雞精液保存技術(shù)的研究進(jìn)展

李曉元

（丹東市振安區(qū)樓房鎮(zhèn)人民政府，遼寧 丹東 118100）

禽類養(yǎng)殖業(yè)的飛速發(fā)展，取決于選育、繁殖禽類優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源。雞的人工授精始于20世紀(jì)30年代，雞的按摩采精技術(shù)沿用至今，人工授精技術(shù)的不斷發(fā)展，突破了自然交配的局限性，繁育出品質(zhì)優(yōu)良的后代，有效地提升了繁殖效率，提升了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)收益。本文探討雞精液保存技術(shù)的研究進(jìn)展，旨在加快禽類養(yǎng)殖現(xiàn)代化進(jìn)程。

1 雞精液冷凍保存技術(shù)

在實(shí)際禽類生產(chǎn)過(guò)程中，精液保存主要有以下3種方法，即常溫保存、低溫保存和冷凍保存。冷凍保存技術(shù)能夠使精液活力保存持久，對(duì)于物種保護(hù)及禽畜生產(chǎn)發(fā)展等方面具有積極影響。在反芻動(dòng)物精液冷凍保存法的研究中，研究時(shí)間較早且廣泛應(yīng)用的為奶牛精液冷凍保存技術(shù)。但是精液冷凍技術(shù)在實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)中存在許多困難，選擇適宜的冷凍保護(hù)劑，配備專業(yè)冷凍保存設(shè)備，嚴(yán)格按照的冷凍與解凍程序操作，否則易發(fā)生精子冷凍休克；運(yùn)輸不便，并且冷凍精子人工授精成功率顯著低于新鮮精子。

雞精液冷凍保存技術(shù)研究起步較晚，精液冷凍技術(shù)處于逐步完善階段。雞新鮮精液人工授精成功率高達(dá)90%，然而，雞精液冷凍保存后，受精率約55%。同家畜的精子相比，雞精子頭尾部更長(zhǎng)，在冷凍保存和解凍時(shí)易受損傷，造成精子不能直線游動(dòng)，使受精率降低。研究者為了保證雞精液的品質(zhì)，根據(jù)精液冷凍原理和雞精子的特點(diǎn)，對(duì)冷凍、解凍程序、冷凍稀釋液、添加抗氧化劑等方面開(kāi)展深入研究。國(guó)外研究者將8%甘油用作冷凍保護(hù)劑、將蝦青素作為抗氧化劑添加至精液稀釋液，使25周雞精液的冷凍保存時(shí)間延長(zhǎng)至30天，解凍后檢測(cè)精子成活率達(dá)68.8%，是雞精液冷凍保存時(shí)間最長(zhǎng)的相關(guān)報(bào)道。

2 雞精液的液態(tài)保存技術(shù)

雞精液在常溫和低溫條件下保存時(shí)為液態(tài)，因而，常溫與低溫保存技術(shù)也稱之為液態(tài)保存法。此方法產(chǎn)生于1977年，國(guó)外研究者將一種磷酸鹽稀釋液應(yīng)用于家禽精液保存技術(shù)中。雞精液在未稀釋的情況下，受精能力會(huì)迅速降低，精液稀釋后使體外保存時(shí)間延長(zhǎng)。保存溫度、稀釋液種類等均對(duì)雞精液保存效果產(chǎn)生一定影響。國(guó)外科學(xué)家將被稀釋的雞精液保存于低溫條件下24小時(shí)，受精率較好。我國(guó)研究人員將pH、滲透壓與稀釋液的組成進(jìn)行優(yōu)化，以滿足精液保存所需能量，研究顯示，pH7.2～7.4，滲透壓330～120摩爾，保存溫度0～5℃，保存5日，精子成活率大于50%。但是冷凍保存與低溫保存會(huì)不同程度損傷雞精子的超微結(jié)構(gòu)，對(duì)精子活力和受精率造成影響。

與冷凍保存技術(shù)相比，液態(tài)保存法無(wú)需購(gòu)買額外的設(shè)備、操作步驟簡(jiǎn)單、保存成本較低、液態(tài)保存的精液受精率較高、可控性較強(qiáng)、易于應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐中。精液常溫保存技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于豬精液的保存中。雞為卵生動(dòng)物，其產(chǎn)卵、繁殖頻率較高，產(chǎn)蛋期的種母雞應(yīng)定期人工授精，公雞精液在種母雞生殖系統(tǒng)內(nèi)存活時(shí)間短，授精周期受限。為了保障種蛋的受精率，通常情況下，每5日需對(duì)種母雞人工授精一次，所需精液新鮮且量多，一般在半小時(shí)內(nèi)完成人工授精。規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)的工作人員需在上午和下午分批次進(jìn)行人工授精，工作量較大。結(jié)合雞授精周期短、多精液量和高受精率的需求，雞精液液態(tài)保存技術(shù)應(yīng)用前景更加廣闊。

3 影響雞精液保存的因素

不同種類、不同日齡的雞、精液自身品質(zhì)、稀釋液種類、稀釋倍數(shù)、抗氧化劑、冷凍劑、滲透壓、pH、光照、保存容器、保存時(shí)長(zhǎng)和溫度、微生物污染等均可影響雞精子活力和雞精液品質(zhì)。有報(bào)道，在同一種冷凍保存條件下，不同品種的雞精液精子復(fù)蘇成功率與受精率也存在差異。我國(guó)南方高溫多雨，熱應(yīng)激使雞精液品質(zhì)降低，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，精子代謝過(guò)程中需消耗較多的能量物質(zhì)，還會(huì)產(chǎn)生活性氧、乳酸等，對(duì)精子受精能力產(chǎn)生影響?；钚匝跏怯绊懢罕４嫫焚|(zhì)的重要因素。當(dāng)活性氧達(dá)到一定量時(shí)，會(huì)損傷精子膜質(zhì)系統(tǒng)的脂質(zhì)，對(duì)精子正常功能造成影響。與其他畜類相比，雞精子質(zhì)膜成分易產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化損傷。在精液常溫保存條件下，加入適當(dāng)比例的稀釋液，抗氧化劑有利于提升精液品質(zhì)，減少活性氧自由基對(duì)精液的負(fù)面影響。研究顯示，將維生素C添加至稀釋液中，可以提升精子活力與精液品質(zhì)。國(guó)外研究人員發(fā)現(xiàn)，在低溫保存羊精液時(shí)，稀釋液中添加200微克/毫升的維生素C，對(duì)精子活力無(wú)影響，當(dāng)濃度為500～1000微克/毫升時(shí)，精子存活時(shí)間明顯延長(zhǎng)。褪黑素作為抗氧化劑，能夠保護(hù)細(xì)胞的核酸、蛋白質(zhì)等成分。研究表明，0.25毫克/毫升褪黑素能夠明顯提升精子的活力、頂體完整性、線粒體活性和活率。但隨褪黑素濃度的增加，反而抑制精液保存效果。研究者發(fā)現(xiàn)，蝦青素抗氧化性較強(qiáng)，將0.20微克/毫升的青蝦素添加至稀釋液中，常溫保存2日，精子頂體、活力、質(zhì)膜完整率保護(hù)效果較好；低溫條件下保存3日后，受精率明顯高于對(duì)照組，可達(dá)63%。在稀釋液中添加0.2毫克/毫升的番茄紅素，在常溫保存條件下，可以有效提升抗氧化酶活性，但是與蝦青素稀釋液相比，番茄紅素制作成本較高。目前，可添加至稀釋液中的抗氧化劑包括維生素C、褪黑素、過(guò)氧化氫酶、超氧化物歧化酶、蝦青素、番茄紅素、谷胱甘肽等。

雞精液量少，黏度較大、密度高，常溫條件下易聚集，受精率低。通過(guò)對(duì)雞精液稀釋，加大精液體積，使精子密度降低，提升授精次數(shù)，提高精液利用率。計(jì)算原雞精液的濃度與適宜的稀釋倍數(shù)能夠提高受精成功率。種蛋的受精率受人工授精時(shí)間和人工授精間隔因素有關(guān)。研究報(bào)道，每次在種母雞生殖系統(tǒng)內(nèi)輸入約0.5億個(gè)有效精子，在間隔5日后可保證種蛋的受精率。

稀釋液的p H 緩沖液和滲透壓，既可以為精子提供所需能量，又可以使精細(xì)胞的滲透壓pH保持穩(wěn)定，使精子壽命延長(zhǎng)。在稀釋液中添加磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉，在常溫條件下保存雞精液，將雞精子存活時(shí)間延長(zhǎng)至72小時(shí)，可以保護(hù)精子的正常形態(tài)與精子活力。在稀釋液中添加蔗糖或果糖，能夠?yàn)榫犹峁┠芰?，降低精子代謝速度，在提高精子活率、活力方面效果良好。添加N-乙酰半胱氨酸、次氯酸等的稀釋液，能夠顯著降低精細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基濃度，抵抗氧化壓力，減緩精子代謝。有研究者發(fā)現(xiàn)，在稀釋液中添加0.25毫摩爾/升、0.5毫摩爾/升的N-乙酰半胱氨酸，能夠使雞精液低溫保存時(shí)間極顯著地延長(zhǎng)，同時(shí)提升精子生存指數(shù)，但是當(dāng)濃度超過(guò)1毫摩爾/升時(shí)，則影響精子存活時(shí)間和精子生存指數(shù)。

4 結(jié)束語(yǔ)

禽類人工授精技術(shù)的發(fā)展推動(dòng)養(yǎng)殖業(yè)現(xiàn)代化、規(guī)?；l(fā)展，雞精液的品質(zhì)與保存技術(shù)影響著養(yǎng)殖成本與雞產(chǎn)品的質(zhì)量。