SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與新疆地區(qū)人群冠心病易感性的關(guān)系研究

熱洋尼沙·卡的，高穎，沙吉旦·阿不都熱衣木，呂茂林

作者單位：830011 新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市，新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院綜合內(nèi)三科

冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是世界范圍內(nèi)的主要死亡原因，在中國，CHD每年導(dǎo)致70萬人死亡［1］。CHD是一種脂代謝紊亂、冠狀動脈內(nèi)皮損傷、慢性炎癥反應(yīng)等多因素參與的復(fù)雜疾病，遺傳因素和生活方式也與其進(jìn)展有密切關(guān)系［2］。研究表明，CHD受環(huán)境和遺傳易感性相互作用的影響［3］。因而積極篩查心血管疾病患者的遺傳易感因素，有助于明確高危人群并及時予以有效防治措施。目前，全基因組關(guān)聯(lián)研究（genome wide association study，GWAS）已經(jīng)確定了許多與CHD相關(guān)的基因突變和染色體位點(diǎn)［4］。SMARCA4（也稱BRG1）基因位于19p13.2的染色體區(qū)域，其蛋白質(zhì)是SWI/SNF復(fù)合物的重要催化成分，可以通過改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)來調(diào)控多種基因的轉(zhuǎn)錄［5］。GWAS顯示，SMARCA4基因第30個內(nèi)含子上rs1122608位點(diǎn)的G等位基因可通過影響低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平而增加心肌梗死發(fā)生風(fēng)險［6］。但也有研究顯示，rs1122608位點(diǎn)與心血管疾病無明顯相關(guān)性［7］。目前rs1122608位點(diǎn)與CHD的關(guān)系尚存在爭議?；诖?，本研究旨在分析SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與新疆地區(qū)人群CHD易感性的關(guān)系，以期為CHD危險因素評估、預(yù)防及治療提供線索和思路。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2017—2019年就診于新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心的CHD患者959例為CHD組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合CHD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，即冠狀動脈造影（coronary angiography，CAG）檢查顯示左主干、左前降支（含主要對角支）、左回旋支（含主要邊緣支）或右冠狀動脈（含后降支、左心室后側(cè)支）中至少1支血管狹窄≥50%［8］；（2）病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有嚴(yán)重心力衰竭、肝腎功能不全、血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤者。選取同期就診于新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心的非CHD患者924例為對照組，其中心臟神經(jīng)官能癥437例、高血壓357例、肺動脈高壓85例、心臟瓣膜病45例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）無CHD家族史；（2）心電圖檢查及超聲心動圖檢查無明顯異常；（3）其他實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果均無明顯異常。排除標(biāo)準(zhǔn)同CHD組。本研究經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)（K202309-08），所有患者簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 一般資料收集

收集患者一般資料，包括性別、年齡、BMI、吸煙情況、飲酒情況、有無高血壓、有無糖尿病、有無血脂異常。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)

采集患者清晨空腹靜脈血5 m l，送至新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，采用全自動生化分析儀（日本OLYMPUS，1000/2700型）檢測三酰甘油（triacylglycerol，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、LDL-C、載脂蛋白A1（apolipoprotein A1，ApoA1）、載脂蛋白B（apolipoprotein B，ApoB）、脂蛋白a〔lipoprotein（a），Lp（a）〕、空腹血糖。

1.2.3 SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性檢測

抽取患者外周靜脈血3 ml，加入2% EDTA抗凝，3 000 r/min離心10 min（離心半徑15 cm），分離白細(xì)胞。采用天根生化科技（北京）有限公司的血液、細(xì)胞、組織基因組DNA提取試劑盒（貨號/批號：DP319-02）提取外周血白細(xì)胞基因組DNA，于－80 ℃環(huán)境下保存?zhèn)溆?。DNA樣本送華大基因行高通量測序以檢測SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型（包括GG、GT、TT）及等位基因（包括G和T）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用S P S S 2 5.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。采用Kolmogorov-Smirnov法進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布的計量資料以M（P25，P75）表示，兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)；計數(shù)資料以相對數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)評估樣本的群體代表性；采用非條件二元Logistic回歸分析探討CHD的影響因素。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料及實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)比較

兩組性別、年齡、BMI、飲酒者占比、血脂異常者占比、TG、ApoA1比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；CHD組吸煙者占比、有高血壓者占比、有糖尿病者占比、TC、LDL-C、ApoB、Lp（a）、空腹血糖高于對照組，HDL-C低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組一般資料及實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)比較Table 1 Comparison of general data and laboratory test indexes between the two groups

2.2 Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)

Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)結(jié)果顯示，對照組和CHD組SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)的基因型分布均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡（P＞0.05），見表2。

表2 兩組Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)結(jié)果Table 2 Hardy-Weinberg genetic balance test results of the two groups

2.3 兩組SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型、等位基因頻率比較

兩組SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型、等位基因頻率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 兩組SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型、等位基因頻率比較〔n（%）〕Table 3 Comparison of genotype and allele frequency of rs1122608 locus of SMARCA4 gene between the two groups

2.4 CHD影響因素的非條件二元Logistic回歸分析

以吸煙（賦值：是=1，否=0）、高血壓（賦值：有=1，無=0）、糖尿?。ㄙx值：有=1，無=0）、TC（實(shí)測值）、HDL-C（實(shí)測值）、LDL-C（實(shí)測值）、ApoB（實(shí)測值）、Lp（a）（實(shí)測值）、空腹血糖（實(shí)測值）、SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型（賦值：GG=1，GT=2，TT=3）為自變量，研究對象是否為CHD患者為因變量（賦值：是=1，否=0），進(jìn)行非條件二元Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，吸煙、高血壓、Lp（a）升高、空腹血糖升高是CHD的獨(dú)立危險因素，HDL-C升高是CHD的獨(dú)立保護(hù)因素（P＜0.05）；SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型不是CHD的影響因素（P＞0.05），見表4。

表4 CHD影響因素的非條件二元Logistic回歸分析Table 4 Unconditioned binary Logistic regression analysis of influencing factors of CHD

3 討論

SMARCA4基因緊鄰低密度脂蛋白受體基因，位于19p13.2的染色體區(qū)域，由7個高度保守的結(jié)構(gòu)域組成［9］。研究顯示，SMARCA4基因可調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)代謝［10］，而其表達(dá)可能受rs1122608位點(diǎn)的調(diào)控［11］。rs1122608位于SMARCA4基因的第30個內(nèi)含子上，既往研究表明，在亞洲男性人群中rs1122608位點(diǎn)G等位基因是CHD的重要危險因素；同時研究顯示，rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與高加索人群CHD易感性相關(guān)［12］。伊朗的研究顯示，rs1122608位點(diǎn)GT基因型或TT基因型與CHD的嚴(yán)重程度有關(guān)［13］。但同時有研究顯示，在中國漢族人群中rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與CHD之間沒有明顯的關(guān)系［14］。因而SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與CHD的關(guān)系尚存在爭議。本研究旨在分析SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與新疆地區(qū)人群CHD易感性的關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示，對照組和CHD組SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)的基因型分布均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡，提示本研究對象具有群體代表性。本研究結(jié)果還顯示，兩組SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型、等位基因頻率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；非條件二元Logistic回歸分析結(jié)果顯示，SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)基因型不是CHD的影響因素，提示SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與新疆地區(qū)人群CHD易感性無關(guān)。但考慮新疆是個多民族地區(qū)，不可避免地存在種族差異，因而還需排除種族差異，從遺傳易感性和生活方式的角度進(jìn)一步闡明SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與新疆地區(qū)人群CHD的關(guān)系。

此外，本研究非條件二元Logistic回歸分析結(jié)果還顯示，吸煙、高血壓、Lp（a）升高、空腹血糖升高是CHD的獨(dú)立危險因素，HDL-C升高是CHD的獨(dú)立保護(hù)因素。分析原因：吸煙會影響動脈粥樣硬化的所有階段，從內(nèi)皮功能障礙到急性臨床事件，其還會加重炎癥反應(yīng)、促進(jìn)血栓形成和LDL-C的氧化，從而增加個體心血管疾病發(fā)生風(fēng)險。既往研究表明，主動吸煙者和被動吸煙者冠狀動脈疾病發(fā)生風(fēng)險均高于不吸煙者［15］。高血壓可引起內(nèi)皮功能障礙，促進(jìn)動脈粥樣硬化進(jìn)程，導(dǎo)致動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定，從而增加CHD發(fā)生風(fēng)險。此外，左心室肥厚是高血壓的常見并發(fā)癥，其可導(dǎo)致冠狀動脈儲備減少及心肌氧需求增加，這兩種機(jī)制均可導(dǎo)致CHD的發(fā)生［16］。Lp（a）是一種附著在低密度脂蛋白樣顆粒上的大分子糖蛋白，其水平升高可能誘發(fā)血栓形成，從而加速動脈粥樣硬化，進(jìn)而導(dǎo)致CHD發(fā)生風(fēng)險升高［17-18］。研究表明，即使是非糖尿病患者，空腹血糖＞5.5 mmol/L（100 mg/dl）與CHD發(fā)病有關(guān)［19］。Framingham研究表明，HDL-C降低是CHD的危險因素［20］。HDL-C在血管中的作用包括抗氧化、抗炎、預(yù)防缺血再灌注、修復(fù)損傷的內(nèi)皮細(xì)胞等，但其最重要的作用是清除細(xì)胞內(nèi)膽固醇，從而降低動脈粥樣硬化發(fā)生風(fēng)險。研究表明，血清HDL-C＜40 mg/dl是CHD的危險因素［21］。

4 結(jié)論

綜上所述，SMARCA4基因rs1122608位點(diǎn)多態(tài)性與新疆地區(qū)人群CHD易感性無關(guān)。但本研究尚存在一定局限性：首先，新疆是一個多民族地區(qū)，基因位點(diǎn)和疾病的關(guān)系可能受到不同民族的影響；其次，本研究為單中心研究，可能存在未調(diào)整的潛在混雜因素，從而影響研究結(jié)果。

作者貢獻(xiàn)：熱洋尼沙·卡的進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計、數(shù)據(jù)收集與整理，撰寫論文，進(jìn)行論文的修訂；高穎進(jìn)行研究的實(shí)施與可行性分析；沙吉旦·阿不都熱衣木進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理；呂茂林進(jìn)行結(jié)果的分析與解釋；高穎負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校，并對文章整體負(fù)責(zé)、監(jiān)督管理。

本文無利益沖突。