氣相色譜法測定西葫蘆中百菌清殘留量的不確定度評定

李盼盼 史曉華 李嘉業(yè) 張慧敏

摘 要：參照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》，通過建立 數(shù)學模型，對氣相色譜法測定西葫蘆中百菌清殘留量的不確定度進行評定。分析量化了樣品稱樣量、提取溶液體積、標準溶 液配置、回收率、測量重復(fù)性、氣相色譜儀6個不確定度分量，計算出合成標準不確定度和擴展不確定度。結(jié)果表明，西葫蘆 中百菌清添加量為0.1 mg/kg時，其測定結(jié)果為0.1069 mg/kg，擴展不確定度為0.0050 mg/kg。影響不確定度的主要因素是標 準溶液配置、回收率、測量重復(fù)性和氣相色譜儀。

關(guān)鍵詞：西葫蘆，百菌清，不確定度，氣相色譜法

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2024.06.031

0 引 言

百菌清（chlorothalonil）是一種廣譜保護性殺 菌劑，對多種作物的真菌病害具有預(yù)防作用，由于 其良好的體表黏著性，不易被水沖刷，因此藥效穩(wěn) 定，殘效期長，世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構(gòu)將 百菌清列為2B類致癌物[1]。

近年來，隨著人們健康意識的逐步提高，對食 用性農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題的關(guān)注度也越來越高[2]。 食品檢驗作為保障食品質(zhì)量安全的重要手段，對其 檢驗檢測數(shù)據(jù)的準確性也提出了更高的要求[3]。但 實驗過程中的諸多不確定因素，使測量值一定程度 上偏離真實值，而不確定度是表征合理地賦予被測 量的量值分散程度，與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)，因此進行不確定度評定，對測量不確定度引起的誤判 風險進行合理預(yù)估，可以定量評價檢測結(jié)果的準確 度，反映檢測過程中各因素對結(jié)果不確定度的影響 程度，使檢測結(jié)果更具可信性和可比性[4-8]。尤其是 當檢測值與最大殘留限量值接近時[9]，通過不確定 度評定可以更科學地對檢測值進行判定，最大限度 地減少合規(guī)判定中可能存在的爭議，提升可食性農(nóng) 產(chǎn)品檢驗質(zhì)量的管控力度和管理水平，為確保食品 安全助力[8，10-12]。

不確定度評定分為A類評定和B類評定[13]。A類 評定是對在規(guī)定測量條件下測得的量值用統(tǒng)計分 析的方法進行測量不確定度分量的評定，評定方 法有貝塞爾公式法和極差法兩種。陳凌峰[14]研究發(fā) 現(xiàn)，使用貝塞爾公式估計的總體方差總是無偏的， 不會給測量結(jié)果的合成標準不確定度帶來原理性 誤差；而用極差法估計的總體標準差雖是無偏的， 但估計的總體方差偏大，導(dǎo)致最終測量結(jié)果的合 成標準不確定度偏大。因此在此選擇貝塞爾公式 法進行A類評定。B類評定是根據(jù)基于經(jīng)驗或其他 信息獲得的概率密度函數(shù)對測量不確定度分量進 行的評定[15]。

依據(jù)JJF 1059.1—2012《測量不確定度評定與 表示》[13]，參考農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/T 761—2008《蔬 菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲 酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》[16]，對西葫蘆中百菌清 殘留量的不確定度進行評定，以期為西葫蘆中百菌 清農(nóng)藥殘留的檢測提供質(zhì)量控制的科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

西葫蘆購自當?shù)剞r(nóng)貿(mào)市場。百菌清標準溶液 （1000 μg/mL，壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司），乙腈 （分析純，天津市永大化學試劑有限公司）、正己烷 （色譜純、色譜純，西隴科學股份有限公司）、丙酮 （色譜純、分析純，國藥集團化學試劑有限公司）， 氯化鈉（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

7 8 9 0 B 氣 相 色 譜 儀（配 E C D 檢 測 器，美 國 Agilent公司），色譜柱：HP-5毛細管柱（30 m×0.32 mm×0.25 mm，美國Agilent公司），電子天平（福州 科迪電子技術(shù)有限公司），四聯(lián)自動清洗勻漿機（美 國海斯特儀器公司），氮吹儀（美國Organomation 公司），10 mL單標線吸量管（天津玻璃儀器廠），5 mL單標線吸量管（天津玻璃儀器廠），50 mL容量 瓶（天津玻璃儀器廠），1000 μL可調(diào)移液器（賽默 飛世爾科技有限公司），可調(diào)瓶口分液器（德國普蘭 德有限公司），弗羅里矽固相萃取小柱（規(guī)格，美國 Agilent公司），濾膜（規(guī)格0.22 μm，天津博納艾杰 爾科技有限公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品前處理

參考農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/T 761—2008《蔬菜和水 果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類 農(nóng)藥多殘留的測定》[16]，結(jié)合實驗室實際條件適當 調(diào)整，進行樣品前處理。

提取：準確稱取25.00 g西葫蘆樣品于廣口瓶 中，用可調(diào)瓶口分液器加入50.0 mL乙腈，勻漿機高 速勻漿2 min后，過濾至裝有7 g氯化鈉的100 mL具 塞量筒中，蓋上塞子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜 置30 min，使乙腈和水相分層。用A級10 mL單標線 移液管移從100 mL具塞量筒中準確吸取10.00 mL乙 腈相溶液于15 mL刻度離心管中，80 ℃氮吹至近干， 加入2.0 mL正己烷復(fù)溶，待凈化。

凈化：將弗羅里矽柱依次用5 mL丙酮+正己烷 （10+90）、5 mL正己烷預(yù)淋洗，棄去淋洗液，當溶 劑液面到達柱吸附層表面時，立即加入待凈化液， 收集洗脫液于15 mL刻度離心管中，用5 mL丙酮+ 正己烷（10+90）淋洗離心管后倒入弗羅里矽柱，并 重復(fù)1次。將盛有洗脫液的離心管于50 ℃氮吹至近 干，用A級5 mL單標線移液管移加入5.00 mL正己 烷，混勻，過膜后測定。

3 結(jié) 論

（1）當稱樣量為25.0 0 g，k =2（置信概率為 95%），氣相色譜法測定西葫蘆中百菌清含量結(jié)果 報告為（0.1069±0.0050）mg/kg。

（2）通過各分量評定發(fā)現(xiàn)，測量不確定度主要 來源于標準溶液配置、回收率、測量重復(fù)性、氣相色 譜儀四個方面，其他方面，尤其是樣品稱量，對測量 不確定度的影響較小。

（3）本測量條件下，標準溶液配置對測量不確定 度影響最大。與沈瑋氣相色譜法測定黃瓜中腐霉利含 量的不確定度評定[15]、金雅慧氣相色譜法測定黃精中 甲胺磷殘留量的不確定度評定結(jié)果一致[22]。本方法采 用了單點校正法，與標準曲線法相比，減少了標準溶 液稀釋過程產(chǎn)生的不確定分量和標準曲線擬合過程 產(chǎn)生的不確定度分量。但單點校正法作為外標法的一 種，實際是利用原點作為標準曲線的另一個點，且標 準溶液的濃度與被測樣品的濃度必須相近，才能保證 定量結(jié)果的準確度[23-25]。因此，單點校正法雖簡便快 捷，但其測定范圍較窄，應(yīng)用時要注意其適用條件。

（4）回收率對測量不確定度的影響次之。加 標回收是實驗室質(zhì)量監(jiān)督和內(nèi)部質(zhì)量控制的方 法之一，加標回收率應(yīng)符 合檢測標準或者GB/ T 27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢 測》的要求[26]。標準化方法下，過程重復(fù)性強，加標 回收率體現(xiàn)了實驗人員前處理過程的規(guī)范化水平。 目前回收率不確定度的評定普遍是對平均回收率 的不確定度評定，但研究發(fā)現(xiàn)，回收率不確定度是依據(jù)過程和模型的計算結(jié)果，包含了與回收率具有 復(fù)函數(shù)關(guān)系的所有因素，平均回收率的不確定度只 是回收率不確定度的一個分量，只有當這個分量占 絕對優(yōu)勢才可代表回收率總不確定度[27]。因此，關(guān) 于回收率不確定度評定還需進一步優(yōu)化。

（5）測量重復(fù)性和氣相色譜儀對測量不確定 度的影響也較大。說明在整個檢測過程中，要注意 好樣品、溶液的均勻性，實驗人員要規(guī)范操作，減少 人為誤差，氣相色譜儀要做好定期的維護保養(yǎng)，確 保儀器狀態(tài)穩(wěn)定。

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作者簡介

李盼盼，通信作者，碩士研究生，工程師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品檢 測檢測工作。

（責任編輯：袁文靜）