丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸對特發(fā)性肺纖維化患者療效及PI3K/Akt/mTOR通路影響

【摘要】 目的：探討丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸對特發(fā)性肺纖維化患者療效及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶（Akt）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路影響。方法：選取2020年1—12月在黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院治療的特發(fā)性肺纖維化患者64例，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組。對照組（n=32）采用乙酰半胱氨酸治療，觀察組（n=32）采用丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸治療。治療6個(gè)月后比較兩組臨床療效，比較兩組治療前后肺功能、生活質(zhì)量、血清PI3K、Akt、mTOR水平，觀察兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況。結(jié)果：觀察組總有效率為93.75%，高于對照組的75.00%（Plt;0.05）。治療6個(gè)月，觀察組用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值的百分比（FEV1%pred）、呼吸峰值流速（PEF）均高于對照組，血清PI3K、Akt、mTOR水平及呼吸癥狀、活動受限、疾病影響評分均低于對照組（Plt;0.05）。兩組治療期間均無相關(guān)不良反應(yīng)。結(jié)論：丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸治療特發(fā)性肺纖維化可提高臨床療效，改善肺功能及生活質(zhì)量，下調(diào)血清PI3K、Akt、mTOR水平，且安全性良好。

【關(guān)鍵詞】 特發(fā)性肺纖維化 丹貝益肺顆粒 乙酰半胱氨酸 肺功能 PI3K/Akt/mTOR通路

Effect of Danbei Yifei Granules Combined with Acetylcysteine on the Efficacy and PI3K/Akt/mTOR Pathway in Patients with Idiopathic Pulmonary Fibrosis/JIN Guannan， ZHANG Bihai， LI Qiang， CUI Xiangnan， JIANG Baihua. //Medical Innovation of China， 2023， 20（25）： 0-068

[Abstract] Objective： To investigate the effect of Danbei Yifei Granules combined with Acetylcysteine on efficacy and phosphatidylinositol 3 kinase （PI3K）/protein kinase （Akt）/rapamycin target protein （mTOR） pathway in patients with idiopathic pulmonary fibrosis. Method： A total of 64 patients with idiopathic pulmonary fibrosis treated in Heilongjiang Academy of Traditional Chinese Medicine from January to December 2020 were selected and divided into two groups by random number table method. The control group （n=32） was treated with Acetylcysteine， and the observation group （n=32） was treated with Danbei Yifei Granules combined with Acetylcysteine. After 6 months of treatment， the clinical efficacy of the two groups were compared， and the levels of lung function， quality of life， serum PI3K， Akt and mTOR before and after treatment were compared between the two groups， and the occurrence of adverse reactions was observed. Result： The total effective rate of the observation group was 93.75%， which was higher than 75.00% of the control group （Plt;0.05）. After 6 months of treatment， the forced vital capacity （FVC）， forced expiratory volume in one second to forced vital capacity ratio （FEV1%pred）， peak respiratory flow （PEF） in the observation group were higher than those in the control group， while the levels of PI3K， Akt and mTOR in serum， respiratory symptoms， activity restriction and disease impact scores in the observation group were lower than those in the control group （Plt;0.05）. No adverse reactions such as nausea， vomiting， skin and mucous membrane bleeding were observed in the two groups during treatment. Conclusion： Danbei Yifei Granules combined with Acetylcysteine in the treatment of idiopathic pulmonary fibrosis can improve clinical efficacy， improve lung function and quality of life， and reduce serum PI3K， Akt and mTOR levels， with good safety.

[Key words] Idiopathic pulmonary fibrosis Danbei Yifei Granules Acetylcysteine Lung function PI3K/Akt/mTOR pathway

First-author's address： Heilongjiang Academy of Traditional Chinese Medicine， Harbin 150000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2023.25.015

特發(fā)性肺纖維化作為一種慢性間質(zhì)纖維化肺疾病，近年來其發(fā)病率呈逐年升高趨勢，且患者預(yù)后極差，5年累積生存率僅為20%，對患者的身心健康造成嚴(yán)重影響[1]。目前，臨床治療特發(fā)性肺纖維化尚無特效藥物，研究表明，乙酰半胱氨酸可發(fā)揮良好的抗氧化作用，并可通過抑制成纖維細(xì)胞增殖，可有效減輕患者肺損傷從而延緩肺纖維化[2]。近年來，中醫(yī)藥憑借多途徑、多靶點(diǎn)的作用在臨床防治特發(fā)性肺纖維化開展了諸多研究，丹貝益肺顆粒是江柏華教授在自身多年臨床經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)下，結(jié)合特發(fā)性肺纖維化的臨床癥狀總結(jié)的自擬方藥，具有活血祛瘀，化痰通絡(luò)，補(bǔ)肺益腎的功效，在臨床實(shí)踐中療效顯著[3-4]。鑒于此，本研究擬對特發(fā)性肺纖維化患者采用丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸治療，旨在探討中西醫(yī)結(jié)合治療對改善患者肺功能及PI3K/Akt/mTOR通路的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1—12月在黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院治療的特發(fā)性肺纖維化患者64例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[5]中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)胸部CT等檢查確診。中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[6]《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，屬痰瘀阻絡(luò)型，主癥：氣短喘息、胸痛胸悶；次癥：干咳，倦怠乏力，食欲不振，唇頰發(fā)紺，舌質(zhì)暗紅有瘀斑，舌苔黃膩，脈滑數(shù)。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均符合特發(fā)性肺纖維化中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）無意識障礙，可自主配合研究用藥治療者；（3）臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）預(yù)計(jì)生存周期不足6個(gè)月；（2）合并其他肺部疾?。ㄈ缏璺?、支氣管擴(kuò)張等）；（3）3周內(nèi)使用免疫抑制劑或糖皮質(zhì)激素；（4）合并精神疾病、智力障礙。采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為對照組與觀察組，各32例。患者自愿受試并簽署知情同意書。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)委員會審批。

1.2 方法

對照組口服乙酰半胱氨酸顆粒（生產(chǎn)廠家：海南贊邦制藥有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20000472，規(guī)格：3 g︰0.1 g）治療，6 g/次，3次/d；觀察組在對照組基礎(chǔ)上聯(lián)合丹貝益肺顆粒（批準(zhǔn)文號：黑藥制字Z20170008，規(guī)格：10 g/袋），具體藥物成分：丹參15 g、平貝15 g、川芎12 g、桃仁12 g、地龍12 g、五味子9 g、補(bǔ)骨脂9 g、黃芪20 g、麥冬20 g、黨參20 g、桔梗6 g，本院自制成顆粒，口服治療，2袋/次，3次/d。兩組均連續(xù)治療6個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 臨床療效評定 從臨床癥狀、影像學(xué)檢查等方面對患者進(jìn)行療效評定，顯效：癥狀緩解，活動能力明顯增強(qiáng)，X線或HRCT檢查示異常影像消失或明顯減少；有效；癥狀較治療前改善，活動能力稍增強(qiáng)，X線或HRCT檢查示異常影像較治療前減少；無效：未達(dá)到上述治療標(biāo)準(zhǔn)；總有效=顯效+有效。

1.3.2 肺功能檢測 分別于治療前、治療6個(gè)月采用德國耶格公司提供的VmaxTMEncore型肺功能檢測儀對兩組患者用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值的百分比（FEV1%pred）、呼吸峰值流速（PEF）進(jìn)行檢測。

1.3.3 血清PI3K、Akt、mTOR水平檢測 分別于治療前、治療6個(gè)月采集兩組空腹靜脈血5 mL，以離心半徑15 cm，離心轉(zhuǎn)速2 500 r/min，離心10 min，取上清置于-70 ℃冰箱保存待測，采用雙抗體夾心ELISA法對兩組患者血清磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶（Akt）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）水平進(jìn)行檢測，試劑盒均購自北京百靈威科技有限公司。

1.3.4 生活質(zhì)量評分 分別于治療前、治療6個(gè)月采用圣喬治呼吸疾病問卷（SGRQ），量表包括呼吸癥狀、活動受限、疾病影響3個(gè)維度，各維度分值0～100分，得分越高，生活質(zhì)量越差。

1.3.5 安全性評價(jià) 觀察兩組惡心嘔吐、皮膚黏膜出血等不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 26.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字²檢驗(yàn)。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較

對照組男20例，女12例；年齡38～71歲，平均（52.33±5.16）歲；病程1～7年，平均（3.05±1.27）年。觀察組男18例，女14例；年齡40～75歲，平均（52.80±5.27）歲；病程1～6年（2.91±1.15）年。兩組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），具有可比性。

2.2 兩組臨床療效比較

觀察組總有效率為93.75%，高于對照組的75.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字²=4.267，P=0.039），見表1。

2.3 兩組肺功能比較

治療前，兩組FVC、FEV1%pred及PEF水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）；治療6個(gè)月，兩組FVC、FEV1%pred及PEF水平均高于治療前，且觀察組均高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。見表2。

2.4 兩組血清PI3K、Akt、mTOR水平比較

治療前，兩組血清PI3K、Akt、mTOR水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）；治療6個(gè)月，兩組血清PI3K、Akt、mTOR水平均低于治療前，且觀察組均低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。見表3。

2.5 兩組生活質(zhì)量評分比較

治療前，兩組SGRQ量表各項(xiàng)評分比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）；治療6個(gè)月，兩組呼吸癥狀、活動受限及疾病影響評分均低于治療前，且觀察組均低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。見表4。

2.6 安全性評價(jià)

兩組治療期間均未見惡心嘔吐、皮膚黏膜出血等不良反應(yīng)。

3 討論

特發(fā)性肺纖維化以肺泡結(jié)構(gòu)紊亂、纖維組織增生等為主要病理改變，目前，其發(fā)病機(jī)制不明確，多數(shù)學(xué)者考慮主要與基因突變、粉塵接觸、病毒感染等多種因素密切相關(guān)[7-8]。本病發(fā)病較為隱匿，且疾病進(jìn)展主要為慢性進(jìn)展，隨著肺組織結(jié)構(gòu)被破壞、肺間質(zhì)出現(xiàn)纖維化進(jìn)程，且患者可發(fā)生限制性通氣障礙，疾病晚期患者多因呼吸衰竭而死亡。因此，減緩肺功能進(jìn)一步下降，改善肺纖維化已成為特發(fā)性肺纖維化藥物治療的研究熱點(diǎn)。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為特發(fā)性肺纖維化屬于“肺痹”“肺萎”等范疇，其病因病機(jī)主要為本虛標(biāo)實(shí)、虛實(shí)夾雜之證，肺為嬌臟，久病肺氣虧虛則氣血運(yùn)行不力，致瘀血阻痹肺絡(luò)，最終導(dǎo)致肺臟失于濡養(yǎng)，肺葉萎弱不用。故治療上當(dāng)以扶助正氣，同時(shí)兼用活血祛瘀、化痰通絡(luò)之法。丹貝益肺顆粒是一種由丹參、平貝等多種中藥材經(jīng)現(xiàn)代工藝加工制成的復(fù)方制劑，其中丹參活血祛瘀、平貝清熱潤肺化痰共為君藥；川芎為血中之氣藥，善活血行氣，桃仁、地龍止咳平喘，共為臣藥；五味子斂肺滋腎，補(bǔ)骨脂溫腎納氣平喘，黃芪、麥冬及黨參均可扶正固表、益氣養(yǎng)陰，共為佐藥；桔梗載藥上達(dá)于肺，又可助平貝化痰止咳，是為使藥；諸藥配伍，標(biāo)本兼顧，補(bǔ)而不滯，使瘀血得除、痰濁得化?，F(xiàn)代藥理研究表明，平貝有效成分生物堿可通過抑制咳嗽中樞、舒張氣管平滑肌，發(fā)揮良好的止咳平喘作用；并可通過抗氧化、清除自由基的作用，減輕肺組織纖維化損傷。丹參酮可有效增加組織型纖溶酶原活性，顯著改善機(jī)體微循環(huán)缺血缺氧狀態(tài)。此外，地龍?zhí)崛∥锞呖鼓?、舒張支氣管的作用[9-11]。

乙酰半胱氨酸可清除蛋白質(zhì)自由基，從而有效提高細(xì)胞缺血缺氧狀態(tài)下的抗氧化能力，以減少細(xì)胞和組織的損傷。研究顯示，乙酰半胱氨酸可通過抑制磷脂酶和炎癥反應(yīng)信號通路，有效降低機(jī)體CRP、IL-6等炎癥細(xì)胞因子表達(dá)，進(jìn)而發(fā)揮強(qiáng)大的抗炎作用[12-14]。另外，乙酰半胱氨酸可抑制轉(zhuǎn)化生長因子-β活性，以調(diào)節(jié)肺組織中氧化-抗氧化失衡，減少肺組織中成纖維化細(xì)胞轉(zhuǎn)化，進(jìn)而延緩肺纖維化進(jìn)程[15-16]。但也有研究表明，單獨(dú)應(yīng)用乙酰半胱氨酸并不能降低肺纖維化患者短期病死率，故需聯(lián)合用藥治療[17]。本研究結(jié)果顯示治療6個(gè)月，觀察組治療總有效率高于對照組，肺功能指標(biāo)FVC、FEV1%pred、PEF及生活質(zhì)量各項(xiàng)評分改善效果均優(yōu)于對照組（Plt;0.05）。提示丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸治療特發(fā)性肺纖維化可提高臨床療效，改善肺功能及生活質(zhì)量?？紤]作用機(jī)制可能是，兩藥聯(lián)合可從多個(gè)方面抗肺組織和肺細(xì)胞纖維化，減緩肺功能的下降，進(jìn)而提高臨床療效。

研究表明，血管內(nèi)皮細(xì)胞在特發(fā)性肺纖維化的發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，PI3K/Akt/mTOR通路廣泛存在于細(xì)胞中，可通過激活血管內(nèi)皮細(xì)胞表面特異性受體促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的生長、分化，進(jìn)而參與肺纖維化過程[18-19]。也有研究證實(shí)，PI3K/Akt/mTOR可促進(jìn)肺組織膠原蛋白合成，抑制細(xì)胞自噬，促進(jìn)特發(fā)性肺纖維化的發(fā)生[20]。本研究結(jié)果顯示，治療6個(gè)月，觀察組血清PI3K、Akt、mTOR水平均低于對照組（Plt;0.05）。提示丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸可通過下調(diào)血清PI3K、Akt、mTOR水平修復(fù)內(nèi)皮細(xì)胞，從而達(dá)到治療的目的，且安全性良好。

綜上所述，丹貝益肺顆粒聯(lián)合乙酰半胱氨酸治療，可有效提高特發(fā)性肺纖維化患者臨床療效，改善肺功能及生活質(zhì)量，下調(diào)血清PI3K、Akt、mTOR水平，且安全性良好。

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