葫蘆素B 納米混懸劑制備及其體內(nèi)藥動學研究

陳 容，田 莉，薛曉菲，潘思影，楊 雪，田 青

（1.鄭州澍青醫(yī)學高等?？茖W校，河南 鄭州 450064； 2.新鄉(xiāng)醫(yī)學院，河南 新鄉(xiāng) 453002）

葫蘆素B 是從葫蘆科植物中提取出的一種四環(huán)三萜類化合物，具有抗炎、降血糖、保肝、抗腫瘤等活性［1-3］，對卵巢癌、乳腺癌、宮頸癌等婦科疾病也具有較強治療作用［4-6］，有著開發(fā)成婦科新藥的潛力，但該成分溶解度僅為44.68 μg／mL，嚴重影響藥物溶出速率、溶出度； 油水分配系數(shù)logP為2.46［7］，表明其脂溶性較高，暫未見首關(guān)效應(yīng)報道，然而生物利用度不足5%［8］，故提高其溶解度、溶出速率、溶出度是改善口服吸收的關(guān)鍵，從而有利于臨床推廣。目前，已有葫蘆素B 固體分散體［8］、磷脂復(fù)合物［9］、納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體［10］、自微乳等［11］報道，但固體分散體存在析晶現(xiàn)象，磷脂復(fù)合物存在穩(wěn)定性差等問題，納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體、自微乳制備工藝復(fù)雜。

納米混懸劑是在穩(wěn)定劑作用下通過制劑技術(shù)使中藥活性成分形成一種亞微膠體分散體系，無需脂質(zhì)載體，具有載藥量高、制備工藝簡單等優(yōu)勢，可有效提高溶解度，促進藥物溶出、體內(nèi)吸收［12-14］。因此，本實驗制備葫蘆素B 納米混懸劑，并考察其體內(nèi)藥動學，以期為相關(guān)研究提供新思路，也為臨床提供新型相關(guān)制劑。

1 材料

SQP 型電子分析天平 ［賽多利斯科學儀器（北京）有限公司］； YC-1800 型實驗室低溫噴霧干燥機（上海雅程儀器設(shè)備有限公司）； 安捷倫1200 型高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）； Axia ChemiSEM 型掃描電鏡（北京歐波同光學技術(shù)有限公司）； LC-DMS-S 型加熱磁力攪拌器（力辰科技儀器有限公司）； G2 Autoplus／Autofill 型溶出儀（美國Hanson 公司）； TP-300 型均質(zhì)機（無錫邁拓環(huán)?？萍加邢薰荆?HPT-16 型氮吹儀（上海滬析實業(yè)有限公司）； NKT-N9H 型粒度分析儀（山東耐克特分析儀器有限公司）。

葫蘆素B 原料藥（批號201025，純度96.0%，湖北實順生物科技有限公司）； 葫蘆素B 對照品（批號20200410，純度98.5%，上海邁瑞爾生化科技有限公司）； 雌酚酮對照品（批號20200915，純度99%，上海邁瑞爾化學技術(shù)有限公司）。微粉硅膠（批號20190225，上海邁峰硅膠有限公司）； 羥丙基纖維素（批號191026，山東戈麥斯化工有限公司）； 十二烷基硫酸鈉（批號20181026，蘇州源泰潤化工有限公司）。

SD 大鼠，雌雄兼具，體質(zhì)量 （220±20）g，購自河南省動物實驗中心，動物生產(chǎn)許可證號SCXK （豫）2020-0001。

2 方法與結(jié)果

2.1 納米混懸劑制備 參考文獻［11，13］報道，取50 mg 葫蘆素B 原料藥，溶于10 mL 無水乙醇中，作為有機相； 取穩(wěn)定劑適量，溶于50 mL 蒸餾水中，作為水相，加熱至45 ℃，將有機相緩慢滴到水相中（攪拌速度800 r／min），攪拌20 min 后減壓（45 ℃）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)20 min，得混懸液，在80 MPa下循環(huán)均質(zhì)數(shù)次，置于-20 ℃冰箱中使體系快速降溫［15］，補加蒸餾水至50 mL，取出，過0.45 μm 微孔濾膜，即得。

2.2 葫蘆素B 含量測定 采用HPLC 法。

2.2.1 色譜條件 Agilent Eclipse Plus C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）； 流動相乙腈-水（65 ∶35）； 體積流量1.0 mL／min； 柱溫35 ℃； 檢測波長228 nm； 進樣量10 μL。

2.2.2 線性關(guān)系考察 取葫蘆素B 對照品10.40 mg，置于10 mL 量瓶中，乙腈溶解定容至刻度，得1.04 mg／mL 貯備液，流動相依次稀釋至10.4、5.2、2.6、1.04、0.104、0.052 μg／mL，分別取10 μL，在“2.2.1” 項色譜條件下進樣測定。以對照品質(zhì)量濃度為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y）進行回歸，得方程為Y＝90.66X-10.43 （r＝0.999 9），在0.052～10.4 μg／mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.3 供試品溶液制備 取納米混懸劑1 mL，置于50 mL 量瓶中，甲醇超聲溶解后流動相定容，取2 mL 至10 mL 量瓶中，流動相定容至刻度，即得。

2.2.4 方法學考察 取納米混懸劑1 份，按“2.2.3” 項下方法平行制備6 份供試品溶液，在“2.2.1” 項色譜條件下進樣測定，測得葫蘆素B峰面積RSD 為1.54%，表明該方法重復(fù)性良好。取供試品溶液1 份，于0、6、12、18、24、48 h在“2.2.1” 項色譜條件下進樣測定，測得葫蘆素B 峰面積RSD 為0.77%，表明溶液在48 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。取供試品溶液適量，在“2.2.1” 項色譜條件下進樣測定6 次，測得葫蘆素B 峰面積RSD為0.63%，表明儀器精密度良好。取納米混懸劑0.5 mL，置于50 mL 量瓶中，按“2.2.3” 項下方法平行制備9 份供試品溶液，分為低、中、高3組，每組3 份，分別加入1.04 mg／mL 貯備液0.25、0.5、0.75 mL，在“2.2.1” 項色譜條件下進樣測定，測得葫蘆素B 平均加樣回收率分別為98.54%、101.06%、100.89%，RSD 分別為0.36%、0.84%、0.70%。

2.3 粒徑、Zeta 電位測定 取納米混懸劑100 μL，蒸餾水稀釋50 倍，混勻，測定粒徑、Zeta 電位，平行3 次，取平均值。

2.4 處方優(yōu)化 采用單因素試驗。

2.4.1 穩(wěn)定劑種類 固定葫蘆素B 投藥量50 mg，穩(wěn)定劑與藥物比例2.5 ∶1，均質(zhì)壓力80 MPa，均質(zhì)次數(shù)10 次，考察穩(wěn)定劑種類對粒徑、PDI 的影響，結(jié)果見圖1。由此可知，單用PVP K30、羥丙甲基纖維素、阿拉伯膠、十二烷基硫酸鈉時粒徑、PDI 較大； 當2 種穩(wěn)定劑聯(lián)用，即PVP K30＋十二烷基硫酸鈉（1 ∶1）、羥丙基纖維素＋十二烷基硫酸鈉（1 ∶1）、阿拉伯膠＋十二烷基硫酸鈉（1 ∶1）時粒徑、PDI 較低，以羥丙基纖維素＋十二烷基硫酸鈉（1 ∶1）更明顯，最終選擇其作為穩(wěn)定劑。

圖1 穩(wěn)定劑種類對粒徑、PDI 的影響（n＝3）Fig.1 Effects of stabilizer type on particle size and PDI（n＝3）

2.4.2 穩(wěn)定劑與藥物比例 固定葫蘆素B 投藥量50 mg，穩(wěn)定劑羥丙基纖維素＋十二烷基硫酸鈉（1 ∶1），均質(zhì)壓力80 MPa，均質(zhì)次數(shù)10 次，考察穩(wěn)定劑與藥物比例對粒徑、PDI 的影響，結(jié)果見圖2。由此可知，在一定范圍內(nèi)隨著穩(wěn)定劑比例增加粒徑、PDI 降低，但穩(wěn)定劑比例過高時兩者反而升高，可能是由于體系黏度增加所致，也可能與過多穩(wěn)定劑附著在納米粒表面有關(guān)，最終選擇3 ∶1 作為穩(wěn)定劑與藥物比例。

圖2 穩(wěn)定劑與藥物比例對粒徑、PDI 的影響（n＝3）Fig.2 Effects of stabilizer-drug ratio on particle size and PDI （n＝3）

2.4.3 均質(zhì)次數(shù) 固定葫蘆素B 投藥量50 mg，穩(wěn)定劑羥丙基纖維素＋十二烷基硫酸鈉（1 ∶1），穩(wěn)定劑與藥物比例3 ∶1，均質(zhì)壓力80 MPa，考察均質(zhì)次數(shù)對粒徑、PDI 的影響，結(jié)果見圖3。由此可知，在一定范圍內(nèi)隨著均質(zhì)次數(shù)增加粒徑、PDI降低，但過多時（14 次）兩者反而升高，可能是由于體系溫度急劇升高所致，根據(jù)Ostwald 熟化理論，小粒徑藥物會發(fā)生溶解，而大粒徑藥物會進一步長大，導致其平均粒徑增加、分布不均勻，最終選擇12 次作為均質(zhì)次數(shù)。

圖3 均質(zhì)次數(shù)對粒徑、PDI 的影響（n＝3）Fig.3 Effects of homogenization frequency on particle size and PDI （n＝3）

2.5 驗證試驗 根據(jù)“2.4” 項下結(jié)果，確定最優(yōu)處方為葫蘆素B 投藥量50 mg，穩(wěn)定劑羥丙基纖維素＋十二烷基硫酸鈉（1 ∶1），穩(wěn)定劑與藥物比例3 ∶1，均質(zhì)壓力80 MPa，均質(zhì)次數(shù)12 次。按上述優(yōu)化工藝放大20 倍，并平行制備3 批樣品，進行驗證試驗，結(jié)果見表1，可知粒徑均在200 nm左右（圖4），PDI 在0.140 左右，Zeta 電位在-32 mV 左右（圖5），表明該工藝重復(fù)性良好。

表1 驗證試驗結(jié)果（n＝3）Tab.1 Results of verification tests （n＝3）

圖4 葫蘆素B 納米混懸劑粒徑分布Fig.4 Particle size distribution of cucurbitacin B nanosuspensions

圖5 葫蘆素B 納米混懸劑Zeta 電位Fig.5 Zeta potential of cucurbitacin B nanosuspensions

2.6 形態(tài)觀察 取納米混懸劑0.1 mL，加入5 mL蒸餾水混勻，取T 型支架，覆以銅膠帶，沖洗3次，滴2 滴稀釋后的納米混懸劑，自然晾干，置于離子濺射儀中噴濺60 s，在掃描電鏡（放大50 000倍）下觀察形態(tài)，結(jié)果見圖6。由此可知，納米粒呈類球形或橢圓形，無粘連。

圖6 葫蘆素B 納米混懸劑掃描電鏡圖Fig.6 Scanning electron microscopic image of cucurbitacin B nanosuspensions

2.7 納米混懸劑固化 采用噴霧干燥法。

2.7.1 支撐劑選擇 課題組前期考察了乳糖、微粉硅膠、甘露醇，發(fā)現(xiàn)乳糖、甘露醇所得噴干產(chǎn)物黏性較大，而微粉硅膠所得噴干產(chǎn)物呈干燥、疏松粉末狀態(tài)，最終選擇其作為支撐劑。

2.7.2 制備工藝、處方篩選 取3 份納米混懸劑，每份1 000 mL，分別按葫蘆素B 與微粉硅膠用量比1 ∶2、1 ∶3、1 ∶4 加入微粉硅膠，充分攪拌后得混懸液，得噴霧干燥參數(shù)為泵體積流量4.5 mL／min，進風口溫度120 ℃，噴嘴規(guī)格型號0.508 mm，出風口溫度55 ～65 ℃，氮氣體積流量0.5 m3／min，所得噴干產(chǎn)物呈干燥、疏松粉末狀態(tài)。

取葫蘆素B、物理混合物（葫蘆素B 與微粉硅膠比例1 ∶3）、葫蘆素B 納米混懸劑噴霧粉適量（葫蘆素B 含量均為10 mg），加入5 mL 介質(zhì)，置于透析袋中（截留分子量8 000 ～12 000 Da），設(shè)定溶出介質(zhì)為1 000 mL 0.5% SDS 溶液，溫度為37 ℃，轉(zhuǎn)速為75 r／min，于0.5、1、2、3、4、8、10、12 h 取樣，其間及時補液來維持溶出介質(zhì)總體積不變，過0.45 μm 微孔濾膜，測定累積溶出度，結(jié)果見圖7。由此可知，葫蘆素B、物理混合物12 h 內(nèi)累積溶出度分別為29.90%、31.21%；葫蘆素B 與微粉硅膠用量比為1 ∶2 時，噴霧粉4 h內(nèi)累積溶出度接近90%，8 h 內(nèi)基本溶出完畢，兩者比例增加至1 ∶3 后3 h 內(nèi)累積溶出度達95.23%，但增加至1 ∶4 時體外溶出行為無明顯變化，最終選擇1 ∶3 作為葫蘆素B 與微粉硅膠用量比。

圖7 葫蘆素B 體外溶出曲線（n＝3）Fig.7 In vitro dissolution curves for cucurbitacin B （n＝3）

2.8 納米混懸劑溶解度、質(zhì)量分數(shù)測定

2.8.1 溶解度 取過量葫蘆素B、物理混合物［葫蘆素B 與輔料（羥丙基纖維素、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠）比例同納米混懸劑噴霧粉］、葫蘆素B 納米混懸劑噴霧粉（葫蘆素B 與微粉硅膠用量比1 ∶3），置于10 mL 蒸餾水中，超聲處理30 min 至飽和，室溫下平衡2 d，取適量混懸液，過0.45 μm 微孔濾膜，測定葫蘆素溶解度。結(jié)果，三者溶解度分別為44.68、48.07、1.14 mg／mL，即原料藥在納米混懸劑噴霧粉中的溶解度增加至25.5 倍。

2.8.2 質(zhì)量分數(shù) 取納米混懸劑噴霧粉20 mg，置于100 mL 蒸餾水中，加入50% 乙醇超聲溶解，取適量，過0.45 μm 微孔濾膜，取1 mL 續(xù)濾液至10 mL 量瓶中，流動相定容，搖勻后測定葫蘆素B含量，計算其質(zhì)量分數(shù)。結(jié)果，葫蘆素B 在納米混懸劑噴霧粉中的平均質(zhì)量分數(shù)為14.03%。

2.9 晶型分析 取葫蘆素B、空白輔料（不加葫蘆素B，輔料比例同納米混懸劑噴霧粉）、物理混合物（葫蘆素B＋空白輔料）、葫蘆素B 納米混懸劑噴霧粉適量，進行X 射線粉末衍射（XRPD）分析，條件為Cu-Ka 靶，范圍（2θ）3°～45°，結(jié)果見圖8。由此可知，原料藥圖譜中出現(xiàn)大量晶型峰，表明它是一種晶型物質(zhì)； 物理混合物圖譜中仍可見原料藥主要晶型峰，但強度較弱者消失，可能是被輔料掩蔽，表明原料藥仍為晶型物質(zhì)； 納米混懸劑噴霧粉圖譜中僅見輔料晶型峰，而原料藥晶型峰全部消失，表明它轉(zhuǎn)變?yōu)闊o定形狀態(tài)。

圖8 各樣品XRPD 圖Fig.8 XRPD patterns for various samples

2.10 穩(wěn)定性考察 取葫蘆素B 納米混懸劑噴霧粉（葫蘆素B 與微粉硅膠用量比1 ∶3）適量，密封后置于溫度25 ℃、相對濕度60%的恒溫恒濕箱中，于0、1、3、6 個月取樣，測定累積溶出度，結(jié)果見圖9。由此可知，納米混懸劑噴霧粉放置6個月后體外溶出基本無變化，表明其穩(wěn)定性良好。

圖9 不同時間點葫蘆素B 納米混懸劑累積溶出度（n＝3）Fig.9 Accumulative dissolution rates of cucurbitacin B nanosuspensions at different time points （n＝3）

2.11 體內(nèi)藥動學研究

2.11.1 UPLC-MS／MS 分析條件 參考文獻［8］報道，ACQUITY BEH C18色譜柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm）； 流動相乙腈-0.1% 甲酸（30 ∶70）； 體積流量0.3 mL／min； 柱溫30 ℃； 進樣量5 μL。電噴霧離子源（ESI）； 噴霧電壓5 000 V； 離子源溫度400 ℃； 氣簾氣30 psi （1 psi ＝6.895 kPa）； 多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）； 檢測離子對葫蘆素Bm／z581.2～521.3，雌酚酮m／z269.3～145.1。

2.11.2 分組、造模與給藥 取葫蘆素B、物理混合物（比例同納米混懸劑噴霧粉）、葫蘆素B 納米混懸劑噴霧粉適量，加入0.5%CMC-Na 溶液制成藥液（葫蘆素B 質(zhì)量濃度均為1.5 mg／mL）。取空腹大鼠18 只，隨機分為3 組，按10 mg／kg 劑量灌胃給予相應(yīng)藥物，于0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12 h 吸入乙醚麻醉，并立即于眼眶后靜脈叢采血各約0.25 mL，置于肝素浸潤離心管中，振蕩混勻后3 000 r／min 離心3 min，取血漿，密封后置于-20 ℃冰箱中。

2.11.3 血漿樣品處理 將血漿樣品在37 ℃水浴中解凍后取50 μL，置于離心管中，加入40 μL 644 ng／mL 雌酚酮溶液、1 mL 乙腈，渦旋2 min，加入0.5 mL 乙酸乙酯，渦旋2 min，8 000 r／min離心15 min，取上清液，35 ℃氮氣吹干，50 μL乙腈復(fù)溶，8 000 r／min 離心10 min，取上清液。

2.11.4 線性關(guān)系考察 取雌酚酮對照品適量，乙腈制成644 ng／mL 溶液，作為內(nèi)標溶液。取葫蘆素B 對照品，乙腈依次稀釋至950、475、237.5、47.5、23.75、9.5 ng／mL，分別取50 μL 至離心管中，35 ℃氮氣吹干，50 μL 空白血漿復(fù)溶，得質(zhì)量濃度分別為950、475、237.5、47.5、23.75、9.5 ng／mL 的血漿對照品溶液，按“2.11.3” 項下方法處理，在“2.11.1” 項條件下進樣測定。以對照品質(zhì)量濃度為橫坐標（X），對照品、內(nèi)標峰面積比值為縱坐標 （Y）進行回歸，得方程為Y＝0.004 1X-0.413 7 （r ＝0.995 9），在9.5 ～950 ng／mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.11.5 專屬性試驗 取空白血漿、血漿對照品溶液（9.5 ng／mL）、給藥12 h 血漿樣品適量，在“2.11.1” 項條件下進樣測定，結(jié)果見圖10。由此可知，葫蘆素B、內(nèi)標保留時間分別為6.18、8.42 min，不受其他雜質(zhì)干擾，表明該方法專屬性良好。

圖10 葫蘆素B 典型MRM 色譜圖Fig.10 Typical MRM chromatograms of cucurbitacin B

2.11.6 方法學考察 取9.5、237.5、950 ng／mL血漿對照品溶液適量，同一天內(nèi)在“2.11.1” 項條件下進樣測定6 次，測得葫蘆素B、雌酚酮峰面積比值RSD 分別為2.94%、3.60%、3.97%； 同法測定6 d，每天1 次，測得兩者比值RSD 分別為5.65%、4.07%、4.26%，表明該方法日內(nèi)、日間精密度良好。取給藥0.5 h 血漿樣品適量，于0、2、4、6、8、12、24 h 在“2.11.1” 項條件下進樣測定，測得葫蘆素B、雌酚酮峰面積比值RSD為6.04%，表明血漿樣品在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。制備9.5、237.5、950 ng／mL 對照品溶液，在“2.11.1” 項條件下進樣測定，計算峰面積A； 取空白血漿50 μL，按“2.11.3” 項下方法處理，平行9 份，得空白基質(zhì)，分別加入9.5、237.5、950 ng／mL 對照品溶液 （含內(nèi)標）各50 μL，在“2.11.1” 項條件下進樣測定，計算峰面積B，計算提取回收率，公式為提取回收率＝ （A／B）×100%，另取9.5、237.5、950 ng／mL 對照品溶液（含內(nèi)標）適量，按“2.11.3” 項下方法處理，在“2.11.1” 項條件下進樣測定，計算峰面積C，計算基質(zhì)效應(yīng)，公式為基質(zhì)效應(yīng)＝ （B／C）×100%，結(jié)果葫蘆素B 提取回收率分別為93.69%、96.03%、95.84%，基質(zhì)效應(yīng)分別為 96.16%、95.73%、95.91%； 雌酚酮提取回收率為96.96%，基質(zhì)效應(yīng)為98.44%，表明基質(zhì)未對成分測定產(chǎn)生干擾。

2.11.7 結(jié)果分析 血藥濃度-時間曲線見圖11，采用DAS 3.2 軟件中的非房室模型計算藥動學參數(shù)，結(jié)果見表2。由此可知，與原料藥比較，物理混合物tmax、t1／2、Cmax、AUC0～t、AUC0～∞無明顯變化（P＞0.05），表明輔料不會顯著影響藥物吸收；與原料藥、物理混合物比較，納米混懸劑tmax縮短（P＜0.01），t1／2延長（P＜0.05，P＜0.01），Cmax、AUC0～t、AUC0～∞升高（P＜0.01），相對生物利用度與原料藥相比增加至4.32 倍。

表2 葫蘆素B 主要藥動學參數(shù)（x±s，n＝6）Tab.2 Main pharmacokinetic parameters for cucurbitacin B （±s，n＝6）

表2 葫蘆素B 主要藥動學參數(shù)（x±s，n＝6）Tab.2 Main pharmacokinetic parameters for cucurbitacin B （±s，n＝6）

注：與葫蘆素B 比較，△P＜0.05，△△P＜0.01； 與物理混合物比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01。

參數(shù)單位葫蘆素B物理混合物葫蘆素B 納米混懸劑tmaxh3.06±0.513.12±0.631.47±0.36△△＃＃t1／2h4.74±0.664.85±0.715.56±0.97△＃Cmaxng·mL-1236.08±74.72270.76±83.21787.69±216.08△△＃＃AUC0～tng·mL-1·h-11 026.34±176.421 092.34±194.354 438.91±726.44△△＃＃AUC0～∞ng·mL-1·h-11 085.61±185.901 128.67±204.584 586.55±777.61△△＃＃

圖11 葫蘆素B 血藥濃度-時間曲線（n＝6）Fig.11 Plasma concentration-time curves for cucurbitacin B （n＝6）

3 討論

本實驗發(fā)現(xiàn)，高壓均質(zhì)后混懸液體系溫度較高，故通過快速降溫（置于-20 ℃冰箱中）可使納米粒形態(tài)、粒徑瞬間變化程度較小，有利于形成粒徑均一的葫蘆素B 納米混懸劑［15］。納米混懸劑固化方法一般是加入凍干保護劑［13-14］，但輔料用量較大，成本較高。另外，乳糖、甘露醇容易吸潮，玻璃化溫度較低［16］，導致噴霧粉黏度較大，而微粉硅膠抗黏性強，支撐效果優(yōu)異，故本實驗以其為支撐劑，大大減少了輔料用量，也便于工業(yè)化生產(chǎn)，并且放置6 個月其穩(wěn)定性仍良好。

溶解度測定結(jié)果顯示，納米混懸劑將葫蘆素B溶解度增加至25.5 倍，3 h 內(nèi)后者基本全部溶出，可能與其粒徑減小、無定形狀態(tài)有關(guān)［17-18］。體內(nèi)藥動學研究結(jié)果顯示，葫蘆素B 納米混懸劑t1／2延長，可能是由于納米藥物胃腸道粘附性較強，會對t1／2產(chǎn)生影響［19］；tmax提前，可能與原料藥在前3 h內(nèi)溶出速率較快有關(guān)，同時其溶解度、累積溶出度大大提高，并轉(zhuǎn)變?yōu)闊o定形狀態(tài)，使得Cmax、生物利用度提高［20］。

目前，葫蘆素B 上市片含量不足0.1 mg／片［21］，而按本實驗所得最優(yōu)處方制成相同規(guī)格片劑后，微粉硅膠含量不足0.3 mg／片，遠低于小于2%的要求［22］。另外，十二烷基硫酸鈉口服致死劑量為0.5～5.0 g／kg［21］，而制成上述片劑后其含量約為0.15 mg／片，安全邊際較高。今后，將對葫蘆素B納米混懸劑噴霧粉片劑制備工藝、質(zhì)量標準、抗婦科腫瘤藥效學等方面展開研究，以期為臨床提供新型相關(guān)口服制劑。