鏈狀裸甲藻對翡翠貽貝清濾率的影響

許翠婭，楊 芳，陳小紅，陳財(cái)珍

(福建省水產(chǎn)研究所，福建省海洋生物增養(yǎng)殖與高值化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 廈門 361013)

清濾率(Clearance rate，CR)是指單位時(shí)間內(nèi)水生生物攝食水中顆粒餌料時(shí)濾過的水的體積。它不僅直接反映了生物的攝食情況，而且也是一個(gè)重要的反映生物自身生理狀態(tài)的指標(biāo)。因此，雙殼類清濾率的改變可以在一定程度上反映出污染物的影響程度[1]。

鏈狀裸甲藻(Gymnodiniumcatenatum)是高毒性甲藻，可產(chǎn)生麻痹性貝類毒素(Paralytic shellfish toxins，PST)，也是中國沿海常見的赤潮藻種之一，在中國許多海區(qū)曾檢測到其游動細(xì)胞和孢囊，并在局部海域形成赤潮[2]。2017年6月，福建省漳州、泉州海域曾發(fā)生鏈狀裸甲藻赤潮，造成了赤潮海域的貽貝、牡蠣、扇貝等濾食性貝類體內(nèi)PST含量超標(biāo)，并導(dǎo)致多地民眾因食用翡翠貽貝(Pernaviridis)而中毒的事件發(fā)生[3]。已有研究表明，產(chǎn)毒藻能夠?qū)ω愵惍a(chǎn)生影響，如塔瑪亞歷山大藻(Alexandriumtamarense)會抑制紫貽貝(Mytilusedulis)的清濾率[1]；微小亞歷山大藻(Alexandriumminutum)會影響菲律賓蛤仔(Ruditapesphilippinesis)的生理狀態(tài)，高密度產(chǎn)毒藻對貝類會有一定的攝食抑制[4]。關(guān)于鏈狀裸甲藻對濾食性貝類的影響報(bào)道較少。

暴露于產(chǎn)毒藻中的貝類的清濾率的變化可以直接反映出其對毒素的敏感性，并能夠指示隨后的毒素累積情況[5]。本文以鏈狀裸甲藻為產(chǎn)毒藻，以沿岸海域常見無毒硅藻中肋骨條藻(Skeletonemacostatum)為對照，研究鏈狀裸甲藻對翡翠貽貝清濾率的影響，為研究PST在濾食性貝類體內(nèi)的累積規(guī)律、貝類脫毒與凈化提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 受試生物

試驗(yàn)用鏈狀裸甲藻和中肋骨條藻藻液均由廈門大學(xué)海洋微型生物保種中心提供，鏈狀裸甲藻藻種于2017年6月分離自泉州海域。翡翠貽貝來自漳州東山烏礁灣海域，選擇活力好、健康、無外傷的翡翠貽貝運(yùn)送至福建省水產(chǎn)研究所生態(tài)試驗(yàn)場。將翡翠貽貝置于25 L玻璃水槽中，按2 ind/L的試驗(yàn)密度進(jìn)行馴養(yǎng)。馴養(yǎng)3 d，期間每日定時(shí)換水，并投喂中肋骨條藻(水體中藻液初始密度為5.0×106cells/L)2次，全天充氣。馴養(yǎng)期間翡翠貽貝活力良好、攝食正常，死亡率為0.3%。試驗(yàn)前隨機(jī)抽取30只翡翠貽貝進(jìn)行生物性狀測量，其殼寬為(7.0±0.3)cm、殼長為(3.2±0.1)cm、全重為(25.1±2.7)g。

1.2 試驗(yàn)方法與條件

試驗(yàn)所用海水來自廈門海域。試驗(yàn)期間海水鹽度為(30.0±0.1)，水溫為(23±1)℃，pH為8.00～8.12，溶解氧濃度為7.19～7.38 mg/L。

1.2.1 1 h清濾率試驗(yàn)

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，試驗(yàn)組和對照組分別設(shè)6個(gè)試驗(yàn)梯度，試驗(yàn)組(G1～G6組)采用鏈狀裸甲藻投喂翡翠貽貝，藻液密度分別為2.5×104、5.0×104、1.0×105、2.5×105、5.0×105和1.0×106cells/L；對照組(S1～S6組)采用中肋骨條藻投喂翡翠貽貝，藻液密度分別為1.0×105、2.5×105、5.0×105、1.0×106、2.5×106和5.0×106cells/L；各組均設(shè)3個(gè)平行。將大小一致、健康的翡翠貽貝放入3 L玻璃燒杯內(nèi)，每個(gè)燒杯盛3只翡翠貽貝、1.5 L藻液，微充氣，1 h后取海水和翡翠貽貝樣品。海水樣品取樣1 L，用魯哥氏液固定，在實(shí)驗(yàn)室靜置24 h后濃縮、計(jì)數(shù)，用于檢測藻液密度，計(jì)算單個(gè)翡翠貽貝的清濾率。取出各組翡翠貽貝的貝肉，置于105 ℃烘箱內(nèi)烘干4 h后稱重，用于換算翡翠貽貝單位干重的清濾率。

單位個(gè)體清濾率(CRind)計(jì)算公式采用Coughlan J(1969)提出的公式[6]：

CRind=V×(lnC0-lnCt)/(n×t)

(1)

由于翡翠貽貝的個(gè)體大小存在差異，本文測定了試驗(yàn)組和對照組翡翠貽貝的軟體部干重，參考楊曉新等[7]文獻(xiàn)計(jì)算公式，換算為單位干重清濾率(CRmass)。

CRmass=V×(lnC0-lnCt)/(w×t)

(2)

式(1)和(2)中：V為試驗(yàn)水體的體積(L)；C0、Ct為試驗(yàn)開始和試驗(yàn)t時(shí)間的藻細(xì)胞密度(cells/L)；n為試驗(yàn)翡翠貽貝個(gè)數(shù)(ind)；W為試驗(yàn)翡翠貽貝軟體部干重(g)；t為試驗(yàn)時(shí)間(h)。

1 h清濾率試驗(yàn)分別采用公式(1)和(2)進(jìn)行計(jì)算；長期清濾率試驗(yàn)由于無法準(zhǔn)確獲得每批次翡翠貽貝樣品的干重，因此采用公式(1)計(jì)算清濾率。

1.2.2 長期清濾率試驗(yàn)

在開展長期清濾率試驗(yàn)前，對翡翠貽貝攝食作用下藻液密度的變化開展預(yù)試驗(yàn)，試驗(yàn)周期12 h，以確定投喂藻液頻率。根據(jù)1 h清濾率試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置1個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對照組，試驗(yàn)組投喂5.0×105cells/L鏈狀裸甲藻，對照組投喂5.0×106cells/L中肋骨條藻，各組均設(shè)3個(gè)平行。從馴養(yǎng)3 d的翡翠貽貝中，選出大小一致、健康的貽貝置于盛有12 L海水的玻璃水槽中，每組24只貽貝×3個(gè)平行，投喂后分別于0.5、1、2、4、6、8、10、12 h取適量海水樣品用于藻細(xì)胞計(jì)數(shù)。

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果開展翡翠貽貝攝食鏈狀裸甲藻的累積試驗(yàn)(10 d)和排出試驗(yàn)(28 d)，同步進(jìn)行清濾率試驗(yàn)，試驗(yàn)周期為38 d。試驗(yàn)設(shè)置1個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對照組，試驗(yàn)組投喂5.0×105cells/L鏈狀裸甲藻，對照組投喂5.0×106cells/L中肋骨條藻，各組均設(shè)3個(gè)平行。從馴養(yǎng)3 d的翡翠貽貝中，選出大小一致、健康的貽貝，每組40只貽貝×3個(gè)平行，分別置于盛有20 L海水的玻璃水槽中。每日上午定時(shí)換水1次，定時(shí)投喂藻液2次(08：00和20：00)。試驗(yàn)開始后分別在累積1、2、4、6、8和10 d的09：00(投喂藻液后1 h)，試驗(yàn)組和對照組各取海水樣品100 mL用于藻細(xì)胞計(jì)數(shù)。累積試驗(yàn)結(jié)束后，試驗(yàn)組改投喂中肋骨條藻(試驗(yàn)密度5.0×106cells/L)，開始排出試驗(yàn)。每隔4 d的09：00(投喂藻液后1 h)，試驗(yàn)組和對照組各取海水樣品100 mL進(jìn)行藻細(xì)胞計(jì)數(shù)，并計(jì)算翡翠貽貝的清濾率。

1.3 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用SPSS 23軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析和T檢驗(yàn)，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 1 h清濾率試驗(yàn)中翡翠貽貝清濾率的變化

當(dāng)鏈狀裸甲藻密度在2.5×104～1.0×106cells/L之間時(shí)，翡翠貽貝單位個(gè)體清濾率的波動范圍在(1.38±0.05)～(2.64±0.03)L/(ind·h)之間，呈先升高后降低的趨勢，不同密度組之間清濾率差異顯著(P<0.05)(圖1)。當(dāng)藻液密度為2.5×104cells/L時(shí)，翡翠貽貝清濾率最小。隨著藻液密度的增大，翡翠貽貝清濾率逐漸升高，當(dāng)藻液密度升高至2.5×105cells/L，達(dá)到赤潮基準(zhǔn)密度時(shí)(鏈狀裸甲藻體長48～65 μm，根據(jù)HY/T 069-2005《海洋赤潮監(jiān)測技術(shù)規(guī)程》，對應(yīng)的赤潮基準(zhǔn)密度為>2×105cells/L)[8]，翡翠貽貝清濾率最大，為(2.64±0.03)L/(ind·h)。隨著藻液密度的繼續(xù)升高，翡翠貽貝清濾率顯著下降(P<0.05)，5.0×105cells/L試驗(yàn)組和1.0×106cells/L試驗(yàn)組清濾率分別為(2.38±0.06)、(1.52±0.02)L/(ind·h)。對照組隨著中肋骨條藻密度從1.0×105cells/L逐漸增加至5.0×106cells/L，翡翠貽貝單位個(gè)體清濾率呈逐漸升高的趨勢，從(1.50±0.01)L/(ind·h)升高至(2.95±0.02)L/(ind·h)，不同密度組之間清濾率差異顯著(P<0.05)(圖2)。

注：G1～G6鏈狀裸甲藻藻液密度分別為2.5×104、5.0×104、1.0×105、2.5×105、5.0×105、1.0×106 cells/L。同一單位下，不同字母表示清濾率差異顯著(P<0.05)，相同則差異不顯著(P>0.05)。下同。Notes：The algal density of G.catenatum were 2.5×104，5.0×104，1.0×105，2.5×105，5.0×105，1.0×106 cells/L，respectively. Under the same unit，the different letters in the figure indicated that there was a significant difference in the clearance rate(P<0.05)，or the same letters meant no difference(P>0.05).The same as below.

注：S1～S6中肋骨條藻藻液密度分別為1.0×105、2.5×105、5.0×105、1.0×106、2.5×106和5.0×106 cells/L。Notes：The algal density of S.costatum were 1.0×105，2.5×105，5.0×105，1.0×106 ，2.5×106，5.0×106 cells/L，respectively.

試驗(yàn)組翡翠貽貝單位干重清濾率的波動范圍在(1.35±0.02)～(3.04±0.02)L/(g·h)之間，與單位個(gè)體清濾率變化趨勢基本一致，呈先升高后降低的趨勢(圖1)，但是清濾率最高值和最低值所對應(yīng)的鏈狀裸甲藻密度不一致。當(dāng)鏈狀裸甲藻密度為2.5×104cells/L時(shí)，翡翠貽貝清濾率為(1.59±0.05)L/(g·h)。隨著藻液密度的增大，翡翠貽貝清濾率逐漸升高，當(dāng)藻液密度升高至1.0×105cells/L，接近赤潮基準(zhǔn)密度時(shí)，翡翠貽貝清濾率最大，為(3.04±0.02)L/(g·h)。當(dāng)藻液密度升高至2.5×105cells/L時(shí)，翡翠貽貝清濾率為(3.00±0.03)L/(g·h)，與1.0×105cells/L試驗(yàn)組相比差異不顯著(P>0.05)。隨著藻液密度的繼續(xù)升高，翡翠貽貝清濾率顯著下降(P<0.05)，5.0×105cells/L試驗(yàn)組清濾率為(2.82±0.07)L/(g·h)；1.0×106cells/L試驗(yàn)組清濾率最低，為(1.35±0.02)L/(g·h)。對照組翡翠貽貝單位干重清濾率的波動范圍在(1.69±0.01)～(3.70±0.03)L/(g·h)之間，呈先升高后降低的趨勢(圖2)。當(dāng)中肋骨條藻密度為1.0×105cells/L時(shí)，翡翠貽貝清濾率最低，隨著藻液密度的增大，翡翠貽貝清濾率逐漸升高，當(dāng)藻液密度升高至2.5×106cells/L，接近赤潮基準(zhǔn)密度時(shí)(中肋骨條藻體長6～22 μm，對應(yīng)的赤潮基準(zhǔn)密度為>5×106cells/L)，翡翠貽貝清濾率最大，為(3.70±0.03)L/(g·h)。當(dāng)藻液密度繼續(xù)升高至5.0×106cells/L時(shí)，翡翠貽貝清濾率顯著下降(P<0.05)，為(3.49±0.03)L/(g·h)。

2.2 長期清濾率試驗(yàn)中翡翠貽貝清濾率的變化

2.2.1 翡翠貽貝濾食作用下藻液密度的變化

鏈狀裸甲藻和中肋骨條藻的初始密度分別為5.0×105和5.0×106cells/L，在翡翠貽貝的濾食作用下，藻液密度隨著時(shí)間的推移逐漸降低。在投喂0.5 h后，鏈狀裸甲藻和中肋骨條藻細(xì)胞密度均下降了1個(gè)數(shù)量級；1 h后下降了2個(gè)數(shù)量級，但下降的速度有所放緩；12 h后藻液密度均下降至較低的水平，鏈狀裸甲藻和中肋骨條藻的細(xì)胞密度分別為1.09×103、8.54×102cells/L(圖3)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，將投喂藻液的頻率確定為每隔12 h一次。

注：同種藻類下的顯著性分析。Note：Signidicance analysis under the same algae specie.

2.2.2 翡翠貽貝清濾率的變化

累積試驗(yàn)中翡翠貽貝清濾率的變化見圖4。試驗(yàn)組投喂5.0×105cells/L鏈狀裸甲藻，隨著累積時(shí)間的推移，翡翠貽貝清濾率在(2.09±0.01)～(2.78±0.05)L/(ind·h)范圍內(nèi)上下波動，平均值為2.35 L/(ind·h)，累積1 d和10 d的清濾率差異不顯著(P>0.05)。對照組投喂5.0×106cells/L中肋骨條藻，翡翠貽貝清濾率波動范圍在(3.09±0.03)～(3.64±0.20)L/(ind·h)之間，平均值為3.31 L/(ind·h)，累積1 d和10 d的清濾率差異不顯著(P>0.05)。

注：同一組別下的顯著性分析。Note：Significance anaylsis under the same group.

排出試驗(yàn)中，試驗(yàn)組和對照組翡翠貽貝均投喂5.0×106cells/L中肋骨條藻，其清濾率的變化見圖5。試驗(yàn)組和對照組翡翠貽貝清濾率分別在(2.83±0.14)～(3.30±0.17)和(2.90±0.02)～(3.43±0.06)L/(ind·h)范圍內(nèi)上下波動，平均值分別為3.00、3.14 L/(ind·h)，二者無顯著差異(P>0.05)。排出28 d與排出4 d相比，試驗(yàn)組和對照組翡翠貽貝清濾率均顯著下降(P<0.05)，但是與1 h清濾率試驗(yàn)數(shù)據(jù)相比[5.0×106cells/L對照組翡翠貽貝的清濾率為(2.95±0.02)L/(ind·h)]，排出28 d后翡翠貽貝清濾率變化不顯著(P>0.05)。

注：組內(nèi)、組間的多重比較。Note：Multiple comparisons within and between groups.

3 討論

3.1 貝類攝食率、清濾率的一般變化規(guī)律以及攝食率的調(diào)節(jié)方式

濾食性貝類的取食有兩種途徑：一是水動力作用，即食物隨水流通過主鰓絲直接進(jìn)入鰓的背緣，隨背部纖毛的擺動進(jìn)入唇瓣；二是黏液纖毛作用，即食物流經(jīng)鰓的表面，在整個(gè)鰓系統(tǒng)的作用下(纖毛擺動、黏液細(xì)胞的作用等)進(jìn)入鰓的腹緣，再沿腹部食物運(yùn)送溝進(jìn)入唇瓣[9]。已有研究表明，在適宜的餌料濃度范圍內(nèi)，濾食性貝類的攝食率和清濾率隨餌料濃度的增大而升高，呈冪函數(shù)關(guān)系，這是由于在較高餌料濃度下，過濾同樣多的海水得到的餌料增加[10-13]。當(dāng)超過一定的餌料濃度時(shí)，貝類攝食率隨餌料濃度的增加而略微降低，清濾率則急劇下降[10-13]，這是由于當(dāng)餌料濃度過高時(shí)，雙殼貝類食道的食物出現(xiàn)飽和，使其關(guān)閉出入水管，限制濾水率[14]。通過降低清濾率來減少濾食的餌料量是濾食性貝類調(diào)節(jié)攝食率的方式之一，另一種方式是通過排出大量假糞來穩(wěn)定攝食率。這兩種方式在調(diào)節(jié)貝類攝食率時(shí)同時(shí)起作用，但是對于不同的餌料質(zhì)量所起的作用不一樣，當(dāng)餌料中有機(jī)物含量較高時(shí)，前者起主要作用；當(dāng)餌料中有機(jī)物含量較低時(shí)，后者起主要作用[10]。假糞的產(chǎn)生是藻細(xì)胞進(jìn)入貝類鰓后不進(jìn)入消化道，而是通過簡單的黏液包裹后立即從外套膜排出體外。假糞的出現(xiàn)會干擾試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。假糞與真糞的辨別主要依據(jù)以下幾方面：一是假糞一般呈絮狀、片狀或團(tuán)狀，而真糞則呈規(guī)則的絲狀；二是假糞韌性不如真糞，容易破碎；三是假糞產(chǎn)生的時(shí)間較真糞早，一般在貝類攝食后10～15 min產(chǎn)生，并且假糞中完整的藻細(xì)胞大多數(shù)是活細(xì)胞[15]。本研究通過預(yù)試驗(yàn)，確定了1 h清濾率試驗(yàn)中試驗(yàn)組和對照組藻液密度的設(shè)置范圍和試驗(yàn)梯度，并開展12 h試驗(yàn)，獲得翡翠貽貝攝食作用下藻液密度的變化數(shù)據(jù)，以確定長期清濾率試驗(yàn)中投喂藻液的密度和頻率，避免試驗(yàn)中翡翠貽貝產(chǎn)生假糞。

3.2 翡翠貽貝清濾率“閾值”與藻細(xì)胞密度的對應(yīng)關(guān)系

本研究結(jié)果表明，翡翠貽貝無論是攝食產(chǎn)毒藻或無毒藻，隨著藻液密度的增加，清濾率均呈先升高后降低的變化趨勢，與已有的研究結(jié)果[10-13]一致。試驗(yàn)組翡翠貽貝單位干重清濾率的峰值出現(xiàn)在鏈狀裸甲藻密度為1.0×105cells/L時(shí)，對照組則出現(xiàn)在中肋骨條藻密度為2.5×106cells/L時(shí)，這是由于鏈狀裸甲藻和中肋骨條藻細(xì)胞個(gè)體大小存在較大差異，因此翡翠貽貝清濾率峰值所對應(yīng)的藻細(xì)胞密度也存在顯著差異(P<0.05)，但是其有共同規(guī)律：兩組翡翠貽貝清濾率的峰值均出現(xiàn)在藻細(xì)胞密度接近赤潮基準(zhǔn)密度時(shí)，即當(dāng)藻細(xì)胞密度達(dá)到和超過赤潮基準(zhǔn)密度時(shí)，翡翠貽貝的清濾率均呈下降趨勢，說明此時(shí)貝類清濾率出現(xiàn)了“閾值”效應(yīng)，降低了對微藻的濾食能力。解萬翠等[16]發(fā)現(xiàn)，用微小亞歷山大藻投喂近江牡蠣，當(dāng)藻細(xì)胞密度超過1.5×106cells/L時(shí)，牡蠣清濾率顯著下降。Murray S A等[17]的研究表明，當(dāng)微小亞歷山大藻密度達(dá)到1.0×106cells/L時(shí)，覆瓦珠母貝(Pinctadaimbricata)清濾率開始下降，而微小亞歷山大藻赤潮基準(zhǔn)密度為1×106cells/L。上述研究表明，當(dāng)藻細(xì)胞密度達(dá)到或超過赤潮基準(zhǔn)密度時(shí)，貝類清濾率出現(xiàn)了“閾值”效應(yīng)，這與本研究結(jié)果相似。

赤潮發(fā)生時(shí)，赤潮生物的大量繁殖會對海洋中其他生物產(chǎn)生危害。不同赤潮生物引發(fā)赤潮時(shí)的基準(zhǔn)密度不同，劃分依據(jù)為赤潮生物的細(xì)胞(個(gè)體)大小。本研究貝類清濾率“閾值”效應(yīng)的出現(xiàn)及其對應(yīng)的藻細(xì)胞大小和密度，也印證了即使是無毒赤潮，在藻細(xì)胞密度達(dá)到赤潮基準(zhǔn)密度后，也會對貝類攝食產(chǎn)生影響。

3.3 鏈狀裸甲藻對翡翠貽貝清濾率的影響

本研究試驗(yàn)組和對照組翡翠貽貝單位干重清濾率的最高值分別為(3.04±0.02)、(3.70±0.03)L/(g·h)，與對照組相比，投喂鏈狀裸甲藻的試驗(yàn)組翡翠貽貝的清濾率顯著下降(P<0.05)，表明鏈狀裸甲藻對翡翠貽貝的攝食產(chǎn)生了影響。其他學(xué)者的研究也有類似發(fā)現(xiàn)，朱明遠(yuǎn)等[18]的研究表明，與投喂三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)相比，投喂亞歷山大藻的櫛孔扇貝(Chlamysfarreri)清濾率顯著下降；黃德強(qiáng)等[19]的研究表明，翡翠貽貝對塔瑪亞歷山大藻的濾食率顯著低于扁藻(Platymonassp.)和三角褐指藻。產(chǎn)毒藻對貝類可能產(chǎn)生行為學(xué)和生理學(xué)方面的影響，一些貝類可以通過關(guān)閉貝殼等減少或避免攝食產(chǎn)毒藻，出現(xiàn)殼瓣閉合、鉆沙、清濾率降低等不良反應(yīng)[5，20-21]，但是這些反應(yīng)具有種的特異性和地域特異性，不同地域的貝類接觸毒藻后會表現(xiàn)出不同的反應(yīng)[5]。也有一些學(xué)者的研究結(jié)果不同，Guéguen M等[22]發(fā)現(xiàn)，投喂微小亞歷山大藻的牡蠣的清濾率無顯著性變化，牡蠣對微小亞歷山大藻敏感性較低；解萬翠等[16]的研究表明，與投喂扁藻相比，投喂微小亞歷山大藻的近江牡蠣的清濾率沒有降低。以上研究結(jié)果表明不同貝類對產(chǎn)毒藻的敏感性存在差異。本研究試驗(yàn)組貽貝清濾率顯著下降(P<0.05)，但其沒有出現(xiàn)殼瓣閉合等明顯不適反應(yīng)，總體而言貽貝對鏈狀裸甲藻的敏感性不高。以往研究[23-24]認(rèn)為，對產(chǎn)毒藻敏感性較低的貝類體內(nèi)累積的PST含量較高，而對毒素敏感性較高的貝類累積的PST含量較低。項(xiàng)目組2017年6月對鏈狀裸甲藻赤潮海域貝類的跟蹤監(jiān)測結(jié)果顯示，與牡蠣、蛤類、扇貝等濾食性貝類相比，翡翠貽貝體內(nèi)PST含量最高，說明與其他貝類相比，其對PST具有更高的累積能力，De Carvalhe I L等[25]的研究結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)。

長期累積試驗(yàn)期間翡翠貽貝的清濾率在一定的范圍內(nèi)上下波動，累積1 d和10 d的清濾率差異不顯著(P>0.05)；排出試驗(yàn)期間翡翠貽貝清濾率同樣呈上下波動之勢，與1 h清濾率試驗(yàn)數(shù)據(jù)相比，排出28 d后其清濾率的變化不顯著(P>0.05)，且試驗(yàn)組和對照組貽貝清濾率無顯著差異(P>0.05)。推測長期累積和排出試驗(yàn)中翡翠貽貝清濾率的上下波動是由其個(gè)體大小的差異造成的。在長期攝食鏈狀裸甲藻的過程中，翡翠貽貝對產(chǎn)毒藻有一定的適應(yīng)性，與短期濾食相比清濾率無顯著變化(P>0.05)。解萬翠等[16]的研究表明，長期(5 d)濾食微小亞歷山大藻的近江牡蠣的清濾率沒有發(fā)生顯著變化，這與本研究結(jié)果一致。

付家想等[26]、藍(lán)文陸等[27-28]研究認(rèn)為，不同種類餌料對香港巨牡蠣(Crassostreahongkongensis)的清濾率和攝食率有著顯著的影響，主要影響因素為藻細(xì)胞大小、形狀、營養(yǎng)質(zhì)量和密度等。朱雨瑞等[29]發(fā)現(xiàn)，稚貝優(yōu)先濾食餌料效果好的微藻，對餌料效果差的微藻攝食速度最慢。本試驗(yàn)材料翡翠貽貝屬于成貝，對鏈狀裸甲藻和中肋骨條藻的攝食不存在受貝類口徑影響的問題。中肋骨條藻為硅藻，具有不易變形的硅酸鹽外殼，更容易被濾食性貝類的鰓保留，與甲藻相比更適合濾食性貝類攝食[30-31]。在整個(gè)試驗(yàn)過程中，翡翠貽貝無行為方面的不適反應(yīng)，長期濾食鏈狀裸甲藻后的清濾率的變化也不顯著。綜上，試驗(yàn)組貽貝清濾率顯著下降的原因可能是綜合藻細(xì)胞大小、外部構(gòu)造、餌料密度、營養(yǎng)質(zhì)量、PST毒性等因素差異造成的結(jié)果。

4 結(jié)論

通過研究鏈狀裸甲藻對翡翠貽貝清濾率的影響，得出如下結(jié)論：

1)翡翠貽貝無論是攝食產(chǎn)毒藻或無毒藻，隨著藻細(xì)胞密度的升高，清濾率的變化均呈先升高后降低的趨勢，峰值出現(xiàn)在藻細(xì)胞密度接近赤潮基準(zhǔn)密度時(shí)。

2)試驗(yàn)組和對照組翡翠貽貝清濾率的最高值分別為(3.04±0.02)、(3.70±0.03)L/(g·h)，試驗(yàn)組翡翠貽貝的清濾率顯著下降(P<0.05)，表明鏈狀裸甲藻對翡翠貽貝的攝食產(chǎn)生了影響，可能是由藻細(xì)胞大小、外部構(gòu)造、餌料密度、營養(yǎng)質(zhì)量、PST毒性等因素差異造成的。

3)長期濾食鏈狀裸甲藻的翡翠貽貝的清濾率基本保持在初始水平，與短期濾食相比無顯著變化(P>0.05)。