慕于超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜和靶向網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)結(jié)合分子對(duì)接研究薤白治療高血脂癥的藥效成分

關(guān)鍵詞 超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜；靶向網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；分子對(duì)接；薤白；藥效成分

薤白（Allii Macrostemonis Bulbus）為百合科植物小根蒜（Allium macrostemon Bge.）或薤（Allium chinenseG. Don）的干燥鱗莖，近球狀，記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[1]。薤白的化學(xué)成分主要包括甾體皂苷[2-4]和揮發(fā)油[5]等?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，薤白具有降低血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抑制腫瘤以及抗菌等多種藥理作用[6-7]。本研究組前期對(duì)薤白主要皂苷類成分進(jìn)行了化學(xué)分析，共鑒定出33 種成分[8]。口服給藥和胃腸吸收入血是中藥發(fā)揮藥效的主要途徑，因此，應(yīng)用現(xiàn)代技術(shù)系統(tǒng)分析中藥的入血成分對(duì)闡明其藥效成分和作用機(jī)制至關(guān)重要。超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS）技術(shù)具有高通量、高靈敏度、高精確性和高分辨率等特點(diǎn)，是快速、準(zhǔn)確鑒定中藥復(fù)雜成分的一種重要手段，在中藥成分檢測(cè)領(lǐng)域具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。

中藥具有多靶點(diǎn)協(xié)同作用的特點(diǎn)，因此，尋找多靶點(diǎn)協(xié)同增效的藥物是目前研究中藥藥效成分及作用機(jī)理的主要思路[9]。Hopkin 等[10]于2007 年首次被提出“網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)”概念，打破了以往的“一個(gè)藥物、一個(gè)基因、一種疾病”的模式，從整體觀和系統(tǒng)觀解析藥物及治療對(duì)象之間的分子關(guān)聯(lián)規(guī)律，進(jìn)而預(yù)測(cè)中藥復(fù)方或單體主要活性成分的生物學(xué)功能，探究其多靶點(diǎn)共同治療疾病的作用機(jī)制。研究表明，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在預(yù)測(cè)中藥潛在作用靶點(diǎn)方面具有顯著成效[11-14]。分子對(duì)接技術(shù)作為一種以計(jì)算機(jī)技術(shù)為基礎(chǔ)的高通量篩選技術(shù)，近年來在研究中藥材的關(guān)鍵問題方面展現(xiàn)出巨大優(yōu)勢(shì)[15]。該技術(shù)主要從已知結(jié)構(gòu)的受體和配體出發(fā)，對(duì)相互作用的分子進(jìn)行識(shí)別，并預(yù)測(cè)分子間的結(jié)合模式和親合力，達(dá)到節(jié)省大量的時(shí)間和成本、提高藥物研發(fā)成功率的目的，近年來已成為計(jì)算機(jī)輔助藥物研究領(lǐng)域的重要技術(shù)。

本研究采用UPLC-Q-TOF-MS 技術(shù)對(duì)薤白化學(xué)成分及入血成分進(jìn)行系統(tǒng)分析和鑒定，并基于薤白入血成分與數(shù)據(jù)庫(kù)篩選降血脂活性成分的交集成分，利用靶向網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對(duì)接技術(shù)了構(gòu)建了“藥物-成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)，用于薤白治療高血脂癥的藥效成分及關(guān)鍵作用靶點(diǎn)分析，進(jìn)而闡明薤白治療高血脂癥的分子作用機(jī)制，為薤白藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升提供了依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Waters Q-TOF SYNAPT G2-Si 超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)Waters 公司）；XS-204 分析天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）；Hyper Sonic DT-A 超聲波清洗器（昆山美美超聲儀器有限公司）；FC5515R 高速微量離心機(jī)（德國(guó)OHAUS 公司）；EYELA 氮吹儀（上海愛朗儀器有限公司）。薤白藥材浸膏（批號(hào)：20230605，吉林省東方制藥有限公司）；甲醇和乙腈（色譜純，美國(guó)Tedia 公司）；甲酸（色譜純，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；甲醇和正丁醇（分析純，天津新通精細(xì)化工有限公司）。實(shí)驗(yàn)用水為超純水（18.2 MΩ·cm，德國(guó)Milli-Q 超純水系統(tǒng)制備）。

1.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

SD 大鼠18 只（雄性，體重200～230 g）購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司。實(shí)驗(yàn)前于可控環(huán)境（12 h 光照/黑暗周期；溫度：（24±1）℃；相對(duì)濕度：51%±5%）中適應(yīng)性喂養(yǎng)，自由獲取飼料和飲用水。7 d后，將大鼠隨機(jī)分為6 組，每組3 只。其中，對(duì)照組給予生理鹽水，其余5 組為給藥組，均灌胃給予薤白浸膏（0.392 g/（kg·d）），連續(xù)給藥7 d。末次給藥前12 h 禁食。5 組給藥組分別于末次給藥后0.5、1、2、4和8 h 采集腹部主動(dòng)脈血樣。血樣靜置1 h 后，于4 ℃、3500 r/min 條件下離心10 min，取上層血清，分裝后于–80 ℃凍存，待測(cè)。

1.3 樣品的制備

1.3.1 供試品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取薤白浸膏5 g，加入到20 mL 70%甲醇中，超聲提取2 次，每次60 min， 合并提取液，過濾，濃縮至10 mL，即得供試品溶液。

1.3.2 大鼠血清樣品的制備

取大鼠血清樣本900 μL，加入3 倍樣本體積的甲醇，渦旋混合3 min 后，于4 ℃以13000 r/min 離心10 min，取上清液，氮?dú)獯蹈?。?00 μL 15%乙腈-水溶液復(fù)溶，于4 ℃以13000 r/min 離心10 min，取上清液進(jìn)行UPLC-Q-TOF-MS 檢測(cè)。

1.4 UPLC-Q-TOF-MS的分析條件

1.4.1 液相色譜條件

ACQUITY BEH C18 色譜柱（50 mm×2.1 mm， 1.7 μm）；流動(dòng)相A 為0.1%甲酸，流動(dòng)相B 為乙腈。梯度洗脫：0～8 min， 15%～19% B；8～10 min， 19% B；10～15 min， 19%～28% B；15～18 min， 28% B；18～22 min， 28%～30% B；22～25 min， 30%～35% B；25～30 min， 35%～40% B；30～35 min， 40%～60%B；35～38 min， 60%～80% B；38～40 min， 80%～100% B；40～45 min， 100% B。流速：0.3 mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：5 μL。

1.4.2 質(zhì)譜條件

ESI 離子源，正、負(fù)離子模式，全信息串聯(lián)質(zhì)譜（MSE）模式掃描；掃描范圍為50～2000 Da；離子源溫度為120 ℃（正離子模式）/110 ℃（負(fù)離子模式）；脫溶劑氣溫度為400 ℃；錐孔氣流速為50 L/h；脫溶劑氣流速為800 L/h；毛細(xì)管電壓為3.0 kV（正離子模式）/2.5 kV（負(fù)離子模式）；MSE 碰撞能量的低碰撞能量為6 eV， 高碰撞能量為20～30 eV/30～45 eV。

1.5 靶向網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析

1.5.1 數(shù)據(jù)庫(kù)與軟件

TCMSP 分析平臺(tái)（http：//ibts.hkbu.eduhk/LSP/tcmsp.php）；Uniprot 數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.Uniprot.org/）；OMIM 數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.omim.org/）；Drugbank 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.drugbank.com/）， GeneCards（http：//www.genecards.org/）；Venny 2.1.0 軟件（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html）；STRING 網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)（https//stringdb.org/）；KEGG 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.kegg.jp/）；Metascape 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//metascape.org/gp/index.htm）；Cytoscape 3.7.2軟件；AutoDock Tools 1.5.7 軟件；Pymol 2.4.1 軟件；Discovery Studio 4.5軟件。

1.5.2 薤白活性成分和靶點(diǎn)蛋白的篩選

通過TCMSP 分析平臺(tái)數(shù)據(jù)庫(kù)查詢檢索薤白成分，根據(jù)口服生物利用度（Oral bioavailability， OB≥30%）和類藥性（Drug-likeness， DL≥0.18），并結(jié)合文獻(xiàn)資料報(bào)道，篩選出符合條件的化合物，作為薤白中主要活性成分。根據(jù)MOL ID 獲取主要活性成分對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)蛋白。利用UniProt 數(shù)據(jù)庫(kù)將靶點(diǎn)蛋白的protein ID 轉(zhuǎn)換為基因的Gene ID。

1.5.3 高血脂癥相關(guān)靶點(diǎn)庫(kù)的構(gòu)建

以“Hyperlipidemia”為關(guān)鍵詞在OMIM、Drugbank 和GeneCards 疾病靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索，獲取高血脂癥相關(guān)靶點(diǎn)基因，將基因整合并去重，構(gòu)建高血脂癥相關(guān)靶點(diǎn)庫(kù)。

1.5.4 薤白降血脂潛在靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

將薤白活性成分對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)與高血脂癥相關(guān)靶點(diǎn)整合，導(dǎo)入Venny 2.1.0 在線工具，互相映射薤白的作用靶點(diǎn)基因與高血脂癥相關(guān)靶點(diǎn)基因，得到二者的交集靶點(diǎn)即為薤白降血脂作用的潛在靶點(diǎn)。

1.5.5 蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將薤白降血脂的潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING 在線數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行PPI 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建。將蛋白物種設(shè)置為“Home sapiens”，相互作用的最低閾值設(shè)置為“Highest confidence gt; 0.7”，其余參數(shù)均為默認(rèn)值。將游離的蛋白隱藏，最終得到靶點(diǎn)蛋白間的PPI 網(wǎng)絡(luò)圖，應(yīng)用Cytoscape 3.7.2 軟件中“Network Analyzer”插件進(jìn)行拓?fù)鋮?shù)分析。

1.5.6 “藥物-成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)鍵

將薤白的主要活性成分與對(duì)應(yīng)的潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2 軟件中構(gòu)建“薤白-有效成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)，并進(jìn)行可視化分析。

1.5.7 關(guān)鍵靶蛋白的GO及KEGG富集通路分析

利用Metascape 數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體論（Gene ontology， GO）及京都基因與基因組百科全書（Bubble diagram of Kyoto encyclopedia of genes and gnomes， KEGG）富集分析，設(shè)置檢索物種為人類（Home sapiens），得到薤白發(fā)揮降血脂作用的GO 及KEGG 信號(hào)通路，應(yīng)用微生信（https：//www.bioinformatics.com.cn/）進(jìn)行可視化處理。

1.5.8 分子對(duì)接驗(yàn)證

依據(jù)Degree 值選取“藥物-成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)中的活性成分及作用靶點(diǎn)作為受體和配體進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證。在TCMSP 數(shù)據(jù)庫(kù)中下載活性成分的.mol2 格式文件，在PDB 數(shù)據(jù)庫(kù)中下載作用靶點(diǎn)蛋白的三維結(jié)構(gòu).pdb 格式文件。應(yīng)用AutoDockTools 1.5.7 Vina 軟件進(jìn)行分子對(duì)接，采用Pymol 和Discovery Studio 4.5軟件將分子對(duì)接結(jié)果可視化。

2 結(jié)果與討論

2.1 薤白成分分析

2.1.1 薤白化學(xué)成分的鑒定

應(yīng)用UPLC-Q-TOF-MS 技術(shù)對(duì)薤白化學(xué)成分進(jìn)行分析，在正、負(fù)離子模式下的總離子流圖如圖1 所示。在本研究組前期研究結(jié)果[8]基礎(chǔ)上，從薤白藥材中共鑒定出36 種化學(xué)成分，包括28 種皂苷類化合物、3種氨基酸類化合物、2種黃酮類化合物、1 種有機(jī)硫化合物、1 種核苷類化合物和1 種類激素脂質(zhì)化合物，詳見電子版文后支持信息表S1。

2.1.2 薤白入血成分的鑒定

采用UPLC-Q-TOF-MS 技術(shù)分析給藥薤白前后血清樣本成分以確定薤白的入血成分，其提取離子流圖如圖2 所示，與數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)共鑒定出8 種入血成分（表1）。

2.2 基于薤白入血成分的靶向網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析

2.2.1 薤白活性成分篩選及靶點(diǎn)蛋白篩選

在TCMSP 分析平臺(tái)數(shù)據(jù)庫(kù)中，以“薤白”為關(guān)鍵詞，設(shè)置篩選參數(shù)OB≥30%， DL≥0.18，共檢索到87 種活性成分及其相關(guān)信息。同時(shí)，結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道中已驗(yàn)證具有降血脂活性的薤白成分[15-16]，綜合篩選出15 種有效活性成分（表2）。基于2.1.2 節(jié)中鑒定的8 種原型入血成分與TCMSP 平臺(tái)數(shù)據(jù)庫(kù)篩選的15 種活性成分的交集成分，獲取對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)蛋白，去重后，共得到188 個(gè)相關(guān)靶點(diǎn)。

2.2.2 高血脂癥相關(guān)靶點(diǎn)庫(kù)的構(gòu)建

在OMIM、Drugbank 和GeneCards 疾病靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫(kù)中，以“Hyperlipidemia”為關(guān)鍵詞，對(duì)高血脂癥相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行檢索，將得到的靶標(biāo)結(jié)果進(jìn)行去重，得到1049 個(gè)高血脂癥疾病相關(guān)靶點(diǎn)。

2.2.3 薤白降血脂潛在靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)及靶點(diǎn)間相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將188 個(gè)入血成分相關(guān)靶點(diǎn)與1049 個(gè)疾病相關(guān)靶點(diǎn)導(dǎo)入Venny 2.1 軟件，所得韋恩圖如圖3A 所示，共映射出薤白治療高血脂癥靶基因69 個(gè)。

在STRING 數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得69 個(gè)交集靶點(diǎn)之間共151 條連線的網(wǎng)絡(luò)圖。將靶點(diǎn)蛋白相互作用信息導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2 中，構(gòu)建可視化PPI 網(wǎng)絡(luò)（電子版文后支持信息圖S1）。在網(wǎng)絡(luò)中節(jié)點(diǎn)越多，其degree值越大，與靶蛋白的相互作用越密切。選擇Degree 值大于2 倍平均值，篩選出AMP 活化蛋白激酶（AMPK）、腫瘤壞死因子（TNF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A（VEGFA）和基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）4 個(gè)靶點(diǎn)蛋白。這些靶點(diǎn)處于蛋白相互作用的核心位置，推測(cè)其可能是薤白治療高血脂癥的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

2.2.4 “薤白-有效成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

應(yīng)用Cytoscape 3.7.2 軟件對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行拓?fù)鋵W(xué)分析，構(gòu)建“薤白-有效成分-靶點(diǎn)”關(guān)聯(lián)網(wǎng)，如圖3B 所示。對(duì)該網(wǎng)絡(luò)圖的80 個(gè)節(jié)點(diǎn)（69個(gè)核心靶點(diǎn)與11個(gè)核心活性成分）進(jìn)行分析，選擇Degree 值大于該節(jié)點(diǎn)中位數(shù)2 倍的節(jié)點(diǎn)為網(wǎng)絡(luò)中關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，篩選出活性成分為槲皮素、柚皮素、薤白苷E 和25（R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羥基-5β-呋甾3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃半乳糖苷，初步推測(cè)其為薤白治療高血脂癥的關(guān)鍵藥效成分。

2.2.5 GO生物富集分析結(jié)果

應(yīng)用Metascape 數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)69個(gè)交集靶點(diǎn)基因進(jìn)行GO富集分析，主要包括生物過程、細(xì)胞成分和分子功能3 個(gè)方面。Min Overlap參數(shù)設(shè)置為3， P Value Cutoff參數(shù)設(shè)置為0.01， Min Enrichment 參數(shù)設(shè)置為1.5，最終得到3793 個(gè)生物過程條目、296 個(gè)細(xì)胞成分條目和534 個(gè)分子功能條目（電子版文后支持信息圖S2A）。

在生物過程條目中，選取排名前20 的條目為主要研究條目（plt;0.01），主要涉及對(duì)營(yíng)養(yǎng)水平的反應(yīng)（Response to nutrient levels）、對(duì)激素的反應(yīng)（Response to hormone）、對(duì)脂多糖的反應(yīng)（Response tolipopolysaccharide）、小分子代謝過程的調(diào)控（Regulation of small molecule metabolic process）以及脂質(zhì)定位調(diào)節(jié)（Regulation of lipid localization）等。

在細(xì)胞成分條目中，選取排名前14的條目為主要研究條目（plt;0.01），主要涉及內(nèi)吞囊泡膜（Endocyticvesiclemembrane）、質(zhì)膜外側(cè)（External side of plasma membrane）、膜筏（Membrane raft）和致密顆粒（Dense core granule）等。

在分子功能條目中，選取排名前20 的條目為主要研究條目（plt;0.01），主要涉及細(xì)胞因子活性（Cytokineactivity）、核受體活性（Nuclear receptor activity）和類固醇結(jié)合（Steroid binding）等。

2.2.6 KEGG信號(hào)通路富集分析

69個(gè)交集靶點(diǎn)的KEGG通路注釋分析結(jié)果氣泡圖如電子版文后支持信息圖S2B 所示。交集靶點(diǎn)主要參與調(diào)控AGE-RAGE 信號(hào)通路（AGE-RAGE signaling pathway）、AMPK 信號(hào)通路（AMPK signaling"pathway）、膽固醇代謝途徑（Cholesterol metabolism）和脂肪細(xì)胞的脂解調(diào)控（Regulation of lipolysis inadipocytes）等。在AMPK 信號(hào)通路中[17-19]，薤白藥材中的活性成分通過參與調(diào)控PPARK1、ACACA/ACACB、PPARGCA1、HMGCR 和SREBF1 等基因靶點(diǎn)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，從而發(fā)揮降血脂的作用，其信號(hào)通路如圖S3 所示。其中，紅色表示上調(diào)靶點(diǎn)，綠色表示下調(diào)靶點(diǎn)。上調(diào)靶點(diǎn)中腺苷-磷酸蛋白激酶（PRKAA1）能夠促進(jìn)糖降解，增加內(nèi)皮細(xì)胞的增值速率，使血管內(nèi)皮層的通透性減少，防止高血脂形成[20]。下調(diào)靶點(diǎn)中的HMG-CoA 還原酶（HMGCR）是膽固醇生物合成途徑中的限速酶， HMGCR 降解可促進(jìn)脂質(zhì)合成減少，進(jìn)而起到治療高血脂癥的作用[17]。

2.3 分子對(duì)接驗(yàn)證

以篩選出的有效成分25（R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羥基-5β-呋甾3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃半乳糖苷、薤白苷E、槲皮素和柚皮素為配體， TNF、AMPK、VEGFA 和MMP9 這4 個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)為受體進(jìn)行分子對(duì)接結(jié)合能力預(yù)測(cè)。結(jié)合能≤–4.25 kJ/mol 表示配體與受體間有一定的結(jié)合活性，結(jié)合能≤–5 kJ/mol 表示配體與受體間有較好的結(jié)合活性，結(jié)合能≤–7 kJ/mol 表示配體與受體間有很強(qiáng)的結(jié)合活性[21]。選取配體與受體結(jié)合能≤–4.25 kJ/mol， 繪制分子對(duì)接熱圖，如電子版文后支持信息圖S4 所示。選取預(yù)測(cè)對(duì)接親和力（Predicted binding affinity）絕對(duì)值最高的兩組，進(jìn)行分子對(duì)接可視化，結(jié)果見電子版文后支持信息圖S5。

柚皮素是一種黃酮類化合物，有研究證實(shí)其可通過降低總膽固醇和甘油三酯水平達(dá)到降脂的目的[22]。槲皮素對(duì)脂代謝及糖代謝均具有明顯的影響[23-26]。薤白苷E 和25（R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羥基-5β-呋甾3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃半乳糖苷是薤白中主要甾體皂苷成分，已有文獻(xiàn)報(bào)道薤白中甾體皂苷是其發(fā)揮“通陽散結(jié)、行氣導(dǎo)滯”的主要活性成分[27-28]。TNF 能誘導(dǎo)白細(xì)胞介素-6 的產(chǎn)生，而白細(xì)胞介素-6 作為生物效應(yīng)的細(xì)胞因子，可抑制脂蛋白脂酶和刺激脂肪水解，導(dǎo)致血清甘油三酯水平升高，從而調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝[29]。AMPK 作為參與機(jī)體能量代謝的蛋白激酶，主要是通過抑制HMGCR 來抑制膽固醇合成，而HMGCR 作為T-CHO 合成過程中的限速酶，降低其活性可減少膽固醇的合成[30]。分子對(duì)接結(jié)果表明，基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選出的4 種潛在活性成分與AMPK 的結(jié)合能均較高，推測(cè)其可能是薤白治療高血脂癥的關(guān)鍵藥效成分。

3 結(jié)論

薤白具有通陽散結(jié)和行氣導(dǎo)滯的功效，用于高血脂癥治療，療效顯著。本研究采用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)對(duì)薤白藥材的化學(xué)成分及體內(nèi)入血成分進(jìn)行分析，共鑒定出36 種化學(xué)成分，其中8 種成分為入血成分。同時(shí)基于多成分、多靶點(diǎn)的研究思路，采用入血成分靶向網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析技術(shù)，篩選柚皮素、薤白苷E、槲皮素和25（R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羥基-5β-呋甾3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃半乳糖苷可能為薤白治療高血脂癥的關(guān)鍵成分。但是，考慮到25（R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羥基-5β-呋甾3-O-β-D-吡喃葡萄糖基（1→2）-β-D-吡喃半乳糖苷和薤白苷E 為薤白中特有的活性成分且含量較高，建議后續(xù)的臨床研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)確定選擇甾體皂苷類化合物。通過“藥物-成分-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建，篩選出薤白治療高血脂癥的關(guān)鍵靶點(diǎn)為AMPK、TNF、VEGFA 和MMP9。研究發(fā)現(xiàn)，薤白一方面通過調(diào)控膽固醇、甘油三酯、脂質(zhì)和糖代謝發(fā)揮降血脂作用；另一方面通過調(diào)節(jié)血管細(xì)胞通透性，防止高血脂形成。本研究初步確定了薤白治療高血脂癥的可能關(guān)鍵成分，但篩選出的化合物活性及作用機(jī)制仍需體內(nèi)活性驗(yàn)證。本研究結(jié)果為深入研究薤白的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)以及治療高血脂癥的作用機(jī)制提供了參考，也為提升薤白藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和臨床合理用藥提供了依據(jù)。