血清Stathmin、TFF3與上皮性卵巢癌患者初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)治療結(jié)局和術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系*

韓 晴,何愛琴,李 詠,邱云芬,劉春花

南通市腫瘤醫(yī)院/南通大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院婦科,江蘇南通 226361

卵巢癌為威脅全球女性生命健康的常見惡性腫瘤,發(fā)病率居第7位,病死率居第8位[1]。該腫瘤發(fā)病隱匿,目前缺乏有效的篩查與早期診斷方式,5年生存率約為47%[2]。上皮性卵巢癌多發(fā)于絕經(jīng)后的女性,確診患者多處于中晚期,此時可能合并臟器或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,錯失最佳治療時機(jī)[3]。初始累及盆腔及上腹部浸潤性上皮性卵巢癌應(yīng)盡可能切除癌病灶[4]。初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)適用于中晚期卵巢癌患者,能較大程度切除病灶組織,抑制病情進(jìn)展[5]。初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)的滿意標(biāo)準(zhǔn)為殘余癌灶最大徑不足1 cm,盡可能肉眼看不見殘留病灶[6]。初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)結(jié)局滿意為提高患者術(shù)后生存率的關(guān)鍵,術(shù)前評估其結(jié)局可為治療方案選擇提供參考,但治療后高復(fù)發(fā)率也是一大難題,尋找患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素是臨床關(guān)注重點[7]。微管解聚蛋白(Stathmin)屬于微管不穩(wěn)定調(diào)節(jié)蛋白,對細(xì)胞微管功能有影響,可改變細(xì)胞增殖周期[8]。研究指出,Stathmin參與了腫瘤發(fā)生、治療后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等[9]。三葉因子3(TFF3)為三葉因子家族中最晚發(fā)現(xiàn)的小分子分泌多肽,可參與黏膜保護(hù)、上皮修復(fù)等過程,在多種腫瘤中水平較高[10-11]。研究顯示,TFF3與宮頸癌等術(shù)后復(fù)發(fā)有關(guān)[12],但是血清Stathmin、TFF3與上皮性卵巢癌術(shù)后復(fù)發(fā)是否相關(guān)尚不清楚。為此,本研究通過分析血清Stathmin、TFF3對上皮性卵巢癌患者初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)治療結(jié)局和術(shù)后復(fù)發(fā)的影響,旨在為臨床早期診療和降低復(fù)發(fā)率提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年7月至2020年1月本院收治的177例上皮性卵巢癌患者為研究對象,年齡35～78歲,平均(57.93±6.39)歲;國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)分期:Ⅲ期86例、Ⅳ期91例;組織分級:低分化74例、中高分化103例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移83例;超出腹腔外的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移87例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中卵巢癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[13],經(jīng)計算機(jī)斷層掃描(CT)、磁共振成像(MRI)或超聲等影像學(xué)檢查與病理檢查確診為上皮性卵巢癌,Finkler超聲評分≥7分;(2)患者FIGO分期為Ⅲ～Ⅳ期,符合指征,接受初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)治療;(3)預(yù)計生存期超過3個月,臨床資料完整;(4)患者知情同意并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)無法耐受手術(shù)患者;(2)合并其他腫瘤患者;(3)術(shù)前有新輔助化療患者;(4)感染性疾病患者;(5)化療禁忌證患者;(6)嚴(yán)重肝腎功能障礙患者;(7)精神疾病患者。本研究取得本院倫理委員會批準(zhǔn)(批號:2016xjs084)。

1.2方法

1.2.1臨床資料收集 收集患者臨床資料,包括年齡、FIGO分期、組織分級、腹水、化療方法及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、超出腹腔外的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等資料,并收集患者術(shù)后腫瘤標(biāo)志物糖類抗原125(CA125)、人附睪蛋白4(HE4)檢測結(jié)果。

1.2.2血清Stathmin、TFF3檢測 術(shù)前抽取患者入院第2日清晨空腹靜脈血3 mL,以3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心(離心半徑為10 cm)0.5 h,取其血清置于-80 ℃冰箱中冷凍保存?zhèn)溆谩２捎妹嘎?lián)免疫吸附試驗檢測血清Stathmin、TFF3水平,Stathmin試劑盒購于深圳市康初源有限公司,TFF3試劑盒購于上海澤葉生物科技有限公司,操作過程嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.2.3手術(shù)方法和手術(shù)結(jié)局評價 初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù):術(shù)前做好充分的腸道準(zhǔn)備,患者入手術(shù)室后常規(guī)消毒鋪巾,麻醉后于腹部做一足夠長的縱形切口,抽取腹水或腹腔沖洗液行脫落細(xì)胞學(xué)檢查,全面探查盆腹腔,切除包括全子宮、大網(wǎng)膜、雙附件、盆腹腔癌灶與盆腔或腹主動脈淋巴結(jié),必要時游離輸尿管。根據(jù)術(shù)中探查情況切除受累的腸管、部分膀胱等臟器,盡可能剝離切除受累腹膜。手術(shù)由同一組經(jīng)驗豐富的主任醫(yī)師進(jìn)行操作。手術(shù)結(jié)局:以肉眼下完全無殘留癌灶(R0)或單個殘留癌灶最大徑不超過1 cm(R1)為滿意,單個殘留癌灶最大徑>1 cm(R2)為不滿意[14]。

1.3隨訪和復(fù)發(fā)標(biāo)準(zhǔn) 對患者行3年隨訪,第1～2年每隔2～3個月隨訪1次,第3年每隔4～6個月隨訪1次,隨訪截止時間為2023年1月或患者死亡。復(fù)發(fā)標(biāo)準(zhǔn):CA125、HE4等腫瘤標(biāo)志物水平升高,CA125正常范圍為0～35 U/mL,HE4正常范圍為0～140 pmol/L,高于正常值則判斷為水平升高;經(jīng)CT或MRI等檢查、體格檢查顯示腫塊;不明原因的腸梗阻;出現(xiàn)腹水?；颊呓?jīng)手術(shù)治療滿意半年后發(fā)生以上任兩項表現(xiàn)即可確診為復(fù)發(fā)[15]。

2 結(jié) 果

2.1滿意組與不滿意組基線資料比較 177例患者治療結(jié)局滿意113例(滿意組),滿意率為63.84%,不滿意64例(不滿意組)。滿意組與不滿意組年齡、FIGO分期、組織分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與超出腹腔外的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),滿意組血清CA125、HE4水平低于不滿意組(P<0.05)。見表1。

表1 滿意組與不滿意組基線資料比較或n(%)]

2.2滿意組與不滿意組血清Stathmin、TFF3水平比較 滿意組血清Stathmin、TFF3水平低于不滿意組(P<0.05)。見表2。

表2 滿意組與不滿意組血清Stathmin、TFF3水平比較

2.3血清Stathmin、TFF3對治療結(jié)局不滿意的預(yù)測價值 將血清Stathmin、TFF3以Logistic回歸法構(gòu)建聯(lián)合應(yīng)用的回歸預(yù)測模型(LogP模型),模型為:Ln(P/1-P)= 0.829 1 ×Stathmin +0.022 5×TFF3。以其模型值為預(yù)測指標(biāo),進(jìn)行ROC曲線分析。結(jié)果顯示,血清Stathmin、TFF3單獨及聯(lián)合應(yīng)用預(yù)測手術(shù)結(jié)局不滿意的曲線下面積(AUC)分別為0.756、0.731、0.826,其中聯(lián)合應(yīng)用預(yù)測效能較高,AUC及靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均較各指標(biāo)單獨應(yīng)用有明顯提升。見表3。

表3 血清Stathmin、TFF3對手術(shù)結(jié)局不滿意的預(yù)測價值

2.4復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組臨床相關(guān)資料比較 隨訪結(jié)果顯示,治療結(jié)局滿意患者復(fù)發(fā)47例(復(fù)發(fā)組),復(fù)發(fā)率為41.59%,未復(fù)發(fā)66例(未復(fù)發(fā)組)。復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組年齡、化療方法比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),兩組FIGO分期、組織分級、腹水、CA125、HE4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、超出腹腔外的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及血清Stathmin、TFF3水平比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組臨床相關(guān)資料比較[n(%)或

2.5影響術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素分析 以表3中差異有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo):FIGO分期(Ⅳ期=1,Ⅲ期=0)、組織分級(低分化=1,中高分化=0)、腹水(>1 000 mL=1,≤1 000 mL=0)、CA125(>35 U/L=1,≤35 U/L=0)、HE4(>400 pmol/L=1,≤400 pmol/L=0)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(有=1,無=0)、超出腹腔外的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(有=1,無=0)、Stathmin(連續(xù)性變量,原值輸入)、TFF3(連續(xù)性變量,原值輸入)為自變量,有無復(fù)發(fā)(復(fù)發(fā)=1,未復(fù)發(fā)=0)為因變量行多因素Logistic回歸分析,結(jié)果顯示,FIGO分期Ⅳ期、腹水>1 000 mL、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、超出腹腔外的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及術(shù)前血清Stathmin、TFF3水平升高為患者術(shù)后復(fù)發(fā)的獨立危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 影響術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素分析

2.6血清Stathmin、TFF3對術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測價值 血清Stathmin、TFF3構(gòu)建聯(lián)合應(yīng)用的回歸預(yù)測模型(LogP模型),模型為:Ln(P/1-P)=1.224 1×Stathmin+0.0313 ×TFF3。結(jié)果顯示:血清Stathmin、TFF3兩指標(biāo)單獨及聯(lián)合應(yīng)用預(yù)測術(shù)后復(fù)發(fā)的AUC分別為0.781、0.720、0.834,聯(lián)合應(yīng)用預(yù)測效能更高。見表6。

表6 血清Stathmin、TFF3對術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測價值

3 討 論

上皮性卵巢癌多發(fā)于中老年女性,其早期診斷率較低,患者病死率高,該腫瘤發(fā)病較為隱匿、病情進(jìn)展快,治療以手術(shù)為主,輔助化療,強(qiáng)調(diào)綜合治療[16]。初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)為上皮性卵巢癌治療的重要方式,需盡可能切除盆腔、腹部及腹膜后腫瘤的所有病灶[17]。因部分患者為晚期,腫瘤已侵犯多器官,粘連較為嚴(yán)重,初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)可能無法取得滿意效果[18]。故術(shù)前評估手術(shù)結(jié)局對治療方案選擇、改善患者預(yù)后具有一定指導(dǎo)作用?；颊咄砥谏掀ば月殉舶┠[瘤細(xì)胞減滅術(shù)后易復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)將進(jìn)一步加重病情,治療難度更大。故尋找血清指標(biāo)以預(yù)測患者術(shù)后復(fù)發(fā)極為重要。

Stathmin為近年來研究較多的微管調(diào)節(jié)蛋白,多存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),能夠經(jīng)磷酸化調(diào)節(jié)自身活性,改變細(xì)胞中微管系統(tǒng)動力平衡,在細(xì)胞周期中有重要作用[19]。該蛋白于乳腺癌[19]、結(jié)直腸癌[20]等多種腫瘤中水平升高。趙車冬等[21]指出,胃癌根治術(shù)后患者血清Stathmin水平與腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有關(guān)。師路等[22]研究指出,胸腔鏡食管癌切除術(shù)患者術(shù)后血清Stathmin水平與復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性,對術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移具有預(yù)測價值。張軍港等[23]研究發(fā)現(xiàn),Stathmin參與卵巢癌C13K細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展,但血清中Stathmin水平在上皮性卵巢癌患者的表達(dá)尚不清楚。本研究不滿意組血清Stathmin水平高于滿意組,提示血清Stathmin水平可能與初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)后治療結(jié)局有關(guān)。該結(jié)果原因可能為:Stathmin的作用靶點為微管蛋白,磷酸化水平與微管平衡及細(xì)胞周期轉(zhuǎn)化有關(guān),當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂期,Stathmin磷酸化水平升高而促進(jìn)細(xì)胞退出有絲分裂期,抑制正常細(xì)胞增殖而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等能力[24]。研究指出,野生型p53基因能通過抑制Stathmin啟動子活性以參與其表達(dá)的負(fù)性調(diào)節(jié),而Stathmin高表達(dá)則越過p53介導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯,對癌細(xì)胞增殖、分化等產(chǎn)生促進(jìn)作用[25]。

TFF3于腸黏膜損傷時可保護(hù)腸黏膜,對上皮愈合具有促進(jìn)作用。TFF3通過多種機(jī)制在婦科惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用,研究發(fā)現(xiàn)健康女性生殖組織中的TFF3無表達(dá)或表達(dá)較低,但在宮頸癌等腫瘤中表達(dá)升高[11]。TFF3表達(dá)受雌激素調(diào)控,在不典型增生組織和子宮內(nèi)膜癌組織中異常升高[26]。TFF3與血管內(nèi)皮生長因子具有協(xié)同作用,可激活信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲與腫瘤生長[26]。MORITO等[27]研究指出,TFF3在結(jié)直腸癌中術(shù)后復(fù)發(fā)中表達(dá)升高?？垫玫萚12]指出,TFF3水平升高的宮頸癌患者術(shù)后2年易復(fù)發(fā),但是血清TFF3在上皮性卵巢癌患者中的表達(dá)及是否與術(shù)后復(fù)發(fā)有關(guān)尚不清楚。本研究中不滿意組血清TFF3水平高于滿意組,提示TFF3可能與初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)后治療結(jié)局有關(guān),其原因可能為TFF3通過表皮生長因子受體等信號通路對癌細(xì)胞存活、轉(zhuǎn)移等過程產(chǎn)生促進(jìn)作用[28]。TFF3高表達(dá)促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展,抑制癌細(xì)胞黏附以促進(jìn)腫瘤浸潤、侵襲,對細(xì)胞凋亡有明顯抑制作用,進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移與擴(kuò)散,導(dǎo)致初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)的治療結(jié)局不滿意[29]。

復(fù)發(fā)組Stathmin、TFF3水平高于未復(fù)發(fā)組,進(jìn)一步經(jīng)多因素Logistic回歸分析顯示,術(shù)前血清Stathmin、TFF3水平升高為患者術(shù)后復(fù)發(fā)的獨立危險因素,該結(jié)果原因為Stathmin能調(diào)節(jié)微管動力與紡錘體形成,對有絲分裂具有影響,進(jìn)而改變細(xì)胞周期以影響細(xì)胞生物學(xué)行為,水平過高對癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用,增加了術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險[30-31]。TFF3可抑制E-鈣黏蛋白表達(dá),增加腫瘤侵襲性,TFF3表達(dá)上調(diào)抑制細(xì)胞凋亡,促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移過程,術(shù)后更易復(fù)發(fā)[32]。血清Stathmin、TFF3聯(lián)合檢測對預(yù)測治療結(jié)局不滿意、術(shù)后復(fù)發(fā)的AUC分別為0.826、0.834,其靈敏度及特異度均高于Stathmin、TFF3單獨檢測,提示二者聯(lián)合應(yīng)用可以提升預(yù)測價值。與臨床常用的血清CA125和HE4相比較,血清Stathmin、TFF3聯(lián)合檢測的預(yù)測效能略高,血清CA125和HE4的AUC在0.65～0.70,而血清Stathmin、TFF3單獨及聯(lián)合檢測的AUC均>0.73,且血清Stathmin、TFF3這兩個新指標(biāo)采集難度與血清CA125、HE4相似,作為預(yù)測評估指標(biāo)更適用。因此,Stathmin、TFF3有望作為臨床早期評估上皮性卵巢癌患者治療結(jié)局和預(yù)后的潛在生物標(biāo)志物。但對于血清Stathmin、TFF3在上皮性卵巢癌中具體作用機(jī)制仍需展開進(jìn)一步研究。

綜上所述,血清Stathmin、TFF3在上皮性卵巢癌中水平升高,能有效預(yù)測患者初始腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)治療結(jié)局和術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險,也是影響患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素,可作為臨床診療與復(fù)發(fā)風(fēng)險評估的潛在生物標(biāo)志物。