支氣管炎患兒腸道菌群變化與免疫功能、炎癥因子水平的相關(guān)性分析

郝浴橋 李珍

(1.洛川縣人民醫(yī)院兒科一病區(qū),陜西 洛川 727400;2.西安市第三醫(yī)院兒科,陜西 西安 710018)

支氣管炎是小兒常見的急性下呼吸道感染,可由不同的病原體感染誘發(fā),臨床上主要表現(xiàn)為咳嗽、喘憋等[1-3]。當(dāng)前支氣管炎的發(fā)病機(jī)制仍未得到統(tǒng)一認(rèn)定,但是免疫功能的異常與其發(fā)病依然存在一定關(guān)系[4]。本文具體探討與分析了支氣管炎患兒腸道菌群變化與免疫功能、炎癥因子水平的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2021年4月至2022年10月在本院診治的支氣管炎患兒102例作為支氣管炎組,同期選擇在本院體檢的無呼吸道疾病的健康小兒102例作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn):支氣管炎組符合支氣管炎的診斷標(biāo)準(zhǔn),初次發(fā)病;年齡1～12歲;無其他系統(tǒng)感染性疾病;臨床資料完整;小兒家長依從性良好。排除標(biāo)準(zhǔn):入院前1個(gè)月發(fā)生腹瀉或服用益生菌制劑的小兒;存在先天性心臟病、結(jié)核感染、支氣管異物的小兒;入院前2周服用免疫調(diào)節(jié)劑、抗組胺藥、糖皮質(zhì)激素的小兒;合并循環(huán)系統(tǒng)疾病的小兒。兩組小兒的一般資料對比無顯著差異(P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料對比

1.2 方法(1)腸道菌群檢測:取兩組小兒的糞便2～3 g,將其放置在無菌瓶中,將無菌氯化鈉溶液加入糞便中,保存于-20.0℃冰箱。使用北京威澤森生物技術(shù)有限公司的ATB半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定。然后進(jìn)行薄層涂片、固定、革蘭染色與鏡檢,根據(jù)油鏡(10×100倍)下每視野平均細(xì)菌數(shù)(雙歧桿菌、大腸桿菌)進(jìn)行分析。(2)血清免疫功能、炎癥因子指標(biāo)檢測:抽取所有小兒的空腹靜脈血1.5～3.0 mL,分為兩管。第一管抗凝后,使用離心機(jī)1 500 r/min離心10 min后獲取分離單個(gè)核細(xì)胞,采用BD公司的流式細(xì)胞儀檢測CD3+、CD8+、IL-17相對水平。第二管促凝后,使用離心機(jī) 1 500 r/min離心10min后,取上層血清,采用酶聯(lián)免疫法檢測血清干擾素(interferon,IFN)-γ、白細(xì)胞介素(Interleukin,IL)-4含量。

2 結(jié) 果

2.1 外周血CD3+、CD8+、IL-17相對水平對比支氣管炎組的外周血CD3+、CD8+、IL-17相對水平明顯少于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組外周血CD3+、CD8+、IL-17相對水平對比

2.2 血清IFN-γ、IL-4含量對比支氣管炎組的血清IFN-γ、IL-4含量顯著高于對照(P<0.05)。見表3。

表3 兩組血清IFN-γ、IL-4含量對比

2.3 腸道菌群克隆數(shù)對比支氣管炎組的腸道雙歧桿菌克隆數(shù)明顯低于對照組(P<0.05),大腸桿菌克隆數(shù)與對照組相比明顯增高(P<0.05)。見表4。

表4 兩組腸道菌群克隆數(shù)對比個(gè),n=102]

2.4 相關(guān)性分析在支氣管炎組中,Pearson相關(guān)性分析顯示腸道雙歧桿菌、大腸桿菌克隆數(shù)與外周血CD3+、CD8+、IL-17相對水平、血清IFN-γ、血清IL-4含量都存在相關(guān)性(P<0.05)。見表5。

表5 支氣管炎患兒腸道菌群變化與免疫功能、炎癥因子水平的相關(guān)性(n=102)

3 討 論

支氣管炎一旦患病,很多患兒會伴有不同程度的呼吸困難,嚴(yán)重影響患兒的身心健康。支氣管炎的發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜,臨床中治療時(shí)難度也比較大,還可反復(fù)發(fā)作[5-6]。

本研究顯示支氣管炎組的腸道雙歧桿菌克隆數(shù)明顯低于對照組(P<0.05),大腸桿菌克隆數(shù)與對照組相比明顯增高(P<0.05),表明支氣管炎患兒可出現(xiàn)腸道菌群紊亂。從機(jī)制上分析,腸道中菌群主要存在于4個(gè)菌門,包括厚壁菌門、放線菌門、擬桿菌門、變形菌門等,在支氣管炎發(fā)生的時(shí)候,表現(xiàn)出微生物菌群的改變,特別是變形菌門的成員的多樣性與豐度都會顯著增加[7]。雙歧桿菌為人體有益菌,雙歧桿菌水平正?？杀ＷC腸道功能正常;而大腸桿菌為有害菌,大腸桿菌水平上升可導(dǎo)致腸黏膜屏障功能受損,影響腸道正常功能,誘發(fā)各種疾病的發(fā)生。支氣管炎可對胃腸道黏膜直接產(chǎn)生影響,進(jìn)而影響腸道內(nèi)菌落,并對胃腸黏膜血流動(dòng)力學(xué)產(chǎn)生影響。故而形成腸道菌群失衡[10]。本研究顯示支氣管炎組的外周血CD3+、CD8+、IL-17相對水平明顯少于對照組(P<0.05),表明支氣管炎患兒可伴隨有免疫功能下降。從機(jī)制上分析,CD3+、CD8+、IL-17在人體免疫功能中屬于反應(yīng)自身免疫性的主要指標(biāo)之一,調(diào)整粘膜免疫與疾病的發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān),CD3+、CD8+、IL-17水平下降可提示疾病的易感性。IFN-γ、IL-4都屬于炎性因子,當(dāng)人體處于炎癥狀態(tài)時(shí)其可呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài),支氣管炎患兒的自身炎癥呈高表達(dá)狀態(tài)。本研究顯示支氣管炎組的血清IFN-γ、IL-4含量與對照組相比都顯著提高(P<0.05),表明支氣管炎患兒可伴隨有炎癥因子的大量釋放。雙歧桿菌為人體腸道有益菌,其含量增加可表明人體自身的腸道功能比較良好。大腸桿菌為有害菌,大腸桿菌在腸道菌群占據(jù)上風(fēng)時(shí),可導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)惡心、發(fā)熱、腹瀉、腹痛等癥狀。本研究Pearson相關(guān)性分析顯示支氣管炎患兒的腸道雙歧桿菌、大腸桿菌克隆數(shù)與外周血CD3+、CD8+、IL-17相對水平、血清IFN-γ、血清IL-4含量都存在相關(guān)性(P<0.05)。本研究由于沒有對支氣管炎患兒進(jìn)行分級分析,也沒有進(jìn)行多因素logistic回歸分析,將在后續(xù)研究中探討。

綜上,支氣管炎患兒可出現(xiàn)腸道菌群紊亂,可伴隨有炎癥因子的大量釋放,并且免疫功能也會降低,支氣管炎患兒腸道菌群變化與免疫功能、炎癥因子水平存在相關(guān)性。

利益沖突說明/Conflict of Intetests

所有作者聲明不存在利益沖突。

倫理批準(zhǔn)及知情同意/Ethics Approval and Patient Consent

本研究通過洛川縣人民醫(yī)院倫理委員會(科學(xué)倫理委員會)批準(zhǔn),患兒及家屬均知情同意。