不同陳化方式對宛艾中酚酸類和黃酮類物質(zhì)含量的影響

摘要 以酚酸中的新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸B、異綠原酸A、異綠原酸C和黃酮類的棕矢車菊素、異澤蘭黃素為指標，采用高效液相色譜儀（HPLC）研究宛艾自然陳化與加速陳化過程中酚酸類和黃酮類物質(zhì)含量的變化。結(jié)果表明：在加速陳化過程中，大多數(shù)酚酸類物質(zhì)含量增加，黃酮類棕矢車菊素含量逐漸減少，黃酮類異澤蘭黃素含量明顯增加；在自然陳化過程中，黃酮類物質(zhì)棕矢車菊素、異澤蘭黃素含量逐漸增加，酚酸類物質(zhì)隨陳化時間的增加變化各異。研究結(jié)果對宛艾大健康產(chǎn)品的開發(fā)具有一定的借鑒意義。

關(guān)鍵詞 宛艾；陳化方式；酚酸類物質(zhì)；黃酮類物質(zhì)；含量

中圖分類號 R284 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2024）17-0178-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.17.041

Effect of Different Aging Methods on the Content of Phenolic Acids and Flavonoids in Wan Artemisiae argyi

TAN Chun-bin， ZHOU Yao， SU Zhi-min et al

（Chongqing Academy of Chinese Materia Medica， Chongqing 400065）

Abstract Using new chlorogenic acid， chlorogenic acid， cryptochlorogenic acid， caffeic acid， isochlorogenic acid B， isochlorogenic acid A and isochlorogenic acid C in phenolic acids， as well as flavonoids such as brown cyanidin and isoxanthin， as indicators， the changes in the content of phenolic acids and flavonoids during the natural and accelerated aging processes of Wan Artemisiae argyi were studied using high performance liquid chromatography （HPLC）.The results showed that during the accelerated aging process， the content of most phenolic acids were increased and the flavonoid isoxanthin significantly increased， while the flavonoid brown cyanidin gradually decreased. During the natural aging process， the content of flavonoids such as brown cyanidin and isoxanthin were gradually increased， while phenolic acids varied with increasing aging time. The research results had certain reference significance for the development of Wan Artemisiae argyi health products.

Key words Wan Artemisiae argyi;Aging method;Phenolic acids;Flavonoids;Content

基金項目 重慶市科技局基本科研業(yè)務(wù)費項目（cstc2021jxjl-jbky80001）；魯渝科技協(xié)作計劃項目（cstc2021jscx-lyggX0005）。

作者簡介 譚春斌（1987—），男，四川遂寧人，副研究員，碩士，從事天然產(chǎn)物提取及其改性研究。

通信作者，副研究員，碩士，從事大健康產(chǎn)品研發(fā)工作。

收稿日期 2023-11-05

艾葉是一種中國傳統(tǒng)中藥，民間廣泛應(yīng)用于濕疹、月經(jīng)不調(diào)［1］，其制品艾灸對哮喘、關(guān)節(jié)炎、失眠等具有較好的治療效果［2］。艾葉中酚酸類物質(zhì)綠原酸、異綠原酸具有降血糖［3］、抗氧化［4-5］、止血與抗凝血作用［6］，艾葉中黃酮類物質(zhì)具有治療風濕性關(guān)節(jié)炎［7］、抗氧化活性［8］、抗腫瘤作用［9-10］，可見艾葉中酚酸類和黃酮類物質(zhì)具有較大的研究價值。該研究對宛艾中酚酸類和黃酮類物質(zhì)進行了檢測，并對比了自然陳化與加速陳化過程中宛艾酚酸類和黃酮類活性物質(zhì)含量變化趨勢。

1 材料與方法

1.1 儀器

高效液相色譜儀（LC-20A，日本島津）；色譜柱Agilent HC-C18；電子天平（AUW220D，日本島津）；低速臺式離心機（800D，上海安亭科學(xué)儀器廠）；超聲波清洗機（SB-5200DT，寧波新芝生物科技股份有限公司）。

1.2 試材

甲醇（AR）、乙腈（HPLC）、磷酸（HPLC），均購于上海阿達瑪斯試劑有限公司。新綠原酸 、綠原酸 、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸B、異綠原酸A、異綠原酸C、棕矢車菊素、異澤蘭黃素標準品，均購于成都埃法生物科技有限公司。宛艾，采購于重慶市彭水縣青木湖村。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗設(shè)計。

將宛艾分成2批，一批自然陳化，一批加速陳化。自然陳化：放除濕柜內(nèi)自然陰干。加速陳化：在溫度 （40± 2）℃、相對濕度（75±5）%的條件下放置，分別于開始加速陳化時、加速陳化30 d、加速陳化60 d、加速陳化90 d、 加速陳化120 d、加速陳化150 d，取樣，按選定方法取樣進行含量測定。

1.3.2 宛艾酚酸類物質(zhì)檢測樣品制備。

將宛艾打粉，過40目篩，稱取0.5 g左右粉末，置于100 mL錐形瓶中，加入70%的甲醇水溶液50 mL，稱重。1 h后，超聲30 min，用70%的甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，離心5 min，濾液過膜得樣品。

1.3.3 液相條件。

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱為Agilent HC-C18，4.6 mm×250 mm×5 μm）；以乙腈為流動相A，0.1%磷酸為流動相B，按表1進行梯度洗脫；流速0.5 mL/min；柱溫35 ℃；進樣量10 μL；檢測波長341 nm。

2 結(jié)果與分析

2.1 HPLC檢測

圖1為宛艾加速陳化與自然陳化過程中酚酸類和黃酮類物質(zhì)的HPLC圖。其中混合標準對照品HPLC圖中各自對應(yīng)的色譜峰保留時間與對應(yīng)酚酸類、黃酮類化合物如表2所示。

2.2 不同陳化方式酚酸類和黃酮類物質(zhì)含量變化

從表3、4可以看出，無論是加速陳化還是自然陳化，隨著陳化時間的延長，宛艾中異澤蘭黃素含量均呈增加趨勢。加速陳化中，在溫度（40±2）℃、相對濕度（75±5）%的條件下放置，異澤蘭黃素含量是先增加后逐漸趨于平穩(wěn)，加速陳化30～90 d，異澤蘭黃素含量增加最為顯著。在加速陳化120 d時異澤蘭黃素含量是初始陳化時的7.1倍。加速陳化過程中異綠原酸A的變化趨勢與異澤蘭黃素的變化趨勢類似，不同的是異綠原酸A在60～90 d變化最為顯著。加速陳化150 d時異綠原酸A含量是初始陳化時的2.7倍。

從表3可以看出，在加速陳化過程后中，陳化150 d與陳化初始期相比，新綠原酸含量增加2.1倍，綠原酸含量增加5.5倍，隱綠原酸含量增加0.9倍。隨著陳化時間的延長，咖啡酸含量先增加后減少，加速陳化150 d時其含量低于陳化初始期；異綠原酸B含量沒有明顯的變化規(guī)律；異綠原酸A含量在60 d內(nèi)變化不大，加速陳化150 d時其含量較陳化初始期增加1.7倍；異綠原酸C含量在陳化過程中變化不大；棕矢車菊素含量在加速陳化過程逐漸減少，加速陳化150 d時其含量約為陳化初始期的16.4%；隨著陳化時間的延長，異澤蘭黃素含量增加并趨于穩(wěn)定。

從表4可以看出，宛艾在自然陳化過程中，隨著陳化時間的延長，黃酮類物質(zhì)棕矢車菊素、異澤蘭黃素含量總體呈現(xiàn)增加趨勢；而酚酸類物質(zhì)含量變化各異，隨著陳化時間的延長，新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸B的含量總體呈現(xiàn)增加趨勢，異綠原酸A、異綠原酸C的含量呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢，咖啡酸含量呈增加—減少—增加的趨勢。自然陳化120 d與陳化初始期相比，新綠原酸含量約為陳化初始期的2.1倍、綠原酸含量約為5.2倍、隱綠原酸含量約為6.2倍、咖啡酸含量約為36.3倍、異綠原酸B含量約為9.4倍、異綠原酸A含量約為5.3倍、異綠原酸C含量約為8.5倍、棕矢車菊素含量約為37.9倍、異澤蘭黃素含量約為10.9倍。

3 結(jié)論

中藥材采收后一般都有干燥的步驟，關(guān)于艾葉在陳化過程中酚酸類、黃酮類物質(zhì)的含量變化情況文獻報道較少。宛艾在自然陳化過程中，隨著陳化時間的延長，黃酮類物質(zhì)棕矢車菊素、異澤蘭黃素含量總體呈現(xiàn)增加趨勢；而酚酸類物質(zhì)含量變化各異，隨著陳化時間的延長，新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸B的含量總體呈現(xiàn)增加趨勢，異綠原酸A、異綠原酸C的含量呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢，咖啡酸含量呈增加—減少—增加的趨勢。宛艾在加速陳化過程中，隨著陳化時間的延長，黃酮類物質(zhì)棕矢車菊素含量逐漸減少，異澤蘭黃素含量增加并趨于穩(wěn)定；酚酸類物質(zhì)新綠原酸、原綠原酸、隱綠原酸的含量總體呈現(xiàn)增加趨勢，異綠原酸B含量沒有明顯的變化規(guī)律；異綠原酸A含量在60 d內(nèi)變法不大，加速陳化150 d其含量較陳化初始期增加1.7倍；異綠原酸C含量變化不大。該研究對艾葉大健康產(chǎn)品的開發(fā)具有一定的借鑒意義。

參考文獻

［1］ 夏佳璇.艾葉酚類成分的質(zhì)量控制與藥代動力學(xué)研究［D］.武漢：湖北中醫(yī)藥大學(xué)，2020.

［2］ CHEN L L，ZHANG H J，CHAO J，et al.Essential oil of Artemisia argyi suppresses inflammatory responses by inhibiting JAK/STATs activation［J］.J Ethnopharmacol，2017，204：107-117.

［3］ XIAO J Q，LIU W Y，SUN H P，et al.Bioactivity-based analysis and chemical characterization of hypoglycemic and antioxidant components from Artemisia argyi［J］.Bioorg Chem，2019，92：1-10.

［4］ JI L L，JIANG P，LU B，et al.Chlorogenic acid，a dietary polyphenol，protects acetaminophen-induced liver injury and its mechanism［J］.J Nutr Biochem，2013，24（11）：1911-1919.

［5］ 侯彩平，韓利文，張鳳，等.異綠原酸 A 的抗氧化活性研究［J］.食品工業(yè)科技，2017，38（12）：72-76.

［6］ 宋瑾.中草藥體外止血及抗菌活性的評價研究［D］.南寧：廣西大學(xué)，2016.

［7］ 石妤，路艷霞，陽航，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討艾葉黃酮治療類風濕性關(guān)節(jié)炎的作用機制［J］.湖北大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2023，45（3）：332-338.

［8］ FEI X W，WANG J，CHEN C，et al.Eupatilin inhibits glioma proliferation，migration，and invasion by arresting cell cycle at G1/S phase and disrupting the cytoskeletal structure［J］.Cancer Manag Res，2019，11：4781-4796.

［9］ 李欽.艾蒿總黃酮誘導(dǎo)人肝癌細胞株SMMC7721凋亡及相關(guān)調(diào)控基因的研究［D］.南昌：南昌大學(xué)，2016.

［10］ 胡倩，劉大會，曹艷.艾葉黃酮類化合物的研究進展［J］.食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2019，10（12）：3648-3653.