基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)探討桂枝附子湯“異病同治”類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎與冠心病的作用機(jī)制

摘要：目的 運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法探討桂枝附子湯“異病同治”類分濕關(guān)節(jié)炎（RA）與冠心?。–HD）的潛在作用機(jī)制。方法 通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)篩選桂枝附子湯的主要活性成分和作用靶點(diǎn)，通過(guò)Genecards、TTD、OMIM、PharmGkb、DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)搜集RA和CHD的相關(guān)疾病靶點(diǎn)，將藥物靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)通過(guò)Uniprot校正后，取交集靶點(diǎn)，利用Cytoscape3.9.1軟件構(gòu)建藥物-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，獲取關(guān)鍵活性成分；通過(guò)STRING數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建交集靶點(diǎn)的蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)，并利用Cytoscape3.9.1中的CytoNCA插件對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行分析，篩選出核心靶點(diǎn)；運(yùn)用R4.1.3軟件進(jìn)行GO功能富集和KEGG通路分析，比較關(guān)鍵靶點(diǎn)及KEGG通路富集基因，選取關(guān)鍵活性成分及核心靶點(diǎn)，應(yīng)用AutoDock vina進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證。結(jié)果 篩選出桂枝附子湯活性成分154個(gè)，主要成分包括槲皮素、柚皮素、山奈酚等；疾病交集靶點(diǎn)146個(gè)，核心靶點(diǎn)為AKT1、STAT3、MAPK1、MAPK3、TP53等；GO分析結(jié)果表明桂枝附子湯治療RA與CHD主要涉及氧化應(yīng)激反應(yīng)、活性氧代謝過(guò)程、脂代謝等生物學(xué)過(guò)；KEGG結(jié)果表明桂枝附子湯可能通過(guò)調(diào)控脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化通路、AGE-RAGE信號(hào)通路、P13K-Akt信號(hào)通路、、IL-17信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等發(fā)揮對(duì)RA與CHD的“異病同治”作用。分子對(duì)接結(jié)果表明桂枝附子湯關(guān)鍵活性成分與核心靶點(diǎn)結(jié)合穩(wěn)定。結(jié)論 桂枝附子湯治療RA與CHD涉及多成分、多靶點(diǎn)，多通路作用機(jī)制，藥物與靶點(diǎn)具有穩(wěn)定的對(duì)接活性，可為后續(xù)臨床應(yīng)用與實(shí)驗(yàn)研究提供理論參考。

關(guān)鍵詞：桂枝附子湯；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；異病同治；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；冠心病

中圖分類號(hào)：R593.22"" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A"" 文章編號(hào)：1007-2349（2024）02-0024-09

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以侵蝕性關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)的自身免疫病，基本病理表現(xiàn)為滑膜炎、血管翳增生，并逐漸出現(xiàn)關(guān)節(jié)軟骨和骨破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失，可并發(fā)肺部疾病、心血管疾病、惡性腫瘤及抑郁癥等［1］。RA的死亡病例中，約50%與心血管疾?。╟ardiovascular disease，CVD）［2］相關(guān)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者心血管病變發(fā)生率達(dá)24.2％左右，其中以冠心病較為常見(jiàn)［3］。冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是以冠狀動(dòng)脈發(fā)生粥樣硬化引起管腔閉塞或狹窄最終導(dǎo)致心肌缺血缺氧或壞死為主要病理特征的臨床常見(jiàn)病、多發(fā)?。?］。RA與CHD目前的共同發(fā)病機(jī)制、疾病之間的相互作用機(jī)制尚不明確。

中醫(yī)藥治療復(fù)雜的多系統(tǒng)疾病有獨(dú)到的優(yōu)勢(shì)，RA屬于中醫(yī)“痹證”的范疇，《素問(wèn)·痹論》提出“風(fēng)寒濕三氣雜至，合而為痹”的發(fā)病學(xué)觀點(diǎn)，吳生元［5］教授認(rèn)為“陽(yáng)虛邪湊”為痹證的關(guān)鍵病機(jī)。冠心病屬于中醫(yī)“胸痹”的范疇，本病的發(fā)生與寒邪內(nèi)侵、情志失調(diào)、飲食不節(jié)、勞倦內(nèi)傷、年邁體虛等因素有關(guān)，“陽(yáng)微陰弦”為本病的基本病機(jī)［6］。由此可見(jiàn)，陽(yáng)氣不足與寒邪內(nèi)侵是二者共同的發(fā)病因素，可能是中醫(yī)“異病同治”的基礎(chǔ)。

桂枝附子湯出自《金匱要略》，主治“傷寒八九日，風(fēng)濕相搏，身體疼煩，不能自轉(zhuǎn)側(cè)，不嘔不渴，脈浮虛而澀者”，由桂枝、附子、甘草、生姜、大棗5味中藥組成，具有溫陽(yáng)散寒、除濕通絡(luò)之功，廣泛應(yīng)用于風(fēng)濕性疾病、心血管疾病的治療［7-8］。中藥復(fù)方是在辨證論治理論和中醫(yī)整體觀念指導(dǎo)下，根據(jù)藥物性味與臨床病機(jī)，依據(jù)君臣佐使、七情和合等配伍原則組成［9］。中藥復(fù)方中的成分與臨床作用機(jī)制極其復(fù)雜，其臨床功效的發(fā)揮往往依賴于多途徑、多成分、多靶點(diǎn)的協(xié)同［10-11］。桂枝附子湯以其溫陽(yáng)散寒的核心功效應(yīng)用于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎與冠心病的治療，現(xiàn)階段對(duì)于桂枝附子湯治療RA與CHD的共同機(jī)制尚不明確，本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以及分子對(duì)接的研究方法，對(duì)桂枝附子湯異“異病同治”RA與CHD的機(jī)制進(jìn)行分析，以期為其臨床應(yīng)用與基礎(chǔ)研究提供參考。

1 資料與方法

1.1 桂枝附子湯活性成分及靶點(diǎn)篩選 通過(guò)訪問(wèn)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)平臺(tái)，分別以“桂枝”、“附子”、“生姜”、“大棗”、“甘草”為關(guān)鍵詞，在數(shù)據(jù)庫(kù)收集桃紅四物湯藥效成分信息，以DL≥0.18和OB≥30%為篩選條件，搜索該數(shù)據(jù)庫(kù)中所包含桂枝附子湯有效活性成分及其靶點(diǎn)。

1.2 桂枝附子湯與RA和CHD疾病靶點(diǎn)與交集靶點(diǎn)獲取 通過(guò)Genecards、TTD、OMIM、PharmGkb、DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)，以“rheumatoid arthritis”為關(guān)鍵詞檢索治療RA的靶點(diǎn)，以“coronary heart disease”為關(guān)鍵詞檢索治療冠心病的靶點(diǎn)。經(jīng)篩選與去重后，通過(guò)Draw Venn Diagram網(wǎng)站分析并獲取桂枝附子湯治療RA和CHD的交集靶點(diǎn)，繪制Venn圖。

1.3 藥物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 將篩選的交集靶點(diǎn)及活性成分交集靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape3.9.2軟件，利用Analyze Network功能，基于自由度、緊密度、介度中心性等參數(shù)以評(píng)估節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中的重要性，構(gòu)建“藥物-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)。

1.4 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心靶點(diǎn)篩選 將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，設(shè)定物種為人類，設(shè)定最小蛋白互作置信度閾值為0.9，隱藏孤立靶點(diǎn)1個(gè)，得到蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)，導(dǎo)入 Cytoscape3.9.2軟件，運(yùn)用Analyze Network功能對(duì)靶基因進(jìn)行拓?fù)浞治?，通過(guò)CytoNCA插件篩選核心靶點(diǎn)。

1.5 GO與KEGG分析 運(yùn)用R軟件的BiocManager、clusterProfiler、pathview等程序包把基因簡(jiǎn)稱（Symbol）轉(zhuǎn)化為基因ID（EntrezID）并進(jìn)行GO功能富集分析與KEGG通路富集分析。

1.6 分子對(duì)接驗(yàn)證 選取度值排名前3的中藥活性性成分作為配體，查閱文獻(xiàn)后選取相關(guān)核心靶點(diǎn)作為受體蛋白進(jìn)行分子對(duì)接分析。從PDB數(shù)據(jù)庫(kù)中下載靶蛋白的3D結(jié)構(gòu)，保存為“pdb”格式的文件，在PumChem中下載3種成分的小分子配體2D結(jié)構(gòu)，通過(guò)Chem3D軟件將2D結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化為3D結(jié)構(gòu)并優(yōu)化結(jié)構(gòu)，通過(guò)Pymol軟件進(jìn)行去水，加氫等操作。運(yùn)用Auto Dock1.5.7軟件將小分子配體與核心蛋白基因pdb 格式轉(zhuǎn)為pdbqt格式并設(shè)置合適的對(duì)接參數(shù)，運(yùn)行Vina進(jìn)行分子對(duì)接，在Pymol中將部分結(jié)果可視化。

2 結(jié)果

2.1 桂枝附子湯活性成分與靶點(diǎn) 經(jīng)過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)檢索及篩選，得到桂枝附子湯活性成分154種，其中包括桂枝7種，附子21種，生姜5種，大棗29種，甘草92種，通過(guò)UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)去重并校對(duì)后得到229個(gè)作用靶點(diǎn)。OB值前50活性分，見(jiàn)表1。

2.2 檢索疾病交集靶點(diǎn) 檢索OMIM、GeneCards、TTD、PharmGkb、DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)，經(jīng)篩選及合并去重后得到RA相關(guān)疾病靶點(diǎn)2965個(gè)、CHD相關(guān)靶點(diǎn)7515個(gè)，桂枝附子湯與RA、CHD的交集靶點(diǎn)146個(gè)，見(jiàn)圖1。

2.3 桂枝附子湯治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和冠心病的“藥物-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析 將桂枝附子湯與RA、CHD的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape3.9.1軟件，對(duì)“藥物-靶點(diǎn)-疾病”進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，見(jiàn)圖2。該網(wǎng)絡(luò)由253個(gè)節(jié)點(diǎn)和1204條邊組成，經(jīng)分析得到Degree排名前10的成分為quercetin（槲皮素）、kaempferol（山柰酚）、naringenin（柚皮素）、7-Methoxy-2-methyl isoflavone（7-甲氧基-2-甲基異黃酮）、licochalcone a（甘草查爾酮a）、formononetin（刺芒柄花素）、isorhamnetin（異鼠李素）、shinpterocarpin（甘草苷）、beta-carotene（β-胡蘿卜素）、Licoagrocarpin（葡糖苷），見(jiàn)表2。

2.4 交集靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心靶點(diǎn)分析 根據(jù)靶點(diǎn)蛋白與藥物的關(guān)系可以構(gòu)建“藥物-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)，將數(shù)據(jù)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，獲得包含146個(gè)節(jié)點(diǎn)和603條邊的PPI網(wǎng)絡(luò)，輸出PPI網(wǎng)絡(luò)為TSV格式并導(dǎo)入Cytoscape3.9.1進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?，通過(guò)CytoNCA插件篩選出大于中位數(shù)值的核心靶點(diǎn)，構(gòu)建核心靶點(diǎn)的篩選策略圖，見(jiàn)圖3。最終經(jīng)兩次篩選獲得包含15個(gè)節(jié)點(diǎn)和79條邊的核心靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)，涉及到的疾病核心靶點(diǎn)包括STAT3、MYC、HIFA、ESR1、MAPK3、TP53、MAPK1、RELA、HSP90AA1、FOS、AKT1、MAPK14、CCND1、EGFR、CDKN1A。

2.5 GO功能富集分析和KEGG信號(hào)通路富集分析結(jié)果 通過(guò)R軟件進(jìn)行了富集分析，GO功能富集分析顯示，見(jiàn)圖4。生物過(guò)程（BP）主要參與對(duì)脂多糖的反應(yīng)、對(duì)氧氣水平的反應(yīng)、對(duì)活性氧的反應(yīng)、對(duì)氧化應(yīng)激的反應(yīng)、細(xì)胞對(duì)缺氧的反應(yīng)；細(xì)胞成分（CC）中主要富集于脂筏、膜微區(qū)、囊腔、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶復(fù)合物、膜小凹；分子功能（MF）中主要與DNA轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)、核受體的活動(dòng)、配體激活的轉(zhuǎn)錄因子活性、RNA聚合酶II-特異性DNA-結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、轉(zhuǎn)錄輔助調(diào)節(jié)因子結(jié)合相關(guān)。KEGG通路富集結(jié)果表明，見(jiàn)圖5。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和冠心病與脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化通路、AGE-RAGE信號(hào)通路、流體剪切應(yīng)力和動(dòng)脈硬粥樣硬化通路、P13K-Akt信號(hào)通路、白介素17信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等密切相關(guān)。

2.6 分子對(duì)接結(jié)果 將PPI網(wǎng)絡(luò)中度值排名前3位的活性成分與篩選出的核心靶點(diǎn)（AKT1、STAT3、MAPK1、MAPK3、TP53）進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證，詳見(jiàn)表3。分子對(duì)接的結(jié)合能（kJ/mol）越小，表明活性成分與靶蛋白之間的對(duì)接越穩(wěn)定。結(jié)合能的數(shù)值小于-4.25kJ/mol時(shí)，活性成分與靶蛋白之間結(jié)合活性一般，小于-5.0kJ/mol時(shí)結(jié)合活性良好，小于-7.0kJ/mol時(shí)結(jié)合活性強(qiáng)烈［12］。桂枝附子湯的主要活性成分槲皮素、山奈酚、柚皮素與5個(gè)靶蛋白的結(jié)合活性均lt;-7.0kJ/mol，表明篩選出的靶蛋白與活性成分均能穩(wěn)定的結(jié)合，其中AKT1與槲皮素的結(jié)合活性最穩(wěn)定，詳見(jiàn)圖6。

3 討論

“異病同治”是中醫(yī)重要的治則，異病同治的關(guān)鍵在于病機(jī)的相同，當(dāng)疾病的病機(jī)相同，則可以運(yùn)用相同的治法［13］。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎屬于中醫(yī)“痹證”的范疇，其主要的病變部位在肢體經(jīng)絡(luò)，久病常可累及心、肺等臟腑。冠心病屬于中醫(yī)“胸痹”的范疇，其主要的病變部位在心與血脈，久病常易出現(xiàn)“真心痛”即心肌梗塞的臨床癥狀。從廣義痹證角度而言，RA與CHD在疾病的病位上有五體痹到五臟痹的聯(lián)系，“陽(yáng)虛寒凝”是二者共同的病機(jī)。如《素問(wèn)·痹論》論“脈痹不已，復(fù)感于邪，內(nèi)舍于心”，“心痹者，脈不通，煩則心下鼓，暴上氣而喘，嗌干善噫，厥氣上則恐”。心痹的主要癥狀表現(xiàn)為心悸、胸悶、喘促、咽干、噯氣、恐懼感與冠心病發(fā)作的臨床表現(xiàn)類似。RA與CHD的西醫(yī)病因病機(jī)雖不相同，但炎癥反應(yīng)［15-16］、血管內(nèi)皮功能障礙［17-18］是二者共同的病理基礎(chǔ)。

桂枝附子湯是中醫(yī)經(jīng)典名方，方中桂枝疏散風(fēng)寒，溫通經(jīng)絡(luò)，附子溫經(jīng)散寒、祛風(fēng)除濕，二藥相合，散風(fēng)寒濕邪而通痹；生姜、大棗調(diào)和營(yíng)衛(wèi)，甘草補(bǔ)脾和中。五味合用，共奏溫經(jīng)散寒，祛風(fēng)勝濕之功。從現(xiàn)代藥理學(xué)角度而言，桂枝具有擴(kuò)血管、鎮(zhèn)痛抗炎、解熱等作用；附子具有有強(qiáng)心、擴(kuò)血管、抗心律失常和保護(hù)心肌等作用；“桂枝-附子”溫通經(jīng)脈配伍可通過(guò)抑制TNF信號(hào)通路的活化，促進(jìn)細(xì)胞黏附和炎癥介質(zhì)的合成，達(dá)到緩解炎癥的目的［19］。動(dòng)脈粥樣硬化本質(zhì)是是冠心病發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，甘草可通過(guò)MAPK信號(hào)途徑、PI3K-Akt信號(hào)途徑調(diào)控細(xì)胞增殖和凋亡、NOD樣受體信號(hào)通路，同時(shí)發(fā)揮免疫調(diào)控作用，從而影響動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展［20］。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)桂枝附子湯能調(diào)控TXNIP/NLRP3/caspase-1通路，抑制軟骨細(xì)胞的焦亡［21］。

本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究方法篩選出桂枝附子湯度值排名前3的關(guān)鍵活性成分為quercetin（槲皮素）、kaempferol（山柰酚）、naringenin（柚皮素）。槲皮素、山奈酚與柚皮素均為黃酮類化合物，黃酮類化合物以其抗炎和抗氧化的特性被熟知［22］。研究表明槲皮素具有抑制炎性細(xì)胞因子、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、清除氧自由基、抑制MMPs和滑膜細(xì)胞增生等多種生物活性［23］。同時(shí)，槲皮素在心血管用藥方面有很大的潛力，槲皮素可以抑制LDL氧化、內(nèi)皮非依賴性血管擴(kuò)張作用、減少黏附分子和其他炎癥標(biāo)志物、在氧化應(yīng)激條件下對(duì)一氧化氮和內(nèi)皮功能起到保護(hù)作用、預(yù)防神經(jīng)元氧化和炎癥損傷以及發(fā)揮抗血小板集聚的作用［24］。實(shí)驗(yàn)研究表明，山奈酚可通過(guò)調(diào)節(jié)circNOL12/miR-6873-3p/FRS2軸來(lái)減輕ox-LDL誘導(dǎo)的HUVEC炎癥、氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡［25］。柚皮素可以通過(guò)Hippo-YAP信號(hào)通路調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，緩解炎癥反應(yīng)［26］。

通過(guò)對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)靶點(diǎn)的篩選與分析發(fā)現(xiàn)AKT1、STAT3、MAPK1、MAPK3、TP53等靶基因是桂枝附子湯治療RA與CHD的核心靶點(diǎn)，分子對(duì)接結(jié)果顯示桂枝附子湯中的核心成分能與上述核心靶點(diǎn)穩(wěn)定結(jié)合。AKT1是P13K-Akt通路的關(guān)鍵靶蛋白之一，與多條信號(hào)通路均有交叉，通過(guò)影響下游多種因子活化，介導(dǎo)細(xì)胞增殖、存活與凋亡、新生血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化及免疫細(xì)胞活化等多種生理過(guò)程［27］。RA的滑膜炎、滑膜血管翳形成、軟骨破壞和骨侵蝕均與PI3K-Akt信號(hào)通路密切相關(guān)［28］。KEGG分析結(jié)果也表明P13K-Akt通路是桂枝附子湯治療RA與CHD的關(guān)鍵通路之一。STAT3在將細(xì)胞外信號(hào)從質(zhì)膜傳遞到細(xì)胞核和線粒體中發(fā)揮著核心作用，它影響轉(zhuǎn)錄和線粒體功能，從而調(diào)節(jié)多種生物過(guò)程。STAT3可以限制心肌缺血引起的心肌細(xì)胞凋亡，心臟內(nèi)源性STAT3水平是在壓力條件下維持心臟正常結(jié)構(gòu)、收縮功能和新陳代謝的關(guān)鍵［29］。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，STAT3是治療RA的潛在靶點(diǎn)，抑制STAT3可以有效阻斷CIA小鼠的炎癥和破骨細(xì)胞的活性［30］。MAPK1、MAPK3均是MAPK家族的成員，槲皮素可以通過(guò)MAPK信號(hào)通路緩解RA的炎癥并發(fā)揮抗氧化作用［31］。體內(nèi)、體外模型的研究均表明MAPK的過(guò)度表達(dá)是引起軟骨降解的關(guān)鍵因素［32-33］。TP53是一種轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)多種信號(hào)通路，如凋亡、細(xì)胞周期、DNA修復(fù)和細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)，TP53可以通過(guò)抗血管生成、促凋亡、調(diào)節(jié)代謝和細(xì)胞周期阻滯來(lái)影響心血管疾病的進(jìn)展［34］，通過(guò)干擾NF-κB和MAPK信號(hào)通路抑制RA的滑膜炎癥［35］。

GO分析結(jié)果表明共有靶點(diǎn)主要參與對(duì)脂多糖的反應(yīng)、對(duì)氧化應(yīng)激的反應(yīng)、對(duì)氧氣水平的反應(yīng)、對(duì)活性氧的反應(yīng)、細(xì)胞對(duì)缺氧的反應(yīng)等生物學(xué)過(guò)程。糖皮質(zhì)激素是緩解RA活動(dòng)期炎癥的主要藥物，長(zhǎng)期大量使用糖皮質(zhì)激素可以誘導(dǎo)TLR4信號(hào)通路異常激活，促進(jìn)破骨細(xì)胞增殖的增殖與活化［36］，導(dǎo)致血黏度升高、細(xì)胞缺氧、紅細(xì)胞變形能力下降，從而引起骨細(xì)胞的破壞，血管內(nèi)皮的損傷［37］。KEGG分析結(jié)果表明脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化、AGE-RAGE信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等密切相關(guān)。炎癥可對(duì)脂蛋白的分子結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響，誘導(dǎo)形成低密度脂蛋白，促進(jìn)活性氧簇產(chǎn)生和減少一氧化氮生成，進(jìn)而導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙［38］。AGEs可以通過(guò)活化的促分裂蛋白激酶（MAPKs）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑激活RAGE，AGEs與RAGE產(chǎn)生相互作用導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激，并通過(guò)激活MAPK激酶途徑級(jí)p21ras，最終激活NF-κB信號(hào)通路［39］，促進(jìn)細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）等基因的轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)心血管疾病的發(fā)生［40］，IL-17信號(hào)通路主要參與慢性炎癥及自身免疫疾病的發(fā)展過(guò)程，主要由轉(zhuǎn)錄因子RORγt的表達(dá)并被IL-23激活，參與多種細(xì)胞效應(yīng)［41］。PI3K是一種胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶，激活后可直接作用于AKT，活化后的AKT通過(guò)磷酸化作用，激活NF-кB信號(hào)通路［42］。TNF信號(hào)通路的異常激活可以引發(fā)腫瘤，炎癥等多種疾病，其中TNF-α可激活NF-κB、JNK/STAT等信號(hào)通路，介導(dǎo)RA骨破壞與血管內(nèi)皮炎癥的產(chǎn)生［43-44］。

綜上所述，本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接的研究方法對(duì)桂枝附子湯“異病同治”RA與CHD所涉及的多靶點(diǎn)、多通路作用機(jī)制，證明了桂枝附子湯的成分與RA和CHD的共同靶點(diǎn)之間可穩(wěn)定連接，桂枝附子湯可能通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞炎癥因子表達(dá)、調(diào)節(jié)免疫和抗氧化等多維網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，發(fā)揮“異病同治”作用，且與脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化、AGE-RAGE信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等密切相關(guān)。但本研究只是生物信息學(xué)層面的預(yù)測(cè)，數(shù)據(jù)庫(kù)納入的信息有一定的局限性，仍需后續(xù)研究進(jìn)一步完善相關(guān)機(jī)制的論證。

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（收稿日期：2023-02-14）