• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    溫度、時(shí)間對(duì)不同方法檢測(cè)地下水中總大腸菌群的影響

    2024-01-17 00:12:52王璞玉
    城市地質(zhì) 2023年4期
    關(guān)鍵詞:影響因素

    摘 要:分別以溫度和時(shí)間為變量,比較了濾膜法、酶底物法檢測(cè)地下水中總大腸菌群的數(shù)量。研究表明,2種方法的檢測(cè)結(jié)果隨溫度變化趨勢(shì)基本一致,在35、36、37 ℃時(shí),大腸菌群生長最快,3個(gè)溫度下的檢測(cè)結(jié)果基本無差異(P < 0.05),而與28、32、40℃下的檢測(cè)結(jié)果相比差異明顯。濾膜法和酶底物法的培養(yǎng)時(shí)間在22、24、28 h時(shí)總大腸菌群基本無差異(P < 0.05),而16、18、20、32 h的總大腸菌群數(shù)差異明顯。因此為保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)準(zhǔn)確,2種檢測(cè)方法都應(yīng)嚴(yán)格控制培養(yǎng)溫度和時(shí)間。培養(yǎng)溫度為36±1 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為22~28 h。

    關(guān)鍵詞:培養(yǎng)溫度;培養(yǎng)時(shí)間;總大腸菌群數(shù);濾膜法;酶底物法;影響因素

    Temperature and time effects on different methods to detect total coliform bacteria in groundwater

    WANG Puyu1,2

    (1.Beijing Institute of Geo-Environment Monitoring, Beijing 100195, China;

    2.Urban Groundwater Safety Prevention and Control Technology Innovation Base, Beijing 100195, China)

    Abstract: This paper compared the number of total coliform bacteria detected by membrane filtration method and enzyme substrate method, using temperature and time as variables, respectively. The study shows that the detection results of the two methods basically agreed with the temperature change trend. At 35 ℃, 36 ℃ and 37 ℃, the coliform bacteria grew the fastest and showed almost no difference for the three temperatures (P<0.05), but varied significantly at 28 ℃, 32 ℃, and 40 ℃. The primary culture time of filter membrane method and enzyme substrate method were basically not different at 22 h, 24 h and 28 h (P< 0.05), while the total coliform number at 16 h, 18 h, 20 h and 32 h varied significantly. Therefore, in order to ensure the true accuracy of the experimental data, the culture temperature and time should be strictly controlled when using either of the two detection methods. The incubation temperature and time were 36 ± 1 ℃, and from 22 h to 28 h, respectively.

    Keywords: incubation temperature; incubation time; total coliform bacteria; membrane filtration method; enzyme substrate method; influencing factors

    地下水是城市生活和工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要水源,且許多城市地下水的使用量占整個(gè)城市供水量的一半以上,城市垃圾糞便對(duì)地下水源的污染深受專家重視(朱濟(jì)成,1981;畢桂超等,2010)。大腸菌群是一類與糞便污染有關(guān)的菌群(呂肖楠,2014),主要包括大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣克雷伯氏菌、檸檬酸桿菌和陰溝腸桿菌等,通常可作為水體糞便污染的指標(biāo)菌(張楊,2015)。指標(biāo)菌的數(shù)量與水體受糞便污染的程度呈正相關(guān),且這些菌中極可能存在腸道致病菌,對(duì)人體健康存在威脅(昝帥君等,2015),地下水中大腸菌群的研究一直以來備受關(guān)注(陳露等,2013;劉京梅等,2006)。

    在總大腸菌群檢測(cè)中,培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間是重要的控制因素,溫度異?;蚺囵B(yǎng)時(shí)間有誤均會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。特別是與有機(jī)指標(biāo)和無機(jī)指標(biāo)相比,微生物的檢測(cè)周期一般較長。全自動(dòng)固相萃取-高效液相色譜法檢測(cè)16種多環(huán)芳烴,40 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)了全部待測(cè)指標(biāo)的分離檢測(cè)(紀(jì)春苗等,2017);高效液相色譜法分離檢測(cè)鐵、銅、鋅,10 min內(nèi)便實(shí)現(xiàn)了Fe3+,Cu2+,Zn2+的同時(shí)分離測(cè)定(吳憲龍等,2000);微生物的檢測(cè)周期相對(duì)要長(≥22 h),檢測(cè)中若某個(gè)步驟出現(xiàn)偏差,時(shí)間、精力均會(huì)增加,嚴(yán)重影響檢測(cè)效率。因此,結(jié)果異常的快速定位分析以及清楚了解符合檢測(cè)的溫度區(qū)間、培養(yǎng)時(shí)間區(qū)間尤為重要。環(huán)境因素、測(cè)樣要求不同,檢測(cè)方法亦不同。GB/T5750.12-2006生活飲用水衛(wèi)生指標(biāo)規(guī)定了3種檢測(cè)方法:濾膜法、多管發(fā)酵法、酶底物法。多管發(fā)酵法適用范圍廣,可用于各種水樣的檢測(cè),但操作繁瑣,出具結(jié)果慢(鄒文燕等,2022);相對(duì)多管發(fā)酵法,濾膜法操作簡(jiǎn)便,出具結(jié)果快,適用范圍較窄,更適用于濁度較低、總大腸菌群較少的水樣(農(nóng)樹莘等,1993);而酶底物法相對(duì)前2種方法成本較高,但操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)周期短(孫杰,2020)、準(zhǔn)確度高,且無需無菌環(huán)境(田立平等,2019),可滿足大量水樣檢測(cè)及應(yīng)急水樣檢測(cè)工作的需要(趙春霞等,2009;王士花等,2017),已在國際上被廣泛認(rèn)可。綜上可知,不同方法檢測(cè)總大腸菌群在操作及出具結(jié)果周期等方面各有不同,而其在檢測(cè)大腸菌群時(shí)隨環(huán)境如何變化?變化是否一致?逯南南等人(2014)用酶底物法檢測(cè)研究了不同溫度、不同時(shí)間、是否為無菌環(huán)境等條件下的大腸菌群的變化,而對(duì)不同方法檢測(cè)大腸菌群時(shí)檢測(cè)結(jié)果隨溫度時(shí)間的變化、檢測(cè)結(jié)果是否一致未做研究。

    因此,本文分別選擇濾膜法和酶底物法(因多管發(fā)酵法流程復(fù)雜,檢測(cè)周期長,因此本文未選擇此方法),研究了總大腸菌群隨溫度、時(shí)間的變化,對(duì)比了2種檢測(cè)方法對(duì)大腸菌群隨環(huán)境變化的影響。此研究結(jié)果為濾膜法和酶底物法檢測(cè)總大腸菌群時(shí)控制培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)溫度提供了理論依據(jù),也為研究其他檢測(cè)方法對(duì)大腸菌群隨環(huán)境變化的影響提供了參考,進(jìn)而為深入研究不同方法下大腸菌群隨溫度、時(shí)間等其他環(huán)境條件變化的原理等提供了研究基礎(chǔ)。

    1? 材料與方法

    1.1? 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備與試劑

    1)濾膜法

    奧林巴斯顯微鏡,型號(hào) CX33;博訊壓力滅菌器,型號(hào) BXM-30R;生化培養(yǎng)箱產(chǎn)于上海一恒科學(xué)儀器有限公司,型號(hào)LRH-150;培養(yǎng)皿采用90 mm玻璃平皿;玻璃試管,直徑180 mm。培養(yǎng)基為品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基、乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,為BR(生物試劑),由北京奧博星生物科技有限公司購買。

    2)酶底物法

    程控定量封口機(jī),型號(hào) lk-2010;定量盤,97孔定量盤;定量瓶,100 mL一次性無菌定量瓶。培養(yǎng)基,Minimal Medium ONPG-MUG(簡(jiǎn)稱MMO MUG)培養(yǎng)基試劑,以上儀器設(shè)備及試劑均由西安立科有限公司購買;生化培養(yǎng)箱與濾膜法中的描述一致。

    1.2? 方法原理

    1)濾膜法。水樣通過0.45 ?m的濾膜(已經(jīng)高溫煮沸滅菌),細(xì)菌即被截留在濾膜上,將帶有濾膜的培養(yǎng)基于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后,將可疑菌落進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)——革蘭氏染色、乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),若革蘭氏染色出現(xiàn)特征菌,且乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中有產(chǎn)酸產(chǎn)氣現(xiàn)象,表明此特征菌為大腸菌群陽性。計(jì)數(shù)濾膜上出現(xiàn)的此特征菌群數(shù),即100 mL水樣中總大腸菌群數(shù)。

    2)酶底物法。水樣經(jīng)過選擇性培養(yǎng)基(MMO MUG)培養(yǎng)會(huì)產(chǎn)生了一類細(xì)菌菌群,此類菌群可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase),當(dāng)β-半乳糖苷酶將MMO MUG培養(yǎng)基中的色原底物分解,便釋放出色原體使培養(yǎng)基呈現(xiàn)顏色變化,通過計(jì)算定量盤中顏色變化的格數(shù)算出水樣中總大腸菌群數(shù)。

    1.3? 實(shí)驗(yàn)方法及步驟

    為了研究培養(yǎng)溫度、時(shí)間對(duì)大腸菌群數(shù)的影響是否會(huì)因檢測(cè)方法的不同而變化,本實(shí)驗(yàn)以濾膜法和酶底物法為檢測(cè)方法,對(duì)6個(gè)北京市采集的地下水樣(樣品編號(hào)分別為D1、D2、D3、D4、D5、D6)分別在28、32、35、36、37、40℃溫度下培養(yǎng)24 h后研究總大腸菌群數(shù)隨溫度的變化,在36℃下分別培養(yǎng)16、18、20、22、24、28、32 h研究總大腸菌群數(shù)隨時(shí)間的變化。

    每個(gè)水樣設(shè)置2個(gè)平行樣,以平行樣的均值作為檢測(cè)結(jié)果,且每一批水樣均設(shè)置空白培養(yǎng)基作為空白對(duì)照,設(shè)置質(zhì)控樣驗(yàn)證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。具體檢測(cè)步驟見表1。

    1.4? 計(jì)算方法

    1)濾膜法:總大腸菌群數(shù)按公式(1)計(jì)算濾膜上生長的總大腸菌群數(shù),以每100 mL水樣中的總大腸菌群數(shù)(CFU·100 mL-1)表示。公式(1)計(jì)算所得總大腸菌群數(shù)是以濾膜上生長的大腸菌群數(shù)計(jì)的。

    總大腸菌群菌落數(shù) = (數(shù)出的大腸菌群菌落數(shù)×100)/過濾的水樣體積 (1)

    2)酶底物法:計(jì)數(shù)經(jīng)培養(yǎng)后的定量盤中出現(xiàn)黃色反應(yīng)的孔數(shù),對(duì)照MPN表查出最終的大腸菌群數(shù)(MPN·100 mL-1)。

    對(duì)不同溫度和時(shí)間做的數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計(jì)17.0軟件進(jìn)行處理,以P<0.05作為差異標(biāo)準(zhǔn),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2? 結(jié)果與分析

    2.1? 溫度對(duì)總大腸菌群的影響

    1)濾膜法

    實(shí)驗(yàn)中溫度分別設(shè)置為28、32、35、36、37、40℃,培養(yǎng)時(shí)間為24 h,檢測(cè)結(jié)果如圖1-a所示。由圖1-a可知,以濾膜法檢測(cè)總大腸菌群時(shí),6個(gè)水樣的檢測(cè)值隨溫度變化趨勢(shì)基本一致,當(dāng)培養(yǎng)溫度為35~37℃時(shí),各溫度下總大腸菌群數(shù)相近,在此區(qū)間溫度對(duì)其生長基本無影響,當(dāng)溫度遠(yuǎn)離此區(qū)間時(shí),總大腸菌群數(shù)逐漸降低,表明低溫或者高溫均抑制大腸菌群的生長。

    2)酶底物法

    以酶底物法檢測(cè)水樣分別在溫度為28、32、35、36、37、40℃下培養(yǎng)24 h后的檢測(cè)結(jié)果,如圖1-b所示。

    結(jié)果表明,酶底物法與濾膜法檢測(cè)大腸菌群隨時(shí)間變化趨勢(shì)基本一致,不同培養(yǎng)溫度下的檢測(cè)結(jié)果存在差異。隨著培養(yǎng)溫度由35℃減小到28℃,D1-D6水樣的總大腸菌群數(shù)隨之降低,分別由41.9、18.5、8.1、45.4、<1、67.9 MPN·100 mL-1降低到20.8、2.0、1.0、17.1、<1、48.4 MPN·100 mL-1,差異明顯。而在35、36、37℃時(shí)總大腸菌群數(shù)基本無差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);在40℃時(shí),總大腸菌群相對(duì)35、36和37℃時(shí)的值偏小,36±1℃是大腸菌群的最佳培養(yǎng)溫度,實(shí)驗(yàn)中為保證結(jié)果準(zhǔn)確需嚴(yán)格控制培養(yǎng)溫度在此范圍(辛生等,2015)。

    綜合考慮,不同檢測(cè)方法對(duì)大腸菌群的最佳生長溫度36±1℃無影響。此溫度下大腸菌群酶的活性最高,生長代謝最快,然而當(dāng)培養(yǎng)溫度偏離時(shí),會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)結(jié)果,因此檢測(cè)水樣時(shí)需嚴(yán)格控制溫度。

    2.2? 時(shí)間對(duì)總大腸菌群的影響

    對(duì)于濾膜法,分為初培養(yǎng)階段和驗(yàn)證階段,初培養(yǎng)階段即本文所研究培養(yǎng)時(shí)間對(duì)大腸菌群影響階段,驗(yàn)證階段培養(yǎng)時(shí)間為定量(24 h),酶底物法只需培養(yǎng)無需驗(yàn)證。

    1)濾膜法

    濾膜法檢測(cè)總大腸菌群時(shí)的檢測(cè)結(jié)果如圖2-a所示。由圖2-a可知,不同初培養(yǎng)時(shí)間下大腸菌群總數(shù)不同,培養(yǎng)了16、18、20 h后,總大腸菌群數(shù)值與培養(yǎng)24 h時(shí)的總大腸菌群數(shù)(36 CFU·100 mL-1、16 CFU·100 mL-1、9 CFU·100 mL-1、47 CFU·100 mL-1、0、78 CFU·100 mL-1)相比明顯較低,可能是接種于培養(yǎng)基中的大腸菌群,未達(dá)到其生長周期,菌落未完全生成;在32 h時(shí),菌落數(shù)降低,可能是培養(yǎng)時(shí)間較久,導(dǎo)致許多菌體衰老死亡,衰老死亡的菌體會(huì)使鏡檢呈破裂狀,影響檢測(cè)結(jié)果。在培養(yǎng)了22、24、28 h后,經(jīng)每2個(gè)檢測(cè)數(shù)據(jù)之間的對(duì)比,總大腸菌群基本無差異(P<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2)酶底物法

    相比濾膜法,酶底物法操作無需在無菌環(huán)境下,增加了操作的簡(jiǎn)便性,與濾膜法類似的是,不同培養(yǎng)時(shí)間仍是影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素,水樣在36℃下分別培養(yǎng)16、18、20、22、24、28、32 h,見圖2-b。

    由圖2-b可看出,酶底物法檢測(cè)大腸菌群實(shí)驗(yàn)結(jié)果隨培養(yǎng)時(shí)間的變化呈現(xiàn)波動(dòng)趨勢(shì),在培養(yǎng)時(shí)間分別為16、18、20、32 h時(shí),檢測(cè)結(jié)果與培養(yǎng)24 h的檢測(cè)結(jié)果有明顯差異(P>0.05),而在培養(yǎng)時(shí)間分別為22、24、28 h時(shí),檢測(cè)結(jié)果無明顯差異。培養(yǎng)32 h后檢測(cè)結(jié)果與22、24、28 h時(shí)差異明顯,可能是因?yàn)镸MO MUG培養(yǎng)基中的抑制劑隨培養(yǎng)時(shí)間增加降低了抑制雜菌生長的效果,從而影響了檢測(cè)結(jié)果。因此酶底物法檢測(cè)總大腸菌群時(shí),培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)該控制在22~28 h,黃曉蓉(2018)、吳海鵬(2023)、逯南南等(2014)人的研究也得到此結(jié)果。

    綜合考慮,2種方法下濾膜法的初培養(yǎng)時(shí)間或酶底物法的培養(yǎng)時(shí)間都應(yīng)控制在22~28 h內(nèi),不足或者超出此范圍均影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。使用濾膜法時(shí)不可提早或推遲鏡檢、驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),使用酶底物法時(shí)不可提早或推遲計(jì)算定量盤中顏色變化格數(shù)。

    2.3? 質(zhì)量控制

    2.3.1? 空白對(duì)照

    檢測(cè)中,每批樣品對(duì)應(yīng)2個(gè)空白對(duì)照水樣,將空白對(duì)照水樣與接種水樣的培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng),以在36℃、培養(yǎng)24 h條件下的總大腸菌群結(jié)果為例,空白對(duì)照水樣結(jié)果如圖3所示。圖3-a為濾膜法實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照,結(jié)果無大腸菌群生長;圖3-b為酶底物法實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照,表明經(jīng)培養(yǎng)后定量盤無變色反應(yīng),大腸菌群未檢出。因此2種檢測(cè)方法均表明,在一系列操作后培養(yǎng)基及器皿未被污染且操作無誤,結(jié)果準(zhǔn)確。

    2.3.2? 質(zhì)控樣品結(jié)果

    為了驗(yàn)證整個(gè)檢測(cè)過程的準(zhǔn)確性,本文每批次樣品添加1個(gè)質(zhì)控樣(由CICC《中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心》購買)作為對(duì)照,由于2種方法的操作及計(jì)數(shù)單位不同,為了更直觀的反映檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,濾膜法和酶底物法采用2個(gè)不同的質(zhì)控樣品,編號(hào)分別為:CICC FTQC-75-06和CICC HJQC-003,培養(yǎng)溫度為36℃,檢測(cè)結(jié)果如表2所示。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,2種方法下檢測(cè)結(jié)果均可信。濾膜法檢測(cè)結(jié)果為123 CFU·100 mL-1,雖與真值180 CFU·100 mL-1有差異,但在95%置信范圍71~460 CFU·100 mL-1內(nèi);酶底物法的檢測(cè)結(jié)果雖與真值存在差異但也在95%置信范圍內(nèi)。2種方法均有效評(píng)價(jià)了隨著不同培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間總大腸菌群數(shù)的變化,此結(jié)果與徐莊艷(2022)研究成果一致。

    3? 結(jié)論及建議

    大腸菌群最適生長溫度為36±1℃,偏離此溫度區(qū)間菌株生長變緩,檢測(cè)結(jié)果偏小。使用濾膜法和酶底物法2種方法檢測(cè)大腸菌群,檢測(cè)結(jié)果隨溫度變化趨勢(shì)基本一致,檢測(cè)方法基本不會(huì)影響大腸菌群的最適培養(yǎng)溫度;2種檢測(cè)方法在培養(yǎng)時(shí)間為22~28 h時(shí)的檢測(cè)結(jié)果基本無差異,不足和超出此培養(yǎng)時(shí)間均會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。濾膜法、酶底物法檢測(cè)水中總大腸菌群時(shí)溫度和培養(yǎng)時(shí)間均為重要影響因素。

    使用不同檢測(cè)方法對(duì)大腸菌群最適培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間無影響,而2種方法在檢測(cè)時(shí)各有優(yōu)缺點(diǎn)。濾膜法相對(duì)酶底物法雖檢測(cè)成本較低,但操作復(fù)雜,需進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn),檢測(cè)周期長,檢測(cè)效率較低,且微生物檢測(cè)對(duì)樣品時(shí)效性要求較高(采樣后2 h完成檢測(cè)),為滿足地下水環(huán)境監(jiān)測(cè)的需要,酶底物法更適用當(dāng)前環(huán)境下的水樣檢測(cè)。

    隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展,被污染區(qū)域的風(fēng)險(xiǎn)可能會(huì)加大,地下水中大腸菌群數(shù)量、種類也會(huì)發(fā)生變化,為了更高效的檢測(cè)與分析,水質(zhì)總大腸菌群檢測(cè)新方法的研究勢(shì)在必行。且對(duì)地表水甚至污水等大腸菌群濃度較高、種類較多的水樣的分析,將是我們下一步研究的內(nèi)容。

    參考文獻(xiàn)

    畢桂超,孫紅繼,2010. 錦州地區(qū)地下水飲用水源污染因素及防治對(duì)策研究[J]. 中國環(huán)境管理干部學(xué)院學(xué)報(bào),20 (3):65-68.

    陳露,鄧敏,2013. 水質(zhì)檢測(cè)中大腸菌群的研究[J]. 科技資訊21:129.

    黃曉蓉,2018. 酶底物法檢測(cè)水中總大腸菌群大腸埃希氏菌的影響因素[J]. 醫(yī)藥前沿,8(12): 221-223.

    紀(jì)春苗,余群,2017. 全自動(dòng)固相萃取-高效液相色譜法測(cè)定水源水中的16種多環(huán)芳烴[J]. 分析儀器(6):70-75.

    劉京梅,張凌,趙君,梁偉,2006. 飲用水中大腸菌群檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊(cè))(2):117-121.

    逯南南,宋武昌,褚福敏,周維芳,孫紹華,賈瑞寶,2014. 酶底物法檢測(cè)水中總大腸菌群/大腸埃希氏菌的影響因素[J]. 中國給水排水,30(24):147-150.

    呂肖楠,2014. 大腸菌群快速檢測(cè)方法的研究[D]. 哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué).

    農(nóng)樹莘,梁恒進(jìn),覃倩萍,1993. 多管發(fā)酵法與濾膜法監(jiān)測(cè)水中總大腸菌群的比較[J]. 中國公共衛(wèi)生3:135.

    孫杰,2020. 3種總大腸菌群和大腸埃希氏菌酶底物法檢測(cè)試劑性能比較[J]. 凈水技術(shù),39(10):13-19.

    田立平,邢峰杰,王曉波,2019. 酶底物法檢測(cè)水中總大腸菌群[J]. 供水技術(shù),13(3):56-58.

    王士花, 彭國芳,安世慧,2017. 酶底物法和多管發(fā)酵法檢測(cè)水中總大腸菌群的比較分析[J]. 大家健康(上旬版),11(10):60.

    吳海鵬,2023. 酶底物法檢測(cè)水中總大腸菌群影響因素的探討[J]. 廣東化工,50(4):160-162.

    吳憲龍,所小沛,2000. 高效液相色譜法分離測(cè)定鐵銅和鋅[J]. 冶金分析(1):32-35.

    辛生,黃鑫, 張立夫,趙薇,楊修軍,2015. 檢測(cè)生活飲用水中總大腸菌群的酶底物法與濾膜法探討[J]. 中國衛(wèi)生工程學(xué),14(2):189.

    徐莊艷,2022. 水中總大腸菌群酶底物法、濾膜法與多管發(fā)酵法的比較[J]. 凈水技術(shù),41(S1):356-359.

    昝帥君,樊景鳳,明紅霞,郭建麗,王玥,常永凱,郭皓,2015. 遼河口糞便污染指示菌的時(shí)空分布特征[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),35(11):3 587-3 594.

    張楊,2015. 飲用水中總大腸菌群的檢測(cè)方法應(yīng)用:濾膜法和酶底物法的比較分析[J]. 產(chǎn)業(yè)與科技論壇,14(2):58-59.

    趙春霞,張哲海,厲以強(qiáng),梅卓華,郭曉潁,沈燕飛,2009. 酶底物法與多管發(fā)酵法和紙片法監(jiān)測(cè)環(huán)境水樣大腸菌群的比較[J]. 環(huán)境監(jiān)測(cè)管理與技術(shù),21 (2):63-64.

    朱濟(jì)成,1981. 防止城市垃圾糞便對(duì)地下水的污染[J]. 環(huán)境保護(hù)(5):10-11.

    鄒文燕,王小龍,王波,趙敏嫻,朱莉勤,2022. 一處水源水多管發(fā)酵法和酶底物法測(cè)定總大腸菌群的差異分析[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,32(3):297-300.

    收稿日期:2023-04-21;修回日期:2023-07-12

    基金項(xiàng)目:北京市監(jiān)測(cè)網(wǎng)運(yùn)行項(xiàng)目(2022年)資助

    作者簡(jiǎn)介:王璞玉(1993- ),女,碩士,工程師,主要從事水質(zhì)檢測(cè)及分析工作。E-mail:w1335280494@163.com

    引用格式:王璞玉,2023.溫度、時(shí)間對(duì)不同方法檢測(cè)地下水中總大腸菌群的影響[J].城市地質(zhì),18(4):113-118

    猜你喜歡
    影響因素
    房地產(chǎn)經(jīng)濟(jì)波動(dòng)的影響因素及對(duì)策
    零售銀行如何贏得客戶忠誠度
    醫(yī)保政策對(duì)醫(yī)療服務(wù)價(jià)格影響因素的探討
    東林煤礦保護(hù)層開采瓦斯抽采影響因素分析
    影響農(nóng)村婦女政治參與的因素分析
    高新技術(shù)企業(yè)創(chuàng)新績效影響因素的探索與研究
    水驅(qū)油效率影響因素研究進(jìn)展
    突發(fā)事件下應(yīng)急物資保障能力影響因素研究
    環(huán)衛(wèi)工人生存狀況的調(diào)查分析
    農(nóng)業(yè)生產(chǎn)性服務(wù)業(yè)需求影響因素分析
    商(2016年27期)2016-10-17 07:09:07
    亚洲av二区三区四区| 婷婷色综合www| 国产免费一级a男人的天堂| 涩涩av久久男人的天堂| 国产亚洲91精品色在线| 我的老师免费观看完整版| 成年av动漫网址| 亚洲色图综合在线观看| 一区二区三区精品91| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产精品久久久久成人av| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲精品第二区| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲中文av在线| 国产一区有黄有色的免费视频| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日日啪夜夜撸| 亚洲精品一区蜜桃| 精品国产国语对白av| 极品人妻少妇av视频| 看十八女毛片水多多多| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲自偷自拍三级| 夫妻性生交免费视频一级片| 晚上一个人看的免费电影| 日日爽夜夜爽网站| 视频区图区小说| 99re6热这里在线精品视频| 成人二区视频| 我要看日韩黄色一级片| 一本色道久久久久久精品综合| 蜜桃在线观看..| 亚洲精品第二区| 免费观看性生交大片5| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 久热这里只有精品99| 女性被躁到高潮视频| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 九草在线视频观看| 丝袜脚勾引网站| 欧美日韩精品成人综合77777| 新久久久久国产一级毛片| 国产精品欧美亚洲77777| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产淫语在线视频| 香蕉精品网在线| 精品国产国语对白av| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲无线观看免费| 热re99久久精品国产66热6| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 国产日韩欧美视频二区| 777米奇影视久久| 久久国产乱子免费精品| 亚洲精品456在线播放app| 国内精品宾馆在线| 免费av中文字幕在线| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲国产日韩一区二区| 如何舔出高潮| 老司机亚洲免费影院| 亚洲国产精品成人久久小说| 国模一区二区三区四区视频| 精品少妇内射三级| xxx大片免费视频| 亚洲精品视频女| 精品酒店卫生间| 国产在线一区二区三区精| 丝袜脚勾引网站| 青春草亚洲视频在线观看| 只有这里有精品99| 午夜免费男女啪啪视频观看| 老熟女久久久| 亚洲人与动物交配视频| 国产男女内射视频| av免费在线看不卡| 国产av精品麻豆| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲色图综合在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲欧洲国产日韩| 91久久精品电影网| 国产精品久久久久久久电影| 免费观看在线日韩| 内射极品少妇av片p| 精品视频人人做人人爽| 欧美3d第一页| 久久国内精品自在自线图片| 国产男女内射视频| 国产成人精品婷婷| 亚洲真实伦在线观看| 男女免费视频国产| 男人添女人高潮全过程视频| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲伊人久久精品综合| 黑丝袜美女国产一区| 老女人水多毛片| 天堂俺去俺来也www色官网| 免费观看性生交大片5| 99热网站在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 欧美+日韩+精品| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 伊人久久国产一区二区| 中文字幕制服av| 免费观看无遮挡的男女| 久久综合国产亚洲精品| 七月丁香在线播放| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产在线免费精品| 又爽又黄a免费视频| 精品一区二区三区视频在线| 国产亚洲最大av| 成人国产av品久久久| av在线app专区| 极品教师在线视频| 国内精品宾馆在线| 日韩欧美精品免费久久| 97在线视频观看| 日韩中字成人| 在线观看av片永久免费下载| 色5月婷婷丁香| 久久久久久久久久久丰满| 一本一本综合久久| 在线观看美女被高潮喷水网站| 成人国产麻豆网| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 黄色日韩在线| 在线天堂最新版资源| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品99久久久久久久久| 熟妇人妻不卡中文字幕| 热re99久久国产66热| 国产亚洲最大av| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲天堂av无毛| 国产高清不卡午夜福利| 美女中出高潮动态图| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲va在线va天堂va国产| av国产精品久久久久影院| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲av男天堂| 日韩av不卡免费在线播放| 在线播放无遮挡| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲不卡免费看| 国产精品久久久久成人av| 亚洲,一卡二卡三卡| 少妇的逼好多水| www.色视频.com| 亚洲精品自拍成人| 国产男女超爽视频在线观看| 另类亚洲欧美激情| 久久精品国产亚洲网站| 如何舔出高潮| 亚洲人与动物交配视频| 中文字幕av电影在线播放| 成人影院久久| 欧美日韩视频精品一区| 三级国产精品欧美在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲不卡免费看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 人人澡人人妻人| 一级a做视频免费观看| www.色视频.com| 在线观看免费日韩欧美大片 | av视频免费观看在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 乱码一卡2卡4卡精品| 青春草国产在线视频| 国产视频内射| 免费在线观看成人毛片| 在线观看免费高清a一片| 国产精品女同一区二区软件| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲av男天堂| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 在线天堂最新版资源| 国产黄片美女视频| 黄色一级大片看看| 五月开心婷婷网| 熟女av电影| 高清视频免费观看一区二区| 在线播放无遮挡| 日韩在线高清观看一区二区三区| 赤兔流量卡办理| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产精品国产av在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲av综合色区一区| 国产精品久久久久久久久免| 秋霞在线观看毛片| 天堂俺去俺来也www色官网| 色婷婷久久久亚洲欧美| 在现免费观看毛片| 性色avwww在线观看| 秋霞在线观看毛片| 麻豆乱淫一区二区| 成人美女网站在线观看视频| 三级国产精品片| 啦啦啦啦在线视频资源| 中文资源天堂在线| 久久久午夜欧美精品| 亚洲综合色惰| 啦啦啦在线观看免费高清www| 久久久久久久精品精品| 久久久久久久精品精品| 亚洲高清免费不卡视频| 91精品国产国语对白视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 免费看av在线观看网站| 国产精品伦人一区二区| 日本黄色片子视频| 国产美女午夜福利| 丰满饥渴人妻一区二区三| 一级av片app| a级毛色黄片| 亚洲成人一二三区av| 亚洲成人一二三区av| 一级爰片在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产精品国产av在线观看| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 777米奇影视久久| 高清av免费在线| 欧美另类一区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产av国产精品国产| 嫩草影院入口| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美3d第一页| 九九爱精品视频在线观看| 精品亚洲成国产av| 色5月婷婷丁香| 国产成人精品福利久久| 国产成人精品福利久久| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 一级,二级,三级黄色视频| 在线观看av片永久免费下载| 国产熟女午夜一区二区三区 | 国产精品福利在线免费观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 欧美bdsm另类| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲av男天堂| 欧美少妇被猛烈插入视频| av国产精品久久久久影院| 毛片一级片免费看久久久久| 欧美xxxx性猛交bbbb| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 午夜老司机福利剧场| 99九九在线精品视频 | 黑丝袜美女国产一区| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久久免费观看电影| 少妇被粗大猛烈的视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 久久ye,这里只有精品| 国产免费视频播放在线视频| 国产美女午夜福利| 国产日韩欧美视频二区| 欧美3d第一页| 老熟女久久久| 国产在线视频一区二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 黄色一级大片看看| 我的老师免费观看完整版| 免费观看av网站的网址| 日本与韩国留学比较| 久久精品国产自在天天线| 亚洲国产av新网站| 国产永久视频网站| 国产黄色免费在线视频| 国产极品天堂在线| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国产精品久久久久久久久免| 国产伦精品一区二区三区四那| 看十八女毛片水多多多| 日韩欧美 国产精品| 国产伦精品一区二区三区视频9| 精品国产乱码久久久久久小说| xxx大片免费视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 在线 av 中文字幕| 热re99久久精品国产66热6| 精品一品国产午夜福利视频| av有码第一页| 看非洲黑人一级黄片| 精品一区在线观看国产| 国内精品宾馆在线| 男人狂女人下面高潮的视频| 18+在线观看网站| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲精品一二三| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产成人精品婷婷| 国模一区二区三区四区视频| 曰老女人黄片| 高清在线视频一区二区三区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 少妇高潮的动态图| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲国产av新网站| av天堂久久9| 国产老妇伦熟女老妇高清| 中文字幕免费在线视频6| 国产在线男女| 大陆偷拍与自拍| 中文欧美无线码| 青青草视频在线视频观看| 老司机亚洲免费影院| 精品亚洲成a人片在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 亚洲久久久国产精品| 亚洲电影在线观看av| av福利片在线| 高清不卡的av网站| 99热6这里只有精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 麻豆成人av视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 国产亚洲欧美精品永久| 校园人妻丝袜中文字幕| 午夜激情福利司机影院| 久久毛片免费看一区二区三区| 日本黄大片高清| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 伊人久久国产一区二区| 日本欧美视频一区| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲国产精品成人久久小说| 少妇精品久久久久久久| 国产精品99久久久久久久久| 男女边摸边吃奶| 一级a做视频免费观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲av.av天堂| 午夜91福利影院| 特大巨黑吊av在线直播| 欧美激情国产日韩精品一区| 午夜av观看不卡| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 少妇的逼水好多| 男女免费视频国产| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲国产最新在线播放| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲av二区三区四区| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲高清免费不卡视频| 午夜精品国产一区二区电影| 九草在线视频观看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产成人免费无遮挡视频| 欧美丝袜亚洲另类| 国产欧美日韩精品一区二区| 日韩人妻高清精品专区| av又黄又爽大尺度在线免费看| 大香蕉97超碰在线| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 天天操日日干夜夜撸| 黑人猛操日本美女一级片| 性色av一级| 日韩在线高清观看一区二区三区| 在线观看av片永久免费下载| 日韩三级伦理在线观看| 一本大道久久a久久精品| 乱码一卡2卡4卡精品| 大话2 男鬼变身卡| 男女国产视频网站| av女优亚洲男人天堂| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲av中文av极速乱| 黑人猛操日本美女一级片| 国产 精品1| 在线观看一区二区三区激情| 在线看a的网站| 欧美国产精品一级二级三级 | 黑丝袜美女国产一区| 日韩中字成人| 日日摸夜夜添夜夜爱| 又爽又黄a免费视频| 日韩av不卡免费在线播放| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 婷婷色av中文字幕| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 日本wwww免费看| 亚洲精品国产av成人精品| 精品一区二区三卡| av在线观看视频网站免费| 天堂8中文在线网| 美女视频免费永久观看网站| 性高湖久久久久久久久免费观看| 精品一区二区免费观看| 热99国产精品久久久久久7| 久久亚洲国产成人精品v| 69精品国产乱码久久久| 美女内射精品一级片tv| a级一级毛片免费在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 精品少妇内射三级| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产亚洲5aaaaa淫片| 嫩草影院入口| 熟女av电影| 97超视频在线观看视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产av国产精品国产| 欧美成人精品欧美一级黄| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一边亲一边摸免费视频| 久久人人爽人人片av| 成年人免费黄色播放视频 | 国产精品一区二区在线不卡| 99久久人妻综合| 国产精品福利在线免费观看| av国产精品久久久久影院| av在线老鸭窝| 婷婷色麻豆天堂久久| 久久精品久久精品一区二区三区| 精品人妻一区二区三区麻豆| 在线看a的网站| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲国产精品国产精品| 边亲边吃奶的免费视频| 人人澡人人妻人| 97在线人人人人妻| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | videos熟女内射| 日韩av不卡免费在线播放| 久久99热这里只频精品6学生| av黄色大香蕉| 2022亚洲国产成人精品| 91精品国产国语对白视频| 国产免费又黄又爽又色| 午夜av观看不卡| 日韩免费高清中文字幕av| 国产av一区二区精品久久| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 成年人午夜在线观看视频| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲综合色惰| 精品人妻熟女av久视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产精品免费大片| 国产亚洲一区二区精品| 成人亚洲精品一区在线观看| 有码 亚洲区| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲精品色激情综合| 亚洲,一卡二卡三卡| av视频免费观看在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲精品日本国产第一区| 波野结衣二区三区在线| 2018国产大陆天天弄谢| 午夜精品国产一区二区电影| 国产永久视频网站| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产精品久久久久久av不卡| 久久久欧美国产精品| 国产伦精品一区二区三区视频9| 久久精品夜色国产| 十八禁网站网址无遮挡 | 日本av手机在线免费观看| 国产高清三级在线| 日韩伦理黄色片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲精品国产成人久久av| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲伊人久久精品综合| 一级黄片播放器| 国产精品久久久久久久电影| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久久久国产网址| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 精品久久久噜噜| 少妇被粗大猛烈的视频| 乱系列少妇在线播放| 国产有黄有色有爽视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 成人午夜精彩视频在线观看| 黑人高潮一二区| 午夜精品国产一区二区电影| 2022亚洲国产成人精品| 老司机亚洲免费影院| av有码第一页| 国产高清国产精品国产三级| 一级爰片在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产精品久久久久久精品电影小说| 亚洲经典国产精华液单| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 校园人妻丝袜中文字幕| 赤兔流量卡办理| 一级a做视频免费观看| 免费少妇av软件| 看非洲黑人一级黄片| 99热这里只有是精品在线观看| 天天操日日干夜夜撸| 日韩欧美精品免费久久| 黄色配什么色好看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲欧美色中文字幕在线| 人人妻人人澡人人看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 天天操日日干夜夜撸| 人妻人人澡人人爽人人| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲国产欧美在线一区| 成年av动漫网址| 国产av又大| 一级a爱视频在线免费观看| 91av网站免费观看| 99久久综合免费| 宅男免费午夜| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 一本综合久久免费| 十八禁网站免费在线| 欧美国产精品一级二级三级| 精品亚洲成国产av| 国产精品 国内视频| 亚洲情色 制服丝袜| 80岁老熟妇乱子伦牲交| av又黄又爽大尺度在线免费看| 不卡一级毛片| 在线看a的网站| 国产成+人综合+亚洲专区| 免费高清在线观看日韩| 国产99久久九九免费精品| 国产免费av片在线观看野外av| 一级片'在线观看视频| 国产在线一区二区三区精| 久9热在线精品视频| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲一区中文字幕在线| 免费观看人在逋| 国产成+人综合+亚洲专区| 90打野战视频偷拍视频| 国精品久久久久久国模美| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 成在线人永久免费视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产精品一区二区免费欧美 | 亚洲av片天天在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 下体分泌物呈黄色| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久人人97超碰香蕉20202| 精品久久蜜臀av无| 18禁国产床啪视频网站| 在线观看免费高清a一片| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 麻豆av在线久日| 韩国高清视频一区二区三区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 丝袜人妻中文字幕| 韩国高清视频一区二区三区| 国产精品偷伦视频观看了| 久久久久国产精品人妻一区二区| cao死你这个sao货| 美女国产高潮福利片在线看| 精品免费久久久久久久清纯 | 91成年电影在线观看| 国产精品久久久久成人av| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 天堂中文最新版在线下载| 午夜福利影视在线免费观看| 男女之事视频高清在线观看| 国产在视频线精品| 亚洲九九香蕉| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲全国av大片| 99久久国产精品久久久| 精品人妻1区二区| 免费在线观看黄色视频的| 一级黄色大片毛片| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲天堂av无毛| 午夜精品国产一区二区电影|