中藥調(diào)控RhoA信號(hào)通路防治糖尿病腎病研究進(jìn)展*

陳影,劉玲玉,劉浩飛,馮睿,苗少博,馬繼偉,

1.河南中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院,河南 鄭州 450000; 2.河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎病科二病區(qū),河南 鄭州 450000

糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是以持續(xù)性蛋白尿?yàn)橹饕卣鞯囊唤M臨床綜合征[1],是糖尿病(diabetes mellitus,DM)常見的微血管并發(fā)癥,其早期病理特征表現(xiàn)為腎小球基底膜增厚,系膜的擴(kuò)張、腎小管細(xì)胞和足細(xì)胞受損;晚期形成彌漫性/結(jié)節(jié)性的腎小球硬化以及腎間質(zhì)的纖維化[2-3]。流行病學(xué)調(diào)查研究顯示,DN的發(fā)病率迅速上升,約30%～40%的糖尿病患者會(huì)發(fā)生DN[4],已經(jīng)成為終末期腎臟病(end stage renal disease,ESRD)的主要病因[5-7]。通常認(rèn)為DN是多種基因相互作用,病因復(fù)雜,其發(fā)揮作用的分子機(jī)制尚未明確[8]。目前治療DN的藥物主要有免疫抑制劑、單抗類靶向藥RAAS抑制劑、SGLT2抑制劑等,但只能適當(dāng)改善水腫、乏力、泡沫尿和蛋白尿等臨床癥狀,尚不能阻止疾病進(jìn)展,且藥物具有較大毒副作用及不良反應(yīng),加之患者個(gè)體差異,尚不能滿足臨床需求[9]。研究發(fā)現(xiàn),中藥及中藥復(fù)方具有多途徑、多靶點(diǎn)、作用溫和、毒副作用小的特點(diǎn),在防治DN中療效突出[10]。從信號(hào)通路探究藥物對(duì)DN的調(diào)控機(jī)制及作用靶點(diǎn)已成為當(dāng)今研究熱點(diǎn),DN的發(fā)病與多條信號(hào)通路的異常傳導(dǎo)息息相關(guān),而RhoA信號(hào)通路作為細(xì)胞內(nèi)關(guān)鍵的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一,能夠抗氧化應(yīng)激、抗炎、抑制腎臟纖維化、維持內(nèi)皮細(xì)胞功能和保護(hù)足細(xì)胞等,在DN的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用[11]?；诖?本文通過梳理RhoA信號(hào)通路在DN中的作用機(jī)制,首次綜述中藥、中藥活性成分及中藥復(fù)方的干預(yù)作用,以期為DN的中醫(yī)藥治療和新藥研發(fā)提供理論依據(jù)。

1 RhoA信號(hào)通路

RhoA信號(hào)通路是一種調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡、增殖及血小板聚集、細(xì)胞黏附、接觸抑制的信號(hào)軸,在多種生物活動(dòng)中發(fā)揮重要作用[12]。RhoA是小的GTP結(jié)合蛋白,在細(xì)胞活動(dòng)中發(fā)揮作用,參與維持細(xì)胞形態(tài)、調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架、細(xì)胞遷移、平滑肌細(xì)胞收縮等。RhoA GTP酶和下游的Rho激酶(Rho-associated coiled-coil-forming kinases,ROCK)激活,誘導(dǎo)肌球蛋白輕鏈(myosin light chain,MLC)磷酸化,從而維持內(nèi)皮細(xì)胞屏障的完整性[13]。MLC的磷酸化又進(jìn)一步有助于F-肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的收縮和內(nèi)皮細(xì)胞之間的細(xì)胞間隙,從而增加腎小球?yàn)V過屏障(glomerular filtration barrier,GFB)的通透性,RhoA/ROCK的激活參與了腎小球白蛋白的高濾過和高血糖引起的微血管/視網(wǎng)膜并發(fā)癥。高糖激活RhoA/ROCK通路,導(dǎo)致MLC的磷酸化增加,肌動(dòng)蛋白應(yīng)激纖維形成,導(dǎo)致內(nèi)皮通透性增加[14]。

2 中醫(yī)藥治療DN的優(yōu)勢(shì)

DN屬于中醫(yī)學(xué)上的“水腫”“尿濁”“膏淋”“關(guān)格”“消渴”“水病”[15]等范疇。醫(yī)史典籍中對(duì)消渴日久轉(zhuǎn)變成水腫和尿濁早有論述。隋代巢元方《諸病源候論》載:“消渴其久病變,或發(fā)癰疽,或成水疾[16]?！辈∫虿C(jī)的研究方面,國(guó)醫(yī)大師呂仁和提出“微型癥瘕”,提供一種新的治療思路[17]。朱政潔等[18]認(rèn)為DN的病機(jī)是本虛標(biāo)實(shí)、脾腎虧虛,虛實(shí)夾雜為發(fā)病的主要基礎(chǔ),其進(jìn)展的重要因素是痰瘀內(nèi)阻,內(nèi)外風(fēng)邪相加,治療應(yīng)以益氣養(yǎng)陰和補(bǔ)腎活血為本,重視溫陽(yáng)和祛風(fēng)。王耀獻(xiàn)提出了“辨機(jī)論治”[19]和“內(nèi)熱致癥”的思想,治療過程中重在引邪透邪,截?cái)嗉膊∪肜锏内厔?shì)[20],臨床上能顯著改善癥狀,控制血糖和蛋白尿[21]。目前,臨床湯藥集中在當(dāng)歸補(bǔ)血湯、五苓散、豬苓湯、六味地黃丸等,中醫(yī)外治療法包含針灸、穴位貼敷、中藥保留灌腸等[22],中醫(yī)藥可以顯著改善臨床有效率,減少尿蛋白,改善乏力、水腫的臨床癥狀,推遲進(jìn)入終末期腎臟病和開始透析時(shí)間,降低全因死亡率,改善患者的長(zhǎng)期預(yù)后[23-24]。在一項(xiàng)荊防當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療DN的臨床觀察中,與單用西藥相比,中藥聯(lián)合西藥能夠明顯減輕患者早期臨床癥狀,降低血清中miR-148b-3p、miRNA-21的水平,抑制氧化應(yīng)激,減輕足細(xì)胞損傷,改善腎功能,療效顯著[25]。郭帥等[26]經(jīng)多中心、隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)表明,益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)方聯(lián)合西藥治療Ⅲ、Ⅳ期DN,可有效改善患者臨床癥狀,降低蛋白尿,保護(hù)腎功能,提高患者生活質(zhì)量,諸多研究都彰顯了中醫(yī)藥治療的優(yōu)勢(shì)。

3 RhoA與DN的關(guān)系

3.1 RhoA與氧化應(yīng)激氧化應(yīng)激是氧化劑和抗氧化劑平衡紊亂的反應(yīng)過程。在內(nèi)外環(huán)境作用下,體內(nèi)產(chǎn)生大量活性氧(reactive oxygen species,ROS)和氮自由基,抗氧化防御系統(tǒng)不能完全清除,機(jī)體內(nèi)ROS生成增多,而抗氧化應(yīng)激能力下降,在細(xì)胞和組織中產(chǎn)生一系列生理和病理反應(yīng)過程[27]。氧化應(yīng)激是DN發(fā)病的核心機(jī)制之一,糖尿病可以增強(qiáng)氧化應(yīng)激的活性,過度氧化應(yīng)激又可以導(dǎo)致糖尿病并發(fā)癥發(fā)生,直接導(dǎo)致腎間質(zhì)、腎小球和腎臟足細(xì)胞的損傷[28]。RhoA和氧化應(yīng)激關(guān)系密切,氧化應(yīng)激可以通過多種途徑激活RhoA,并且調(diào)節(jié)其活性;而RhoA信號(hào)通路又參與到調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的應(yīng)答,具體表現(xiàn)在以下3方面:(1)RhoA在氧化應(yīng)激中的作用:RhoA的活化可以調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架的重塑、細(xì)胞黏附以及遷移的過程,并且參與到調(diào)控細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的應(yīng)答。RhoA信號(hào)通路的激活可通過調(diào)節(jié)多個(gè)下游效應(yīng)蛋白如ROCK,參與氧化應(yīng)激引發(fā)的炎癥反應(yīng)和損傷修復(fù)的過程。(2)活性氧物種調(diào)控RhoA信號(hào):活性氧物種,如過氧化氫和超氧陰離子可以直接調(diào)節(jié)RhoA,進(jìn)一步促進(jìn)其下游信號(hào)通路的激活。(3)抗氧化劑調(diào)控RhoA:某些抗氧化劑如N-乙酰半胱氨酸和谷胱甘肽等可通過減少氧化應(yīng)激和清除活性氧的物種,抑制RhoA信號(hào)通路的活化,表明控制氧化應(yīng)激的水平可以調(diào)節(jié)RhoA信號(hào)通路的活性[29]?？傊?RhoA信號(hào)通路和氧化應(yīng)激相互影響和調(diào)節(jié),氧化應(yīng)激可以激活RhoA,而RhoA的激活又參與到調(diào)控細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的應(yīng)答。

3.2 RhoA與炎癥反應(yīng)炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致DN的關(guān)鍵因素,雖然適當(dāng)?shù)难装Y可以維持組織完整性和穩(wěn)態(tài),但是過度的炎癥加速ECM的沉積,加重腎組織損傷[30-31]。RhoA與炎癥反應(yīng)關(guān)系密切,可以從多個(gè)機(jī)制參與調(diào)控炎癥反應(yīng):(1)細(xì)胞遷移:一方面,RhoA可以調(diào)節(jié)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞遷移,如巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。另一方面,RhoA可通過激活ROCK和下游的其他效應(yīng)蛋白,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架的重塑,使細(xì)胞產(chǎn)生收縮和變形,促進(jìn)細(xì)胞的遷移。(2)炎癥介質(zhì)的釋放:炎癥細(xì)胞一旦受到刺激會(huì)產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì),如化學(xué)介質(zhì)和細(xì)胞因子等。RhoA通過調(diào)控細(xì)胞骨架以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)重塑,影響炎癥介質(zhì)的合成和釋放。(3)細(xì)胞和細(xì)胞之間相互作用:RhoA通過調(diào)節(jié)細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)相互作用,影響炎癥細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附遷移,參與到炎癥反應(yīng)的浸潤(rùn)中[32]。

3.3 RhoA與腎臟纖維化腎臟纖維化是一種病理過程,其特征是腎臟組織中的瘢痕和纖維化區(qū)域的增加,導(dǎo)致正常的腎小球和腎單位結(jié)構(gòu)受損[33]。RhoA的激活可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的異常激活,進(jìn)而促進(jìn)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的增殖、遷移和分泌膠原等纖維化相關(guān)分子。這些變化最終導(dǎo)致腎臟組織的結(jié)構(gòu)紊亂和纖維化病變[34]。具體表現(xiàn)在以下兩個(gè)方面:(1)RhoA通過激活下游信號(hào)通路,如Rho激酶和Rho關(guān)聯(lián)蛋白激酶(ROCK),參與調(diào)節(jié)腎臟纖維化過程中的各種生物學(xué)效應(yīng),包括增強(qiáng)腎小管上皮細(xì)胞的收縮,促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和膠原基質(zhì)的合成,引導(dǎo)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的遷移以及破壞腎小球?yàn)V過屏障等。ROCK活性增強(qiáng)又可以進(jìn)一步促進(jìn)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞,刺激基質(zhì)的合成和沉積,最終導(dǎo)致腎臟纖維化[35]。(2)RhoA直接調(diào)節(jié)促纖維化基因的表達(dá),通過調(diào)節(jié)促纖維化信號(hào)通路的激活,進(jìn)一步調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生。研究表明,選擇性ROCK2抑制劑KD025能減輕db/db小鼠的蛋白尿和腎小球的纖維化[36]。

3.4 RhoA與內(nèi)皮功能障礙內(nèi)皮功能障礙是由多種途徑導(dǎo)致的,晚期糖基化終產(chǎn)物(advanced glycation end product,AGEs)是葡萄糖與蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或核酸大分子之間非酶糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物,長(zhǎng)期高糖環(huán)境下,大量的AGEs在腎臟中積累,導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷,并且改變形態(tài)和細(xì)胞骨架,內(nèi)皮損傷是腎小球系膜病變及腎小球硬化的始動(dòng)因素[14],蛋白尿就是DN中腎小球內(nèi)皮細(xì)胞廣泛損害的標(biāo)志之一。DN的蛋白尿發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,涉及GFB功能障礙,人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞與足細(xì)胞相互作用,有助于GFB的完整性。RhoA信號(hào)通路和內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙關(guān)系密切,MLC的磷酸化和F-肌動(dòng)蛋白應(yīng)激纖維的形成是內(nèi)皮高通透性的關(guān)鍵因素[37-38]。HG激活RhoA/ROCK信號(hào)通路,導(dǎo)致MLC磷酸化增加,肌動(dòng)蛋白應(yīng)激纖維形成,導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加。RhoA GTP酶和下游ROCK的激活,誘導(dǎo)MLC的磷酸化[37],在維持內(nèi)皮細(xì)胞屏障的完整性方面發(fā)揮重要作用[39]。

3.5 RhoA與足細(xì)胞損傷足細(xì)胞排列在腎小球基底膜外表面,是腎小球?yàn)V過屏障的重要組成部分,與內(nèi)皮細(xì)胞和腎小球基底膜共同調(diào)節(jié)腎小球?yàn)V過功能。DN是由于足細(xì)胞凋亡增加,導(dǎo)致腎小球?yàn)V過功能減弱,進(jìn)而出現(xiàn)蛋白[40]。足細(xì)胞損傷后,RhoA信號(hào)通路的激活導(dǎo)致RhoA蛋白轉(zhuǎn)換為活性GTP結(jié)合形式,調(diào)控其下游效應(yīng)蛋白R(shí)OCK蛋白激酶,進(jìn)一步調(diào)控細(xì)胞骨架重構(gòu)和細(xì)胞功能改變。下游蛋白R(shí)OCK被激活,磷酸化肌球蛋白輕鏈,促進(jìn)肌動(dòng)蛋白收縮和細(xì)胞骨架重塑,有利于足細(xì)胞損傷的修復(fù)和重新連接[41]。綜上所述,RhoA信號(hào)通路在足細(xì)胞損傷的修復(fù)過程中發(fā)揮著重要調(diào)節(jié)作用,通過調(diào)控細(xì)胞骨架的重組、肌動(dòng)蛋白的收縮以及細(xì)胞遷移和增殖等過程,幫助維持足細(xì)胞的正常功能和組織結(jié)構(gòu)。

4 中醫(yī)藥通過RhoA信號(hào)通路對(duì)DN的干預(yù)作用

4.1 中藥單體對(duì)RhoA信號(hào)通路的影響

4.1.1 水蛭素水蛭素是中藥水蛭的有效成分,具有抗凝、抗血栓、抗纖維化、抗腫瘤、減輕腦損傷和提高隨意皮瓣成活率的作用,能夠減少鈣離子內(nèi)流,保護(hù)足細(xì)胞,減少RhoA蛋白,保護(hù)足細(xì)胞骨架[42]。研究發(fā)現(xiàn),水蛭素能夠減輕db/db小鼠的蛋白尿和腎功能,同時(shí)維持高糖誘導(dǎo)的相關(guān)蛋白的表達(dá)水平,修復(fù)足細(xì)胞F-actin,與RhoA信號(hào)調(diào)節(jié)足細(xì)胞骨架相關(guān)[43]。水蛭素還可以阻斷RhoA/p38/NF-κB信號(hào)通路,抑制血管生成因子的表達(dá),從而抑制腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管生成[44]。

4.1.2 柚皮素柚皮素是一種從柑橘類植物中提取出來的黃酮類化合物,主要作用是抗心律失常、抗炎、抗纖維化以及抗腫瘤和病毒等[45]。有研究表明,經(jīng)柚皮素和ROCK的抑制劑法舒地爾干預(yù)后,腎臟組織中RhoA、ROCK1、ROCK2 的表達(dá)下降,MYPT1 Thr853 磷酸化程度也減低,ROCK活性減弱,并且伴有蛋白尿的減少和腎功能的改善[46-47]。

4.1.3 雷公藤多苷雷公藤多苷是中藥雷公藤的有效成分,可以直接作用于抗原抗體復(fù)合物,發(fā)揮抗氧化、抗炎、免疫抑制、抗增殖和抗癌的作用[48]。保護(hù)腎功能主要是通過提高系膜細(xì)胞代謝速度,避免分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子。研究表明,雷公藤多苷治療DN,主要是通過上調(diào)足細(xì)胞 nephrin、podocin表達(dá),保護(hù)和及時(shí)修復(fù)足細(xì)胞以達(dá)到減輕蛋白尿的目的。此外,對(duì)DN大鼠的血清總膽固醇、三酰甘油和空腹血糖都有明顯的改善作用,可能與2型糖尿病的胰腺細(xì)胞以及血管內(nèi)皮功能障礙與ROCKs的活性密切相關(guān)[49]。

4.1.4 梓醇梓醇是地黃代表性的效應(yīng)單體,發(fā)揮著抗細(xì)胞凋亡、抗氧化應(yīng)激和抗高血糖的作用。梓醇能顯著減少腎內(nèi)皮細(xì)胞分泌單核細(xì)胞趨化蛋白-1、抑制巨噬細(xì)胞遷移和炎性因子分泌,調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞M1/M2極化平衡,從而減輕炎癥反應(yīng),有效改善腎小球系膜基質(zhì)的增厚,腎間質(zhì)纖維化和糖原的沉積[50]。研究發(fā)現(xiàn),梓醇能夠抑制RAGE/RhoA/ROCK信號(hào)通路的激活,減少VEGF的分泌,增加Occludin和VE鈣黏蛋白的表達(dá),從而改善內(nèi)皮功能障礙和炎癥反應(yīng)[51-52]。

4.1.5 山柰酚山柰酚是中藥山奈的有效成分,來源于葡萄、草莓、銀杏葉和十字花科的蔬菜,發(fā)揮著抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌、抗糖尿病活性,具有增強(qiáng)機(jī)體免疫、神經(jīng)保護(hù)和心臟保護(hù)作用[53]。研究表明,山柰酚抑制RhoA/ROCK活性,從而導(dǎo)致RhoA膜易位,ROCK2表達(dá)受抑制。與此同時(shí),可以降低IL-1β的表達(dá),展示其抗炎的特征?？傊?山柰酚抑制RhoA的激活,抑制氧化應(yīng)激、促炎細(xì)胞因子(IL-1β和腫瘤壞死因子α)以及纖維化(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1和細(xì)胞外基質(zhì)的表達(dá))[54-55]。

4.1.6 桉油醇桉油醇是桉樹果實(shí)中提取的化合物,具有抗菌、抗炎、殺菌止痛等藥理作用。研究表明,桉油醇可通過抑制RhoA介導(dǎo)的GSK3β下游通路的激活,從而改善屏障功能障礙和蛋白尿。GSK3β是足細(xì)胞局灶性黏附中Rho/ROCK信號(hào)通路的下游介質(zhì),桉油醇可以阻斷RhoA和GSK3β二者之間的激活。桉油醇可減弱葡萄糖暴露的足細(xì)胞和糖尿病腎臟中RhoA、Rac1和Cdc42的誘導(dǎo),通過調(diào)節(jié)這些分子開關(guān),改善肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架,并且保持強(qiáng)大的局灶黏附組裝,從而抑制足細(xì)胞的屏障功能障礙以及由此所產(chǎn)生的蛋白尿[56]。

4.1.7 蘆丁蘆丁是中藥蕓香、蕎麥的主要有效成分,具有降低氧化應(yīng)激,抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗心肌損傷、抗腫瘤和保護(hù)腎臟免受損傷的作用[57]。研究表明,蘆丁可通過激活Nrf2抑制RhoA/ROCK信號(hào)通路,減輕葡萄糖誘導(dǎo)的腎小球內(nèi)皮屏障功能的破壞,主要用于DN血管病變的治療,減少氧化應(yīng)激,減輕腎臟的損傷[58]。

4.1.8 白藜蘆醇藜蘆醇是中藥虎杖的有效成分,具有抗炎、抗感染、心血管保護(hù)、神經(jīng)保護(hù)和肝臟保護(hù)的作用[59]。研究表明,白藜蘆醇可通過調(diào)節(jié)血管生成延緩DN的進(jìn)展。腎小球中的膠原沉積主要通過RhoA/ROCK信號(hào)通路,因此早期DN腎小球硬化主要途徑可能是RhoA/ROCK信號(hào)通路,通過抑制RhoA/ROCK信號(hào)通路可顯著減輕DN相關(guān)的腎小球硬化[60]。

4.1.9 丹酚酸A丹酚酸A是中藥丹參的有效成分,發(fā)揮抗氧化、抗血栓、抗肝纖維化、心肌缺血保護(hù)、神經(jīng)保護(hù)和防治糖尿病及其并發(fā)癥的作用[61]。研究表明,丹酚酸A對(duì)腎小球微血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用可能與抑制AGEs激活的RhoA-ROCK和隨后MLC調(diào)節(jié)的細(xì)胞骨架紊亂有關(guān),可通過減輕足細(xì)胞損傷,抑制氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng),發(fā)揮腎臟保護(hù)作用[62]。

4.1.10 黃連素黃連素是中藥黃連的有效成分,具有控制血壓、控制血糖、抗炎、抗心肌缺血、抗心律失常、抗病原微生物、調(diào)節(jié)免疫和抗腫瘤的藥理作用[63]。研究表明,黃連素可通過抑制RhoA/ROCK信號(hào)通路來抑制纖連蛋白(fibronectin,FN)的積聚,減少細(xì)胞間黏附分子-1、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1和FN的過度產(chǎn)生,抑制RhoA/ROCK信號(hào)通路,發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用[64]。

4.1.11 青藤堿青藤堿是中藥青風(fēng)藤的有效成分,具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和抗制移植物排斥等作用[65]。研究表明,青藤堿具有抗炎和腎臟保護(hù)作用,可治療HG誘導(dǎo)的DN血管高通透性,通過激活核因子相關(guān)因子2(nuclear factor correlation factor 2,Nrf2),保護(hù)腎內(nèi)皮屏障功能,阻斷ROS的產(chǎn)生,抑制RhoA/ROCK信號(hào)通路,從而激活Nrf2介導(dǎo)的防御反應(yīng),達(dá)到預(yù)防HG誘導(dǎo)的氧化損傷的目的[66]。

4.1.12 燈盞花乙素?zé)舯K花乙素是燈盞花中提取的黃酮苷,能夠有效預(yù)防糖尿病心肌病和視網(wǎng)膜病變,具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抗纖維化和改善心腦缺血等作用[67]。研究表明,燈盞花乙素能夠通過下調(diào)RhoA/ROCK介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和纖維化發(fā)揮腎臟保護(hù)作用[68]。

4.2 中藥組方及制劑對(duì)RhoA信號(hào)通路的影響

4.2.1 益腎化濕顆粒益腎化濕顆粒的藥物組成包括茯苓、澤瀉、柴胡、黃連、人參、黃芪、陳皮、白術(shù)、白芍、羌活、獨(dú)活、防風(fēng)、半夏、炙甘草、大棗和生姜。藥理作用主要是增強(qiáng)免疫力。其中,黃芪可以提升網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞的吞噬功能,茯苓可通過激活腺苷酸激活蛋白激酶,從而減弱成纖維細(xì)胞的激活,減少異常細(xì)胞外基質(zhì)的沉積,降低蛋白尿。研究表明益腎化濕顆?？梢愿纳艱N患者的炎癥狀態(tài),降低蛋白尿,改善腎功能,其作用機(jī)制是部分抑制RhoA/ROCK1/NF-κB信號(hào)通路,調(diào)控下游炎癥因子 IL-6、TNF-α的表達(dá),抑制AGEs損傷足細(xì)胞,還可以降低早期DN患者的C反應(yīng)蛋白和IL-8的表達(dá),從而抑制炎癥反應(yīng),保護(hù)早期DN[69]。

4.2.2 六味地黃丸六味地黃丸由熟地黃、山萸肉、茯苓、澤瀉、山藥和牡丹皮組成,現(xiàn)代藥理研究表明此方可以抗氧化,延緩衰老,調(diào)節(jié)血糖、血脂、血壓、免疫,保護(hù)血管內(nèi)皮,抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)等[70]。研究表明,六味地黃丸可以明顯抑制RhoA、ROCK1 的表達(dá),減輕患者的腎損害,其機(jī)制是顯著降低RhoA、ROCK1的表達(dá),抑制腎臟的肥大,改善病理,潛在的藥理機(jī)制主要是和炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡以及免疫的調(diào)節(jié)有關(guān),通過減輕腎小管上皮細(xì)胞的氧化損傷以及細(xì)胞凋亡從而延緩間質(zhì)纖維化的進(jìn)程[71]。

4.2.3 自擬益氣養(yǎng)陰活血方自擬益氣養(yǎng)陰活血方的藥物組成是生地黃、生黃芪、積雪草、菟絲子、水蛭和大黃,擬方依據(jù)是久病虛瘀入絡(luò),治以活血化瘀,益氣養(yǎng)陰。研究表明,此方可通過抑制TRPC6和RhoA的表達(dá),減少24小時(shí)尿蛋白定量,改善腎臟病理,保護(hù)足細(xì)胞,同時(shí)改善生化血脂血糖的情況[72]。

4.2.4 腎康注射液腎康注射液由大黃、丹參、紅花、黃芪組成,研究表明腎康注射液可顯著改善DN患者的胰島素抵抗、糖脂代謝和腎功能,改善腎小球硬化和局灶性足突的消失,主要是通過有效控制糖腎大鼠的血清總膽固醇和三酰甘油水平,進(jìn)而抑制大鼠的內(nèi)皮損傷程度和氧化應(yīng)激反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。與此同時(shí),該注射液可通過調(diào)節(jié)IL-6、TGF-β1、VCAM-1、ICAM-1、α-SMA,改善炎癥反應(yīng)和腎間質(zhì)纖維化,調(diào)控RhoA、ROCK1的表達(dá),保護(hù)腎臟組織[73]。

4.2.5 腎康丸腎康丸的藥物組成是黃芪、刺五加、刺蒺藜、玉米須、白頭翁、益母草、蟬蛻、山楂8種藥物,具有補(bǔ)腎健脾、活血利濕的功效。研究表明,腎康丸可通過增加neparin和podocin的表達(dá)來保護(hù)足細(xì)胞免受損傷,抑制AURKB、racGAP1和RhoA的表達(dá),發(fā)揮腎臟保護(hù)作用[74]。

表2 中藥組方及制劑通過靶向RhoA改善糖尿病腎病的作用機(jī)制

5 總結(jié)與展望

RhoA信號(hào)通路在DN的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,可作為DN的治療靶點(diǎn)。中醫(yī)藥治療DN具有多組分、多靶點(diǎn)、副作用小的優(yōu)勢(shì)。國(guó)內(nèi)外的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究表明,RhoA信號(hào)通路參與了DN的氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、腎臟纖維化、內(nèi)皮功能障礙和足細(xì)胞損傷?，F(xiàn)有研究仍存在不足之處:(1)RhoA在DN中作用機(jī)制比較復(fù)雜,涉及氧化應(yīng)激、炎癥、自噬等,后期多是腎臟纖維化,尚未明確是通過單一靶點(diǎn)還是多靶點(diǎn)調(diào)控RhoA干預(yù)DN。(2)針對(duì)中藥組方及其制劑和中藥單體作用于RhoA的研究,下游通路主要集中于ROCK,缺少對(duì)其他通路的研究。(3)RhoA信號(hào)通路和DN之間的關(guān)系研究相對(duì)較少,多集中在炎癥反應(yīng)的研究。以后可以進(jìn)一步拓展炎癥方向的研究,進(jìn)一步明確中藥單體及復(fù)方的作用機(jī)制,為實(shí)驗(yàn)提供理論支撐。