妊娠晚期陰道微生態(tài)改變與GBS感染的關(guān)系探究

【摘要】 目的：探討妊娠晚期陰道微生態(tài)改變與B族鏈球菌（GBS）感染的關(guān)系。方法：選取2022年1月—2023年1月九江市婦幼保健院收治的疑似GBS感染的妊娠晚期孕婦80例，將生殖道GBS檢測陽性的妊娠晚期孕婦40例納入陽性組，另將生殖道GBS檢測陰性的妊娠晚期孕婦40例納入陰性組。比較兩組患者陰道微生態(tài)指標(biāo)（功能學(xué)指標(biāo)、陰道菌群密集度、陰道菌群多樣性、陰道清潔度、Nugent評分），采用多因素logistic回歸分析妊娠晚期GBS感染與陰道微生態(tài)改變的相關(guān)性。結(jié)果：單因素分析結(jié)果顯示，陽性組過氧化氫（H2O2）、白細(xì)胞酯酶（LE）、唾液酸苷酶（SNA）、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）陽性率均高于陰性組，pH值、陰道清潔度、陰道菌群密集度、陰道菌群多樣性異常率及BV診斷率均高于陰性組（P<0.05）。多因素logistic回歸分析結(jié)果顯示，低H2O2、高LE、高pH值、陰道清潔度異常、高Nugent評分是GBS感染的獨立危險因素（P<0.05）。結(jié)論：陰道微生態(tài)改變與GBS感染密切相關(guān)，臨床應(yīng)重視對妊娠晚期孕婦H2O2、LE、pH值、陰道清潔度及Nugent評分的評估，以便對GBS感染進(jìn)行早期診斷和干預(yù)。

【關(guān)鍵詞】 妊娠晚期 陰道微生態(tài) B族鏈球菌

Relationship Exploration between Vaginal Microecology Changes and GBS Infection in Late Pregnancy/TONG Lu， WEN Xiao， DUAN Jiaqing. //Medical Innovation of China， 2024， 21（27）： -135

[Abstract] Objective： To explore the relationship between vaginal microecology changes and group B streptococcus （GBS） infection in late pregnancy. Method： A total of 80 gravidas in late pregnancy with suspected GBS infection admitted to Jiujiang Maternal and Child Health Hospital from January 2022 to January 2023 were selected， 40 gravidas in late pregnancy with positive of genital tract GBS detection were included in the positive group， and 40 gravidas in late pregnancy with negative genital tract GBS detection were included in the negative group. Vaginal microecology indicators （functional indicators， vaginal flora density， vaginal flora diversity， vaginal clearing degree， Nugent score） were compared between the two groups. Multivariate logistic regression was used to analyze the relationship between GBS infection and vaginal microecology changes in late pregnancy. Result： Univariate analysis showed that the positive rates of hydrogen peroxide （H2O2）， leukocyte esterase （LE）， sialidases （SNA） and N-acetyl-β-glucosaminidase （NAG） in the positive group were higher than those in the negative group， and the abnormal rate of pH value， vaginal clearing degree， vaginal flora density， vaginal flora diversity and BV diagnostic rate were higher than those in the negative group （P<0.05）. Multivariate logistic regression analysis showed that low H2O2， high LE， high pH value， abnormal vaginal clearing degree and high Nugent score were independent risk factors for GBS infection （P<0.05）. Conclusion： Vaginal microecology changes are closely related to GBS infection. Clinical evaluation of H2O2， LE， pH， vaginal clearing degree and Nugent score of gravidas in late pregnancy should be emphasized for early diagnosis and intervention of GBS infection.

[Key words] Late pregnancy Vaginal microecology Group B streptococcus

First-author's address： Department of Laboratory， Jiujiang Maternal and Child Health Hospital， Jiujiang 332000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.27.030

正常情況下陰道微生態(tài)環(huán)境呈弱酸性動態(tài)平衡狀態(tài)，各種微生物之間相互影響、制約，以維持微生態(tài)平衡。但當(dāng)出現(xiàn)機(jī)體免疫功能低下等情況時，陰道酸性環(huán)境容易被破壞，易出現(xiàn)菌群失調(diào)[1]。B族鏈球菌（GBS）廣泛存在于人體泌尿生殖系統(tǒng)中，孕婦作為特殊群體，陰道黏膜形態(tài)發(fā)生改變，且普遍存在免疫力低下、內(nèi)分泌失調(diào)等問題，致使GBS感染發(fā)生率普遍較高[2]。相關(guān)統(tǒng)計學(xué)研究表明我國每年孕產(chǎn)婦GBS定植率可達(dá)14.52%[3]。此外，GBS感染具有帶菌量大、易傳播等特點，易發(fā)生上行傳染，導(dǎo)致產(chǎn)褥期感染、陰道出血、早產(chǎn)等發(fā)生率增加，威脅孕產(chǎn)婦生命和安全[4]。再者，該菌垂直傳播率高達(dá)50%，易傳播給胎兒或新生兒，增加新生兒胎膜早破、新生兒肺炎等疾病發(fā)生風(fēng)險，使胎兒或新生兒死亡風(fēng)險增加[5]。目前，已有研究表明妊娠晚期GBS感染的發(fā)生、發(fā)展與陰道微生態(tài)系統(tǒng)功能失衡之間存在一定聯(lián)系[6]。本研究對妊娠晚期陰道微生態(tài)改變與孕婦GBS感染的關(guān)系展開研究，旨在為臨床GBS感染的預(yù)防、控制及管理提供參考，現(xiàn)詳述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2022年1月—2023年1月九江市婦幼保健院收治的80例疑似GBS感染孕婦作為研究對象。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①單胎妊娠；②無羊水過多、妊娠期糖尿病等妊娠合并癥或妊娠并發(fā)癥；③意識、認(rèn)知正常；④年齡20～35歲；⑤孕28～40周；⑥無生殖器官畸形；⑦有尿路感染，頭暈頭痛，惡心嘔吐，發(fā)熱，腰痛等疑似GBS感染癥狀。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他陰道病原菌感染；②近1個月內(nèi)服用過阿莫西林等抗菌藥物或進(jìn)行過陰道局部用藥；③臨床資料不完整；④GBS感染復(fù)發(fā)；⑤早產(chǎn)。根據(jù)生殖道GBS檢測結(jié)果將GBS陽性的40例妊娠晚期孕婦納入陽性組，另將GBS陰性的40例妊娠晚期孕婦納入陰性組。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，且患者及家屬均知情同意本研究。

1.2 方法

1.2.1 GBS檢查 取膀胱截石位，使用無菌棉試紙獲取孕婦子宮頸分泌物標(biāo)本，使用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）分析儀（杭州安譽科技有限公司，AGS4800）采用實時熒光定量PCR法檢測GBS，試劑盒購自江蘇碩世生物科技股份有限公司。

1.2.2 功能學(xué)指標(biāo) 取膀胱截石位，在孕婦陰道低位1/3處取分泌物，使用陰道炎多項檢測試劑盒（江蘇碩世生物科技股份有限公司，50人份/盒）采用干化學(xué)酶法對過氧化氫（H2O2）、白細(xì)胞酯酶（LE）、唾液酸苷酶（SNA）、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）及pH值進(jìn)行檢測。H2O2<2 μmol/L為陽性，LE≥9 U/L為陽性，SNA≥7 U/L為陽性，NAG≥

0.1 U/mL為陽性，pH值≥4.6視為異常。

1.2.3 陰道清潔度 將陰道分泌物置于高倍顯微鏡（江西鳳凰光學(xué)科技有限公司，XSP-30）下觀察，根據(jù)桿菌、球菌、上皮細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)量將陰道清潔度分為Ⅰ～Ⅳ度，其中Ⅰ、Ⅱ度為陰道清潔度正常，Ⅲ、Ⅳ度為陰道清潔度異常[7]。

1.2.4 陰道菌群密集度 于高倍油鏡（奧林巴斯株式會社，SZX16）下觀察陰道分泌物標(biāo)本，根據(jù)每高倍視野下細(xì)菌數(shù)劃分等級，其中Ⅱ級（10～99個）、Ⅲ級（≥100個）為正常，Ⅰ級（1～9個）、Ⅳ級（細(xì)菌聚集成團(tuán)/密集覆蓋黏膜上皮細(xì)胞）為異常[8]。

1.2.5 陰道菌群多樣性 于高倍油鏡下觀察陰道分泌物標(biāo)本細(xì)菌種類，根據(jù)辨別的細(xì)菌種類劃分，Ⅱ級（4～6種）、Ⅲ級（7～9種）為正常，Ⅰ級（1～3種）、Ⅳ級（≥10種）為異常[9]。

1.2.6 Nugent評分 包括乳桿菌（0～4分）、加德納菌及類桿菌（0～4分）、染色不定的彎曲桿菌（1～

2分）3項，總分1～10分，Nugent評分≤3分為正常、4分≤Nugent評分≤6分為中間型[疑似細(xì)菌性陰道?。˙V）]，7分≤Nugent評分≤10分為BV[10]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 22.0分析數(shù)據(jù)。計數(shù)資料用率（%）表示，組間行字2檢驗；計量資料以（x±s）表示，組間行t檢驗；采用多因素logistic回歸分析妊娠晚期孕婦GBS感染影響因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料比較

陽性組孕周28～40周，平均（36.85±1.96）周；

年齡22～34歲，平均（28.17±5.35）歲；孕次1～5次，平均（2.36±0.65）次；產(chǎn)次1～3次，平均（1.51±0.32）次。陰性組孕周28～40周，平均（37.04±1.72）周；年齡21～35歲，平均（28.83±6.12）歲；孕次1～4次，平均（2.18±0.53）次；產(chǎn)次1～3次，平均（1.47±0.27）次。兩組基線資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 妊娠晚期GBS感染單因素分析

單因素分析結(jié)果顯示：陽性組H2O2、LE、SNA、NAG陽性率均高于陰性組，pH值、陰道清潔度、陰道菌群密集度、陰道菌群多樣性異常率及BV診斷率均高于陰性組（P<0.05），見表1。

2.3 妊娠晚期GBS感染多因素分析

以GBS為應(yīng)變量（陽性=1，陰性=0），以H2O2（陽性=1，陰性=0）、LE（陽性=1，陰性=0）、SNA（陽性=1，陰性=0）、NAG（陽性=1，陰性=0）、pH值（異常=1，正常=0）、陰道清潔度（異常=1，正常=0）、陰道菌群密集度（異常=1，正常=0）、陰道菌群多樣性（異常=1，正常=0）、Nugent評分（BV=1，正常、疑似=0）為自變量進(jìn)行賦值。logistic多因素回歸分析結(jié)果顯示：低H2O2、高LE、高pH值、陰道清潔度異常及高Nugent評分是妊娠晚期GBS感染的獨立危險因素（P<0.05），見表2。

3 討論

陰道微生態(tài)系統(tǒng)由陰道微生物群、免疫系統(tǒng)等組成，對維持陰道的正常酸性環(huán)境、預(yù)防病原菌過度繁殖有積極意義[11]。GBS寄生于女性生殖道，是女性陰道微生物群的重要組成部分，正常情況下與其他陰道菌群處于共生狀態(tài)，具有一定防御和保護(hù)能力。但由于妊娠期婦女陰道分泌物和雌激素分泌增加，導(dǎo)致陰道酸性環(huán)境易被破壞，加快細(xì)菌滋生，造成菌群結(jié)構(gòu)失衡，導(dǎo)致GBS感染風(fēng)險增加[12]。研究表明部分妊娠晚期GBS感染患者雖無典型臨床表現(xiàn)，但GBS易通過陰道上行感染至子宮腔，破壞孕婦胎膜屏障，引發(fā)早產(chǎn)、胎膜早破，威脅母嬰生命[13]。因此，早期發(fā)現(xiàn)GBS感染對提高母嬰健康狀況有積極意義。目前臨床尚缺乏統(tǒng)一的GBS篩查方法，雖然可以通過預(yù)防性使用抗生素來降低GBS感染發(fā)病率，但該方法易增加細(xì)菌對抗生素的耐藥性和新生兒敗血癥發(fā)生風(fēng)險[14]。國外已有研究表明陰道菌群失調(diào)與GBS感染有一定相關(guān)性，但我國對二者關(guān)系仍處于研究階段[15]。

本研究對陰道功能學(xué)指標(biāo)展開研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)陽性組H2O2、LE陽性率及pH值異常率均高于GBS陰性組，且多因素logistic回歸分析結(jié)果顯示低H2O2、高LE及高pH值是造成GBS感染的獨立危險因素。分析原因，乳酸桿菌為陰道微生態(tài)系統(tǒng)的優(yōu)勢菌，在正常陰道菌群中高達(dá)50%～80%，不僅具有干擾、抑制致病菌生長黏附、提高機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能的作用，還能夠?qū)⑻窃纸鉃槿樗幔{(diào)節(jié)陰道pH值，此外，其還能抑制多種條件致病菌生長，故陰道菌群缺乏乳酸桿菌的女性更有可能GBS感染[16]。陰道分泌物H2O2濃度與乳酸桿菌數(shù)量和功能密切相關(guān)，正常女性陰道菌群中約96%的乳酸桿菌具有生產(chǎn)H2O2的能力，H2O2濃度降低表明乳酸桿菌數(shù)量減少、功能減退，其抗菌作用也隨之減弱，GBS感染發(fā)生率上升[17]。此外，張萍萍等[18]研究表明GBS感染患者pH值異常率明顯高于GBS陰性患者，本研究結(jié)果與之一致。分析原因在于，當(dāng)陰道pH值上升時，乳酸桿菌生長、繁殖受限，陰道防御機(jī)制遭到破壞，GBS黏附數(shù)量增加，GBS感染風(fēng)險也隨之增加。LE存在于中性粒細(xì)胞，是機(jī)體炎癥反應(yīng)的重要指標(biāo)，陰道分泌物L(fēng)E陽性常提示患者存在陰道炎癥。黃亞軍等[19]研究表明GBS感染組LE水平高于非感染組，本研究結(jié)果與之一致。分析原因在于，當(dāng)陰道發(fā)生炎癥反應(yīng)時，GBS能夠通過蛋白酶水解和細(xì)胞吞噬作用侵襲機(jī)體，導(dǎo)致GBS感染。此外，受炎癥反應(yīng)影響，機(jī)體免疫應(yīng)答機(jī)制受到影響，患者自身抵抗和清除有害細(xì)菌的能力減弱，導(dǎo)致GBS感染風(fēng)險增加。

本研究陽性組陰道清潔度異常率高于陰性組，且陰道清潔度異常是導(dǎo)致GBS感染發(fā)生的獨立危險因素，這與董衛(wèi)國等[20]研究結(jié)果相似。分析原因，陰道清潔度反映陰道菌群環(huán)境，良好的清潔度能夠維持陰道生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定。當(dāng)陰道清潔度下降時，優(yōu)勢菌群發(fā)生改變，陰道白細(xì)胞數(shù)量增多，GBS、氣單胞菌等在陰道內(nèi)大量繁殖導(dǎo)致菌群失調(diào)，且這些微生物使陰道分泌物生化成分發(fā)生改變，產(chǎn)生的氨類、有機(jī)酸及酶類等物質(zhì)導(dǎo)致陰道pH值升高，并造成局部炎癥反應(yīng)加重，為GBS感染創(chuàng)造條件。Nugent評分是反映加德納菌等細(xì)菌的重要指標(biāo)[21]。本研究陽性組BV診斷率明顯高于GBS陰性組，提示Nugent評分升高，GBS感染風(fēng)險增加。Gilbert等[22]對加德納菌與妊娠婦女GBS定植的關(guān)系展開研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)同時接種GBS和加德納菌的妊娠小鼠GBS感染風(fēng)險是未接種加德納菌的10倍。此外，曹清蕓等[23]研究表明Nugent評分與GBS感染呈正相關(guān)，考慮與BV導(dǎo)致患者陰道內(nèi)環(huán)境失調(diào)有關(guān)，但目前其作用機(jī)制相關(guān)研究較少，仍需進(jìn)一步證實。

綜上所述，陰道微生態(tài)改變與GBS感染密切相關(guān)，H2O2降低、LE升高、pH值升高、陰道清潔度異常、Nugent評分升高，GBS感染風(fēng)險也隨之增加。

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（收稿日期：2024-02-19） （本文編輯：陳韻）