楊敏,周陳平,李慶萌,鄺瑞彬,吳夏明,魏岳榮
(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南亞熱帶果樹生物學(xué)與遺傳資源利用重點實驗室/廣東省熱帶亞熱帶果樹研究重點實驗室,廣州 510640)
番木瓜(CaricapapayaL.)是世界上種植和消費最廣的熱帶水果之一,也是中國嶺南特色水果,具有很高的營養(yǎng)和藥用價值,被世界衛(wèi)生組織列為最有價值的十大水果之首,有“百益果王”之美譽[1-3]。據(jù)《OECDFAO農(nóng)業(yè)展望報告2020—2029》預(yù)測,在未來十年內(nèi),世界番木瓜產(chǎn)量將以每年2.1%的速度增長,到2029年可達(dá)1660萬t,發(fā)展前景廣闊。然而,番木瓜屬于典型的呼吸躍變型果實,采后常溫貯藏2~4 d,即可迅速達(dá)到生理成熟,之后果實腐爛,嚴(yán)重影響果實品質(zhì)和貨架期[4-7]。番木瓜采后貯藏已成為影響番木瓜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。針對這一問題,人們開發(fā)出很多理化技術(shù)以延長番木瓜貯藏時間。物理保鮮技術(shù)主要包括:熱處理[8-10]、低溫保鮮[8,11]、輻射處理[12-14]和氣調(diào)保鮮技術(shù)[15-16]。化學(xué)保鮮技術(shù)主要包括:1-甲基環(huán)丙烯(1-MCP)處理[17-18]、涂膜保鮮[19-22]、熏蒸保鮮[23-24]、鈣處理[25]、植物生長調(diào)節(jié)劑處理[26-27]和防腐殺菌劑處理[28]技術(shù)。鑒于番木瓜是典型的呼吸躍變型水果,具有成熟過程伴隨乙烯產(chǎn)生高峰,果實硬度急劇下降,從而使果實成熟[29]的特點,1-MCP 作為一種新型的高效乙烯抑制劑而備受關(guān)注。1-MCP可通過阻礙乙烯與受體結(jié)合,抑制果實生理生化反應(yīng),從而達(dá)到延緩果實成熟衰老的目的。但長期施用1-MCP 或處理不當(dāng)可導(dǎo)致番木瓜果實成熟障礙,即果實雖能正常黃變,但不能正常軟化,出現(xiàn)果實橡膠化、可食性差等弊端[18,30-31]。因此,產(chǎn)業(yè)急需自然延長貯藏時間的新品種/系。通常,在果實成熟過程中伴隨著果實硬度的降低,而果實硬度與果實開裂、失水和病害防御密切相關(guān),對果實的運輸性、貯藏性和貨架期有著重要影響[32],通常果實硬度較高的品種會有更長的貯藏期。且已有研究表明果實硬度與乙烯信號途徑中的乙烯響應(yīng)因子(ERF)和轉(zhuǎn)錄因子(ETN3)密切相關(guān)[32-35]。因此,以延長采后貯藏時間為目標(biāo),利用現(xiàn)有番木瓜資源選育硬度高且品質(zhì)優(yōu)良的番木瓜品種,并進行相關(guān)的機理研究具有重要意義。本團隊前期利用‘泰國紅’和‘GZ201301301’番木瓜為親本進行雜交,在F1代中篩選到‘黃花佑’和‘金錘’兩個優(yōu)系,兩者在果實硬度上差異顯著。為理清2 個遺傳背景完全一致的番木瓜優(yōu)系果實硬度差異的原因、果實硬度對番木瓜貯藏是否存在正面影響等科學(xué)問題,本研究對‘黃花佑’和‘金錘’采后果實進行了貯藏試驗,測定、統(tǒng)計和分析了2個優(yōu)系在貯藏期的果實失水率、可溶性固形物含量、果實硬度、乙烯含量等指標(biāo),并對2個優(yōu)系不同貯藏期的果實材料進行轉(zhuǎn)錄組測序和分析,初步明確了‘黃花佑’和‘金錘’果實硬度差異形成的原因及果實硬度對采后貯藏時間的影響,為番木瓜采后貯藏、品種選育和品質(zhì)調(diào)控提供了理論依據(jù)。
‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜為廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所以‘泰國紅’和‘GZ201301301’為親本,通過雜交育種獲得的兩個F1代優(yōu)系,‘黃花佑’和‘金錘’都已申報國家植物新品種權(quán),申請?zhí)柗謩e為:20211000173,20221007022?!S花佑’具有品質(zhì)優(yōu)、豐產(chǎn)的特性,‘金錘’則具有果形好、硬度高、耐貯運的特性,兩者在采后果實硬度上差異顯著?!S花佑’和‘金錘’番木瓜果實于商業(yè)成熟度(‘三線黃’)時采自廣東省廣州市白云區(qū)人和實驗基地,隨即運回廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所,用75%乙醇清洗,之后用ddH2O沖洗干凈,晾干后置于25℃室內(nèi)貯藏,并用于后續(xù)實驗。
1.2.1 果實硬度測試使用艾德堡數(shù)顯水果硬度計GY-4。從2個優(yōu)系中,分別挑選15個完好無損傷的果實進行編號,之后在不同貯藏時間測定果實硬度,實驗重復(fù)3次。
1.2.2 果實失水率測定采用稱重法。從2 個優(yōu)系中,分別挑選15個完好無損傷的果實進行編號,之后稱首重,在采后第1、4、7、10、12 d分別再次稱重,實驗重復(fù)3次。失水率的計算見公式(1)。
1.2.3 果實可溶性固形物含量測定使用日本ATAGO PAL-1 數(shù)顯糖度計測定。每次測定10 個成熟度一致的果實,實驗重復(fù)3次。
1.2.4 乙烯含量測定采用便攜式乙烯氣體分析儀-F-900測定。每個優(yōu)系每次取30個果實測定,實驗重復(fù)3次。計算見公式(2)。
1.2.5 石蠟切片制備和觀察取采后0、4、7、10 d的2個優(yōu)系果實,切取果實赤道部橫切面,用FAA 固定液固定。石蠟切片樣品制備及觀察參考梁社堅等[36]的方法進行。
1.2.6 乙烯利處理于商業(yè)熟度‘三線黃’時采摘‘金錘’果實,用75%乙醇清洗,之后用ddH2O沖洗干凈,晾干;配置乙烯利溶液,將果實浸泡3 min后取出,放入袋子中密封24 h后取出,室溫保存,之后觀察和統(tǒng)計果實軟化情況。對照果實不用乙烯利浸泡,每個處理選取10個果實,實驗重復(fù)3次。
以采后0、4、7、10 d的‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜果實為材料,委托美吉生物科技有限公司進行高通量轉(zhuǎn)錄組測序,測序平臺為Illumina HiSeq xten/NovaSeq 6000,每個樣品設(shè)置3 個重復(fù)。測序所得數(shù)據(jù)經(jīng)質(zhì)控后,使用Tophat2 軟件,與番木瓜參考基因組(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genome/?term=Carica papaya)進行比對分析。以|log2 fold change|≧1、p-adjust<0.05為標(biāo)準(zhǔn)篩選差異表達(dá)基因(differentially expressed genes,DEGs)。對獲得的差異基因分別用Goatools(https://github.com/tanghaibao/Goatools) 和 KOBAS(http://kobas.cbi.pku.edu.cn/home.do) (http://kobas.cbi.pku.edu.cn/home.do)進行KEGG富集通路分析,富集通路選擇前20條進行展示。
使用與轉(zhuǎn)錄組實驗相同的RNA,利用DNase I 去除基因組DNA,根據(jù)試劑盒說明,用反轉(zhuǎn)錄酶將1 μg RNA 反轉(zhuǎn)錄成cDNA。以cDNA 為模板,用Applied Biosystems 7500 實時定量PCR 儀進行qRT-PCR 試驗。以真核翻譯起始因子4A(EIF4A)為內(nèi)參基因,對3個乙烯合成及信號相關(guān)的基因(CpACO、CpCTR1和CpETR1)進行qRT-PCR檢測。利用Primer Premier 5.0軟件設(shè)計引物(表1)。實驗重復(fù)3次,利用2-ΔΔCt方法計算基因相對表達(dá)量。
表1 實驗所用引物
利用Excel 2007 軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,利用Photoshop CS2軟件進行圖像處理。
貯藏過程中,兩個番木瓜優(yōu)系在果實外觀形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)上都發(fā)生了一系列的變化。在剛采收時,‘黃花佑’和‘金錘’果實顏色較青、硬度較大,不適合食用(圖1-A,表2)。隨著貯藏時間的延長,到第4天時,果實轉(zhuǎn)色,在貯藏第7 天時,‘黃花佑’果實幾乎全部轉(zhuǎn)黃,‘金錘’果實大部分轉(zhuǎn)黃,到貯藏第10 天時,‘黃花佑’果實全部轉(zhuǎn)黃且顏色加深,開始出現(xiàn)皺縮,而‘金錘’表面仍然光滑,到貯藏第12 天時,相較‘金錘’,‘黃花佑’出現(xiàn)明顯皺縮(圖1-A)。失水率實驗結(jié)果顯示‘黃花佑’失水率比‘金錘’高,尤其在第7、10、12天更為明顯(圖1-B),與圖1-A 結(jié)果一致。從果肉切片結(jié)構(gòu)來看,在采后的0和第4天,‘黃花佑’和‘金錘’的果肉細(xì)胞排列緊密,大小均勻,在第7 天時,‘黃花佑’果肉細(xì)胞開始膨大,果實已經(jīng)變軟,而‘金錘’果肉細(xì)胞依然比較緊密,到第10 天時,‘黃花佑’果肉細(xì)胞破損,而‘金錘’果肉細(xì)胞依然完好(圖1-C)。
圖1 兩個番木瓜優(yōu)系貯藏期間果實形態(tài)(A)、失水率(B)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化(C)
表2 ‘金錘’和‘黃花佑’貯藏期間的果實硬度和可溶性固形物含量比較
綜上,在采后貯藏尤其是貯藏后期,‘黃花佑’失水率高于‘金錘’番木瓜,出現(xiàn)皺皮的時間也比‘金錘’早,且‘金錘’的果肉細(xì)胞結(jié)構(gòu)在貯藏后期比‘黃花佑’致密。說明番木瓜果實硬度與果肉細(xì)胞結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。
在整個貯藏過程中,‘金錘’和‘黃花佑’果實的硬度是持續(xù)下降的。但相較‘黃花佑’,‘金錘’在采后始終保持較高的硬度。結(jié)果如表2所示,‘金錘’和‘黃花佑’剛采摘下來時的硬度基本一致,約為41 N,果實硬度大,沒有測定可溶性固形物含量。在貯藏第4天時,‘金錘’硬度為34.03 N,而‘黃花佑’硬度僅有其一半,為15.54 N,此時‘金錘’的可溶性固形物含量為9.35%,而‘黃花佑’的可溶性固形物含量達(dá)到12.10%,‘黃花佑’處于食用較佳時期。在貯藏第7天時,‘金錘’硬度為22.89 N,可溶性固形物含量為11.70%,而‘黃花佑’此時硬度為9.21 N,果實處于較軟狀態(tài),可溶性固形物含量為12.80%,‘黃花佑’仍然處于較好的食用時期。到貯藏第10天時,‘金錘’硬度為16.13 N,可溶性固形物含量隨著果實變軟增加到12.14%,比較適合食用。而‘黃花佑’此時硬度只有3.26 N,可溶性固形物只有10.55%,果實過熟,已不太適合食用。到貯藏第12天時,‘金錘’硬度為10.03 N,可溶性固形物含量增加到12.15%,適合食用。而‘黃花佑’此時硬度只有2.12 N,可溶性固形物含量只有9.86%,過熟不適合食用。這一結(jié)果與果肉切片觀察到的果實細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化結(jié)果是一致的(圖1-C)。綜上,‘金錘’在采后貯藏12 d內(nèi)的任何時間點硬度都比‘黃花佑’高,分別高出2~5倍,在采后貯藏時間上有明顯優(yōu)勢。
同時,由表2可知,‘黃花佑’果實可溶性固形物在采后第4天即達(dá)到較高水平,在貯藏第7天達(dá)到峰值,而‘金錘’果實可溶性固形物在采后第10~12天達(dá)到峰值,且兩者的可溶性固形物含量都能達(dá)到12.0%以上,因此本研究認(rèn)為‘金錘’和‘黃花佑’都具有較好的果實品質(zhì)。
根據(jù)‘金錘’和‘黃花佑’采后果實貯藏特點,本研究在‘金錘’和‘黃花佑’采后貯藏0、4、7、10 d果實的相同部位取樣進行轉(zhuǎn)錄組測序,測序數(shù)據(jù)經(jīng)過濾后得到162.25 G 的純凈數(shù)據(jù),各樣品Clean Data 均達(dá)到6.01 Gb 以上,Q30 堿基百分比在92.58%以上,數(shù)據(jù)質(zhì)量符合轉(zhuǎn)錄組分析的基本要求。通過分析,發(fā)現(xiàn)‘金錘’和‘黃花佑’相比,在采后0 d時,共有4163個差異表達(dá)基因(differentially expressed genes,DEGs),其中1518 個上調(diào)表達(dá),2645 個下調(diào)表達(dá),在采后貯藏4 d 時,共有4977 個DEGs,其中2026 個上調(diào)表達(dá),2951 個下調(diào)表達(dá),在貯藏7 d時,共有2896個DEGs,其中925個上調(diào)表達(dá),1971 個下調(diào)表達(dá),在貯藏10 d 時,共有5795 個DEGs,其中3021個上調(diào)表達(dá),2774個下調(diào)表達(dá)(表3)。
進一步對DEGs進行KEGG通路分析,結(jié)果顯示,‘金錘’和‘黃花佑’果實的大量差異表達(dá)基因在植物激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑顯著富集,尤其是在貯藏的第4天(圖2)。乙烯是植物中最重要的激素之一,它推動果實成熟,因此,應(yīng)重點關(guān)注和分析乙烯信號途徑。分析結(jié)果如圖3所示:在貯藏0 d時,相較‘金錘’,‘黃花佑’中協(xié)同負(fù)調(diào)控乙烯反應(yīng)的乙烯受體基因ETR(Ethylene receptor)和蛋白激酶基因CTR1(Constitutive triple response 1)的表達(dá)量要低,在貯藏第4 天時,除ETR和CTR1基因外,‘黃花佑’中負(fù)調(diào)控乙烯下游途徑關(guān)鍵因子EIN3(Ethylene insensitive 3) 穩(wěn)定性的EBF1/2(EIN3-binding F box protein 1/2)基因的表達(dá)量也比‘金錘’低,而‘黃花佑’中乙烯響應(yīng)因子ERF/2的表達(dá)量高于‘金錘’,暗示‘黃花佑’在貯藏4 d時可能已經(jīng)啟動了乙烯反應(yīng),而‘金錘’中的乙烯信號被抑制。當(dāng)貯藏時間為7 d時,‘黃花佑’中ETR基因的表達(dá)依然低于‘金錘’,而ERF2的表達(dá)量高于‘金錘’,乙烯信號依然處于激活狀態(tài)。這一結(jié)果與‘黃花佑’果實硬度和可食用時間在貯藏的第4~7天是一致的。而當(dāng)貯藏時間延長到10 d時,相較‘黃花佑’,‘金錘’中的ETR和CTR1表達(dá)量變低,EBF1/2表達(dá)量升高,乙烯信號下游基因ERF1/2表達(dá)量上調(diào),暗示此時‘金錘’的乙烯信號通路打開,果實成熟,這與‘金錘’硬度和最佳食用時間在貯藏第10~12天也是相符的(圖3)。
圖2 ‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜采后貯藏4 d時果實差異表達(dá)基因的KEGG富集分析
圖3 ‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜采后果實乙烯信號途徑相關(guān)基因的表達(dá)差異
同時,本研究對‘黃花佑’和‘金錘’中與乙烯合成及信號途徑相關(guān)的關(guān)鍵基因進行聚類熱圖分析,結(jié)果如圖4 所示,‘黃花佑’和‘金錘’在不同貯藏時間點的ETR1、CTR1、EBF1/2和ERF2表達(dá)情況與KEGG 分析結(jié)果完全一致。已有研究表明:番木瓜果實成熟時,乙烯合成關(guān)鍵基因1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACC)合酶ACS1基因和ACC氧化酶ACO1基因表達(dá)上調(diào),觸發(fā)乙烯生物合成,乙烯爆發(fā)發(fā)生在收獲后的3~4 d,并誘導(dǎo)果膠酶表達(dá)[7]。因此,本研究也對‘黃花佑’和‘金錘’果實中的ACO和ACS進行了聚類熱圖分析,結(jié)果顯示其中一個ACO基因(gene 4917)在‘黃花佑’貯藏第4天時高表達(dá),之后下降,而該基因在‘金錘’貯藏第7天時才高表達(dá),之后下降。另一個ACO1(gene 19882)基因在‘黃花佑’貯藏第4天時高表達(dá),之后下降,在‘金錘’貯藏的第4 天該基因的表達(dá)量也升高,但是表達(dá)強度低于‘黃花佑’。ACS基因在‘黃花佑’貯藏的0 d 時就高表達(dá),之后下降,而‘金錘’在貯藏的第10 天該基因才高表達(dá)。以上結(jié)果暗示‘黃花佑’番木瓜采后果實乙烯的合成早于‘金錘’,呼吸躍變及信號的啟動也早于‘金錘’,這可能是兩者硬度、貯藏時間差異的主要原因。
圖4 ‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜采后果實乙烯合成及信號途徑差異表達(dá)基因的聚類熱圖分析
為了驗證轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的可靠性,本研究利用qRTPCR 檢測了乙烯合成和信號途徑中的3 個關(guān)鍵基因,ACO1、CTR1和ETR1在兩個番木瓜優(yōu)系貯藏期間的表達(dá)量變化(圖5),結(jié)果與轉(zhuǎn)錄組結(jié)果(圖3、圖4)一致,說明轉(zhuǎn)錄組結(jié)果是可靠的,同時也說明‘金錘’番木瓜乙烯合成及信號啟動的時間要比‘黃花佑’晚。
圖5 qRT-PCR檢測乙烯合成和信號途徑3個關(guān)鍵基因在‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜中的表達(dá)情況
為了進一步確定以上結(jié)果,對采后不同貯藏時間點的‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜進行了乙烯含量測定,結(jié)果如圖6所示,‘黃花佑’在采后貯藏第4天時乙烯釋放量達(dá)到峰值,之后開始迅速下降;而‘金錘’在采后貯藏第8天時乙烯釋放量達(dá)到峰值,第10天略有下降,但仍然保持較高水平。這一結(jié)果與筆者檢測的乙烯相關(guān)基因的表達(dá)模式基本一致。
為了進一步明確乙烯的釋放影響了‘金錘’的果實硬度和貯藏時間,對采后‘金錘’果實進行乙烯利處理,結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙烯利處理4 d時,‘金錘’果實硬度可由剛采摘下時的40.34 N 降低到11.32 N,此時‘金錘’的可溶性固形物含量也有10.80,而未經(jīng)乙烯處理的‘金錘’此時硬度為36.18 N(圖7,表2)。這一結(jié)果表明,人為添加乙烯利可以顯著降低‘金錘’的果實硬度,促進其成熟達(dá)到可食程度。
圖7 乙烯利處理對‘金錘’果實硬度的影響
果實硬度在果實開裂、失水和病害中起著重要作用,對果實的運輸性、貯藏性和貨架期有著強烈的影響[32]。通常果實硬度較高的品種會有更長的貯藏期。本團隊前期通過雜交育種,選育出2 個品質(zhì)較好的番木瓜優(yōu)系:‘黃花佑’和‘金錘’。值得一提的是,‘金錘’在采后成熟過程中硬度較大、貯藏期長,是實現(xiàn)番木瓜長距離運輸?shù)臐摿ζ贩N。
明確同一遺傳背景下兩個番木瓜優(yōu)系果實硬度差異的原因,可為其在生產(chǎn)上更好的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。因此,本研究對‘黃花佑’和‘金錘’貯藏期的品質(zhì)、貯藏特性和轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)分別進行了觀察、統(tǒng)計和分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在采后貯藏尤其是貯藏后期,‘黃花佑’失水率高于‘金錘’,出現(xiàn)皺皮的時間也比‘金錘’早?!疱N’番木瓜果肉細(xì)胞比‘黃花佑’更加致密。之前有研究利用2 個不同硬度的蘋果品種,進行果皮電鏡結(jié)構(gòu)掃描分析,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞結(jié)構(gòu)規(guī)則、排列致密、完整性好的品種,果實硬度更高[37]。另外也有研究用采后緩慢軟化和快速軟化的蘋果品種進行果肉細(xì)胞電鏡掃描分析,也得到類似結(jié)果[38]。本研究與前人的這兩個研究結(jié)果一致,同時也說明番木瓜果實硬度與果肉細(xì)胞結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。
‘黃花佑’和‘金錘’采后果實轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析顯示,2 個優(yōu)系在乙烯信號途徑存在明顯差異。乙烯是植物中最重要的激素之一,它推動果實成熟。呼吸躍變型果實的成熟過程伴隨著乙烯峰值的生成,從而導(dǎo)致果實硬度降低,果實軟化成熟[29]。已有研究表明果實硬度與乙烯信號途徑中的乙烯響應(yīng)因子(ERF1)和轉(zhuǎn)錄因子(ETN3)密切相關(guān)[32-35]。番木瓜作為一種典型的呼吸躍變型水果,它快速成熟也是由乙烯生物合成觸發(fā)的。有研究表明,番木瓜果實成熟時,乙烯合成關(guān)鍵基因ACS1和ACO1表達(dá)上調(diào),觸發(fā)乙烯生物合成。乙烯爆發(fā)發(fā)生在收獲后3~4 d,并誘導(dǎo)果膠酶表達(dá)[7]。本研究利用聚類熱圖分析了ACO基因的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)‘黃花佑’中ACO表達(dá)的峰值出現(xiàn)在采后貯藏第4 天,且此時的‘黃花佑’果實也達(dá)到了可食程度,與前人的研究結(jié)果一致。而在果實軟化緩慢的‘金錘’番木瓜中,ACO基因的表達(dá)峰值在貯藏后第7天,說明‘金錘’乙烯釋放的峰值要晚于‘黃花佑’,呼吸躍變的時間也相應(yīng)的推遲。而ACS基因在‘黃花佑’貯藏的0 d 就高表達(dá),之后下降,而在‘金錘’貯藏的第10 天才高表達(dá),雖然這與之前報道的乙烯爆發(fā)發(fā)生在收獲后3~4 d 不一致,但這可能與番木瓜品種、采收時的成熟度、貯藏條件等因素差異有關(guān)。同時,從表達(dá)模式上看,‘金錘’ACS基因高表達(dá)的時間晚于‘黃花佑’,乙烯達(dá)到峰值的時間也就晚于‘黃花佑’,這與‘黃花佑’成熟快,‘金錘’軟化慢也是相吻合的。另外,本研究還利用qRT-PCR 檢測了乙烯途徑中另外兩個重要的負(fù)調(diào)控因子CTR1和ETR1基因的表達(dá)情況,結(jié)果顯示在采后貯藏4 d時,‘黃花佑’中這兩個基因的表達(dá)量要低于‘金錘’,說明‘黃花佑’中此時可能已啟動乙烯反應(yīng)。進一步的乙烯含量檢測結(jié)果也顯示‘金錘’番木瓜采后果實乙烯釋放量達(dá)到峰值的時間比‘黃花佑’延后,驗證了上述結(jié)果。綜上結(jié)果表明:‘金錘’果實硬度高,軟化慢的原因與乙烯信號途徑直接相關(guān)。
同時,為了驗證上述結(jié)果,本研究利用乙烯利處理‘金錘’采后果實,處理4 d后,‘金錘’的果實軟化,可溶性固形物含量升高,達(dá)到可食狀態(tài),說明‘金錘’的果實硬度直接與乙烯相關(guān)。綜合以上結(jié)果,筆者認(rèn)為:‘黃花佑’鮮果宜在采后一周內(nèi)完成銷售,‘金錘’可延長至12 d 以上。有意思的是,‘金錘’番木瓜可通過施用乙烯利人為控制成熟時間,具有更好的利用價值和市場潛力,同時也可作為品種改良的重要親本資源。在本研究中,使用的貯藏條件為常溫,并沒有設(shè)置溫度梯度、濕度等更多的影響因素,后續(xù)將對這些條件進行細(xì)化,并明確這些條件對‘黃花佑’和‘金錘’品質(zhì)和貯藏時間的影響,同時進行更為深入的機理研究,為在生產(chǎn)上更好的利用這些優(yōu)系提供更多的數(shù)據(jù)支持,為番木瓜采后品質(zhì)調(diào)控、貯藏和保鮮提供新思路。
本實驗得出,‘黃花佑’和‘金錘’果實可溶性固形物含量都可以達(dá)到12.0以上,兩者均具有較好的果實品質(zhì)。與‘黃花佑’相比,‘金錘’在貯藏期間果實硬度高、失水率低、果實軟化慢、在使用乙烯利處理后能迅速軟化,且品質(zhì)基本不變。‘黃花佑’和‘金錘’番木瓜果實硬度的差異與乙烯合成及信號途徑密切相關(guān),‘黃花佑’采后果實乙烯的合成及信號啟動都早于‘金錘’,促使‘黃花佑’果實軟化、成熟。‘黃花佑’鮮果宜在采后一周內(nèi)完成銷售,‘金錘’可延長至采后12 d以上。