摘要:為探明茶葉對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Ra菌株的抑制作用,采用牛津杯法對(duì)H37Ra菌株進(jìn)行抑菌試驗(yàn),研究不同茶葉提取物(茶多酚、茶多糖和茶皂素)及不同種類茶葉(華農(nóng)綠針、大宗炒青、廣東大葉青、福鼎壽眉、鐵觀音、鳳凰單叢、祁門紅茶、下關(guān)沱茶、青磚茶)對(duì)H37Ra菌株活性的抑制能力。結(jié)果顯示,茶多酚對(duì)H37Ra菌株表現(xiàn)出顯著的抑菌能力,隨著茶多酚濃度的增加,抑菌效果逐漸增強(qiáng);在40 mg·mL-1下,茶多酚顯示出長期抑制H37Ra菌株生長的能力;茶多糖和茶皂素對(duì)結(jié)核分枝桿菌沒有抑制作用;不同種類茶葉表現(xiàn)出不同程度的抑菌能力,其中鳳凰單叢的乙酸乙酯部較其他分離部有更強(qiáng)的抑菌能力,其60%乙醇洗脫的柱層析分離物抑菌能力最強(qiáng),推測茶多酚是抑制H37Ra菌株生長的主要成分。研究結(jié)果證實(shí)了茶葉對(duì)H37Ra菌株具有抑制作用,且茶葉不同提取物和不同種類茶葉在抑菌能力上存在差異,為開發(fā)結(jié)核病相關(guān)的抗菌藥物提供了一個(gè)新思路。
關(guān)鍵詞:茶葉提取物;抑菌;結(jié)核分枝桿菌H37Ra菌株;茶多酚
中圖分類號(hào):S571.1;R373 " " " " " " " " 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A " " " " " " "文章編號(hào):1000-369X(2024)02-341-09
Research on the Inhibition of Tea Extracts and Different Types of Tea on Mycobacterium tuberculosis
XU Jing1,2, HUANG Youyi3, HUANG Jin4, LI Chunlei2*
1. Department of Tourism and Hospitality Management, Pingdingshan Vocational and Technical College, Pingdingshan 467000, China;
2. Shandong Province Facility Horticulture Bioengineering Research Center, College of Agriculture, Weifang Institute of Science and Technology, Shouguang 262700, China; 3. Tea Science Department of College of Horticulture amp; Forestry Sciences, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430064, China; 4. Shiyan Institute of Fruit and Tea, Shiyan 442000, China
Abstract: This study was aimed at investigating the inhibitory effect of tea on Mycobacterium tuberculosis strain H37Ra by using the Oxford cup method for the bacteriostatic assay of H37Ra. The inhibitory abilities of different tea extracts (tea polyphenols, tea polysaccharides and tea saponins) and different teas (Huanong Lvzhen, Dazongchaoqing, Guangdong Dayeqing, Fuding Shoumei, Tieguanyin, Fenghuang Dancong, Keemun black tea, Xiaguan Tuocha and Green brick tea) on the activity of H37Ra strain were studied. The results of the bacteriostatic experiments of tea extracts show that tea polyphenols exhibited significant bacteriostatic ability against H37Ra strain and the bacteriostatic effect was gradually enhanced with the increase of tea polyphenol concentration. At a concentration of 40 mg·mL-1, tea polyphenols show long-term inhibition of the growth of H37Ra strain. Tea polysaccharides and saponins had no inhibitory effect on Mycobacterium tuberculosis. Different types of tea exhibit varying degrees of antibacterial ability, among which, the ethyl acetate fraction of Fenghuang Dancong had a stronger bacterial inhibition ability than other isolates. The column chromatography separated by 60% ethanol had the strongest bacterial inhibition ability, suggesting that tea polyphenols were the main components to inhibit the growth of H37Ra strain. The results confirm that tea has an inhibitory effect on H37Ra strain and different tea extracts and different tea types have different antibacterial abilities, which provides a new idea for the development of tuberculosis related antibacterial drugs.
Keywords: tea extracts, bacteriostatic, Mycobacterium tuberculosis H37Ra, tea polyphenols
結(jié)核病是一種全球性疾病,截至2022年全球新發(fā)結(jié)核病患者1 060萬名,較2021年增加4.5%,耐藥結(jié)核病負(fù)擔(dān)增加3%,嚴(yán)重威脅人類健康[1]。結(jié)核病由感染肺部的結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起,結(jié)核分枝桿菌是一種細(xì)長略帶彎曲的桿菌,其細(xì)胞壁外的一層莢膜有一定保護(hù)作用,因此,結(jié)核分枝桿菌不僅很難被藥物殺死,而且表現(xiàn)出越來越強(qiáng)的耐藥性[2]。近年來針對(duì)結(jié)核病已開發(fā)出近20種藥物,但均存在明顯副作用、易產(chǎn)生耐藥性、病人難阻耐受等缺點(diǎn)。研究表明,結(jié)核分枝桿菌至少對(duì)兩種較有效的抗結(jié)核藥物(異煙肼和利福平)具有抗性,給臨床治療帶來困難[3]。
茶是一種具有豐富保健功能的飲料,除作為日常飲料之外,也被用于制作保健品、食品添加劑、除霉劑等,在醫(yī)藥方面也有一定的應(yīng)用[4]。目前,茶葉在抗結(jié)核分枝桿菌方面的研究較少,深入研究茶葉在抑制結(jié)核分枝桿菌方面的作用對(duì)天然藥物及藥用添加劑的開發(fā)具有重要意義,也為日常飲食改善結(jié)核病提供可能。本研究以不同茶葉提取物和不同種類的茶葉水浸提物為原料,研究其對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Ra菌株的抑制作用,為結(jié)核病的輔助治療及結(jié)核桿菌的抗耐藥性研究提供新的思路。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
以結(jié)核分枝桿菌H37Ra菌株為試驗(yàn)菌種,由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保藏;茶多酚、茶多糖、茶皂素購自陜西百川生物科技有限公司,純度均達(dá)95%以上;華農(nóng)綠針(名優(yōu)綠茶)、大宗炒青、廣東大葉青、福鼎壽眉、鐵觀音、鳳凰單叢、祁門紅茶、下關(guān)沱茶、青磚茶由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供;菌體培養(yǎng)使用的7H9液體培養(yǎng)基和7H10固體培養(yǎng)基試劑購自美國BD公司;用于柱層析的NKA9大孔樹脂購自廣州偉伯科技有限公司。
1.2 培養(yǎng)基制備
7H9液體培養(yǎng)基的配制方法:稱取4.7 g培養(yǎng)基試劑粉末溶于900 mL的蒸餾水中,加入2 mL甘油和0.5 mL吐溫80,自動(dòng)滅菌鍋121 ℃滅菌10 min,待液體溫度降至45 ℃,以無菌操作加入100 mL OADC增菌液,4 ℃冰箱保存,顏色為淡黃色。
7H10固體培養(yǎng)基的配制方法:稱取19 g試劑粉末溶于900 mL蒸餾水中,加入5 mL甘油,混合均勻煮沸并不停搖動(dòng)1 min使粉末完全溶解,自動(dòng)滅菌鍋121 ℃滅菌10 min,待液體溫度降至50~55 ℃,以無菌操作加入100 mL OADC增菌液,混合均勻后分裝在培養(yǎng)皿并置于4 ℃冰箱保存,顏色為白色透明。
1.3 菌種活化培養(yǎng)
將7H9液體培養(yǎng)基裝入已滅菌處理的5支培養(yǎng)瓶中,在超凈工作臺(tái)中,用移液器吸取已解凍的H37Ra菌種,接種到7H9液體培養(yǎng)基中。接種后的培養(yǎng)瓶置于37 ℃恒溫?fù)u床中振蕩培養(yǎng)12 d[5]。
1.4 體外抑制結(jié)核分枝桿菌H37Ra試驗(yàn)方法
采用牛津杯法檢測抑菌能力。將活化后的H37Ra菌種稀釋103倍,菌數(shù)約為1×104 CFU·mL-1,取0.1 mL涂布于配制好的7H10培養(yǎng)基上,將滅菌后的牛津杯放置于培養(yǎng)基上,每個(gè)培養(yǎng)皿放置2個(gè)牛津杯,每2個(gè)培養(yǎng)皿為一組,分別向每組牛津杯中加入30 μL抑菌物質(zhì),培養(yǎng)完成后(10~12 d)測量抑菌圈大小[6]。以正常培養(yǎng)基為對(duì)照,以抑菌圈的大小判斷加入的抑菌物質(zhì)的抑菌能力。
1.5 抑菌試驗(yàn)
1.5.1 茶葉提取物抑菌試驗(yàn)
將茶多酚、茶多糖、茶皂素分別用水配制成80、40、20、10、5 mg·mL-1 5個(gè)質(zhì)量濃度梯度,并用0.22 μm濾膜過濾后加入30 μL抑菌物質(zhì),使用牛津杯法進(jìn)行抑菌試驗(yàn)[6],以同體積的水作為對(duì)照。
1.5.2 不同濃度茶葉水提物的抑菌試驗(yàn)
將9種茶葉磨碎并過80目篩備用。稱取10 g茶樣,以1︰50的茶水比(m︰V)沸水浴浸提10 min,用脫脂棉過濾,濾液以5 000 r·min-1離心20 min。上層液通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至200 mg·mL-1,然后分別配制質(zhì)量濃度為150、100、50 mg·mL-1的茶湯,加入30 μL抑菌物質(zhì),使用牛津杯法進(jìn)行抑菌試驗(yàn)[7],以同體積的水作為對(duì)照。
1.5.3 不同茶葉有機(jī)提取物抑菌試驗(yàn)
取上述濾液50 mL通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至200 mg·mL-1的濃縮茶湯,分別使用100 mL的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取,每種有機(jī)溶劑萃取兩遍,分別濃縮蒸干后,再用水定容至50 mL。經(jīng)過處理,每種茶葉被分離為5部分,分別是石油醚部、氯仿部、乙酸乙酯部、正丁醇部及剩余水部[8]。每個(gè)分離部分加入30 μL抑菌物質(zhì),使用牛津杯法進(jìn)行抑菌試驗(yàn),以同體積的水作為對(duì)照。
1.5.4 鳳凰單叢乙酸乙酯萃取物的柱層析分離物抑菌試驗(yàn)
以NKA-9大孔吸附樹脂為吸附劑,對(duì)鳳凰單叢乙酸乙酯部進(jìn)行柱層析分離。層析柱規(guī)格為2.5 cm×50 cm,95%乙醇浸泡NKA-9大孔吸附樹脂24 h,濕法裝柱,用95%乙醇洗至無混濁,再用蒸餾水洗至無醇味。用4倍柱體積鹽酸溶液以每小時(shí)5倍柱體積的流速洗樹脂柱,并浸泡3 h,用蒸餾水洗至中性;再用4倍柱體積的5%氫氧化鈉以每小時(shí)5倍層析柱體積的流速洗樹脂柱,并浸泡3 h,再用蒸餾水洗至中性[9]。取10 mL鳳凰單叢乙酸乙酯部進(jìn)行上樣,流速為每小時(shí)50%的層析柱體積,先用3倍柱體積的蒸餾水洗,然后分別用3倍柱體積的20%、40%、60%、80%、95%乙醇溶液洗脫,分別收集洗脫液。洗脫液分別進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至一定濃度時(shí)進(jìn)行冷凍干燥,再以一定體積的蒸餾水溶解后,加入30 μL抑菌物質(zhì),使用牛津杯法進(jìn)行抑菌試驗(yàn)。
1.6 茶多酚含量的測定
采用酒石酸亞鐵比色法測定[8]。
1.7 數(shù)據(jù)處理
所有試驗(yàn)重復(fù)3次,試驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。使用Microsoft Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理,采用SPSS 26軟件分析各處理間的差異顯著性(α=0.05)。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同茶葉提取物對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Ra的抑制作用
為探究茶葉中功能成分對(duì)H37Ra菌株的抑菌作用,本研究分別以茶多酚、茶多糖、茶皂素等茶葉提取物進(jìn)行抑菌試驗(yàn),以抑菌圈的大小作為抑菌能力的評(píng)價(jià)指標(biāo)(表1)。結(jié)果表明,對(duì)照組沒有抑菌效果,茶多酚對(duì)H37Ra菌株表現(xiàn)出明顯的抑菌能力,茶多糖和茶皂素對(duì)H37Ra無抑菌能力。茶多酚的抑菌能力隨著濃度的升高而增強(qiáng),在5 mg·mL-1時(shí)抑菌圈直徑僅為0.60 cm(圖1A),在40 mg·mL-1時(shí)增大為2.48 cm(圖1D),濃度達(dá)到80 mg·mL-1時(shí),培養(yǎng)皿內(nèi)兩個(gè)牛津杯的抑菌圈重合,未取得有效直徑數(shù)據(jù)。顯著性分析表明,不同濃度茶多酚的抑菌能力表現(xiàn)出顯著差異(P<0.05)。將添加20 mg·mL-1和40 mg·mL-1茶多酚溶液的培養(yǎng)皿培養(yǎng)至23 d(圖1E和圖1F),結(jié)果顯示,添加40 mg·mL-1茶多酚溶液的抑菌圈內(nèi)不再生長出結(jié)核分枝桿菌,而添加20 mg·mL-1茶多酚溶液的抑菌圈內(nèi)重新長出了部分菌落,說明40 mg·mL-1茶多酚溶液對(duì)H37Ra菌株能夠維持較長時(shí)間的抑制作用,而20 mg·mL-1茶多酚溶液對(duì)H37Ra菌株生長的抑制作用隨時(shí)間的延長而減弱。
2.2 不同茶葉水提物對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Ra的抑制作用
9種茶葉的茶湯對(duì)H37Ra菌株的抑菌試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。華農(nóng)綠針、大宗炒青、福鼎壽眉、廣東大葉青、鐵觀音和鳳凰單叢對(duì)H37Ra菌株表現(xiàn)出抑菌效果,且抑菌能力均隨濃度的升高而增大。廣東大葉青在50 mg·mL-1以下沒有抑菌能力,福鼎壽眉和大宗炒青在質(zhì)量濃度為100 mg·mL-1及以下時(shí)也沒有表現(xiàn)出抑菌能力。顯著性分析表明,不同種類茶湯在質(zhì)量濃度為200 mg·mL-1時(shí),對(duì)結(jié)核桿菌的抑菌效果表現(xiàn)出顯著差異(P<0.05)。其中,鳳凰單叢的抑菌能力最強(qiáng),抑菌圈直徑達(dá)到2.07 cm;其次為華農(nóng)綠針,抑菌圈直徑為1.90 cm;鐵觀音的抑菌圈直徑為1.72 cm。雖然華農(nóng)綠針的抑菌效果強(qiáng)于鐵觀音,但從總體茶類來看,烏龍茶的抑菌效果最好,綠茶、白茶、黃茶對(duì)結(jié)核桿菌有一定的抑菌能力,而黑茶和紅茶則未表現(xiàn)出抑菌能力。
2.3 3種茶葉的提取物對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Ra的抑制作用
將華農(nóng)綠針、鐵觀音和鳳凰單叢3種抑菌能力較強(qiáng)的茶葉的茶湯浸提濃縮后,分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,各萃取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥后的水溶液進(jìn)行抑菌試驗(yàn),結(jié)果如表3和圖2所示。結(jié)果表明,3種茶湯的有機(jī)萃取物中,乙酸乙酯部的抑菌能力最強(qiáng);華農(nóng)綠針和鐵觀音的石油醚萃取物有一定抑菌能力,抑菌圈分別為0.60 cm和0.93 cm;華農(nóng)綠針的正丁醇萃取物抑菌圈達(dá)到了1.71 cm;而3種茶湯萃取后剩余水部均不具有抑菌活性。
為了進(jìn)一步分析3種茶葉中抑制H37Ra生長的關(guān)鍵物質(zhì),對(duì)華農(nóng)綠針、鳳凰單叢和鐵觀音茶湯有機(jī)分離部的茶多酚含量進(jìn)行測定,結(jié)果如表4所示。結(jié)果顯示,華農(nóng)綠針乙酸乙酯部的茶多酚含量明顯高于其他各部(15.69 mg·mL-1),
其次為石油醚部(10.61 mg·mL-1);鳳凰單叢乙酸乙酯部的茶多酚含量最高(22.84 mg·mL-1);鐵觀音的茶多酚含量最高(13.54 mg·mL-1)的是乙酸乙酯部,但低于華農(nóng)綠針、鳳凰單叢的乙酸乙酯部。顯著性分析表明,3種茶湯有機(jī)分離部的茶多酚含量存在顯著差異(P<0.05)。其中,乙酸乙酯部的茶多酚含量均顯著高于其他分離部,抑菌能力最強(qiáng),結(jié)合表1的結(jié)果初步推測茶多酚為茶葉中抑制H37Ra菌株生長的關(guān)鍵物質(zhì)。
2.4 鳳凰單叢乙酸乙酯萃取物的柱層析分離物對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Ra的抑制作用
為了進(jìn)一步研究抑菌效果最好的鳳凰單叢乙酸乙酯部的關(guān)鍵物質(zhì),本研究進(jìn)行了柱層析并測試了各洗脫分部的抑菌能力。結(jié)果表明(表5),60%乙醇洗脫部的抑菌能力最強(qiáng),抑菌圈直徑達(dá)到2.40 cm;其次為40%乙醇洗脫部,抑菌圈直徑為2.21 cm;20%和80%乙醇洗脫部的抑菌圈直徑分別為1.00 cm和0.77 cm;蒸餾水和100%乙醇洗脫部沒有抑菌能力。綜合各洗脫部抑菌結(jié)果推測,60%乙醇洗脫部的化合物是鳳凰單叢乙酸乙酯部中抑制H37Ra菌株生長的主要物質(zhì)。
3 討論
茶葉的抗菌和抗氧化功效一直備受關(guān)注。大量研究表明,茶葉對(duì)變形鏈球菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌等都有很強(qiáng)的抑制作用[10-14],本研究探究了茶葉對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Ra菌株的抑菌能力。茶多酚、茶多糖、茶皂素等茶葉提取物抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明,茶多酚能夠抑制H37Ra菌株的生長,且抑菌效果隨著濃度的增加而增強(qiáng),這與Renzetti等[15]研究結(jié)果一致,說明茶多酚是茶葉抑菌的關(guān)鍵成分。此外,有研究顯示,茶多糖和茶皂素能抑制細(xì)菌生長,如茶多糖可顯著抑制金黃色葡萄球菌、痤瘡丙酸桿菌、幽門螺桿菌等病原菌引起的血液凝集[16];湄潭白茶多糖對(duì)金黃色葡萄球菌具有抑菌活性,其最小抑菌濃度為8 mg·mL-1[17];茶皂素溶液對(duì)表皮葡萄球菌、沙門氏菌、大腸桿菌、黑曲霉和枯草芽孢桿菌均具有明顯的抑制作用[18-20],但在本研究中,茶多糖和茶皂素均未表現(xiàn)出對(duì)H37Ra菌株有抑制作用,可能與兩種物質(zhì)的抑菌機(jī)理以及H37Ra菌株具有保護(hù)莢膜有關(guān)。
為了進(jìn)一步探索不同種類茶葉對(duì)H37Ra菌株的抑菌能力,本研究選取多種茶葉進(jìn)行試驗(yàn),研究發(fā)現(xiàn),烏龍茶(鳳凰單叢和鐵觀音)的抑菌能力明顯高于其他茶類,除華農(nóng)綠針表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑菌能力外,發(fā)酵程度較低的綠茶(大宗炒青)、白茶(福鼎壽眉)、黃茶(廣東大葉青)抑菌能力較弱,而發(fā)酵程度更高的祁門紅茶和黑茶(下關(guān)沱茶、青磚茶)均未表現(xiàn)出抑菌能力。初步判斷茶葉發(fā)酵程度與對(duì)H37Ra菌株的抑菌能力沒有直接關(guān)聯(lián),可能與其所含茶多酚的成分有關(guān)[21]。茶多酚具有抑菌活性,在烏龍茶發(fā)酵過程中的茶多酚轉(zhuǎn)化可能對(duì)抑菌活性有增強(qiáng)作用[22];而紅茶和黑茶在發(fā)酵過程中,茶多酚大多轉(zhuǎn)化為茶色素等物質(zhì),導(dǎo)致了抑菌能力的下降[23]。此外,烏龍茶在發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生大量的酚類化合物、有機(jī)酸和揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)等具有抗菌效果的物質(zhì),這些物質(zhì)的協(xié)同作用會(huì)增強(qiáng)其抗菌活性[24]。因此,茶葉種類和加工方式導(dǎo)致的茶多酚組成成分不同,可能成為影響茶葉抑制H37Ra菌株能力的關(guān)鍵因素。
對(duì)3種抑菌能力較強(qiáng)的茶葉進(jìn)行有機(jī)提取,發(fā)現(xiàn)不同有機(jī)提取物中均以乙酸乙酯提取的茶多酚含量最高,且抑菌能力最強(qiáng),進(jìn)一步表明茶葉中抑制H37Ra菌株生長的主要成分是茶多酚。對(duì)鳳凰單叢乙酸乙酯萃取物進(jìn)行柱層析分離發(fā)現(xiàn),60%乙醇洗脫部抑菌圈達(dá)到了2.40 cm,在各洗脫組分中最高,結(jié)合Vuong等[9]關(guān)于乙酸乙醋萃取茶多酚的研究,推測茶葉中抑制H37Ra菌株的關(guān)鍵物質(zhì)是兒茶素中的表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)。Anand等[25]證實(shí),茶葉中的EGCG與一線有效抗結(jié)核藥物(如利福平、異煙肼、乙胺丁醇等)結(jié)合后,藥物的效力都有所提高,抗結(jié)核活性均達(dá)到90%以上,EGCG可發(fā)揮增效作用;Mali等[26]對(duì)EGCG抑菌機(jī)理研究發(fā)現(xiàn),結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁由分枝桿菌酸組成,分枝桿菌酸的合成是通過脂肪酸合酶(FAS)調(diào)節(jié),烯酰還原酶、泛酸合成酶和十異戊二烯基磷?;?β-D-核糖2'-差向異構(gòu)酶(DPRE1)是發(fā)現(xiàn)新型抗結(jié)核藥物的關(guān)鍵有吸引力的靶點(diǎn),EGCG對(duì)DPRE(pdb id:4p8c)具有最高的結(jié)合親和力;Sun等[27]研究表明,綠茶提取物中的EGCG是抑制分枝桿菌包皮瘤mc2155生長的主要成分,在EGCG處理18 h后,細(xì)胞包膜結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,細(xì)胞壁變得更厚更粗糙,影響分枝桿菌細(xì)胞壁的完整性。因此,推測茶多酚通過破壞H37Ra菌株的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),使結(jié)核分枝桿菌無法維持正常生理功能,從而達(dá)到抑菌效果。
分離鑒定茶葉中抑制H37Ra菌株的活性成分,可為開發(fā)出高效、無毒、安全的抑菌藥物提供理論參考。對(duì)茶葉抑菌機(jī)制的進(jìn)一步探討也有助于深化對(duì)茶葉的認(rèn)識(shí)和開發(fā),提高茶葉在健康保健和醫(yī)療領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值。
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