柑橘黃龍病菌效應(yīng)蛋白與寄主互作研究進(jìn)展與展望

崔學(xué)進(jìn), 馬世綿, 沈 盼, 時(shí)洪偉, 傅仕敏, 賀 俊,鄒修平, 周常勇, 王雪峰

(國(guó)家柑桔工程技術(shù)研究中心，西南大學(xué)柑桔研究所，重慶 400712)

柑橘在中國(guó)有4 000余年的悠久栽培史,2021年我國(guó)柑橘栽培面積289萬(wàn)hm2、產(chǎn)量5 569萬(wàn)t,產(chǎn)量和面積均居世界首位,是我國(guó)南方鄉(xiāng)村振興的重要抓手產(chǎn)業(yè)。柑橘黃龍病(citrus Huanglongbing, HLB)是由韌皮部桿菌屬CandidatusLiberibacter細(xì)菌引起的全球性柑橘重大病害,在田間主要由柑橘木虱Diaphorinacitri傳播。目前該病在我國(guó)部分優(yōu)勢(shì)柑橘產(chǎn)區(qū)流行風(fēng)險(xiǎn)加劇,非疫區(qū)亦面臨威脅,使我國(guó)由柑橘生產(chǎn)大國(guó)向強(qiáng)國(guó)轉(zhuǎn)型面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)[1]。由于目前尚無(wú)有效方法根治黃龍病,生產(chǎn)上采取“三項(xiàng)基本措施”,即使用無(wú)病苗木、及時(shí)挖除病樹(shù)和大面積聯(lián)防聯(lián)控柑橘木虱防控黃龍病,總體上仍呈“可防可控不可治”的態(tài)勢(shì)。

當(dāng)前對(duì)黃龍病菌致病機(jī)制的研究已主要形成以下結(jié)論:1)病菌與韌皮部細(xì)胞膜互作,在韌皮部細(xì)胞間運(yùn)輸聚集,引起胼胝體沉積和篩孔堵塞;此外病菌代謝產(chǎn)物通過(guò)改變滲透壓來(lái)破壞韌皮部功能[2-3]。2)在寄主細(xì)胞表面定位的模式識(shí)別受體識(shí)別黃龍病菌的鞭毛蛋白、脂多糖等病原相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular patterns, PAMPs),引起耐、感病寄主中胼胝體聚集、活性氧(reactive oxygen species,ROS)產(chǎn)生等防御響應(yīng)[4-5]。3)黃龍病是一種病原觸發(fā)的免疫病害,侵染后導(dǎo)致活性氧在韌皮部組織積累,可通過(guò)抗氧化劑或赤霉素減輕黃龍病危害[6]。4)病菌通過(guò)分泌系統(tǒng)分泌效應(yīng)蛋白或其他毒力因子影響寄主靶標(biāo)的功能,誘導(dǎo)寄主產(chǎn)生病癥[7]。本文重點(diǎn)就柑橘黃龍病菌分泌系統(tǒng)特征、效應(yīng)蛋白與寄主互作機(jī)制及抗病種質(zhì)創(chuàng)制等方面進(jìn)行綜述。

1 韌皮部桿菌屬細(xì)菌及其分泌系統(tǒng)特征

韌皮部桿菌屬的確立與柑橘黃龍病的病原命名相關(guān)。韌皮部桿菌屬的大部分成員未實(shí)現(xiàn)離體培養(yǎng),但通過(guò)田間癥狀觀察、嫁接診斷、病原電子顯微鏡觀察、分子生物學(xué)等方法,證明了韌皮部桿菌是柑橘黃龍病、馬鈴薯斑馬病及其他一些作物病害的病原。根據(jù)16S rRNA序列差異和病原所分布的地區(qū),黃龍病菌可分為3個(gè)亞種:亞洲種“CandidatusLiberibacter asiaticus”(CLas)、非洲種“Ca.Liberibacter africanus”(CLaf)及美洲種 “Ca.Liberibacter americanus”(CLam)[8]。其中亞洲種分布最廣,危害最嚴(yán)重,是我國(guó)發(fā)生的黃龍病病原。韌皮部桿菌屬細(xì)菌基因組高度簡(jiǎn)化,缺少核心代謝途徑,需依賴(lài)寄主植物提供營(yíng)養(yǎng),這可能是體外純培養(yǎng)至今未能取得突破的主要原因[9]。韌皮部是許多胞內(nèi)寄生菌的天然庇護(hù)所,寄生菌寄居于此能夠躲避天敵、環(huán)境脅迫和農(nóng)藥等的侵襲,同時(shí)又能從中吸取糖類(lèi)、微量元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。由于韌皮部的天然屏障和韌皮部寄生菌的獨(dú)特習(xí)性,多數(shù)韌皮部寄生菌需靠昆蟲(chóng)介體傳播。細(xì)菌可依賴(lài)韌皮部進(jìn)行長(zhǎng)距離擴(kuò)散[10]。研究表明,黃龍病菌可借助汁液流動(dòng)或通過(guò)菌毛滑行,在韌皮部中以約3 cm/d的速度遷移,僅為韌皮部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)速率的0.25%,并能向上和向下運(yùn)輸?shù)匠墒烊~片和根中[3,11]。柑橘黃龍病菌至今無(wú)法離體培養(yǎng),難以進(jìn)行傳統(tǒng)的分子和遺傳操作,極大制約了對(duì)黃龍病菌毒力機(jī)制的認(rèn)知。

細(xì)菌能利用分泌系統(tǒng)將胞內(nèi)合成的毒蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)、分泌至胞外,從而調(diào)控寄主靶標(biāo),抑制寄主免疫反應(yīng),完成入侵增殖。目前細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)至少9種分泌系統(tǒng)(T1SS～T9SS),按作用機(jī)制的不同,又分為一步法分泌系統(tǒng)(T1SS、T3SS、T4SS、T6SS和T7SS)和兩步法分泌系統(tǒng)(T2SS、T5SS、T8SS和T9SS)[12-14]。一步法分泌系統(tǒng)能直接將底物轉(zhuǎn)運(yùn)到胞外,兩步法分泌系統(tǒng)則先依賴(lài)內(nèi)膜跨越轉(zhuǎn)運(yùn)體,通過(guò)一般分泌途徑(general secretion pathway, Sec)或雙精氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)途徑(twin-arginine translocation pathway,Tat)將底物轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞周質(zhì),再通過(guò)相應(yīng)分泌系統(tǒng)運(yùn)送到胞外環(huán)境[15-16]。Sec途徑通常轉(zhuǎn)運(yùn)未折疊形式的蛋白,而Tat途徑轉(zhuǎn)運(yùn)折疊形式的蛋白,T2SS、T5SS、T8SS是Sec依賴(lài)的分泌路徑[16]。

效應(yīng)蛋白又稱(chēng)效應(yīng)子、分泌蛋白等,是一類(lèi)在病原細(xì)胞內(nèi)合成,分泌到胞外,繼而進(jìn)入寄主體內(nèi)發(fā)生效應(yīng)的蛋白,是病原發(fā)揮毒力的重要因子。黃龍病菌為柑橘韌皮部胞內(nèi)寄生菌,可能也具有將效應(yīng)蛋白分泌到寄主細(xì)胞內(nèi)干擾寄主防御的功能。Duan等[17]從單頭帶病柑橘木虱中,利用宏基因組測(cè)序首次獲得了高度精簡(jiǎn)、大小為1.23 Mb的黃龍病菌完整基因組序列,全基因組分析發(fā)現(xiàn),黃龍病菌中雖沒(méi)有革蘭氏陰性細(xì)菌常見(jiàn)的T3SS和T4SS,但有T1SS和Sec分泌途徑。

T1SS分泌系統(tǒng)分泌過(guò)程中不需要信號(hào)肽的剪切,分泌的蛋白又稱(chēng)為非經(jīng)典分泌蛋白。有關(guān)黃龍病菌非經(jīng)典分泌蛋白的報(bào)道較少,Cong等[18]發(fā)現(xiàn)在T1SS基因簇旁邊存在一個(gè)金屬蛋白酶(Serralysin蛋白)基因,該蛋白廣泛存在于細(xì)菌中且往往由T1SS分泌系統(tǒng)分泌,可以通過(guò)降解寄主免疫相關(guān)蛋白抑制寄主免疫,因此,推測(cè)該蛋白可能是黃龍病菌的毒力因子。

Sec分泌途徑可以轉(zhuǎn)運(yùn)毒力因子、侵襲素和蛋白酶等。典型的Sec識(shí)別信號(hào)序列是長(zhǎng)約18～30個(gè)氨基酸的信號(hào)肽[17]。韌皮部寄生的植原體主要通過(guò)Sec途徑完成SAP54、SAP11和Tengu等重要毒力因子的分泌[19-21]。運(yùn)用生物信息學(xué)軟件,如SignalP、Phobius等可對(duì)Sec分泌蛋白進(jìn)行預(yù)測(cè),為進(jìn)一步篩選鑒定黃龍病菌效應(yīng)蛋白奠定基礎(chǔ)。Prasad等[22]對(duì)柑橘黃龍病菌基因組進(jìn)行生物信息學(xué)分析,預(yù)測(cè)到166個(gè)蛋白具有信號(hào)肽序列,進(jìn)一步通過(guò)堿性磷酸酶(PhoA)試驗(yàn)確認(rèn)了其中的86個(gè)蛋白具有胞外分泌能力,推測(cè)這些分泌蛋白可能在黃龍病菌和寄主互作過(guò)程中發(fā)揮作用。

2 柑橘黃龍病菌效應(yīng)蛋白與寄主互作機(jī)制

2.1 黃龍病菌效應(yīng)蛋白對(duì)寄主細(xì)胞壞死的影響

對(duì)黃龍病菌效應(yīng)蛋白誘導(dǎo)/抑制細(xì)胞壞死功能分析表明,多數(shù)效應(yīng)蛋白具有抑制壞死功能,只有少數(shù)幾個(gè)效應(yīng)蛋白能觸發(fā)細(xì)胞壞死。Pitino等[23]發(fā)現(xiàn)效應(yīng)蛋白SDE1(CLIBASIA_05315)能誘導(dǎo)本氏煙Nicotianabenthamiana細(xì)胞壞死和胼胝質(zhì)沉積。Liu等[24]報(bào)道了一個(gè)溫度依賴(lài)型效應(yīng)蛋白m460(CLIBASIA_00460),常溫(25℃)時(shí),m460定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),瞬時(shí)表達(dá)m460只引起本氏煙葉片出現(xiàn)微小壞死斑,高溫(32℃)減少m460在細(xì)胞核中的積累,而在m460的N端加入SV40核定位序列后可促進(jìn)m460入核并引起本氏煙葉片嚴(yán)重褪綠和壞死;Oh等[25]發(fā)現(xiàn)m460還會(huì)抑制丁香假單胞菌Pseudomonassyringaepv.tomato(Pst)免疫激發(fā)子PrfD1416V觸發(fā)的過(guò)敏性壞死反應(yīng)(hypersensitive response, HR)。Li等[26]證實(shí)本氏煙中瞬時(shí)過(guò)表達(dá)m03915(CLIBASIA_03915)和m04250(CLIBASIA_04250)可引起衰老葉片韌皮部壞死。Du等[27]發(fā)現(xiàn)黃龍病菌原噬菌體區(qū)域一個(gè)可引起本氏煙過(guò)敏性壞死作用的效應(yīng)子AGH17470,其通過(guò)上調(diào)病程相關(guān)基因(pathogenesis-related genes,PR)和水楊酸(salicylic acid,SA)信號(hào)通路基因的表達(dá)來(lái)激活植物免疫,在柑橘上瞬時(shí)過(guò)表達(dá)AGH17470提高了其對(duì)柑橘潰瘍病菌Xanthomonascitrisubsp.citri(Xcc)的抗性。

Zhang等[28-29]于2019和2020年先后發(fā)現(xiàn)m3875(CLIBASIA_03875)和m4405(CLIBASIA_04405)能抑制小鼠凋亡蛋白(pro-apoptotic mouse protein)Bax和馬鈴薯晚疫病菌激發(fā)素INF1(PhytophthorainfestansINF1)引起的本氏煙過(guò)敏性細(xì)胞壞死。Pang等[30]發(fā)現(xiàn)效應(yīng)蛋白SDE15(CLIBASIA_04025)能同時(shí)抑制柑橘潰瘍病菌Xanthomonascitrissp.citri(Xcc)和辣椒瘡痂病菌X.vesicatoria效應(yīng)蛋白AvrBsT誘導(dǎo)的HR反應(yīng),表明其是一個(gè)廣譜免疫抑制子。Du等[31]通過(guò)非經(jīng)典分泌蛋白預(yù)測(cè)軟件SecretomeP鑒定到27個(gè)非經(jīng)典分泌蛋白,其中10個(gè)可抑制Bax和INF1引起的細(xì)胞壞死和H2O2積累,它們可以通過(guò)協(xié)同誘導(dǎo)PR基因的表達(dá),抑制寄主早期免疫反應(yīng)并促進(jìn)病原菌定殖。Shen等[32]從黃龍病菌中鑒定到一個(gè)能抑制免疫激發(fā)子Bax和INF1誘導(dǎo)的過(guò)敏性壞死、活性氧暴發(fā)和胼胝質(zhì)沉積的效應(yīng)蛋白SECP8(CLIBASIA_05330),轉(zhuǎn)mSECP8基因能促進(jìn)黃龍病菌在柑橘中的早期定殖、葉片斑駁黃化和植株矮化。

2.2 黃龍病菌效應(yīng)蛋白與寄主因子互作抑制免疫反應(yīng)

Clark等[33]發(fā)現(xiàn)SDE1(CLIBASIA_05315)與柑橘木瓜蛋白酶樣半胱氨酸蛋白酶(citrus papain-like cysteine proteases, PLCPs)互作,且SDE1通過(guò)干擾PLCPs活性抑制寄主免疫。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),將SDE1在擬南芥中超量表達(dá)后,葉片出現(xiàn)類(lèi)似柑橘感染黃龍病的嚴(yán)重黃化癥狀;與野生型柑橘相比,轉(zhuǎn)SDE1基因柑橘更易感黃龍病菌,衰老相關(guān)基因SAGs(senescence-associated genes)在轉(zhuǎn)基因株系中上調(diào)表達(dá),推測(cè)SDE1可能與促早熟和衰老相關(guān)[34]。Zhou等[35]驗(yàn)證到SDE1與本氏煙DDX3(DEAD-box ATP-dependent RNA helicase 3)蛋白互作,瞬時(shí)過(guò)表達(dá)SDE1和瞬時(shí)沉默NbDDX3均能引起本氏煙葉片褪綠,且SDE1能降低NbDDX3轉(zhuǎn)錄水平,表明SDE1引起的褪綠癥狀與NbDDX3下調(diào)表達(dá)有關(guān)。

轉(zhuǎn)SDE15基因葡萄柚Citrusparadisi在接種Xcc Aw菌株后PTI (pattern-triggered immunity)標(biāo)記基因和PR基因下調(diào)表達(dá),且SDE15通過(guò)與柑橘感病因子CsACD2(accelerated cell death 2)互作發(fā)揮免疫抑制子功能[30]。Li等[36]發(fā)現(xiàn)效應(yīng)因子CLIBASIA_00255編碼水楊酸羥化酶(SahA),能夠通過(guò)降解水楊酸抑制植物防御,純化的SahA蛋白可降解SA及其衍生物,在轉(zhuǎn)基因煙草中過(guò)表達(dá)SahA可以消除SA積累和寄主的過(guò)敏性壞死反應(yīng)。

當(dāng)植物遭遇生物和非生物(干旱、鹽堿、澇害、冷害等)脅迫時(shí),細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生和清除機(jī)制無(wú)法平衡,導(dǎo)致活性氧的過(guò)度積累,進(jìn)一步造成脂質(zhì)過(guò)氧化、蛋白質(zhì)變性、堿基突變和DNA鏈斷裂等氧化損傷,甚至造成植株的死亡[37]。因此,及時(shí)清除過(guò)多的活性氧以維持活性氧穩(wěn)態(tài),對(duì)于植物生理功能的正常運(yùn)行至關(guān)重要。感染黃龍病菌的柑橘葉片ROS水平提高,使用抗氧化劑抑制ROS水平可減輕黃龍病癥狀[6]。Jain等[38]報(bào)道了黃龍病菌UF506株系的SC2原噬菌體上一個(gè)非經(jīng)典分泌蛋白SC2_gp095,該蛋白是一個(gè)過(guò)氧化物酶,通過(guò)下調(diào)RbohB的轉(zhuǎn)錄來(lái)抵御H2O2積累,從而抑制寄主免疫。此外,UF506染色體區(qū)域的兩個(gè)分泌蛋白Lasprx5(CLIBASIA_RS00940)和Lasbcp(CLIBASIA_RS00445)也發(fā)揮著過(guò)氧化物酶的功能,參與抗活性氧脅迫[39]。Du等[40]發(fā)現(xiàn)黃龍病菌原噬菌體區(qū)域效應(yīng)蛋白AGH17488靶向寄主抗壞血酸過(guò)氧化物酶6(APX6),促進(jìn)APX6活性從而抑制ROS積累來(lái)提高寄主的感病性。

2.3 黃龍病菌效應(yīng)蛋白調(diào)控寄主細(xì)胞自噬

細(xì)胞自噬是真核生物內(nèi)普遍存在的保守的物質(zhì)降解過(guò)程,在植物生長(zhǎng)發(fā)育、衰老、細(xì)胞穩(wěn)態(tài)以及響應(yīng)生物和非生物脅迫等過(guò)程中發(fā)揮重要作用[41]。植物細(xì)胞自噬的發(fā)生過(guò)程主要包括:自噬的誘導(dǎo)、自噬體的形成、與液泡的融合。目前已有超過(guò)40個(gè)自噬相關(guān)基因(AuTophaGy-related genes, ATGs)被鑒定,這些基因編碼的蛋白在細(xì)胞自噬的各個(gè)階段發(fā)揮不同作用[42]。在植物與病原互作過(guò)程中,植物通過(guò)自噬降解限制病原侵染是其重要的防御手段,但病原物也進(jìn)化出逃逸自噬的機(jī)制,調(diào)控自噬促進(jìn)其在寄主內(nèi)的定殖與增殖[43]。

近年來(lái),植物病原物調(diào)控寄主自噬的相關(guān)研究取得系列重要進(jìn)展,但韌皮部寄生菌如何操控寄主細(xì)胞自噬的研究甚少。Shi等[44]發(fā)現(xiàn)黃龍病菌效應(yīng)蛋白SDE4405 與柑橘ATG8家族蛋白相互作用,激活本氏煙細(xì)胞自噬;通過(guò)電鏡觀察發(fā)現(xiàn),在SDE4405轉(zhuǎn)基因柑橘中,細(xì)胞自噬也顯著增強(qiáng);ATG8s響應(yīng)SDE4405介導(dǎo)的植物免疫抑制,瞬時(shí)過(guò)表達(dá)CsATG8c和SDE4405促進(jìn)了柑橘潰瘍病菌在柑橘葉片的增殖,表明SDE4405誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬具有促進(jìn)細(xì)菌侵染的功能。Shi等[45]發(fā)現(xiàn)黃龍病菌效應(yīng)蛋白SDE3(CLIBASIA_00420)的表達(dá)不僅增強(qiáng)病毒和疫霉侵染煙草和擬南芥的能力,而且顯著地增強(qiáng)了柑橘對(duì)潰瘍病和黃龍病的易感性。進(jìn)一步研究表明SDE3與柑橘胞質(zhì)中3-磷酸甘油醛脫氫酶(CsGAPC1/2)互作,CsGAPC1/2可以與柑橘自噬相關(guān)蛋白家族CsATG8s (CsATG8A/C/D/F/G/I)直接互作,并特異性地降解CsATG8s;SDE3與CsGAPC1/2的互作進(jìn)一步增強(qiáng)了CsGAPC1/2對(duì)CsATG8s的降解,從而抑制植物的細(xì)胞自噬。對(duì)該領(lǐng)域的深入研究將進(jìn)一步闡明黃龍病菌調(diào)控自噬的機(jī)制并為建立柑橘黃龍病新型防控策略提供理論依據(jù)。

3 抗耐病黃龍病種質(zhì)創(chuàng)制

由于缺乏抗黃龍病的天然柑橘種質(zhì)資源,利用轉(zhuǎn)基因或基因編輯技術(shù)創(chuàng)制抗(耐)黃龍病柑橘種質(zhì)具有重要的應(yīng)用前景。將擬南芥抗病基因NPR1(non-expressor of pathogenesis related genes 1)在甜橙Citrussinensis‘Hamlin’和‘Valencia’中分別進(jìn)行系統(tǒng)超量和韌皮部特異表達(dá),AtNPR1轉(zhuǎn)基因甜橙對(duì)黃龍病抗性大幅提高,且病原相關(guān)分子模式(PAMPs)、富含亮氨酸受體激酶(leucine-rich receptor kinase,LRR-RKs)等防御相關(guān)基因在轉(zhuǎn)基因植物中顯著上調(diào)表達(dá),此外采用非轉(zhuǎn)基因接穗和轉(zhuǎn)AtNPR1基因砧木組合,可提高植株抗(耐)病性[46-47]。在墨西哥來(lái)檬Citrus×aurantifolia中單獨(dú)或同時(shí)表達(dá)lysozyme和β-defensin可以顯著降低植株中的黃龍病菌的滴度,緩解黃龍病癥狀[48]。Hao等[49]將柑橘內(nèi)源Thionins基因在卡里佐枳橙Citrussinensis×P.trifoliata中超量表達(dá),嫁接傳菌 1年后,與對(duì)照植株相比,轉(zhuǎn)基因植株根和接穗中的病菌濃度顯著降低,提高了卡里佐枳橙對(duì)黃龍病的抗性。

自2013年CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在植物中成功應(yīng)用以來(lái),基因編輯技術(shù)在柑橘中的研究就受到了廣泛的關(guān)注。西南大學(xué)柑桔研究所團(tuán)隊(duì)成功構(gòu)建了CRISPR/Cas9介導(dǎo)的柑橘基因組編輯技術(shù),并首次成功獲得了抗?jié)儾〉腃sLOB1突變體[50]。利用構(gòu)建的柑橘基因組編輯等技術(shù),團(tuán)隊(duì)開(kāi)展了柑橘黃龍病抗性編輯等分子育種研究,創(chuàng)制了CsPP2B15、CsWRKY22等一批抗病相關(guān)突變體和轉(zhuǎn)基因材料[50-53],其中,抗菌肽轉(zhuǎn)基因和CsLOB1突變體抗病材料已獲得農(nóng)業(yè)農(nóng)村部轉(zhuǎn)基因中間試驗(yàn)許可,目前正在開(kāi)展田間抗性評(píng)價(jià)。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)制非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題。CRISPR/Cas9技術(shù)誕生后,攻克該技術(shù)瓶頸已成為基因組編輯領(lǐng)域和分子育種的熱點(diǎn),并在不同的物種中被成功解決。由于柑橘基因組高度雜合、珠心胚起源、生長(zhǎng)周期長(zhǎng)、遺傳轉(zhuǎn)化效率低,嚴(yán)重阻礙了CRISPR/Cas9技術(shù)在創(chuàng)制不含轉(zhuǎn)基因成分的優(yōu)良突變體中的有效利用[54],已成為柑橘分子育種從研究走向應(yīng)用的技術(shù)瓶頸。最近,美國(guó)佛羅里達(dá)大學(xué)團(tuán)隊(duì)利用Cas12a/crRNA編輯系統(tǒng)成功構(gòu)建了柑橘非轉(zhuǎn)基因基因組編輯技術(shù),獲得了抗?jié)儾〉姆寝D(zhuǎn)基因突變體[55]。該突變體已獲得了美國(guó)農(nóng)業(yè)部動(dòng)植物衛(wèi)生檢疫局(USDA-APHIS)的監(jiān)管批準(zhǔn)和環(huán)境保護(hù)署(EPA)的豁免監(jiān)管,大力推動(dòng)了柑橘基因組編輯育種的商業(yè)化進(jìn)程。

4 展望

近年來(lái)在黃龍病菌重要基因功能,特別是效應(yīng)蛋白的寄主互作因子鑒定與功能研究方面取得了顯著進(jìn)展,為柑橘抗黃龍病定向遺傳改良提供了重要靶標(biāo)。黃龍病菌主要是通過(guò)柑橘木虱取食傳播到柑橘韌皮部組織,但當(dāng)前在黃龍病菌-木虱-柑橘三者間互作的研究還有待深入,特別是在韌皮部場(chǎng)景中的相互博弈尚不清晰,如木虱和病菌的效應(yīng)蛋白如何與柑橘韌皮部組織蛋白相互作用,二者的效應(yīng)蛋白是否存在協(xié)同作用機(jī)制?因此深入解析黃龍病菌-木虱-柑橘互作機(jī)制,挖掘寄主響應(yīng)木虱和病菌的關(guān)鍵基因,有望創(chuàng)制抗病種質(zhì)材料,從根本上解決黃龍病防控難題,保障柑橘產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。