增施農(nóng)家肥對(duì)不同區(qū)域煙葉香氣品質(zhì)的影響

摘要 ［目的］研究增施農(nóng)家肥處理對(duì)不同地區(qū)及不同葉位煙葉揮發(fā)性物質(zhì)、總酚、總黃酮以及類胡蘿卜素含量的影響，尋求一種能有效提高煙草香氣品質(zhì)、提升卷煙質(zhì)量的煙草種植優(yōu)化技術(shù)，為不同產(chǎn)區(qū)進(jìn)行適宜的管理模式選擇與煙葉品質(zhì)評(píng)價(jià)提供了基礎(chǔ)理論支撐。［方法］以“云煙87”為材料，在湖北利川和宣恩種植基地對(duì)煙葉進(jìn)行施肥處理（增施農(nóng)家肥7 500 kg/hm2，餅肥450 kg/hm2），分析施肥處理對(duì)不同葉位煙葉總酚、總黃酮、類胡蘿卜素及揮發(fā)性物質(zhì)含量的影響。［結(jié)果］利用HS-SPME-GC-MS技術(shù)共檢測(cè)到25種關(guān)鍵芳香成分，1，4-二十碳烯烴類揮發(fā)物為煙葉中占比最高的物質(zhì)，達(dá)54.39%～83.38%，茄尼酮次之，此外，在利川地區(qū)，施肥處理顯著提高煙葉中苯甲醛、β-紫羅蘭酮、3-羥基-β-二氫大馬酮與二氫獼猴桃內(nèi)酯4種關(guān)鍵揮發(fā)性物質(zhì)含量占比，但在宣恩地區(qū)，施肥處理的煙葉中揮發(fā)性物質(zhì)含量低于常規(guī)栽培模式。此外，在利川示范區(qū)，施肥處理的上部煙葉中類胡蘿卜素含量比常規(guī)模式提高23%，中部煙葉中總黃酮含量提高了50%，總酚含量也顯著提高。［結(jié)論］施肥處理可對(duì)不同地區(qū)及葉位揮發(fā)性物質(zhì)、總酚、總黃酮及類胡蘿卜素含量產(chǎn)生影響，但不同地區(qū)模式不同，這為不同產(chǎn)區(qū)進(jìn)行適宜的管理模式選擇、提高煙草香氣品質(zhì)、提升卷煙質(zhì)量提供一定的理論和技術(shù)依據(jù)。

關(guān)鍵詞 煙草；施肥；揮發(fā)性物質(zhì)；活性物質(zhì)

中圖分類號(hào) S572 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2024）13-0121-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.13.030

開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Effects of Adding Farmyard Manure on Aroma Quality of Tobacco Leaves of Different Production Regions

XIANG Yu1，HUANG Yan-jiang1，ZHOU Cheng2 et al

（1.China Tobacco Hubei Industrial Co.，Ltd.，Enshi，Hubei 445000;2.Hubei Aromatic Tobacco Co.，Ltd.，Enshi，Hubei 445000）

Abstract ［Objective］ To seek an optimized planted technology that can improve aroma and nutrition quality of the cigarette，effects of adding farmyard manure on volatiles content，total phenol，total flavonoids and carotenoids of tobacco leaves from different parts and regions were studied.The study provided basic theoretical support for appropriate management and quality evaluation of tobacco leaves in different producing areas.［Method］ ‘Yunyan 87’ was used as material to fertilize tobacco leaves in Lichuan and Xuanen planting bases of Hubei Province （7 500 kg/hm2 of farm fertilizer and 450 kg/hm2 of cake fertilizer）.The effects of adding farmyard manure on content of total phenols，total flavonoids，carotenoids and volatile substances in different parts of tobacco leaves were analyzed and evaluated.［Result］A total of 25 key aromatic components were detected by HS-SPME-GC-MS technique.1，4-Eicosadiene was the most important substance in tobacco leaves，accounting for 54.39%-83.38%，followed by 6，8-Nonadien-2-one，8-methyl-5-（1-methylethyl）-，（E）-.The content of four key volatile substances （benzaldehyde，β-ionone，3-Hydroxy-β-damascone and Dihydroactinidioide） were significantly increased by fertilization treatment，but the content of volatile substances in tobacco leaves treated with fertilization were lower than those in conventional cultivation mode in Xuanen area.In addition，in Lichuan demonstration area，the carotenoid content treated with fertilizer increased by 23% compared with the conventional mode in the upper tobacco leaves，the total flavonoid content in the middle tobacco leaf increased by 50%，and the total phenol content was also significantly increased.［Conclusion］ Adding farmyard manure treatment can affect the content of volatile substances，total phenols，total flavonoids and carotenoids in different regions and leaves，but the change pattern is different in different regions，which provides theoretical and technical basis for selecting appropriate management mode in different producing areas，improving tobacco aroma quality and cigarette quality.

Key words Tobacco;Fertilization;Volatile substances;Active substance

作者簡(jiǎn)介

向羽 （1986—），男，湖北恩施人，農(nóng)藝師，碩士，從事煙葉原料評(píng)價(jià)及質(zhì)量控制研究。*通信作者，助理研究員，博士，從事農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏研究。

收稿日期 2023-08-29；修回日期 2023-09-28

煙草是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物，是我國(guó)出口最多的農(nóng)產(chǎn)品之一，在我國(guó)稅收來(lái)源中占據(jù)重要地位。研究表明，我國(guó)2018年烤煙種植面積達(dá)89.87萬(wàn)hm2，主要種植于云南、河南、貴州和山東等地［1-2］。目前，我國(guó)大力發(fā)展中式卷煙，其品質(zhì)不僅與煙葉中煙堿、糖、鉀等成分有關(guān)，更重要的是與煙草的香味物質(zhì)有關(guān)，因此，尋求一種有效的種植技術(shù)提高煙葉品質(zhì)，從而生產(chǎn)高香氣的優(yōu)質(zhì)煙葉對(duì)提高煙葉利用率及提升卷煙質(zhì)量具有重要意義。目前，煙葉中已有2 549種香氣物質(zhì)被鑒定［3］，其中根據(jù)致香功能基團(tuán)可劃分為酸類、醇類、醛類、酮類、酯類、酚類等，按前體物可分為類胡蘿卜素類降解產(chǎn)物、類西柏烷類、苯丙氨酸類、棕色化產(chǎn)物、新植二烯等［4-5］。施肥作為提高作物產(chǎn)量的手段之一，已在我國(guó)煙草種植田廣泛施用，并被證明可以提高煙葉的產(chǎn)量和香氣含量［6］。孫新等［7］研究表明，一定程度上提高鉀素的施用量可以提高煙草中醛類物質(zhì)的相對(duì)含量，Yan等［5］研究表明，提高煙葉種植土壤的碳含量可有效提高煙葉中的β-紫羅蘭酮、芳樟醇等香氣物質(zhì)的含量。黃泰松等［8］對(duì)煙草進(jìn)行施鉬處理，結(jié)果表明，施鉬能夠提高中上部煙葉中性和酸性香氣成分總量，其中酸性香氣成分總量增幅較大。然而，有關(guān)增施農(nóng)家肥對(duì)不同葉位及地區(qū)煙葉香氣品質(zhì)的影響尚不明確。因此，筆者以“云煙87”為材料，以湖北利川和湖北宣恩為示范區(qū)，研究施肥處理對(duì)不同葉位及地區(qū)烤煙總酚、總黃酮以及類胡蘿卜素含量的影響，并對(duì)其煙葉香氣品質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)，旨在提供一種能有效提高煙草品質(zhì)的煙草種植優(yōu)化技術(shù)，為提高煙草香氣品質(zhì)、提升卷煙質(zhì)量提供一定的理論和技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以“云煙87”為供試材料，種植于湖北宣恩和湖北利川試驗(yàn)基地。

1.2 試驗(yàn)方法 示范區(qū)樣品增施農(nóng)家肥（發(fā)酵牛糞）7 500 kg/hm2，菜籽餅肥450 kg/hm2，非示范區(qū)樣品采用常規(guī)栽培技術(shù)，以上煙草均按照當(dāng)?shù)貎?yōu)質(zhì)煙葉生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范統(tǒng)一管理，在生長(zhǎng)相同時(shí)間取上部及中部煙葉，每次取10株煙草，每次3個(gè)重復(fù)，置于相同條件下進(jìn)行烘烤后，對(duì)不同葉位以及不同地區(qū)煙葉進(jìn)行品質(zhì)評(píng)價(jià)。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1 總酚含量。

總酚含量采用福林酚法測(cè)定［9］。稱取1 g組織樣品，用5 mL 80%的甲醇均質(zhì)，12 000 r/min 4 ℃離心20 min，上清液即為總酚粗提液?？偡臃磻?yīng)體系包含0.5 mL上清液，1 mL福林酚試劑和3.5 mL 1 mol/L的碳酸鈉溶液，混合液在30 ℃水浴中保溫1 h，在760 nm處測(cè)定吸光值，以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量，結(jié)果以干質(zhì)量計(jì)，表示為mg/kg。

1.3.2 總黃酮含量。

稱取1 g組織樣品，加入4 mL 60%的乙醇，4 ℃、12 000 r/min離心20 min，收集上清液分析總黃酮含量?？傸S酮含量的測(cè)定參照陳瑩等［10］的方法略作修改?？傸S酮反應(yīng)體系包括2 mL上清液、1 mL乙醇、1 mL 3%AlCl3和2 mL乙酸鈉緩沖液（pH 5.5），在510 nm處測(cè)定吸光值，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量，結(jié)果以干質(zhì)量計(jì)，表示為mg/g。

1.3.3 類胡蘿卜素含量。

類胡蘿卜素含量根據(jù)植物類胡蘿卜素含量試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定，結(jié)果以干質(zhì)量計(jì)，表示為mg/kg。

1.3.4 揮發(fā)性物質(zhì)含量。

煙草揮發(fā)性物質(zhì)含量參照劉哲等［11］的方法，采用SPME-GC-MS測(cè)定。稱取煙草組織樣品20.5 g，加入3 mL 200 mmol/L乙二胺四乙酸-二鈉（EDTA-Na2）和3 mL 20% CaCl2溶液，以2-辛醇（0.004 mg/mL）作為內(nèi)標(biāo)，置于固相微萃取裝置中以 70 ℃、250 r/min 條件下萃取 20 min 后，解吸時(shí)間 2 min，進(jìn)行 GC/MS 分析。色譜條件：載氣，He，流量為l mL/min。柱箱升溫程序：60 ℃保持2 min，4 ℃/min升至260 ℃保持10 min，分流比5∶1。分離柱為DB-WAX 毛細(xì)管柱（30 m × 0.25 mm × 0.25 μm ），離子化方式為電子轟擊電離，電子能量70 eV，四級(jí)桿溫度為150 ℃，傳輸線溫度為250 ℃。揮發(fā)性化合物的定性通過(guò)與NIST質(zhì)譜庫(kù)（NIST-08）對(duì)比確定，根據(jù)內(nèi)標(biāo)物的峰面積計(jì)算揮發(fā)性化合物的相對(duì)含量，結(jié)果表示為μg/kg。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采用Excel整理繪表并采用Origin 2018軟件作圖，采用SPSS 20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用SPSS 20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性分析，*表示不同栽培模式具有顯著差異，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，ND，no detected，未檢測(cè)出。試驗(yàn)結(jié)果均表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地區(qū)施肥與常規(guī)栽培香氣物質(zhì)積累差異

利用HS-SPME-GC-MS技術(shù)對(duì)不同地區(qū)及葉位的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，共發(fā)現(xiàn)25種關(guān)鍵芳香成分，包括4種醛類、9種酮類、4種醇類、2種酯類與6種烴類（表1）。煙草中不同地區(qū)不同葉位的芳香物質(zhì)中最主要的成分為1，4-二十碳烯，不同管理方式的占比在54.39%～83.38%，在相同管理方式下，不同地區(qū)1，4-二十碳烯出現(xiàn)相反變化規(guī)律。利川地區(qū)施肥管理模式下不同葉位中1，4-二十碳烯的占比小于常規(guī)栽培模式，但在宣恩地區(qū)，施肥模式中1，4-二十碳烯的含量高于常規(guī)模式。此外，利川地區(qū)施肥管理模式下，上部煙葉中的1，4-二十碳烯的含量高于中部煙葉，常規(guī)管理中上部煙葉中1，4-二十碳烯的積累量則低于中部煙葉，但在宣恩地區(qū)施肥管理模式上部煙葉中的該物質(zhì)積累規(guī)律與利川地區(qū)相反，但在常規(guī)模式下的積累量無(wú)顯著差異。酮類物質(zhì)因?yàn)榫哂休^低的閾值，對(duì)煙葉的芳香氣味貢獻(xiàn)巨大，不同煙葉中酮類物質(zhì)含量占比達(dá)0.06%～17.80%，其利川地區(qū)中施肥模式占比含量最高的酮類物質(zhì)是茄尼酮，其在中部煙葉占比高達(dá)17.8%，但常規(guī)模式下茄尼酮含量占比只有7.8%，顯著低于施肥處理。宣恩地區(qū)不同部位煙葉香氣中含量第二高的為茄尼酮，占比在8.67%～15.50%，其中常規(guī)栽培模式下不同葉位中β-紫羅蘭酮含量占比也達(dá)0.35%～0.80%。由此可知，不同產(chǎn)區(qū)不同管理模式對(duì)不同部位煙葉芳香成分的積累占比具有顯著影響。這可能與當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境差異有關(guān)，因此，這為針對(duì)不同產(chǎn)區(qū)進(jìn)行適宜的管理模式選擇與煙葉品質(zhì)評(píng)價(jià)提供了基礎(chǔ)理論支撐。

2.2 不同地區(qū)與不同葉位關(guān)鍵香氣物質(zhì)含量變化

通過(guò)對(duì)不同產(chǎn)區(qū)不同管理模式下不同葉位煙葉總體香氣物質(zhì)含量的占比分析，結(jié)合含量與不同物質(zhì)的占比及呈味感官特性，篩選出苯甲醛、β-紫羅蘭酮、1，4-二十碳烯、3-羥基-β-二氫大馬酮與二氫獼猴桃內(nèi)酯5種關(guān)鍵芳香成分，并對(duì)其含量進(jìn)行了分析。由圖1可知，苯甲醛含量在利川地區(qū)上部葉片中差距不大，但在中部葉位中施肥管理下的含量顯著高于常規(guī)模式。宣恩地區(qū)在不同葉位煙葉中的苯甲醛含量常規(guī)管理模式均高于施肥模式。煙草中的重要香氣物質(zhì)β-紫羅蘭酮的含量變化呈現(xiàn)出與苯甲醛類似的積累規(guī)律。在利川地區(qū)的中部煙葉和宣恩地區(qū)的上部煙葉中，施肥管理的β-紫羅蘭酮占比顯著高于常規(guī)管理模式。這表明宣恩地區(qū)煙葉香氣物質(zhì)含量受到不同管理模式的影響更大。煙葉香氣中另外一種差異變化較大且重要的酮類是3-羥基-β-二氫大馬酮，在利川地區(qū)的施肥管理模式下上部葉片中積累占比近5%，但常規(guī)栽培模式占比不到1%，在宣恩地區(qū)常規(guī)管理模式的占比顯著高于施肥模式，但含量占比都不到1%。煙葉中含量占比最高的1，4-二十碳烯在不同地區(qū)不同管理模式下表現(xiàn)出相反的積累模式。常規(guī)管理模式利川地區(qū)上部與中部葉位煙葉中1，4-二十碳烯的占比均顯著高于施肥管理模式，常規(guī)管理模式占比54%～83%，施肥模式占比在50%～70%，但均在宣恩地區(qū)施肥模式不同葉位煙葉中積累更多的1，4-二十碳烯，占比在65%～75%，常規(guī)模式下的占比僅為50%～60%。煙葉中檢測(cè)到2種比較穩(wěn)定的酯類芳香成分，二氫獼猴桃內(nèi)酯含量占比較高，且受到不同管理模式顯著影響。在利川地區(qū)上部葉位煙葉中積累無(wú)顯著差異，但在中部葉位煙葉中，施肥管理模式下的二氫獼猴桃內(nèi)酯含量顯著高于常規(guī)模式，是常規(guī)模式的1.8倍。

2.3 不同管理模式下不同地區(qū)煙葉關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分變化

煙葉中不同營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)煙葉風(fēng)味與品質(zhì)等級(jí)具有重要影響。研究了不同管理模式下不同地區(qū)上部與中部葉位煙葉的類胡蘿卜素、總酚與總黃酮含量的變化，對(duì)比了其積累規(guī)律。類胡蘿卜素是煙葉中關(guān)鍵香氣成分C13降異戊二烯類的底物，同時(shí)對(duì)煙葉的色澤等外觀品質(zhì)起著決定作用。測(cè)定發(fā)現(xiàn)，在利川地區(qū)上部葉位煙葉中，施肥模式能顯著提高類胡蘿卜素含量，施肥模式下類胡蘿卜素含量比常規(guī)模式提高23%左右，中部葉位煙葉則差異不顯著。但在宣恩地區(qū)，施肥模式下類胡蘿卜素含量都顯著高于常規(guī)模式，表明施肥能顯著提高煙葉的類胡蘿卜素積累（圖2）。

總酚與總黃酮是細(xì)胞重要抗氧化成分，不僅能保持煙葉的品質(zhì)，更能對(duì)煙葉的風(fēng)味有重要貢獻(xiàn)。測(cè)定發(fā)現(xiàn)，這2種抗氧化物質(zhì)的含量在不同地區(qū)不同管理模式下表現(xiàn)出相似的積累規(guī)律。施肥管理有效提高利川地區(qū)的中部煙葉的總酚含量，但對(duì)上部煙葉總酚含量影響不大。宣恩地區(qū)則呈現(xiàn)出相反的積累模式，施肥管理顯著提高上部煙葉的總酚含量，但對(duì)中部葉位煙葉的總酚積累無(wú)顯著影響。施肥管理對(duì)利川地區(qū)總黃酮含量的影響與總酚的影響相一致，上部煙葉的總黃酮含量無(wú)顯著差異，但施肥顯著提高了中部葉位的總黃酮含量，積累量在120 mg/g左右，而常規(guī)模式僅有80 mg/g左右，增加量近50%。但在宣恩地區(qū)，施肥模式對(duì)上部煙葉總黃酮的積累無(wú)顯著影響，對(duì)中部煙葉總黃酮積累具有顯著效果，施肥模式較常規(guī)模式提升近23%。由此可知，施肥管理對(duì)宣恩地區(qū)不同葉位煙葉的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分影響較大，對(duì)利川地區(qū)營(yíng)養(yǎng)成分的積累影響呈現(xiàn)出較為明顯的葉位差異，但總體來(lái)看，施肥對(duì)不同地區(qū)不同葉位的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分的積累具有提升作用。這為進(jìn)一步優(yōu)化不同地區(qū)的管理模式提供了數(shù)據(jù)支撐。

3 討論

有關(guān)煙草的香氣物質(zhì)，前人已經(jīng)做了大量研究，吳麒昊等［12］采用HS-SPME-GC/MS從煙葉中檢測(cè)出128種化學(xué)成分，并通過(guò)OAV值確定煙堿、苯乙醛、香葉基丙酮、а-大馬酮、大馬酮等12種活性物質(zhì)為煙草中的主要揮發(fā)性香氣成分，劉哲等［11］采用HS-SPME-GC/MS 從2種煙葉樣品中共檢出 82 種香氣成分，包括醇類 15 種、酯類11種、酚類3種、醛類9種、酮類 20 種、酸類 7 種、烴類 8 種、其他 9 種，張風(fēng)梅等［13］也從8種煙葉樣品中檢測(cè)到125種香氣成分，通過(guò)SPME-GC-MS共鑒定出25種主要揮發(fā)性香氣成分，包括4種醛類、9種酮類、4種醇類、2種酯類與6種烴類，其中1，4-二十碳烯在不同管理方式下的占比在54.39%～83.38%，是煙草中占比最高的揮發(fā)性物質(zhì)。此外，可能由于環(huán)境因素的影響，β-紫羅蘭酮和茄尼酮含量占比在不同栽培模式下表現(xiàn)出不同差異。

類胡蘿卜素是烤煙中的重要香氣前體物質(zhì)［14-15］ ，藏花醛、二氫獼猴桃內(nèi)酯、紫羅蘭酮、大馬酮和巨豆三烯酮、香葉基丙酮等都是由類胡蘿卜素裂解產(chǎn)生［16-18］，此外，不同栽培模式會(huì)對(duì)煙葉的香氣物質(zhì)含量產(chǎn)生巨大影響。榮仕賓等［19］研究表明不同留葉數(shù)會(huì)影響煙葉中類胡蘿卜素降解產(chǎn)物總量、芳香族氨基酸降解產(chǎn)物總量和揮發(fā)性香氣物質(zhì)含量，孫新等［7］研究表明，一定程度上提高鉀素含量可提高煙草中醛類物質(zhì)的相對(duì)含量，氮過(guò)高則對(duì)酮類物質(zhì)積累不利，糖類物質(zhì)含量［20］和鉬肥處理［8］也會(huì)對(duì)煙草的香氣物質(zhì)含量造成影響。這與該研究結(jié)果相類似。該研究中，對(duì)苯甲醛、β-紫羅蘭酮、1，4-二十碳烯、3-羥基-β-二氫大馬酮與二氫獼猴桃內(nèi)酯5種關(guān)鍵芳香成分分析表明，不同地區(qū)施肥處理對(duì)煙葉香氣物質(zhì)含量占比影響不同，在利川地區(qū)，施肥處理的煙葉中苯甲醛、β-紫羅蘭酮、3-羥基-β-二氫大馬酮與二氫獼猴桃內(nèi)酯4種關(guān)鍵揮發(fā)性物質(zhì)含量占比顯著高于常規(guī)栽培，但在宣恩示范區(qū)表現(xiàn)出相反的變化模式。程昌新等［21］研究指出，遺傳因素影響香氣物質(zhì)的性質(zhì)和種類，環(huán)境因素則主要影響香氣物質(zhì)的含量和組成比例，因此，針對(duì)不同地區(qū)煙草的適宜栽培模式需進(jìn)一步研究。

多酚類物質(zhì)是衡量煙草品質(zhì)的重要指標(biāo)，其在煙草的生長(zhǎng)發(fā)育、調(diào)制特性、煙葉色澤和香氣吃味等方面發(fā)揮重要作用［22-23］。在煙草中，綠原酸、蕓香苷和莨菪亭占多酚總量的80%以上，且等級(jí)越高的煙葉，多酚含量越高［24］。研究表明，煙葉中多酚含量與基因型、植株部位、成熟度、溫度、海拔、栽培措施和調(diào)制方式等有關(guān)［22，25］，張希等［26］研究表明施氮是提高煙葉多酚類物質(zhì)含量物質(zhì)的重要措施，移栽30 d后打頂處理可以抑制酚類降解相關(guān)酶的活性，從而提高綠原酸等酚類物質(zhì)的含量［25］。此外，不同葉位多酚含量不同，表現(xiàn)為上葉位>中葉位>下葉位［27］。在該研究中，施肥處理對(duì)不同地區(qū)煙葉總酚含量均有顯著影響，但由于受地理因素的影響，在利川示范區(qū)，施肥處理顯著提高了中部葉位的總酚含量，在宣恩示范區(qū)，施肥處理則對(duì)上部煙葉的多酚含量影響更為顯著。但總體來(lái)看，施肥處理對(duì)不同地區(qū)及葉位煙葉總酚含量具有積極影響。與總酚類似，黃酮類化合物作為多酚類次生代謝產(chǎn)物，也是衡量煙草和卷煙質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)［28］。在煙草中，黃酮類物質(zhì)也作為重要的潛香型物質(zhì)，產(chǎn)生呋喃二酮和糠醛等香氣物質(zhì)，從而影響卷煙品質(zhì)和風(fēng)味特征。楊虹琦等［29］研究表明，黃酮類物質(zhì)含量較高時(shí)，煙草中的香氣含量也相對(duì)提高，不同施氮水平可通過(guò)上調(diào)煙草葉片中黃酮類化合物代謝相關(guān)基因表達(dá)，從而提高蕓香苷等黃酮類物質(zhì)的含量［30］，不同生長(zhǎng)溫度也會(huì)對(duì)煙草黃酮類物質(zhì)含量產(chǎn)生顯著影響［28，31］。該研究結(jié)果表明，施肥可以提高煙草葉片中總黃酮含量，在利川示范區(qū)，施肥的中部葉片中總黃酮含量是常規(guī)栽培的1.5倍，在宣恩示范區(qū)，施肥的上部葉片中總黃酮含量是常規(guī)栽培的1.3倍，表明施肥處理可以顯著提高中部煙葉總黃酮含量。

4 結(jié)論

施肥處理可以影響煙葉中總酚和總黃酮含量，提高煙葉品質(zhì)，不同葉位總酚、總黃酮含量受結(jié)構(gòu)優(yōu)化的影響不同。利用HS-SPME-GC-MS技術(shù)共檢測(cè)到25種關(guān)鍵芳香成分，1，4-二十碳烯為煙葉中占比最高的物質(zhì)，茄尼酮次之。在利川地區(qū)，施肥處理顯著提高煙葉中苯甲醛、β-紫羅蘭酮、3-羥基-β-二氫大馬酮與二氫獼猴桃內(nèi)酯4種關(guān)鍵揮發(fā)性物質(zhì)含量占比，且施肥處理的上部煙葉中類胡蘿卜素含量比常規(guī)模式提高23%，中部煙葉中總黃酮含量提高了50%，總酚含量也顯著提高。此外，由于環(huán)境因素的影響，不同地區(qū)揮發(fā)性香氣物質(zhì)含量差異并不一致，因此，針對(duì)不同地區(qū)，仍需要進(jìn)一步篩選適宜地區(qū)的栽培技術(shù)。這為提高煙草香氣品質(zhì)、提升卷煙質(zhì)量提供一定的理論和技術(shù)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

［1］

張文姬，陳楨祿，鄒明民，等.煙草資源多元化開(kāi)發(fā)利用潛能［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，48（12）：100-110.

［2］ 楊琳，楊超.我國(guó)卷煙材料技術(shù)現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(shì)［J］.輕工科技，2019，35（2）：33-35，37.

［3］ 沈漫兮.烤煙不同時(shí)期成熟香氣物質(zhì)差異性研究［D］.泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2022.

［4］ LIAO F，LI Y S，HE W M，et al.Evaluation of aroma styles in flue-cured tobacco by near infrared spectroscopy combined with chemometric algorithms［J］.Journal of near infrared spectroscopy，2020，28（2）：93-102.

［5］ YAN S，LIU G S.Effect of increasing soil carbon content on tobacco aroma and soil microorganisms［J］.Phytochemistry letters，2020，36：42-48，26

［6］ YAN S，NIU Z Y，YAN H T，et al.Transcriptome sequencing reveals the effect of biochar improvement on the development of tobacco plants before and after topping［J］.PLoS One，2019，14（10）：1-16.

［7］ 孫新，趙方貴，李樹(shù)全，等.不同鉀素水平對(duì)煙草香氣物質(zhì)的影響［J］.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，57（21）：83-86.

［8］ 黃泰松，張紀(jì)利，金亞波，等.施鉬對(duì)煙草香氣成分含量的影響［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（6）：94-5.

［9］ 李琪，吳棟，吳延妮，等.LED光質(zhì)對(duì)兩種金線蓮組培苗生理特征和代謝物質(zhì)的影響［J］.南昌大學(xué)學(xué)報(bào)（理科版），2021，45（1）：56-62.

［10］ 陳瑩，張巧云，任麗，等.金線蓮總黃酮提取工藝優(yōu)化及不同月齡、品系金線蓮黃酮含量比較［J］.食品工業(yè)科技，2019，40（8）：184-189.

［11］ 劉哲，張鳳梅，劉志華，等.朱砂煙葉和普通煙葉香氣成分的HS-SPME-GC/MS對(duì)比分析和感官差異［J］.煙草科技，2020，53（7）：54-61.

［12］ 吳麒昊，姚力文，普仕林，等.HS-SPME-GC-MS分析津巴布韋煙草提取物主要揮發(fā)性香氣成分［J］.香料香精化妝品，2023（3）：57-65.

［13］ 張鳳梅，韓敬美，王慶華，等.不同產(chǎn)地?zé)熑~相似性分析［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，49（7）：191-196.

［14］ 周冀衡，楊虹琦，林桂華，等.不同烤煙產(chǎn)區(qū)煙葉中主要揮發(fā)性香氣物質(zhì)的研究［J］.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2004（1）：20-23.

［15］ 楊永霞，張嘉煒，張洪映，等.過(guò)表達(dá)Lcy-b基因?qū)煵蓊惡}卜素代謝及香氣物質(zhì)的影響［J］.中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，2016，22（3）：94-100.

［16］ 吳麗君，石鳳學(xué)，劉晶，等.煙草香氣成分分析研究進(jìn)展［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2014，30（21）：251-257.

［17］ 陶陶，來(lái)苗，姬小明，等.烤煙類胡蘿卜素及其降解產(chǎn)物與香氣特性的關(guān)系研究［J］.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2016，29（2）：294-297.

［18］ 王穎，薛磊，郭志剛，等.煙草中香氣成分分析研究綜述［J］.陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，67（11）：99-102.

［19］ 榮仕賓，趙園園，秦艷青，等.留葉數(shù)與調(diào)制方式互作對(duì)四川茄芯煙葉煙草特有亞硝胺含量和香氣質(zhì)量的影響［J］.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2023，36（2）：306-313.

［20］ 王林，周平，賀佩，等.糖類物質(zhì)對(duì)煙草香氣品質(zhì)的影響研究進(jìn)展［J］.中國(guó)煙草科學(xué)，2021，42（6）：92-98.

［21］ 程昌新，盧秀萍，許自成，等.基因型和生態(tài)因素對(duì)煙草香氣物質(zhì)含量的影響［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21（11）：137-139，182.

［22］ 賀文俊，何佳，孫志浩，等.煙草煙葉多酚類物質(zhì)代謝影響因素的研究進(jìn)展［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（2）：4-7.

［23］ 高婭北，段史江，付宗仁，等.煙草多酚類物質(zhì)研究進(jìn)展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，46（7）：38-40.

［24］ 王昇，謝復(fù)煒，吳鳴，等.多酚在白肋煙生長(zhǎng)、采收、調(diào)制過(guò)程中的變化研究［J］.中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，2004，10（5）：1-7.

［25］ 楊銀菊，張彥，王樹(shù)聲，等.打頂對(duì)煙草葉片多酚代謝及其關(guān)鍵酶的影響［J］.中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，2018，24（1）：60-67.

［26］ 張希，王慧芳，代卓毅，等.基因型、施氮量及其互作對(duì)烤煙多酚類物質(zhì)的影響［J］.作物雜志，2021（3）：84-90.

［27］ 李曉寧，徐興陽(yáng)，范茂攀，等.煙草不同葉位多酚含量及相關(guān)酶活性變化的研究［J］.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，58（9）：80-55，106.

［28］ 張剛，逄濤，王莎莎，等.不同生長(zhǎng)溫度對(duì)煙草葉片黃酮類化合物含量及其代謝途徑的調(diào)控［J］.基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2016，35（12）：3527-3537.

［29］ 楊虹琦，周冀衡，楊述元，等.不同產(chǎn)區(qū)烤煙中主要潛香型物質(zhì)對(duì)評(píng)吸質(zhì)量的影響研究［J］.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2005，31（1）：11-14.

［30］ 張剛，逄濤，王莎莎，等.不同施氮水平對(duì)煙草葉片黃酮類化合物含量及其代謝途徑的調(diào)控［J］.基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2017，36（3）：1055-1065.

［31］ 張剛.生長(zhǎng)溫度和施氮水平對(duì)煙草葉片黃酮類化合物含量及其代謝途徑的調(diào)控［D］.昆明：云南師范大學(xué)，2016.