruit wine as a quality control sample， which passed stability and uniformity tests before distribution. The results were evaluated using the Z-ratio score method. A total of 228 laboratories participated in this proficiency testing activity， with 220 laboratories achieving satisfactory results， accounting for 96.5%; 4 laboratories with suspicious results， accounting for 1.75%; there are 4 laboratories with unsatisfactory results， accounting for 1.75%. At the same time， provide technical analysis and laboratory improvement suggestions based on the results of this validation.

Keywords： benzoic acid; proficiency testing; food safety

苯甲酸及其鹽類是食品工業(yè)中廣泛使用的防腐劑，它通過滲透作用改變微生物細(xì)胞的內(nèi)外壓力，從而破壞微生物細(xì)胞的正常功能，抑制微生物的生長，此外苯甲酸會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞中的蛋白質(zhì)變性，破壞微生物的正常代謝功能[1-2]。然而，過量攝入苯甲酸還會(huì)造成肝臟損傷、腎功能障礙等毒副作用，甚至?xí)绊懮窠?jīng)系統(tǒng)并導(dǎo)致細(xì)胞代謝紊亂等[3-4]。

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760—2014）[5]中規(guī)定了苯甲酸的使用原則、范圍和限量。本實(shí)驗(yàn)室組織了此次果酒中苯甲酸的測定能力驗(yàn)證活動(dòng)，以期提升相關(guān)檢測能力，充分發(fā)揮能力驗(yàn)證對檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)質(zhì)量體系運(yùn)行和工作質(zhì)量控制的作用。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器

苯甲酸，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，德國DR；甲醇（色譜純）、甲酸（色譜純）、乙酸銨（優(yōu)級純），上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司；Agilent 1260液相色譜儀，配備DAD檢測器，安捷倫科技有限公司。

1.2 檢測方法

本次能力驗(yàn)證推薦的檢測方法為《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定》（GB 5009.28—2016）第一法 液相色譜法[6]。

1.3 樣品均勻性檢驗(yàn)

將所有樣品分裝后分為兩批，在每批次樣品中各隨機(jī)抽取10份（m=10）樣品，按照GB 5009.28—2016第一法對所抽取的樣品進(jìn)行檢測，每個(gè)樣品在同樣的條件下平行測定2次。

判定原則：①在樣品發(fā)送前，采用單因子方差分析法，通過F檢驗(yàn)對樣品進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)。檢驗(yàn)具體方法依據(jù)《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價(jià)指南》（CNAS-GL003：2018）進(jìn)行[7]。判定樣品內(nèi)和樣品間無顯著性差異，需滿足Flt;自由度為（f1， f2）及給定顯著性水平α（通常α=0.05）的臨界值Fα（f1， f2），表明樣本是均勻的。②收到參加實(shí)驗(yàn)室檢測數(shù)據(jù)反饋后，計(jì)算樣品之間不均勻性標(biāo)準(zhǔn)偏差Ss以及參加實(shí)驗(yàn)室檢測數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差σ，若Sslt;0.3σ，則表明樣品間無顯著差異。

1.4 樣品穩(wěn)定性檢驗(yàn)

依據(jù)《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價(jià)指南》（CNAS-GL003：2018），對樣品進(jìn)行貯存溫度下穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)及高溫模式下穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。兩種穩(wěn)定性測試分別是在兩種溫度模式下，在不同的保存時(shí)間、不同保存溫度下隨機(jī)抽取3個(gè)樣品，進(jìn)行均勻性測試，并將樣品結(jié)果的均值與均勻性檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較，之間的絕對差值除以能力驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)偏差σ，以比值小于0.3為原則確定樣品的最長保存時(shí)間。統(tǒng)計(jì)公式為

|X-Y|/σ≤0.3（1）

式中：X為穩(wěn)定性檢驗(yàn)測試結(jié)果的均值；Y為相應(yīng)的均勻性測試結(jié)果均值；σ為本次能力評定標(biāo)準(zhǔn)差。

1.5 樣品發(fā)放

樣品使用白色PP瓶包裝并密封，每份樣品約為50 mL。樣品標(biāo)識貼于包裝瓶上，樣品編號為實(shí)驗(yàn)室代碼，每個(gè)樣品的標(biāo)識均具有唯一性。樣品常溫運(yùn)輸，到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，建議2～8 ℃冷藏保存。

1.6 結(jié)果評價(jià)原則

結(jié)果評價(jià)采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)方法[8]進(jìn)行評價(jià)。能力驗(yàn)證結(jié)果的計(jì)算及評價(jià)公式為

Z=（x-A）/σ（2）

式中：x為參加者能力驗(yàn)證結(jié)果；A為中位值；σ為能力評定標(biāo)準(zhǔn)差。

當(dāng)|Z|≤2.0反饋結(jié)果為“滿意”；2.0＜|Z|＜3.0反饋結(jié)果為“可疑”；|Z|≥3.0反饋結(jié)果為“離群”。

1.7 保密及防串通措施

本計(jì)劃共制備了3組濃度水平的果酒樣品，隨機(jī)發(fā)給3組參加者。在能力驗(yàn)證過程中以實(shí)驗(yàn)室編號和樣品號作為樣品分發(fā)、結(jié)果報(bào)告及統(tǒng)計(jì)的依據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品均勻性檢驗(yàn)結(jié)果

由表1可知，3組樣品的F值均小于臨界值F0.05（9，10）=3.02，這說明在95%置信概率下，樣本的均勻性滿足能力驗(yàn)證過程的技術(shù)要求。同時(shí)，Ss均小于0.3σ，說明樣品間無顯著差異，進(jìn)一步驗(yàn)證了樣品的均勻性符合要求。

2.2 樣品穩(wěn)定性檢驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，|X-Y|/σ均小于0.3，說明3組樣品在測試允許時(shí)間范圍內(nèi)的穩(wěn)定性達(dá)到了能力驗(yàn)證樣品要求。

2.3 能力驗(yàn)證結(jié)果分析

本次能力驗(yàn)證活動(dòng)共有228家實(shí)驗(yàn)室參加，滿意結(jié)果實(shí)驗(yàn)室220家，占比96.5%；可疑結(jié)果實(shí)驗(yàn)室4家，占比1.75%；不滿意結(jié)果實(shí)驗(yàn)室4家，占比1.75%。能力驗(yàn)證結(jié)果統(tǒng)計(jì)量見表3，結(jié)果評價(jià)情況見表4。各實(shí)驗(yàn)室Z值分布結(jié)果如圖1、圖2、圖3。

3 影響苯甲酸檢測結(jié)果的原因分析

果酒中的苯甲酸測定過程簡便易操作，但仍有少數(shù)實(shí)驗(yàn)室離群，經(jīng)溝通并查閱相關(guān)資料，發(fā)現(xiàn)造成本次能力驗(yàn)證結(jié)果偏離的主要因素有以下幾方面。①標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的影響。能力驗(yàn)證樣本的檢測，對所使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有較為嚴(yán)格要求。應(yīng)保證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測定能追溯，并確保標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)保存得當(dāng)，并在使用有效期內(nèi)。同時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)曲線選擇范圍不合理也是本次實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果不滿意原因之一。有實(shí)驗(yàn)室在使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)未將其濃度考慮在內(nèi)，導(dǎo)致結(jié)果離群。②儀器設(shè)備的影響。液相色譜儀的工作參數(shù)對于檢測結(jié)果有較大影響。樣品上機(jī)檢測后數(shù)據(jù)處理時(shí)，峰型較差，不能準(zhǔn)確識別目標(biāo)組分以及積分參數(shù)不合理均會(huì)造成檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差，最終導(dǎo)致結(jié)果的可疑或離群。③檢測人員的影響。為降低實(shí)驗(yàn)室誤差，檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)選擇工作經(jīng)驗(yàn)豐富，能力較強(qiáng)的檢測人員作為主要檢測人。檢測人員不僅要具備扎實(shí)的專業(yè)知識和技能，還需具有較強(qiáng)責(zé)任心以及嚴(yán)謹(jǐn)、求實(shí)的工作態(tài)度。綜上，建議出現(xiàn)可疑或離群結(jié)果的檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)根據(jù)能力驗(yàn)證過程反向核查試驗(yàn)過程，分析并找出造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不滿的具體原因并進(jìn)行整改，以提高實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)能力和管理水平。

4 結(jié)論

本次能力驗(yàn)證共有參加者228家，其中獲得滿意結(jié)果實(shí)驗(yàn)室220家，可疑結(jié)果實(shí)驗(yàn)室4家，不滿意結(jié)果實(shí)驗(yàn)室4家。說明大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室具備果酒中苯甲酸的檢測能力，能夠正確運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)方法對苯甲酸進(jìn)行檢測。

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[6]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)，國家食品藥品監(jiān)督管理總局.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定：GB 5009.28—2016[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

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[8]中國合格評定國家認(rèn)可委員會(huì).能力驗(yàn)證結(jié)果的統(tǒng)計(jì)處理和能力評價(jià)指南：CNAS-GL002：2018[S/OL].（2018-03-29）[2024-08-12].https：//www.cnas.org.cn/fwzl/nlyzzl/nlyzxgzcyzl/889732.shtml.