基于Klotho/血管緊張素Ⅱ1型受體信號通路探討大蒜素對鹽敏感性高血壓模型大鼠腎臟的影響

趙偉，張瑤，2，唐榮杰，2，霍迎新，2，廉秋芳，2

作者單位：1.712000 陜西省咸陽市，延安大學(xué)咸陽醫(yī)院心血管內(nèi)科 2.716000 陜西省延安市，延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院

腎臟在維持血壓穩(wěn)定方面發(fā)揮著重要作用，且長期血壓負荷值偏高會造成腎臟損傷［1］。鹽敏感性高血壓（salt sensitive hypertension，SSH）是一種特殊類型的高血壓，研究發(fā)現(xiàn)，與原發(fā)性高血壓?。╡ssential hypertension，EH）相比，SSH患者腎臟損傷更為嚴(yán)重，分析其原因為高鹽攝入所致血壓升高及高鹽本身均可導(dǎo)致腎臟損傷［2］。目前，臨床上阻止或逆轉(zhuǎn)SSH患者腎臟損傷的方法仍然有限。大蒜素是大蒜中的主要生物活性物質(zhì)?，F(xiàn)代研究表明，大蒜素具有廣泛的藥理活性，其對腸道菌群紊亂、血脂代謝異常、癌癥等具有一定治療作用［3-5］。近年來大蒜素作為一種腎臟保護藥物備受關(guān)注，研究表明，補充外源性大蒜素能有效減輕腎缺血再灌注損傷模型大鼠腎臟損傷、局部炎癥損傷及氧化應(yīng)激損傷，減少腎臟細胞凋亡，進而改善腎功能［6］；此外，大蒜素還能抑制慢性腎衰竭模型大鼠炎癥相關(guān)信號通路，降低炎癥因子水平，減輕腎臟纖維化，進而保護腎功能［7］?；诖耍狙芯炕贙lotho/血管緊張素Ⅱ 1型受體（angiotensin Ⅱ type 1 receptor，AT1R）信號通路探討大蒜素對SSH模型大鼠腎臟的影響，以期為SSH藥物研發(fā)提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 實驗時間

本實驗時間為2022年2—6月。

1.2 實驗動物

健康SPF級Dahl鹽敏感大鼠24只，雄性，8周齡，體質(zhì)量200～250 g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司。飼養(yǎng)環(huán)境：溫度（22±2）℃，相對濕度（55±2）%，12 h光照/12 h黑暗交替進行，自由飲食和攝水。將24只Dahl鹽敏感大鼠隨機分為正常鹽組、高鹽組和高鹽＋大蒜素組，每組8只。動物實驗方案經(jīng)延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物倫理委員會審核批準(zhǔn)（編號：2021-41）。

1.3 主要實驗藥物、試劑及儀器

（1）藥物：大蒜素購自上海創(chuàng)賽科技有限公司（純度≥98%，生產(chǎn)批號：PA02571）。（2）試劑：尿蛋白定量測試盒（貨號：C035-2-1）、血肌酐測定試劑盒（貨號：C011-2-1）均購自南京建成生物工程研究所有限公司，HE染色試劑盒（貨號：C0105S）購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司，Masson染色試劑盒（貨號：B1130）購自北京普利萊基因技術(shù)有限公司，丙二醛檢測試劑盒（CEA597Ge 96T）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）檢測試劑盒（SES134Ra 96T）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）檢測試劑盒（CEA294Ge 96T）購自博奧派克生物科技有限公司，Klotho抗體（貨號：DF10309）購自Affinity Biosciences公司，AT1R抗體（貨號：ab124734）購自Abcam公司，TRIzol（貨號：10296028）、SuperScriptⅢ逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（11752050）、PCR mix（4472920）購自Invitrogen公司，BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒（型號：MD913053）、SDS-PAGE凝膠配制試劑盒（型號：MD911919）購自北京百奧思科生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司。（3）儀器：多參數(shù)監(jiān)護儀（型號：PM-9000GTA）購自湖南瑞博科技有限公司，酶標(biāo)儀（型號：Model 550）購自Bio-Rad公司，化學(xué)發(fā)光成像儀（型號：chemiscope 6100）購自上海勤翔科學(xué)儀器有限公司，熒光定量PCR儀（型號：StepOne Software）購自Applied Biosystems公司，電泳儀（型號：EPS 300）購自Bio-Rad公司，凝膠成像儀（型號：2500）購自Bio-Rad公司，凝膠成像系統(tǒng)（型號：GelDoc-It310）購自上海巴玖實業(yè)有限公司，化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（型號：170-8280）購自Bio-Rad公司。

1.4 干預(yù)方法

正常鹽組大鼠給予0.3%氯化鈉飼料喂養(yǎng)。高鹽組和高鹽＋大蒜素組大鼠制備SSH模型，具體如下：參考文獻［8］，采用8%氯化鈉飼料喂養(yǎng)大鼠，在此基礎(chǔ)上，高鹽＋大蒜素組大鼠給予大蒜素16 mg/kg，口服。三組大鼠均干預(yù)4周。大鼠尾動脈收縮壓升高且發(fā)生腎臟纖維化提示造模成功。

1.5 觀察指標(biāo)

1.5.1 尾動脈收縮壓

干預(yù)前及干預(yù)1、2、3、4周的同一時間，采用多參數(shù)監(jiān)護儀測量大鼠平靜狀態(tài)下尾動脈收縮壓，每只大鼠連續(xù)測量3次，取平均值。

1.5.2 腎功能指標(biāo)

干預(yù)4周后對大鼠進行稱重并采用代謝籠收集其24 h尿液，嚴(yán)格按照尿蛋白定量測試盒操作說明書檢測尿蛋白；之后采用10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，取5 ml腹主動脈血，3 500～4 000 r/min離心10 min（離心半徑8 cm），分離血清，嚴(yán)格按照血肌酐測定試劑盒操作說明書檢測血肌酐水平。之后摘取大鼠雙腎并稱重，計算腎臟重量/體質(zhì)量（kindey weight/body weight，KW/BW）比值。

1.5.3 腎組織病理學(xué)改變

干預(yù)4周后，取大鼠適量左腎組織，采用4%多聚甲醛溶液固定，然后洗滌、脫水，根據(jù)HE染色及Masson染色試劑盒說明書進行操作，脫水、透明、封固后在光鏡下觀察腎組織病理學(xué)改變。

1.5.4 氧化應(yīng)激指標(biāo)

干預(yù)4周后，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測大鼠腎組織丙二醛、SOD、GSH水平，具體如下：取大鼠適量右腎組織，根據(jù)丙二醛、SOD、GSH檢測試劑盒操作說明書檢測腎組織丙二醛、SOD、GSH水平。實驗獨立進行3次。

1.5.5 Klotho、AT1R表達水平

干預(yù)4周后，采用免疫組化染色法檢測大鼠腎組織Klotho、AT1R表達水平，具體如下：將腎臟組織進行石蠟包埋，切割5 μm石蠟切片并固定于60 ℃恒溫箱中，在水中采用二甲苯和梯度乙醇溶液脫蠟，采用枸櫞酸鈉緩沖液修復(fù)。采用PBS洗滌3次，每次持續(xù)3 min。加入已稀釋的一抗并于4 ℃環(huán)境下過夜，采用PBS洗滌后再次添加二抗，并在37 ℃環(huán)境下孵育30 min。通過光學(xué)顯微鏡觀察Klotho、AT1R表達水平。

1.5.6 Klotho、AT1R mRNA相對表達量

干預(yù)4周后，采用RT-qPCR法檢測大鼠腎組織Klotho、AT1R mRNA相對表達量，具體如下：取適量右腎組織并置于液氮中研磨，使用TRIzol提取總RNA，分別在260、280 nm波長處測定RNA溶液的吸光度。取適量RNA溶液按照SuperScript Ⅲ逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA合成cDNA，然后對cDNA進行PCR，以β-actin為內(nèi)參。RT-qPCR引物序列見表1。PCR條件：95 ℃持續(xù)5 min，然后進行40次擴增循環(huán)（95 ℃ 10 s，58 ℃ 20 s，72 ℃20 s）。反應(yīng)體系包括2 μl cDNA、6 μl ddH2O、10 μl PCR mix、1 μl正向引物和1 μl反向引物。目的基因mRNA相對表達量=2-（ΔCt目的基因－ΔCt參照基因）。實驗獨立進行3次。

表1 RT-qPCR引物序列Table 1 RT-qPCR primer sequences

1.5.7 Klotho、AT1R蛋白相對表達量

干預(yù)4周后，采用Western blot法檢測腎組織Klotho、AT1R蛋白相對表達量，具體如下：將腎小管上皮細胞與裂解液在冰上孵育15 min，12 000 r/min離心10 min（離心半徑6.2 cm），收集上清液。采用BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒檢測細胞上清液中蛋白濃度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過SDS-PAGE凝膠配制試劑盒分離蛋白質(zhì)，然后轉(zhuǎn)移到PVDF膜上；采用1×TBST配置的3%脫脂牛奶封閉液封閉1 h，然后將PVDF膜放一抗孵育過夜；采用1×TBST浸泡10 min后棄掉1×TBST，重復(fù)3次。將PVDF膜放入二抗孵育2 h；采用1×TBST浸泡10 min后棄掉1×TBST，重復(fù)3次。采用發(fā)光液浸濕PVDF膜后將其置于化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)進行顯影，采用Image J軟件分析目的蛋白條帶灰度值，以目的蛋白條帶灰度值/參照蛋白灰度值表示目的蛋白相對表達量。實驗獨立進行3次。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用GraphPad Prism 8.0.2軟件進行數(shù)據(jù)處理。計量資料以（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用Tukey檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 尾動脈收縮壓

高鹽組和高鹽＋大蒜素組大鼠均造模成功。干預(yù)前，三組大鼠尾動脈收縮壓比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；干預(yù)1、2、3、4周，三組大鼠尾動脈收縮壓比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。干預(yù)1周，高鹽組大鼠尾動脈收縮壓高于正常鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；干預(yù)2、3、4周，高鹽組大鼠尾動脈收縮壓高于正常鹽組，高鹽＋大蒜素組大鼠尾動脈收縮壓低于高鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 三組大鼠干預(yù)前后尾動脈收縮壓比較（±s，mmHg，n=8）Table 2 Comparison of tail artery systolic blood pressure among the three groups of rats before and after intervention

表2 三組大鼠干預(yù)前后尾動脈收縮壓比較（±s，mmHg，n=8）Table 2 Comparison of tail artery systolic blood pressure among the three groups of rats before and after intervention

注：a表示與正常鹽組比較，P ＜0.05；b表示與高鹽組比較，P＜0.05；1 mmHg=0.133 kPa。

組別干預(yù)前 干預(yù)1周 干預(yù)2周 干預(yù)3周 干預(yù)4周正常高鹽組117±3 115±4120±5117±4 118±3鹽組114±4 123±6a 165±6a 181±4a 207±10a高鹽＋大蒜素組 118±3 123±2144±6b 154±6b 172±9b F值3.409.40118.70350.20265.40 P值0.0510.001＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 腎功能指標(biāo)

干預(yù)4周后，三組大鼠尿蛋白、血肌酐、KW/BW比值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；干預(yù)4周后，高鹽組大鼠尿蛋白、血肌酐、KW/BW比值高于正常鹽組，高鹽＋大蒜素組大鼠尿蛋白、血肌酐、KW/BW比值低于高鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 三組大鼠干預(yù)4周后腎功能指標(biāo)比較（±s，n=8）Table 3 Comparison of renal function indexes among the three groups of rats at 4 weeks after intervention

表3 三組大鼠干預(yù)4周后腎功能指標(biāo)比較（±s，n=8）Table 3 Comparison of renal function indexes among the three groups of rats at 4 weeks after intervention

注：KW/BW=腎臟重量/體質(zhì)量；a表示與正常鹽組比較，P＜0.05；b表示與高鹽組比較，P＜0.05。

組別尿蛋白（mg/L） 血肌酐（μmol/L） KW/BW比值正常鹽組5.50±1.1624.14±0.810.66±0.06高鹽組高鹽＋大蒜素13.67±1.18a43.02±0.88a1.19±0.19a組9.21±0.96b29.83±0.76b0.88±0.12b F值109.901 124.0031.30 P值＜0.001＜0.001＜0.001

2.3 腎組織病理學(xué)改變

HE染色結(jié)果顯示，正常鹽組大鼠腎小球與腎小管結(jié)構(gòu)清晰，形態(tài)正常；與正常鹽組相比，高鹽組大鼠腎小球囊腔增大且輪廓不規(guī)則，腎小球基底膜增厚，腎小管上皮細胞肥大，呈空泡變性，腎間質(zhì)伴有炎性細胞浸潤；與高鹽組相比，高鹽＋大蒜素組大鼠腎組織病理損傷相對減輕，局部可見少量炎性細胞浸潤，見圖1。Masson染色結(jié)果顯示，與正常鹽組相比，高鹽組視野內(nèi)觀察到大量膠原纖維沉積，腎組織纖維化嚴(yán)重；與高鹽組相比，高鹽＋大蒜素組大鼠腎組織纖維化明顯減輕，見圖2。

圖2 三組大鼠腎組織Masson染色結(jié)果（×400）Figure 2 Masson staining results of renal tissue among the three groups of rats

2.4 氧化應(yīng)激指標(biāo)

干預(yù)4周后，三組大鼠腎組織丙二醛、SOD、GSH水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；干預(yù)4周后，高鹽組大鼠腎組織丙二醛水平高于正常鹽組，腎組織SOD、GSH水平低于正常鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；干預(yù)4周后，高鹽＋大蒜素組腎組織丙二醛水平低于高鹽組，腎組織SOD、GSH水平高于高鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表4。

表4 三組大鼠干預(yù)4周后腎組織氧化應(yīng)激指標(biāo)比較（±s，n=3）Table 4 Comparison of oxidative stress indexes of renal tissue among the three groups of rats at 4 weeks after intervention

表4 三組大鼠干預(yù)4周后腎組織氧化應(yīng)激指標(biāo)比較（±s，n=3）Table 4 Comparison of oxidative stress indexes of renal tissue among the three groups of rats at 4 weeks after intervention

注：SOD=超氧化物歧化酶，GSH=谷胱甘肽；a表示與正常鹽組比較，P＜0.05；b表示與高鹽組比較，P＜0.05。

組別丙二醛（ng/ml） SOD（ng/ml） GSH（μg/ml）正常鹽組110.6±3.05.8±0.210.6±1.1高鹽組鹽＋大蒜素202.7±4.5a1.7±0.1a4.4±0.5a高組161.1±4.4b4.6±0.2b8.8±0.9b F值1 043.01633.0105.1 P值＜0.001＜0.001＜0.001

2.5 Klotho、AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量

干預(yù)4周后，三組大鼠腎組織Klotho、AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；干預(yù)4周后，高鹽組大鼠腎組織Klotho表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量低于正常鹽組，AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量高于正常鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；干預(yù)4周后，高鹽＋大蒜素組大鼠腎組織Klotho表達水平及其mRNA相對表達量、蛋白高于高鹽組，AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量低于高鹽組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表5、圖3～4。

圖3 三組大鼠免疫組化染色結(jié)果（×400）Figure 3 Results of immunohistochemical staining among the three groups of rats

圖4 Western blot法檢測三組大鼠Klotho、AT1R蛋白相對表達量的SDS-PAGE圖Figure 4 SDS-PAGE diagram of relative expression of Klotho，AT1R protein detected by Western blot method among the three group of rats

表5 三組大鼠干預(yù)4周后腎組織Klotho、AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量比較（±s，n=3）Table 5 Comparison of expression level，mRNA relative expression，protein relative expression of Klotho and AT1R of renal tissue among the three groups of rats at 4 weeks after intervention

表5 三組大鼠干預(yù)4周后腎組織Klotho、AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量比較（±s，n=3）Table 5 Comparison of expression level，mRNA relative expression，protein relative expression of Klotho and AT1R of renal tissue among the three groups of rats at 4 weeks after intervention

注：a表示與正常鹽組比較，P＜0.05；b表示與高鹽組比較，P＜0.05。

組別Klotho表達水平AT1R表達水平Klotho mRNA相對表達量 AT1R mRNA相對表達量Klotho蛋白相對表達量AT1R蛋白相對表達量正常鹽組0.32±0.020.23±0.031.03±0.091.04±0.080.92±0.010.32±0.02高鹽組0.21±0.05a0.39±0.08a0.51±0.06a1.63±0.09a0.37±0.03a0.83±0.04a高鹽＋大蒜素組 0.29±0.02b0.26±0.02b0.82±0.10b1.28±0.06b0.59±0.02b0.65±0.03b F值10.968.6327.9643.99471.20201.50 P值0.0090.017＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

3 討論

高血壓是慢性腎臟?。╟hronic kidney disease，CKD）的主要原因，僅次于糖尿病，是加劇患者CKD患者腎功能惡化的重要因素［9］。眾所周知，飲食習(xí)慣與高血壓的發(fā)病密切相關(guān)，尤其是高鹽飲食。研究表明，高達50%的EH為高鹽引起，其被稱為SSH［10］。研究表明，天然植物化合物（natural plant compounds，NPC）在高血壓及其靶器官損傷的治療中發(fā)揮著重要作用［11-12］。在臨床研究中，幾種NPC已被證明具有腎臟保護作用，其主要通過激活抗氧化防御系統(tǒng)及抑制促炎信號通路而改善腎臟病患者預(yù)后［13］。因此，本研究以NPC為切入點，基于Klotho/AT1R信號通路探討大蒜素對SSH模型大鼠腎功能的影響。

本研究結(jié)果顯示，干預(yù)1周，高鹽組大鼠尾動脈收縮壓高于正常鹽組；干預(yù)2、3、4周，高鹽組大鼠尾動脈收縮壓高于正常鹽組，高鹽＋大蒜素組大鼠尾動脈收縮壓低于高鹽組；干預(yù)4周后，高鹽組大鼠尿蛋白、血肌酐、KW/BW比值高于正常鹽組，高鹽＋大蒜素組大鼠尿蛋白、血肌酐、KW/BW比值低于高鹽組。HE染色結(jié)果顯示，與正常鹽組相比，高鹽組大鼠腎小球基底膜增厚，腎小管上皮細胞肥大，呈空泡變性，腎間質(zhì)伴有炎性細胞浸潤；與高鹽組相比，高鹽＋大蒜素組大鼠腎組織病理損傷相對減輕，局部可見少量炎性細胞浸潤。Masson染色結(jié)果顯示，與正常鹽組相比，高鹽組視野內(nèi)觀察到大量膠原纖維沉積，腎組織纖維化嚴(yán)重；與高鹽組相比，高鹽＋大蒜素組大鼠腎組織纖維化明顯減輕。提示高鹽飲食喂養(yǎng)Dahl鹽敏感大鼠可成功制備SSH模型，且SSH模型大鼠伴有腎組織損傷、膠原纖維沉積及腎功能降低，而補充大蒜素能有效降低SSH模型大鼠收縮壓，減輕其腎組織損傷、膠原纖維沉積，改善其腎功能。LIU等［14］研究發(fā)現(xiàn)，大蒜素可有效降低自發(fā)性高血壓模型大鼠血壓，并通過抑制鈣調(diào)蛋白激酶Ⅱ/核因子κB信號通路而保護大鼠血管和心臟，提示大蒜素對血壓升高引起的靶器官損傷具有一定治療作用。此外，大蒜素還對不同原因腎功能損傷具有保護作用，如其能保護腎組織免受環(huán)孢素A引起的腎毒性與氧化應(yīng)激損傷，進而減少腎小管萎縮和壞死［15］。再者，大蒜素對血壓和腎功能的影響與氯沙坦相當(dāng)［16］。

氧化應(yīng)激損傷是活性氧（reactive oxygen species，ROS）產(chǎn)生的一種負面作用，其是導(dǎo)致多種疾病的重要因素，其中腎臟特別容易受到氧化還原失衡和氧化應(yīng)激損傷的影響［17］。研究報道，高鹽喂食Dahl鹽敏感大鼠能夠誘導(dǎo)腎臟髓質(zhì)中ROS含量增加，但不影響大腦中ROS含量，提示高鹽飲食介導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷與腎臟密切相關(guān)［18］；此外，血壓升高可通過直接或間接作用促進腎臟ROS表達增加［19］。丙二醛可以反映氧自由基含量、脂質(zhì)過氧化水平及氧自由基對腎組織的損傷程度。SOD和GSH作為主要抗氧化酶，在清除氧自由基方面發(fā)揮了至關(guān)重要的作用，其活性可以反映腎臟清除氧自由基和抵抗脂質(zhì)過氧化的能力。本研究結(jié)果顯示，干預(yù)4周后，高鹽＋大蒜素組腎組織丙二醛水平低于高鹽組，腎組織SOD、GSH水平高于高鹽組，提示SSH模型大鼠存在氧化應(yīng)激損傷，而大蒜素能有效減輕其氧化應(yīng)激損傷。

Klotho蛋白作為一種抗衰老蛋白，與腎臟及腎臟疾病有關(guān)。一方面，Klotho蛋白主要在腎臟遠曲小管表達［20］；另一方面，腎臟病發(fā)病過程中伴隨Klotho蛋白水平下降，且補充Klotho蛋白能緩解甚至逆轉(zhuǎn)多種因素造成的腎臟損傷［21］。此外，Klotho蛋白能抑制腎臟氧化應(yīng)激損傷，其缺乏已被證明會增加內(nèi)源性ROS的生成，并加劇氧化應(yīng)激損傷［22］；相反，外源性補充Klotho可有效增強機體抗氧化防御能力，下調(diào)ROS表達水平，進而減輕氧化應(yīng)激損傷［23］。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，Klotho蛋白能與AT1R結(jié)合，進而抑制AT1R表達及其介導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷，且對高鹽誘導(dǎo)的腎細胞損傷具有保護作用［24］。本研究結(jié)果顯示，干預(yù)4周后，高鹽組大鼠腎組織Klotho表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量低于正常鹽組，AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量高于正常鹽組；干預(yù)4周后，高鹽＋大蒜素組大鼠腎組織Klotho表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量高于高鹽組，AT1R表達水平及其mRNA、蛋白相對表達量低于高鹽組；提示SSH模型大鼠Klotho蛋白表達下調(diào)，AT1R表達上調(diào)，腎臟氧化應(yīng)激損傷加重；而補充大蒜素能有效上調(diào)Klotho蛋白表達，抑制AT1R表達，進而減輕腎臟氧化應(yīng)激損傷，表明大蒜素對SSH模型大鼠的腎臟保護作用與其調(diào)控Klotho/AT1R信號通路、減輕腎臟氧化應(yīng)激損傷相關(guān)。

4 結(jié)論

綜上所述，大蒜素能有效改善SSH模型大鼠腎功能，減輕其腎組織損傷、膠原纖維沉積及腎臟氧化應(yīng)激損傷，其機制可能與大蒜素調(diào)控Klotho/AT1R信號通路有關(guān)。

作者貢獻：趙偉進行文章的構(gòu)思與設(shè)計，并撰寫論文；張瑤進行結(jié)果的分析與解釋；趙偉、唐榮杰、霍迎新進行實驗實施；張瑤、霍迎新進行數(shù)據(jù)整理；趙偉、廉秋芳進行論文修訂；廉秋芳進行文章的質(zhì)量控制及審校，并對文章整體負責(zé)、監(jiān)督管理。

本文無利益沖突。