方斑東風(fēng)螺人工養(yǎng)殖、環(huán)境生理和營養(yǎng)需求研究進(jìn)展

王 筱， 冼健安， 張秀霞， 張澤龍， 李軍濤， 鄭佩華， 吳恒梅 ， 魯耀鵬

（1.佳木斯大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154002；2.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所，海南省海洋生物資源功能性成分研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/海南熱帶農(nóng)業(yè)資源研究院海南省熱帶農(nóng)業(yè)生物資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 ?？?571101）

方斑東風(fēng)螺（Babylonia areolata）俗稱花螺，隸屬腹足綱，狹舌目，蛾螺科，東風(fēng)螺屬，是一種生活在熱帶及亞熱帶地區(qū)數(shù)米至數(shù)十米的泥沙質(zhì)底海域的肉食軟體動(dòng)物 （Dobson 等，2020a、2020b；劉慧玲等，2016）。 方斑東風(fēng)螺生長快、養(yǎng)殖周期短、肉質(zhì)爽脆、味道鮮美，具有極高的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。但作為新興的養(yǎng)殖品種，其養(yǎng)殖技術(shù)和營養(yǎng)需求研究尚不完善， 現(xiàn)如今還存在一系列問題：（1）養(yǎng)殖模式尚不完善，技術(shù)落后；（2）養(yǎng)殖疾病頻發(fā)，應(yīng)對疾病的手段效果差；（3）營養(yǎng)需求研究滯后，市場上還沒有統(tǒng)一的專用配合飼料，當(dāng)前多以喂食鮮雜魚為主。 這些問題的存在嚴(yán)重制約了方斑東風(fēng)螺規(guī)?；B(yǎng)殖的健康發(fā)展。因此，急需統(tǒng)一高效的養(yǎng)殖技術(shù)和手段來解決東風(fēng)螺產(chǎn)業(yè)發(fā)展所面臨的主要問題。近年來，學(xué)者們已對方斑東風(fēng)螺的人工育苗、養(yǎng)殖模式、病害防控、生理生態(tài)和營養(yǎng)飼料方面進(jìn)行了一定的研究， 本文對此研究進(jìn)展進(jìn)行綜述， 以期為方斑東風(fēng)螺產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供參考。

1 人工養(yǎng)殖技術(shù)研究進(jìn)展

1.1 養(yǎng)殖方式 方斑東風(fēng)螺的養(yǎng)殖方式主要為水泥池養(yǎng)殖，水泥池面積為15 ～25 m2，池深1 m，池中設(shè)有進(jìn)水管、 排水管和充氣管 （楊蕊等，2019）。 水泥池上方應(yīng)鋪設(shè)遮陽網(wǎng)或帆布，以防止光線過強(qiáng)， 影響方斑東風(fēng)螺的生長 （蒲利云等，2018）。 養(yǎng)殖池底應(yīng)鋪設(shè)砂層，為了方便排污和清洗砂層， 可先在池底鋪設(shè)一層木板， 木板上覆蓋50 ～100 目的篩絹， 再鋪上砂層 （符致德等，2017a） 。 養(yǎng)殖前，將鋪在池底的沙子和水泥池用高錳酸鉀消毒，沖洗干凈，即可進(jìn)行養(yǎng)殖（符致德等，2017b）。

1.2 養(yǎng)殖條件 方斑東風(fēng)螺養(yǎng)殖場地應(yīng)選擇在海水清澈、無污染、與水源距離較近、無淡水沖擊、周年鹽度較高，且交通運(yùn)輸便利的地方（王巧藝，2012）。養(yǎng)殖設(shè)施需要配備完整的供水和增氧設(shè)施（翁文明等，2021） 。 供水設(shè)施包括砂濾井、水泵、進(jìn)出水管道、過濾池、蓄水池、輸水管道等。其中輸水管道的材質(zhì)往往使用聚氯乙烯塑料以防止海水腐蝕管道。增氧設(shè)施主要為增氧機(jī)，應(yīng)保證水體的溶解氧在4.0 mg/L 以上（滕兆麗等，2021）。

1.3 人工育苗

1.3.1 親螺的選擇和培養(yǎng) 親螺的選擇標(biāo)準(zhǔn)為：殼高≥6 cm、殼寬≥5 cm、體重在50 ～70 g、靨片完整、殼厚、外表完整、活力好（鐘茂程等，2022） 。東風(fēng)螺養(yǎng)殖池底部應(yīng)選擇透氣性好、粗細(xì)適中（直徑1.5 mm）的砂鋪撒7 cm 左右（葉樂等，2016），且砂層需要隨著螺的長大來增厚。 養(yǎng)殖水位高度控制在40 cm 左右，7：00 ～8：00 和17：00 ～18：00各投喂一次。 親螺的培育往往投喂新鮮的凡納濱對蝦 （Litopenaeus vannamei）、 牡蠣 （Concha ostreae）、槍烏賊（Loligo chinensis）、梭子蟹（Portunus trituberculatu） 等 （姚高友等，2017； 林國清等，2015）。 投餌量為在池方斑東風(fēng)螺體重的5% ～10%， 可根據(jù)環(huán)境因素和螺的生理狀態(tài)靈活調(diào)控（占二新，2020）。此外，要定期進(jìn)行消毒、換砂和吸附殘餌等工作，避免水環(huán)境惡化。

1.3.2 親螺的交配產(chǎn)卵與孵化 方斑東風(fēng)螺自成熟期后便可自行交配、體內(nèi)受精，受精卵自雌性螺卵巢排入水中發(fā)育。方斑東風(fēng)螺的繁殖期在3 ～8月份，產(chǎn)卵時(shí)水溫應(yīng)控制在25 ～30 ℃，雌性東風(fēng)螺將螺卵產(chǎn)在池底，可排水后采集螺卵（陳萌等，2022）。 將卵囊消毒后，置于溫度27 ～30 ℃，氧氣充足的干凈水體中進(jìn)行孵化，5 ～7 d 后， 方斑東風(fēng)螺幼蟲即可孵化出來（占二新，2020）。

1.3.3 幼體和稚螺的培育 方斑東風(fēng)螺幼體對水質(zhì)的要求較高。 幼體飼養(yǎng)時(shí)，溫度保持在24 ～27 ℃，鹽度為25‰～35‰，溶氧在4.0 mg/L 以上，pH 保持在8.0 ～8.5（占二新，2020）。為避免幼體感染病原菌，每天換一次水，每次換水量在全池水量的1/10 ～1/5（林國清等，2015）。 東風(fēng)螺幼體期多以浮游形式生活在水體中，通常投喂一些藻類餌料，如叉鞭金藻、球等鞭金藻、牟氏角毛藻、小球藻等。 喂養(yǎng)25 d 左右，幼體即可變態(tài)發(fā)育為稚螺（張漢華等，2006）。

稚螺飼料主要為一些魚、蝦、蟹、貝肉糜（姚高友等，2019）。稚螺有爬壁的習(xí)性，培養(yǎng)稚螺時(shí)需要在培養(yǎng)池的四周掛上雙層網(wǎng)紗， 并定時(shí)將稚螺抖落入水中，避免其缺水死亡（林國清，2015） 。

1.4 東風(fēng)螺的養(yǎng)成 稚螺殼高達(dá)到1 cm 左右即可進(jìn)行螺苗投放， 密度一般為每平方900 ～1000粒（林清海，2012）。 在工廠化養(yǎng)殖過程中，東風(fēng)螺主要以喂食小雜魚為主，每天下午投喂一次，投喂量為螺體重的3% ～10%，投喂2 h 后及時(shí)清理殘餌，防止污染水體（蒲利云等，2018；林清海，2014；裴琨，2007）。 東風(fēng)螺一般采用全天流水充氣的養(yǎng)殖模式。每周需清洗沙層，發(fā)現(xiàn)沙層發(fā)黑后需及時(shí)倒池?fù)Q沙。 東風(fēng)螺達(dá)到殼高2.6 ～3.5 cm 時(shí)即可收獲出售（林清海，2012；陳利雄等，2004）。

2 病理與病害防控技術(shù)研究進(jìn)展

在密集養(yǎng)殖系統(tǒng)中， 水環(huán)境理化因子的變化會(huì)影響弧菌的數(shù)量和群落結(jié)構(gòu)（凌慧，2019；凌慧，2018；凌慧，2017）。已有研究表明方斑東風(fēng)螺疾病與弧菌息息相關(guān) （Wang 等，2022；Ruangsri 等，2018） 。方斑東風(fēng)螺常見的病害主要有腫吻癥、脫殼癥、翻背癥等。 腫吻癥的病癥為吻部紅腫、無法縮回殼內(nèi)， 身體翻轉(zhuǎn)后無法自行恢復(fù) （梁健等，2016）。 研究證明腫吻癥的主要病原菌為弧菌類群，包括哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）（黃郁蔥等，2009） 、 鰻弧菌生物變種Ⅰ（Vibrio anguillarum BiovarⅠ）（張新中等，2010）、 弗尼斯弧菌（Vibriofurnissii）（梁健，2016）。 脫殼病癥狀為軟體與殼完全分離， 但軟體完整且可正常爬行， 但不能進(jìn)食（狄桂蘭等，2017）。 裴琨等（2006）報(bào)道，脫殼病可能與副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）、哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）和河流弧菌（Vibrio fluvialis）有關(guān)。翻背癥癥狀表現(xiàn)為螺殼口朝上、不能自行翻轉(zhuǎn)、 不能進(jìn)食、 腹足肌無力且收縮呈波紋狀（趙旺等，2016）。已有研究證明翻背癥病原菌為弧菌，包括哈維氏弧菌（黃瑜等，2016）和塔式弧菌（Vibrio tubiashii）（劉曉靖等，2019）。

方斑東風(fēng)螺疾病應(yīng)堅(jiān)持防治結(jié)合的理念，即有病早治、無病先防、防治結(jié)合、防重于治。病害防治的措施主要有：（1）放苗前，做好消毒工作?？捎蒙摇?漂白粉或強(qiáng)氯精等任何一種對池塘、水體、工具進(jìn)行全方位消毒。 （2）采用益生菌制劑調(diào)節(jié)水質(zhì)，無藥物殘留。（3）定期消毒、洗砂、換砂，清除殘餌。（4）若出現(xiàn)病螺時(shí)要及時(shí)換水、隔離病螺、檢測查明病因并采取應(yīng)對措施。（5）方斑東風(fēng)螺患病后， 應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況用健康環(huán)保的生態(tài)藥物來減緩和治療病情， 避免使用抗生素和化學(xué)藥物來治療， 以免病原菌產(chǎn)生耐藥性使整個(gè)養(yǎng)殖業(yè)遭受損失。

3 環(huán)境生理研究進(jìn)展

3.1 溫度 方斑東風(fēng)螺最適生長溫度為24 ～28 ℃（甘洋，2017）。 劉永等（2005）發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水溫低于24 ℃時(shí)，方斑東風(fēng)螺運(yùn)動(dòng)減弱、攝食量減少，建議水溫控制在24 ℃以上。劉建勇和卓健輝（2005）與楊章武等（2008）的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，方斑東風(fēng)螺存活的臨界溫度分別為11 ℃和35 ℃， 生存溫度為14 ～32 ℃，最適生長水溫為26 ～29 ℃，且在29 ℃時(shí)，方斑東風(fēng)螺生長速度最快。

3.2 鹽度 方斑東風(fēng)螺應(yīng)生活在鹽度較高的水體中（≥25‰），在低鹽度海水中方斑東風(fēng)螺的攝食率降低且能量需求增加（Bashevkin，2015）。 此外，Ruangsri 等（2018）發(fā)現(xiàn)，低鹽度抑制了方斑東風(fēng)螺總血細(xì)胞數(shù)（THC）、血糖、酚氧化酶（PO）等免疫參數(shù)和生長速度。

3.3 pH pH 的變化不僅能夠反映水體堿度、硬度、氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等環(huán)境因素（張水波，2015），還對養(yǎng)殖動(dòng)物的代謝、免疫產(chǎn)生直接影響。丁瑞霞等（2022）設(shè)置pH 為5.0、6.0、7.0、8.0（對照）和9.0 的急性脅迫試驗(yàn)，結(jié)果顯示，pH 為5.0和9.0 的試驗(yàn)組出現(xiàn)死亡；隨著pH 的增加，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化物酶（POD）活性呈“誘導(dǎo)-抑制”趨勢，試驗(yàn)組過氧化氫酶（CAT）呈“誘導(dǎo)-抑制-誘導(dǎo)”趨勢，pH 為5.0 和6.0 的試驗(yàn)組酸性磷酸酶（ACP）呈“誘導(dǎo)-抑制”趨勢。環(huán)境pH 的變化會(huì)顯著影響水生生物的生理和生活，因此pH 的調(diào)控在水產(chǎn)養(yǎng)殖中十分重要。

3.4 氨氮 氨氮（NH4-N）是影響水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要環(huán)境因子之一。氨氮濃度達(dá)到一定程度時(shí)，會(huì)影響機(jī)體的免疫性能和消化能力。譚春明等（2019a）設(shè)置氨氮濃度為0（對照）、22、47.5、102、220 mg/L的水體環(huán)境養(yǎng)殖方斑東風(fēng)螺，在6、12、24、36、48、72、96 h 取樣分別檢測其免疫酶活性，結(jié)果顯示，CAT 和堿性磷酸酶（AKP）活性均表現(xiàn)出“誘導(dǎo)-抑制”的趨勢，ACP 和總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性表現(xiàn)出“抑制-誘導(dǎo)”的趨勢，CSH-Px 活性呈現(xiàn)“誘導(dǎo)-抑制-誘導(dǎo)” 的趨勢， 而氨氮對處理個(gè)體POD 活性的影響整體表現(xiàn)為抑制作用；學(xué)者進(jìn)一步探究了氨氮脅迫對方斑東風(fēng)螺消化酶的影響，發(fā)現(xiàn)隨著刺激時(shí)間的延長， 脂肪酶活性呈抑制趨勢，22 mg/L 組蛋白酶活性呈 “誘導(dǎo)-抑制” 趨勢（譚春明等，2019b）。 Zhou 等（2023）發(fā)現(xiàn)，高濃度氨會(huì)對方斑東風(fēng)螺的組織結(jié)構(gòu)和免疫功能造成損傷， 抑制超氧化物歧化酶 （SOD）、CAT、ACP 和AKP 的活性。

MTHFR基因定位于染色體1p36.3，目前國內(nèi)外研究最多的是MTHFR C677T、A1298C位點(diǎn)。以677CC基因型對應(yīng)的酶活力為100%，TT基因型對應(yīng)的酶活性約為22%。A1298C的基因位點(diǎn)多態(tài)性會(huì)引起編碼的氨基酸由谷氨酸變?yōu)楸彼幔M(jìn)而導(dǎo)致酶活性降低[3]。酶活性的變化與紅細(xì)胞葉酸濃度[4]、血漿HCY水平[5]密切相關(guān)。從而影響同型半胱氨酸甲基化為蛋氨酸的過程，后者轉(zhuǎn)化成S-腺苷蛋氨酸(SAM)，而SAM作為體內(nèi)唯一的甲基供體為DNA 的甲基化、蛋白質(zhì)和脂類的甲基化等重要的生化反應(yīng)提供甲基[6-7]。

4 營養(yǎng)需求研究進(jìn)展

東風(fēng)螺養(yǎng)殖主要采用鮮雜魚作為餌料（方偉等，2022），但存在營養(yǎng)不全面、易引入病原菌、污染水體等問題。 目前仍缺乏有效替代鮮雜魚的專用配合飼料，因此需要營養(yǎng)全面、健康環(huán)保、提高免疫力和抗脅迫能力的專用人工飼料。

4.1 蛋白質(zhì)、脂肪和糖類需求 方斑東風(fēng)螺為海洋肉食性動(dòng)物，蛋白需求較高。許貽斌等（2006）研究發(fā)現(xiàn)，東風(fēng)螺最適飼料蛋白質(zhì)含量為36.47% ～43.10%。 羅俊標(biāo)等（2014）配制不同蛋白質(zhì)含量（18.85% 、24.30% 、30.08% 、36.44% 、42.64% 和48.86%）的6 組飼料，飼喂東風(fēng)螺42 d，結(jié)果發(fā)現(xiàn)東風(fēng)螺飼料適宜的蛋白質(zhì)添加水平為42.78%。魚粉替代研究是降低飼料成本的主要研究方向，Kritsanapuntu 等（2015）研究了金槍魚蒸煮液替代魚粉對方斑東風(fēng)螺生長的影響，發(fā)現(xiàn)替代50%的魚粉后東風(fēng)螺體內(nèi)的飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸含量優(yōu)于其他組，因此，金槍魚蒸煮液替代魚粉具有一定的可行性。

適宜的脂肪和糖類水平不僅可節(jié)約飼料成本， 還可提高養(yǎng)殖動(dòng)物的飼料利用率和生長性能（Wang 等，2018）。Zhou 等（2007）以魚油作為脂肪源， 配制脂肪含量為1.83%、3.83%、5.91%、7.80%、9.86%和11.76%的飼料， 喂養(yǎng)東風(fēng)螺10周，結(jié)果表明，6.54%的脂肪含量可以提高東風(fēng)螺的消化酶活力并促進(jìn)其生長。 張麗麗等（2009）以魚粉、酪蛋白、明膠為蛋白源，分別以含量為20%的葡萄糖、糊精、蔗糖、玉米淀粉、小麥淀粉和馬鈴薯淀粉6 種作為糖源配制飼料， 飼喂方斑東風(fēng)螺84 d，結(jié)果表明，淀粉類糖源促進(jìn)生長效果要優(yōu)于單糖和雙糖，其中以小麥淀粉最優(yōu)。

4.2 礦物質(zhì)需求 鈣、 磷參與方斑東風(fēng)螺生理代謝，在方斑東風(fēng)螺生長發(fā)育和外殼生長發(fā)揮著重要作用。Chaitanawisuti 等（2010）以三種鈣水平（1%、4%、7%）和三種磷水平（1%、3%、5%）配制九種不同鈣磷含量的方斑東風(fēng)螺飼料，喂養(yǎng)180 d，結(jié)果表明， 飼料添加1%的鈣和1%的磷適合東風(fēng)螺的生長，鈣磷交互作用對方斑東風(fēng)螺無顯著影響。

鋅在促進(jìn)生長、調(diào)節(jié)代謝、增強(qiáng)免疫力、參與機(jī)體構(gòu)建等都有著重要作用（Shahpar，2019） 。 楊原志等（2013）以硫酸鋅為鋅源，證明了飼料添加鋅可顯著增加?xùn)|風(fēng)螺抗氧化和免疫酶活性， 飼料鋅的最適添加量為22.9 ～24.3 mg/kg。 彭存智等（2012）報(bào)道，飼料添加30 mg/kg 的鋅最適合東風(fēng)螺生長，可顯著提高其增重率。

董曉慧等（2014）以硫酸銅為銅源，證明了飼料添加銅可提高東風(fēng)螺SOD、Cu-ZnSOD、CAT 和銅ATP 轉(zhuǎn)運(yùn)酶（Cu-ATPase）活性，以不同指標(biāo)做回歸曲線得出東風(fēng)螺對銅的需求量分別為5.83、5.61、5.67 mg/kg。

硒是動(dòng)物生命活動(dòng)的必需元素，是動(dòng)物體內(nèi)谷胱甘肽、硒蛋白等的重要組分。王蘊(yùn)婷（2022）在飼料中添加不同水平的酵母硒（100、200、400 mg/kg）飼喂東風(fēng)螺30 d，結(jié)果表明，200 mg/kg 酵母硒可顯著提高東風(fēng)螺的增重率（WGR）和存活率（SR），并且可提高其消化和抗氧化能力。

4.3 維生素需求 鐘鴻干等（2013）對比不同多維添加劑對方斑東風(fēng)螺養(yǎng)殖效果的影響， 試驗(yàn)分為2%的次粉，2%的鮑魚多維和2%東風(fēng)螺多維組，結(jié)果表明，鮑魚多維組的增重率顯著高于其他組。 王冬梅等（2013）在方斑東風(fēng)螺基礎(chǔ)飼料中添加不同濃度的維生素D（0、50、100、500、1000、10000 IU/100 g），證明了維生素D 可以促進(jìn)東風(fēng)螺的生長且最適添加量為100 IU/100 g。

4.4 健康添加劑 飼料添加劑對水產(chǎn)動(dòng)物具有促生長和提高免疫力的作用， 但有關(guān)方斑東風(fēng)螺飼料添加劑的報(bào)道較少， 主要集中在益生菌和益生元方面。 冼健安等（2016）報(bào)道，飼料添加2.34×109CFU/100 g 的枯草芽孢桿菌可顯著提高方斑東風(fēng)螺的增重率和特定生長率；飼料添加1.2×109CFU/100 g 的乳酸菌可顯著提高東風(fēng)螺的抗氧化能力。 王茜等（2014）研究表明，在飼料中添加0.5%的芽孢桿菌粉可使東風(fēng)螺肝胰腺的POD 活性提高28.44%。 商晨旭等（2022）以基礎(chǔ)飼料作對照組，添加0.5%的殼寡糖（COS）、甘露寡糖（MOS）、低聚木糖（XOS）和低聚果糖（FOS）四種益生元的飼料作為試驗(yàn)組， 結(jié)果表明COS 和XOS 對東風(fēng)螺的促生長、 抗氧化和抗干露脅迫效果最佳。 李軍濤等（2019）配制0%、0.2%、0.6%和1%四個(gè)殼聚糖水平的飼料，飼養(yǎng)東風(fēng)螺90 d，結(jié)果表明，試驗(yàn)組的方斑東風(fēng)螺免疫酶活性顯著高于對照組，0.6%組AKP 和ACP 活性最高，0.2%組溶菌酶活性最強(qiáng)。敬昭等（2019）發(fā)現(xiàn)，飼料添加0.75%?；撬峥商岣邧|風(fēng)螺ACP、AKP 和POD 活性。

5 問題與展望

隨著國內(nèi)外學(xué)者的研究， 方斑東風(fēng)螺人工養(yǎng)殖技術(shù)目前已經(jīng)取得了一定的成果， 推動(dòng)了方斑東風(fēng)螺養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。 但是， 方斑東風(fēng)螺養(yǎng)殖研究仍需加強(qiáng)。 今后， 可從以下幾方面開展相關(guān)研究：（1）方斑東風(fēng)螺病害問題尚未得到解決，有關(guān)病原菌的分離和鑒定工作還需深入研究， 探討病原菌對東風(fēng)螺的影響機(jī)制， 為東風(fēng)螺病害防控奠定理論基礎(chǔ)。（2）東風(fēng)螺營養(yǎng)需求研究尚在初步探究階段， 今后研究應(yīng)著重于不同規(guī)格東風(fēng)螺的營養(yǎng)需求， 研究出不同養(yǎng)殖階段東風(fēng)螺的最適營養(yǎng)素添加量。（3）東風(fēng)螺養(yǎng)殖仍缺乏有效替代鮮雜魚的專用配合飼料， 鮮雜魚飼喂東風(fēng)螺存在著受季節(jié)限制、營養(yǎng)成分不可控、污染環(huán)境、細(xì)菌滋生等問題。 因此，殘留少、營養(yǎng)豐富的人工配合飼料的開發(fā)迫在眉睫。 今后應(yīng)傾向于方斑東風(fēng)螺健康環(huán)保的功能性配合飼料的研究， 推動(dòng)配合飼料替代冰鮮魚的步伐。（4）環(huán)境因子對東風(fēng)螺影響的研究較少， 其生理生態(tài)的變化尚不清晰， 機(jī)制更不明確。 因此需利用轉(zhuǎn)錄組、 代謝組和蛋白組等手段研究環(huán)境因子對方斑東風(fēng)螺的影響機(jī)制， 為東風(fēng)螺疾病的預(yù)防提供理論依據(jù)。