聚合物刷型二齒硼酸配體吸附劑的制備及其對尿液中核苷的分離富集性能分析

摘要 為提高硼親和吸附劑的結(jié)合力和吸附容量，以丙烯酰胺為單體，通過原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)在聚多巴胺磁性微球（Fe3O4@pDA）表面接枝富含氨基的聚合物刷，然后鍵合二齒硼酸配體，獲得聚合物刷型二齒硼酸配體吸附劑（Fe3O4@pDA@p-DBA）。利用紅外光譜和X-射線光電子能譜對材料進(jìn)行表征，并研究了材料的吸附性能。結(jié)果表明，吸附劑對順式二羥基化合物具有較高的選擇性，并且二齒硼酸配體吸附劑較單齒硼酸配體吸附劑（Fe3O4@pDA@p-BA）具有更高的親和力和吸附容量，說明二齒硼酸配體對材料的親和力和吸附容量有促進(jìn)作用。靜態(tài)等溫吸附和動(dòng)態(tài)吸附研究結(jié)果表明，此材料對核苷的吸附符合Freundlich 擬合及準(zhǔn)二級動(dòng)力學(xué)方程，為多層吸附，其中化學(xué)吸附起主導(dǎo)作用。在中性至弱酸性條件下，此材料對順式二羥基分子仍具有良好的吸附性，有利于生物樣品的直接分離富集。當(dāng)緩沖液pH=6.5 時(shí)，對于濃度為1.0 μg/mL 的腺苷、鳥苷、胞苷和尿苷4 種核苷混合溶液，最佳吸附劑質(zhì)量為30.0 mg。最佳洗脫條件為0.5 mL 0.1 mol/L 甲酸-甲醇（1∶1， V/V）混合溶液洗脫2 次，每次洗脫5 min。將此吸附劑用于尿液中核苷的分離富集，利用高效液相色譜進(jìn)行檢測，檢測出尿液中腺苷、鳥苷、胞苷和尿苷的含量分別為8.0、50.4、29.3 和35.2 ng/mL，加標(biāo)回收率為87.6%～107.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.8%～9.2%，說明本方法的準(zhǔn)確度較高，結(jié)果可靠。

關(guān)鍵詞 二齒硼酸配體；線性聚合物刷；親和力；分離富集；核苷

核苷是DNA 和RNA 的基本組成單位，是生命體內(nèi)最重要的生物分子之一。核苷及其代謝物在能量轉(zhuǎn)化、細(xì)胞生長、代謝和生理調(diào)節(jié)等生物學(xué)功能中發(fā)揮了重要作用[1-3]。生物體液中核苷及其代謝物含量反映了機(jī)體的健康水平，對其含量的檢測可以了解機(jī)體的健康狀況。目前，檢測核苷的方法主要有高效液相色譜法（HPLC）[4]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）[5]、毛細(xì)管電泳法（CE）[6]和熒光法（FL）[7]等。HPLC 法簡單、準(zhǔn)確、靈敏，是檢測核苷最常用的方法。但是，生物體液中核苷的含量極低且基質(zhì)復(fù)雜，因此，在HPLC 分析之前必須對生物樣品進(jìn)行前處理[8]。

近年來，硼親和固相萃取被廣泛應(yīng)用于核苷的分離富集[9-11]。傳統(tǒng)的硼親和吸附劑主要以苯硼酸為配體，通過小分子間隔臂將配體直接鍵合在基質(zhì)表面，其親和力較弱、富集效率低，并且在較高pH 值條件下才能與順式二羥基結(jié)合，不適合生物樣品（pH 值接近中性）的直接預(yù)富集[12-13]。超支化聚合物修飾法通過提高硼酸配體的鍵合密度，利用“多位點(diǎn)”協(xié)同吸附提高親和力[14-15]。由于空間位阻作用，超支化大分子的接枝密度有限。同時(shí)，超支化大分子的支鏈呈分散狀排布，并且氨基利用率有限，采用傳統(tǒng)的單齒硼酸配體時(shí)，硼親和位點(diǎn)的密度較低。與超支化聚合物不同，線性聚合物排列有序，可在材料表面形成高密度的聚合物刷[16]。目前，制備硼親和吸附劑主要是以3-丙烯酰胺基苯硼酸或4-乙烯基苯硼酸為單體，采用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP）法向基質(zhì)表面接枝側(cè)鏈為苯硼酸的線性聚合物[17-19]。ATRP 法首先將引發(fā)劑鍵合在材料表面，然后引發(fā)單體原位聚合，通過控制引發(fā)劑的密度和聚合時(shí)間可有效調(diào)控聚合物刷的接枝密度和鏈長；同時(shí)，聚合物刷的碳-碳骨架靈活，自由度較高。因此，線性聚合物修飾法能更有效地提高硼酸配體的鍵合密度[20]，提高吸附容量。

本研究組前期研究表明，分子內(nèi)含有2 個(gè)硼酸基的二齒硼酸配體（Diboronic acid， DBA）有助于提高材料的親和力和吸附容量[21-22]。本研究將DBA 修飾在線性聚合物鏈的側(cè)鏈上，最終在材料表面形成二齒硼酸配體線性聚合物刷。線性聚合物刷與DBA 結(jié)合，不僅能增大硼酸配體的密度，而且其線狀分子刷構(gòu)型更有利于硼酸配體與目標(biāo)分子結(jié)合，有利于提高親和力和吸附容量。最后，將此材料用于尿液中核苷的分離富集，顯示了優(yōu)良的選擇性，回收率高。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

1260 Infinity 高效液相色譜儀（美國安捷倫科技有限公司）；K-AlphaxＸ射線光電子能譜儀（美國賽默飛世爾科技有限公司）；Tensor 27 紅外光譜儀（德國布魯克公司）；智能型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上?，樮帉?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；空氣浴搖床（上海島析實(shí)業(yè)有限公司）。

Fe3O4·6H2O（98%）和N，N-二異丙基乙胺（99%）購自上海麥克林生化有限公司；鹽酸多巴胺（DA，98%）、2-溴異丁酰溴（2-BIB， 98%）、丙烯酰胺（AM， 99%）、2，2-二吡啶（Bpy， 99%）、4-甲酰苯硼酸（4-FBA， 97%）、氰基硼氫鈉（95%）、三聚氯氰（99%）和3-氨基苯硼酸（分析純）購自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；胞苷（98%）、腺苷（99%）、鳥苷（98%）和尿苷（99%）購自上海藍(lán)季生物試劑有限公司；對苯二酚（分析純）購自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；鄰苯二酚（分析純）購自上海三愛思試劑有限公司。其它試劑均為分析純。

1.2 聚合物刷型二齒硼酸配體吸附劑的制備

1.2.1 DBA的制備

參照文獻(xiàn)[22]的方法合成DBA。將1.39 g 3-氨基苯硼酸和0.92 g 無水乙酸鈉溶于10 mL 50%乙酸溶液中，另將0.84 g 三聚氯氰溶于20 mL 冰乙酸中。將兩種溶液混合，室溫下攪拌反應(yīng)3 h，得到乳白色懸浮液，抽濾，棄去濾液，產(chǎn)物用乙酸和水依次洗滌3 次， 40 ℃真空干燥，得到白色粉末。

1.2.2 ATRP法鍵合聚丙烯酰胺

參照文獻(xiàn)[22]的方法制備聚多巴胺磁性微球（Fe3O4@pDA），以其為基質(zhì)制備固體引發(fā)劑。稱取0.6 gFe3O4@pDA 分散于50 mL 四氫呋喃中，冰浴超聲20 min 后，加入0.6 mL 三乙胺和0.5 mL 2-BIB， 4 ℃反應(yīng)3 h 后，升溫至35 ℃反應(yīng)12 h，即得到固體引發(fā)劑2-BIB 修飾的Fe3O4@pDA（Fe3O4@pDA-Br）。用水和甲醇依次洗滌，干燥備用。

以AM 為單體進(jìn)行ATRP 反應(yīng)。將0.5 g Fe3O4@pDA-Br 和0.5 g AM 分散于50 mL DMF 中，超聲20 min，再抽真空-充氮?dú)? 次；將20 mg Bpy 和20 mg 溴化亞銅溶于1 mL DMF 中并注入上述分散液，于60 ℃攪拌16 h，得到聚丙烯酰胺修飾的磁性微球（Fe3O4@pDA@pAM），用甲醇洗滌，干燥備用。

1.2.3 聚合物刷型二齒硼酸配體吸附劑的制備

采用聚合后修飾的方法在聚合物刷的側(cè)鏈上鍵合DBA。向50 mL DMF中加入0.5 g Fe3O4@pDA@pAM、0.6 g DBA 和0.2 mL N，N-二異丙基乙胺， 120 ℃反應(yīng)24 h，得到聚合物刷型二齒硼酸配體吸附劑（Fe3O4@pDA@p-DBA），用甲醇洗滌，干燥備用。

1.3 對照材料聚合物刷型單齒硼酸配體吸附劑的制備

向50 mL 無水甲醇中加入0.5 g Fe3O4@pDA@pAM、0.25 g 4-FBA 和0.3 g 氰基硼氫鈉， 25 ℃反應(yīng)24 h，即得到聚合物刷型單齒硼酸配體吸附劑（Fe3O4@pDA@p-BA），用甲醇洗滌，干燥備用。

1.4 吸附性能研究

1.4.1 選擇性考察

稱取Fe3O4@pDA@p-DBA 或Fe3O4@pDA@p-BA 約10 mg 分散于5.00 mL 鄰苯二酚與對苯二酚的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（16.0 μg/mL， pH 8.5）中，置于恒溫（25 ℃）振蕩器中，以150 r/min 的轉(zhuǎn)速振蕩吸附40 min， 用磁鐵進(jìn)行液固分離，棄去上清液；用1.0 mL NH3-NH4Cl 緩沖液（10 mmol/L， pH 8.5）和1.0 mL 水依次洗滌粒子各2 min，再用1.0 mL 0.2%醋酸洗脫20 min， 用磁鐵進(jìn)行液固分離， 洗脫液進(jìn)行HPLC 分析。

1.4.2 靜態(tài)等溫吸附實(shí)驗(yàn)

分別配制濃度為10～200 μg/mL（pH 8.5）的鄰苯二酚、腺苷或鳥苷標(biāo)準(zhǔn)溶液，稱取Fe3O4@pDA@p-DBA或Fe3O4@pDA@p-BA 約10 mg 分散于5.00 mL 上述標(biāo)準(zhǔn)溶液中，再置于恒溫（25 ℃）振蕩器中，以150 r/min 的轉(zhuǎn)速振蕩吸附40 min，用磁鐵進(jìn)行液固分離，上層清液進(jìn)行HPLC 分析，按公式（1）計(jì)算吸附量，并繪制靜態(tài)等溫吸附線。

1.4.3 吸附動(dòng)力學(xué)研究

稱取約10 mg Fe3O4@pDA@p-DBA 分散于5.00 mL 鳥苷和腺苷的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 μg/mL， pH 8.5）中，設(shè)置吸附時(shí)間為10、20、30、40 和60 min， 按照1.4.2 節(jié)方法測定吸附不同時(shí)間后的吸附量。

1.4.4 pH值的影響

稱取約10 mg Fe3O4@pDA@p-DBA 分散于5.00 mL 鳥苷和腺苷的混合溶液（20 μg/mL， pH 4.5～9.0）中，按照1.4.2 節(jié)方法測定不同pH 值時(shí)的吸附量，考察pH 值的影響。

1.5 實(shí)際樣品分析

取健康志愿者的新鮮尿液， 4 ℃離心，取上清液備用。向1.8 mL 尿液中加入0.2 mL 核苷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，加標(biāo)濃度分別為0、10、20、30、50、100、300、500、700 和1000 ng/mL。將30.0 mgFe3O4@pDA@p-DBA 加入到上述加標(biāo)尿液中，按照1.4.1 節(jié)的方法進(jìn)行前處理，最后用0.5 mL 0.1 mol/L 甲酸-甲醇（1∶1， V/V）混合溶液洗脫2 次，每次洗脫5 min，收集洗脫液進(jìn)行HPLC 檢測。以洗脫液中各物質(zhì)的峰面積為縱坐標(biāo)、各物質(zhì)加標(biāo)濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算尿液中核苷的濃度。

1.6 HPLC條件

Agilent HC-C18 色譜柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm），柱溫為30 ℃，進(jìn)樣量為20 μL，流速為0.8 mL/min。對苯二酚和鄰苯二酚分析的流動(dòng)相為水（A）-甲醇（B）（80∶20， V/V），檢測波長為280 nm；核苷分析的流動(dòng)相為水（A）-甲醇（B）（85∶15， V/V），檢測波長為260 nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 Fe3O4@pDA@p-DBA的制備與表征

為提高硼酸配體的鍵合密度，以Fe3O4@pDA-Br 為固體引發(fā)劑、AM 為單體，通過ATRP 反應(yīng)在Fe3O4@pDA 表面接枝富含氨基的聚合物刷，然后鍵合DBA，從而產(chǎn)生高密度的硼親和位點(diǎn)，以提高吸附容量和萃取效率。同時(shí)，以單齒硼酸配體4-FBA 代替DBA，制備單齒硼酸配體吸附劑作為對照材料，研究DBA 對吸附性能的影響（圖1）。

采用紅外吸收光譜（IR）和X-射線光電子能譜（XPS）對微球表面的化學(xué)結(jié)構(gòu)以及元素組成和含量進(jìn)行表征，結(jié)果見圖2。在Fe3O4@pDA 的紅外光譜中， 1650～1450 cm?1 處的峰為苯環(huán)的特征吸收峰， 1260 cm?1處的峰為C—N 鍵的伸縮振動(dòng)峰， 3432 cm?1 處的峰為為N—H 鍵的伸縮振動(dòng)峰；在XPS 圖譜中， 284.7、399.4和531.9 eV處的能譜分別歸屬于C 1s、N 1s和O 1s，并且N的相對含量為7.23%，與多巴胺分子中的N 含量相近。上述結(jié)果表明，在Fe3O4 表面成功包覆了聚多巴胺。在Fe3O4@pDA-Br 的紅外光譜中，595 cm?1 處的峰為C—Br 鍵的特征吸收峰；在XPS圖譜中， 70.3 eV 處的能譜歸屬于Br 3d， Br 的相對含量為0.67%。以上結(jié)果說明在Fe3O4@pDA 表面成功鍵合了2-BIB。在Fe3O4@pDA@pAM 的紅外光譜中，3432 和3300 cm?1 左右的峰為伯酰胺N—H 鍵的伸縮振動(dòng)峰， 1630 cm?1 左右的吸收峰明顯增強(qiáng)，為C=O的伸縮振動(dòng)峰， 1400 cm?1 處的峰為酰胺C—N 鍵的伸縮振動(dòng)峰；在XPS 圖譜中，出現(xiàn)C 1s、N 1s 和O 1s的譜峰，元素組成和含量沒有明顯變化。以上結(jié)果說明通過ATRP 反應(yīng)在Fe3O4@pDA 表面接枝了聚丙烯酰胺鏈。在Fe3O4@pDA@p-DBA的紅外光譜中， 1380 cm?1 處的峰為B—O的特征吸收峰；在XPS圖譜中，190.3 eV處的峰歸屬于B 1s的電子躍遷， B 的相對含量為1.95%，說明DBA被成功鍵合在材料表面。

2.2 材料的吸附性能和吸附機(jī)理探討

2.2.1 吸附選擇性

采用Fe3O4@pDA@p-DBA 和Fe3O4@pDA@p-BA 對鄰苯二酚和對苯二酚的混合液進(jìn)行固相萃取，考察兩種材料的選擇性及吸附能力（圖3）。經(jīng)固相萃取后，洗脫液中幾乎檢測不到對苯二酚，而鄰苯二酚的信號顯著增強(qiáng)，說明兩種材料對鄰苯二酚都有良好的吸附選擇性。圖3c 中鄰苯二酚的信號強(qiáng)度明顯高于圖3b，說明Fe3O4@pDA@p-DBA 對鄰苯二酚的吸附量高于Fe3O4@pDA@p-BA，表明二齒硼酸配體相較于單齒硼酸配體具有更高的親和吸附能力。

2.2.2 靜態(tài)等溫吸附線

以鄰苯二酚、腺苷和鳥苷為目標(biāo)物，測定Fe3O4@pDA@p-DBA 和Fe3O4@pDA@p-BA 的靜態(tài)等溫吸附線。由圖4A～4C 可知，隨著溶液濃度增加，吸附量增加的速率先快后慢，最后趨于平緩。分別利用Langmuir 模型（公式（2））和Freundlich 模型（公式（3））對等溫吸附線進(jìn)行擬合。

材料的結(jié)合能力可以采用Scatchard 模型進(jìn)行評價(jià)：

為了進(jìn)一步考察二齒配體對親和力的影響，對靜態(tài)等溫吸附線進(jìn)行了Scatchard 擬合。由表1 可知，F(xiàn)e3O4@pDA@p-DBA 的等溫吸附線擬合后的相關(guān)系數(shù)（R2）比Fe3O4@pDA@p-BA 高，并且Kd值均低于Fe3O4@pDA@p-BA，說明Fe3O4@pDA@p-DBA 對順式二羥基分子有更高的親和力[ 25]。經(jīng)擬合，F(xiàn)e3O4@pDA@p-DBA 對鄰苯二酚、腺苷和鳥苷的吸附容量分別為105.3、36.8 和17.4 μmol/g，均高于Fe3O4@pDA@p-BA。同時(shí)， Fe3O4@pDA@p-DBA 的吸附量也高于部分文獻(xiàn)報(bào)道值[11，26]。上述結(jié)果表明，DBA 不僅提高了材料的親和力，也提高了吸附容量。

2.2.3 吸附動(dòng)力學(xué)

以鳥苷和腺苷為例，考察了吸附時(shí)間對Fe3O4@pDA@p-DBA 吸附量的影響（圖5A）。在0～40 min， 吸附量逐漸增大， 40 min 后吸附量隨時(shí)間變化緩慢，說明Fe3O4@pDA@p-DBA 在40 min 內(nèi)基本達(dá)到了吸附平衡。吸附行為通常用準(zhǔn)一級動(dòng)力學(xué)方程（公式（5））和準(zhǔn)二級動(dòng)力學(xué)方程（公式（6））描述。

動(dòng)力學(xué)擬合曲線如圖5B 所示，準(zhǔn)二級動(dòng)力學(xué)擬合的R2 分別為0.9762 和0.9985，高于準(zhǔn)一級動(dòng)力學(xué)擬合。因此，準(zhǔn)二級動(dòng)力學(xué)方程更適合描述Fe3O4@pDA@p-DBA 對核苷的吸附，整個(gè)過程以化學(xué)吸附為主。在吸附過程中，化學(xué)吸附較緩慢（圖5A），因其需要克服活化能[23]，吸附過程表現(xiàn)在動(dòng)力學(xué)曲線上會(huì)出現(xiàn)驟然上升與緩慢上升兩個(gè)階段。

2.2.4 pH值對吸附量的影響

根據(jù)硼親和原理，大多數(shù)硼親和固相萃取需在堿性條件（pH gt; 8.5）下進(jìn)行，因此對實(shí)際應(yīng)用有一定限制。在堿性條件下，酚羥基易氧化，導(dǎo)致樣品的穩(wěn)定性較差；而大部分生物樣品呈弱酸性至中性，需先調(diào)節(jié)其pH 值至堿性再進(jìn)行固相萃取。因此，降低硼親和固相萃取的工作pH 值，有利于保證樣品的穩(wěn)定性，簡化操作[13]?？疾炝司彌_溶液pH 值對吸附量的影響，結(jié)果表明，當(dāng)pH=9.0 時(shí)，腺苷和鳥苷的吸附量最大，當(dāng)pH 值由9.0 逐漸降至4.5 時(shí)，吸附量僅降低了約10%～20%（圖6A），說明Fe3O4@pDA@p-DBA 在中性至弱酸性條件下仍能與核苷分子結(jié)合。因此，將此材料用于分離富集尿液時(shí)，無需將尿液的pH 值調(diào)至堿性。

2.2.5 材料合成的重現(xiàn)性

為了考察材料合成的重現(xiàn)性，測定了同批次Fe3O4@pDA@p-DBA 對鄰苯二酚的吸附量，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD， n=3）為1.8%；3 個(gè)不同批次的Fe3O4@pDA@p-DBA 對鄰苯二酚吸附量的RSD 為4.2%。以上結(jié)果說明，此材料具有良好的合成重現(xiàn)性。

2.3 固相萃取條件的優(yōu)化

為獲得最佳的萃取效率和回收率，對Fe3O4@pDA@p-DBA 的用量、洗脫劑種類及洗脫時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化（圖6B～6D）。當(dāng)緩沖液pH=6.5 時(shí)，對于2.00 mL 濃度為1.0 μg/mL 的4 種核苷混合溶液，最佳吸附劑質(zhì)量為30.0 mg；最佳洗脫條件為0.5 mL 0.1 mol/L 甲酸-甲醇（1∶1， V/V）混合溶液洗脫2 次，每次5 min。

2.4 尿液中核苷的固相萃取

尿液中核苷含量低，并且基質(zhì)復(fù)雜，本研究考察了Fe3O4@pDA@p-DBA 對尿液中核苷固相萃取的選擇性（圖7）。尿液直接進(jìn)樣時(shí)，色譜圖中出現(xiàn)大量干擾峰，僅有少量鳥苷被檢出（圖7b）；向尿液中加入1.0 μg/mL 核苷標(biāo)準(zhǔn)溶液后，直接進(jìn)行HPLC 分析，腺苷、鳥苷、胞苷和尿苷均可被檢出，但由于基質(zhì)干擾嚴(yán)重，未經(jīng)固相萃取的加標(biāo)尿液產(chǎn)生較強(qiáng)的背景吸收和干擾峰，色譜峰分離度較差，影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確度（圖7c）；加標(biāo)尿液經(jīng)過Fe3O4@pDA@p-DBA 固相萃取后，干擾峰基本消除，洗脫液中4 種核苷均出現(xiàn)明顯的色譜峰（圖7d），說明Fe3O4@pDA@p-DBA 能夠有效消除基質(zhì)干擾，對核苷具有較高的吸附選擇性，因此有助于提高分析靈敏度和準(zhǔn)確度，為尿液中核苷的固相萃取-HPLC 檢測提供了新方法。

2.5 方法學(xué)考察

采用標(biāo)準(zhǔn)加入法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。向新鮮尿液中加入腺苷、鳥苷、胞苷和尿苷系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照最佳條件進(jìn)行固相萃取后，采用HPLC 檢測，以洗脫液的峰面積對加標(biāo)濃度作圖，擬合得到標(biāo)準(zhǔn)曲線（表2）。腺苷和鳥苷的線性范圍為10～1000 ng/mL（R2gt;0.99），胞苷和尿苷的線性范圍為20～1000 ng/mL（R2gt;0.98）。根據(jù)空白樣品響應(yīng)信號的3 倍標(biāo)準(zhǔn)偏差對應(yīng)的濃度（S/N=3）確定檢出限（LOD），結(jié)果見表2。

2.6 尿液中核苷的含量測定和回收率

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)加入法的線性方程，采用外推法計(jì)算尿液中內(nèi)源性核苷的含量。結(jié)果表明，內(nèi)源性腺苷、鳥苷、胞苷和尿苷的含量分別為8.0、50.4、29.3 和35.2 ng/mL。進(jìn)行了尿液加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表3。在3 個(gè)加標(biāo)水平（50、400 和800 ng/mL）下，尿液中4 種核苷的回收率為87.6%～107.3%， RSD 為2.8%～9.2%。與文獻(xiàn)[26-27]報(bào)道的方法相比，本方法具有更好的靈敏度、精密度和回收率。

3 結(jié)論

本研究制備了一種聚合物刷型二齒硼酸配體吸附劑，此吸附劑比單齒配體吸附劑有更高的親和力和吸附容量，表明線性聚合物刷與DBA 聯(lián)合促進(jìn)了硼親和位點(diǎn)與順式二羥基的結(jié)合。將此吸附劑應(yīng)用于尿液中核苷的固相萃取，并采用HPLC 檢測，顯示了較高的選擇性、回收率和準(zhǔn)確度。

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