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    多血型系統(tǒng)抗體鑒定和交叉配血策略一例抗-f合并抗-M

    2024-03-14 06:56:10鄭仲男李曉菲張燁苗天紅
    臨床輸血與檢驗 2024年1期
    關(guān)鍵詞:抗人血型抗原

    鄭仲男 李曉菲 張燁 苗天紅

    北京市紅十字血液中心 100088

    截至2023年7月,國際輸血協(xié)會(ISBT)已確定并命名了45個人類紅細(xì)胞血型系統(tǒng),其中Rh血型系統(tǒng)編號004,MNS血型系統(tǒng)編號002。Rh血型抗原是由位于1號染色體短臂上的兩個同源且緊密連鎖的基因所編碼,RHD基因編碼D抗原,RHCE基因編碼C、c、E、e抗原及RhCE復(fù)合抗原:ce(f,也稱RH6)、CE(RH22)、Ce(RH7、RH41)和cE(RH27)[1]。針對Rh血型抗原產(chǎn)生的同種抗體除抗-C、c、E、e外,也會產(chǎn)生復(fù)合抗原抗體,即抗-f、抗-CE、抗-Ce、抗-cE[2-3]。MNS血型系統(tǒng)的GYPA和GYPB基因位于4號染色體,主要編碼M、N、S、s抗原,針對該血型系統(tǒng)抗原產(chǎn)生的同種抗體常見抗-M[1]。本文報告一例同種抗-f合并抗-M患者的抗體鑒定和交叉配血策略。

    對象與方法

    1 研究對象

    男性,32歲,臨床診斷為肝血管瘤,血常規(guī)結(jié)果顯示,紅細(xì)胞:1.7×1012/L,血紅蛋白:52 g/dL,血小板計數(shù):38×109/L。患者有輸血史,末次輸血時間為2021年10月,送檢血樣采血時間為2022年5月,當(dāng)日送檢。

    2 試劑

    LISS/Coombs卡(8461219324)、直抗分型卡(8254562006)、0.8%抗體篩選細(xì)胞(45330.04.x)由Bio-Rad 提供;Rh分型卡由Bio-Rad(8382426521)和江陰立博(202203003)提供;抗體篩選細(xì)胞(批號:8000456153)、抗體鑒定譜細(xì)胞(批號8000456155)和酶處理抗體鑒定譜細(xì)胞(批號:8000456154)由Sanquin提供;抗-A、抗-B(20220710)由上海生物提供;抗-D(V213552)由BASO提供;抗-M(OMM177-1)、抗-N(ONM224)由CE提供;酸放散樣本釋放劑(202210017)由江陰立博提供,所有試劑均按使用說明書操作。

    3 方法

    ABO、RhD和MN血型鑒定采用鹽水介質(zhì)試管法;Rh血型采用Rh分型卡檢測;抗體篩選、交叉配血采用鹽水介質(zhì)試管法和抗人球蛋白卡法;抗體鑒定采用抗人球蛋白卡法;放散液抗體篩選采用抗人球蛋白卡法,所有試驗均參考全國臨床檢驗操作規(guī)程和相關(guān)文獻(xiàn)[4-5]。

    結(jié) 果

    1 血型

    ABO血型:O型;Rh血型:CCDee;MN血型:NN。

    2 直接Coombs實驗

    抗-IgG:3+,抗-C3d:陰性。

    3 放散液抗體篩選

    陰性。

    4 抗體篩選

    用患者血漿與抗體篩選細(xì)胞分別進(jìn)行鹽水介質(zhì)和抗人球蛋白卡檢測,鹽水介質(zhì)抗篩陰性,說明無IgM類抗體;抗人球蛋白卡抗篩陽性,說明患者血漿中存在IgG類意外抗體,結(jié)果見表1和表2。

    表1 Sanquin抗體篩選細(xì)胞結(jié)果

    表2 Bio-red抗體篩選細(xì)胞結(jié)果

    5 抗體鑒定

    5.1 抗體鑒定

    用患者血漿與抗體鑒定譜細(xì)胞用抗人球蛋白卡檢測,結(jié)果見表3。通過比對譜細(xì)胞反應(yīng)格局可以得出患者血漿中存在同種抗體:抗-f+疑似抗-M。

    表3 Sanquin抗體鑒定譜細(xì)胞格局

    5.2 酶處理譜細(xì)胞抗體鑒定

    為了鑒定患者血漿中除抗-f外是否存在抗-M,我們選用酶處理譜細(xì)胞進(jìn)一步抗體鑒定,結(jié)果見表3。通過比對酶處理譜細(xì)胞反應(yīng)格局,我們發(fā)現(xiàn)抗體反應(yīng)增強(qiáng)且僅與有f抗原的譜細(xì)胞反應(yīng),其他無f抗原的譜細(xì)胞反應(yīng)均呈陰性。反應(yīng)強(qiáng)度為±的M抗原陽性譜細(xì)胞經(jīng)酶處理后,反應(yīng)呈陰性,進(jìn)一步考慮存在抗-M。

    5.3 4℃抗體鑒定

    為了鑒定患者血漿中是否存在IgG抗-M抗體,用患者血漿與譜細(xì)胞進(jìn)行4℃抗人球蛋白卡實驗,結(jié)果見表3。通過比對譜細(xì)胞的反應(yīng)格局,確定患者血漿中同時存在同種抗-M,且在4℃情況下反應(yīng)明顯增強(qiáng)。

    6 交叉配血

    挑選4袋O型RhD陽性無M抗原的懸浮紅細(xì)胞成分血與患者進(jìn)行交叉配血,其中3袋配血相合,1袋配血不相合(主側(cè)為W+)。我們對這4袋紅細(xì)胞進(jìn)行Rh血型鑒定,結(jié)果見表4。我們得出交叉配血策略:患者血漿中同時存在抗-f和抗-M時,先挑選無M抗原紅細(xì)胞進(jìn)行交叉配血,根據(jù)交叉配血相合結(jié)果,對獻(xiàn)血者紅細(xì)胞進(jìn)行Rh血型鑒定,選擇無f抗原紅細(xì)胞發(fā)放。

    表4 配血結(jié)果及Rh血型

    討 論

    編碼Rh血型復(fù)合抗原的基因位于同一條染色體上單倍體的CE基因內(nèi)[6]。ce復(fù)合抗原為f或RH6,Ce復(fù)合抗原為RH7和RH41,CE復(fù)合抗原為RH22,cE復(fù)合抗原為RH27[7]???f抗體多見于經(jīng)過輸血或妊娠免疫后,表型為CCDee、ccDEE和CcDEe(基因型為DCe/DcE或DCe/dcE或dCe/DcE)的個體中[8]。在臨床中少見抗-f抗體引起的輸血反應(yīng)和新生兒溶血病。抗-M抗體是MNS血型系統(tǒng)中最常見的抗體,抗-M抗體多為IgM型,可以影響血型反定型和鹽水介質(zhì)抗體篩選,也有IgM+IgG和IgG型[9]。IgM和部分IgG型抗-M在4℃反應(yīng)性強(qiáng)于37℃,極易造成漏檢[5,10]。冷反應(yīng)性IgG型抗-M抗體同樣會引起溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病[11-14]。

    紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有負(fù)電荷,使紅細(xì)胞相互排斥[15]。常見的蛋白水解酶如菠蘿酶、木瓜酶和無花果酶等可作用于紅細(xì)胞表面的多糖鏈,縮短紅細(xì)胞間的距離,增強(qiáng)IgG抗體與紅細(xì)胞表面抗原的凝集反應(yīng)(如Rh、Kidd血型系統(tǒng)抗體),也會改變MNS、Duffy等血型系統(tǒng)抗原的構(gòu)型而破壞其抗原性[16-17]。當(dāng)抗體鑒定出現(xiàn)多種抗體共存或抗體凝集反應(yīng)微弱時,我們可以利用蛋白水解酶的特性,進(jìn)一步區(qū)分和鑒定。本例報告使用的為木瓜蛋白酶處理后的譜細(xì)胞。直抗陽性紅細(xì)胞放散液檢測的目的:抗體篩選陽性說明自身抗體導(dǎo)致紅細(xì)胞陽性;抗體篩選陰性說明非自身抗體導(dǎo)致紅細(xì)胞陽性。本例紅細(xì)胞放散實驗為陰性,排除自身抗體的存在,造成患者紅細(xì)胞直接Coombs實驗陽性的原因不詳。

    本例患者血漿中存在同種抗-f抗體和疑似抗-M抗體,酶處理譜細(xì)胞抗人球卡結(jié)果顯示血漿中存在的同種抗-f反應(yīng)增強(qiáng),且可疑抗-M反應(yīng)消失;4℃譜細(xì)胞抗人球卡結(jié)果顯示血漿中抗體反應(yīng)增強(qiáng),呈現(xiàn)抗-M抗體格局。在交叉配血時,優(yōu)先挑選無M抗原的O型RhD陽性懸浮紅細(xì)胞進(jìn)行配血,根據(jù)配血結(jié)果,對配血相合的獻(xiàn)血者紅細(xì)胞進(jìn)行RhCE抗原鑒定,選擇無f抗原紅細(xì)胞進(jìn)行輸血。

    在為多次輸血或者妊娠患者進(jìn)行抗體鑒定時,除常見的Rh血型系統(tǒng)抗體外,還應(yīng)考慮RhCE復(fù)合抗原抗體存在的可能性,復(fù)合抗原抗體僅與存在復(fù)合抗原的紅細(xì)胞反應(yīng),且能被蛋白水解酶增強(qiáng);在懷疑血漿中存在抗-M抗體時,先檢測鹽水介質(zhì)抗體篩選和37℃抗人球蛋白實驗反應(yīng)是否陽性,再檢測確認(rèn)酶處理或4℃環(huán)境下,抗體篩選或譜細(xì)胞的反應(yīng)格局。在患者血漿中同時存在RhCE復(fù)合抗原抗體和其它血型系統(tǒng)同種抗體的情況下,優(yōu)先考慮其它血型系統(tǒng)同種抗體,選擇無對應(yīng)血型系統(tǒng)抗原的紅細(xì)胞進(jìn)行交叉配血,再根據(jù)配血結(jié)果,對相合紅細(xì)胞進(jìn)行RhCE抗原鑒定,選擇不含RhCE復(fù)合抗原的血液發(fā)放。

    利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突

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