QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定六堡茶中15種農(nóng)藥殘留

摘 要：建立了QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定六堡茶中15種農(nóng)藥殘留的方法。樣品經(jīng)1%乙酸水浸泡，再加乙腈提取，加入無水乙酸鈉和無水硫酸鎂使有機相和水相分層，去除水分，采用PSA、C18、GCB、MgSO4混合凈化管凈化后，以超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法定性定量分析。結(jié)果表明，15種農(nóng)藥化合物的線性相關(guān)系數(shù)均大于0.995 9，檢出限為0.02～0.20 mg·kg-1，定量限為0.04～0.40 mg·kg-1，在3個加標(biāo)回收水平下，平均回收率在63.1%～113.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.1%～8.6%。該方法檢測速度快，操作簡單，有較好的靈敏度，適用于六堡茶中農(nóng)藥殘留的測定。

關(guān)鍵詞：QuEChERS；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；農(nóng)藥殘留；六堡茶

Quick Determination of 15 Pesticide Residues in Liupao Tea by QuEChERS UltraHigh Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

CHEN Maolin， XIAO Jiayin*， DAI Yonghai

（Wuzhou Food and Drug Inspection Institute， Wuzhou 543000， China）

Abstract： A method was developed for the rapid determination of 15 pesticide residues in Liupao tea by QuEChERS-ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （UPLC-MS/MS）. The samples were soaked in 1% acetic acid water， then extracted with acetonitrile， and anhydrous sodium acetate and anhydrous magnesium sulfate were added to make the organic and aqueous phases stratified， and the water was removed， and the samples were purified by a mixture of purification tubes of PSA， C18， GCB， and MgSO4， and then analyzed by UPLC-MS/MS. The results showed that the linear correlation coefficients of the 15 pesticide compounds were more than

0.995 9， the limits of detection were in the range of 0.02～0.20" mg·kg-1， the limits of quantification were in the range of 0.04～0.40 mg·kg-1， and the average recoveries were in the range of 63.1%～113.0% at three spiked recoveries levels with the relative standard deviations of 0.1%～8.6%. The method is fast， simple and has good sensitivity， and is suitable for the determination of pesticide residues in Liupao tea.

Keywords： QuEChERS; ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; pesticide residues; Liupao tea

六堡茶富含茶多酚﹑黃酮等營養(yǎng)物質(zhì)，具有明目清心﹑降低膽固醇等保健功效[1]。在六堡茶的種植過程中，農(nóng)藥被廣泛使用。目前，我國農(nóng)藥殘留檢測水平與發(fā)達國家相比仍有一定的差距[2]。為確保六堡茶的質(zhì)量安全，本文擬建立快速、準(zhǔn)確檢測六堡茶中農(nóng)藥殘留的方法，以提高檢測效率[3]。QuEChERS是目前農(nóng)產(chǎn)品檢測的主流方法，凈化效果好，具有簡便、快速、安全、高效等優(yōu)點[4]。本文以QuEChERS為凈化手段，采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS）對六堡茶中農(nóng)藥殘留進行快速篩查和定量分析[5]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

旋渦混合器：上海青浦瀘西儀器廠；LC-1290/QQQ-6470超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀：安捷倫科技有限公司；Allegra X-15R離心機：美國貝克曼公司；圓周振蕩搖床：IKA公司。

無水硫酸鎂和無水乙酸鈉：四川西隴科學(xué)有限公司；乙腈（HPLC級）：OMNICHEM；PSA、GCB和C18：上海安譜實驗科技股份有限公司；涕滅威亞砜、涕滅威砜、氯吡脲、啶蟲脒、涕滅威、苯醚甲環(huán)唑、三羥基克百威、克百威、甲基異柳磷、多菌靈、吡蟲啉、水胺硫磷、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、嘧菌酯和腈菌唑15種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：購自TMstandard公司。

1.2 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

分別精密稱取15種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品約10.00 mg于15個10 mL容量瓶中，加少量乙腈，超聲溶解，用乙腈定容至刻度，配制成濃度約為1.0 mg·mL-1的15種農(nóng)藥單標(biāo)儲備液，儲存于-20 ℃冰箱中。

1.3 試驗方法

1.3.1 提取及凈化

稱取2 g（精度到0.01 g）試樣于50 mL聚丙烯離心管中，加入10 mL 1%乙酸水浸泡10 min，加入15 mL乙腈，置于振蕩搖床振蕩5 min，加入混合鹽包（1.5 g無水乙酸鈉和6 g無水硫酸鎂），立即搖勻，冰浴10 min，冷卻后再振蕩5 min，4 750 r·min-1離心5 min，取上清液3 mL過QuEChERS凈化管（PSA 100 mg，C18 100mg，GCB 30 mg，MgSO4 300 mg）凈化，棄去初濾液，續(xù)濾液過0.22 μm有機濾膜，供UPLC-MS/MS測定。

1.3.2 色譜條件

色譜柱：ACE Ultracore Super C18（75 mm×2.1 mm，2.5 μm）；流動相：A為0.1%甲酸水，B為乙腈。梯度洗脫程序：0～0.5 min，5%B；0.5～2.0 min，5%B→80%B；2.0～2.5 min，80%B→90%B；2.5～4.0 min，90%B。后運行時間：1.5 min；流速：0.35 mL·min-1。柱溫：40 ℃。進樣量：1.0 μL。

1.3.3 質(zhì)譜條件

離子源：AJS ESI+；檢測方式：MRM；霧化器壓力：15 psi；干燥氣溫度：150 ℃；干燥氣流速：

8 L·min-1；毛細管電壓：3 500 V；加速電壓：7 V；鞘氣溫度：350 ℃；鞘氣流速：10 L·min-1；15種農(nóng)藥質(zhì)譜參數(shù)如表1所示。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系、檢出限與定量限

取1.2中標(biāo)準(zhǔn)儲備液分別采用空白六堡茶基質(zhì)溶液進行稀釋，配制6個濃度水平的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[6]。如表2所示，在相應(yīng)樣品濃度范圍內(nèi)，15種農(nóng)藥的峰面積與其濃度的線性關(guān)系良好（R2＞0.995 9）。以定量離子對的信噪比大于3計算方法的檢出限，信噪比大于10計算方法的定量限[7]，各農(nóng)藥的檢出限為0.02～0.20 mg·kg-1，定量限為0.04～0.40 mg·kg-1。

2.2 回收率與精密度

選取標(biāo)準(zhǔn)系列的1、3、5共3個濃度水平作為加標(biāo)水平1、加標(biāo)水平2、加標(biāo)水平3，對六堡茶空白試樣進行加標(biāo)回收實驗，每個濃度水平設(shè)置6個平行，按上述方法同步進行實驗，測定15種農(nóng)藥在六堡茶試樣中的平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果如表2所示。15種農(nóng)藥在六堡茶中的平均回收率為63.1%～113.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.1%～8.6%，可見該方法符合農(nóng)藥殘留痕量分析的要求[8]。

3 結(jié)論

本文通過QuEChERS對六堡茶中農(nóng)藥殘留進行前處理凈化，用UHPLC-MS/MS檢測[9]，建立測定六堡茶中農(nóng)藥殘留的方法。結(jié)果表明，QuEChERS凈化效果良好，該方法操作簡便、快速、安全、高效，可作為六堡茶中15種農(nóng)藥殘留的檢測分析方法。

參考文獻

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作者簡介：陳茂林（1994—），男，廣西梧州人，本科，助理工程師。研究方向：食品、藥品檢測。

通信作者：肖嘉茵（1994—），女，廣西梧州人，本科，工程師。研究方向：食品、藥品檢測。E-mail：931655229@qq.com。