2022 年湖南省家禽H7N9 亞型禽流感監(jiān)測(cè)與分析

黃建龍，郭永祥，張朝陽(yáng)，范仲鑫，魯杏華

（湖南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南長(zhǎng)沙 410114）

2013 年，上海市首次在人類(lèi)體內(nèi)發(fā)現(xiàn)H7N9亞型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV），這是一種新重組A型流感病毒，為低致病性AIV[1]。這種低致病性H7N9 亞型AIV 感染雞后不表現(xiàn)臨床癥狀或臨床癥狀比較溫和[2]。但是隨著時(shí)間的推移，到2016 年底，該低致病性H7N9 亞型AIV 進(jìn)一步突變?yōu)楦咧虏⌒訟IV，并呈現(xiàn)對(duì)雞的高致病力[3]。2017 年3 月，湖南省東安縣首次報(bào)告發(fā)生雞高致病性H7N9 亞型禽流感疫情[4]。隨后，河北、河南和天津等多個(gè)?。ㄖ陛犑校┍┌l(fā)了雞H7N9 亞型禽流感疫情，給我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)帶來(lái)了巨大損失[5-7]。

鑒于H7N9 亞型禽流感防控的嚴(yán)峻形勢(shì)，2017年9 月開(kāi)始我國(guó)在家禽中全面實(shí)施H7N9 亞型禽流感免疫政策。為了解湖南省家禽H7N9 亞型禽流感的免疫抗體水平及其流行情況，2022 年在全省14個(gè)地市開(kāi)展了H7N9 亞型禽流感監(jiān)測(cè)，以期為湖南省H7N9 亞型禽流感的預(yù)警和防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2022 年1—12 月，在全省14 個(gè)市州，采用配額抽樣方法，在每個(gè)市州采集不同場(chǎng)點(diǎn)（種禽場(chǎng)、商品代場(chǎng)、散養(yǎng)戶和活禽市場(chǎng)）的禽血清和禽拭子樣品，每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)采樣1 次（具體采樣月份不一），至少采集10 份禽血清或10 份禽拭子（同時(shí)采集，但具體數(shù)量不完全一致），每個(gè)市州至少采集500份禽血清和500 份禽拭子，但是對(duì)不同場(chǎng)點(diǎn)和不同動(dòng)物種類(lèi)（雞、鴨、鵝）的具體采樣數(shù)量和采樣比例沒(méi)作要求。各市州抽樣場(chǎng)群數(shù)不同（70～249 個(gè)），共在種禽場(chǎng)、商品代場(chǎng)、散養(yǎng)戶和活禽市場(chǎng)，采集46 112 份禽血清樣品和53 246 份禽拭子樣品，具體數(shù)量見(jiàn)表 1。

1.2 檢測(cè)方法

禽血清用血凝抑制（HI）試驗(yàn)檢測(cè)H7 亞型抗體，HI 抗體效價(jià)≥24，判定為個(gè)體合格，個(gè)體合格率≥70%的群體為合格場(chǎng)群，具體操作方法參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936—2020）；禽咽和泄殖腔拭子用H7N9 亞型AIV 熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒進(jìn)行病毒核酸檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用Microsoft Excel 軟件對(duì)不同種類(lèi)、不同場(chǎng)群、不同地區(qū)的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并用GraphPad Prism 軟件進(jìn)行差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體檢測(cè)情況

2022 年共對(duì)1 857 個(gè)場(chǎng)群（包括種禽場(chǎng)、商品代場(chǎng)、散養(yǎng)戶和活禽市場(chǎng)）進(jìn)行H7N9 亞型AIV免疫抗體檢測(cè)，其中檢出合格場(chǎng)群1 732 個(gè)，平均場(chǎng)群合格率為93.27%；共檢測(cè)46 112 份禽血清樣品，檢出H7N9 亞型AIV 免疫抗體合格樣品41 777 份，平均個(gè)體合格率為90.60%；共檢測(cè)53 246 份禽拭子樣品，僅在1 份雞拭子樣品中檢測(cè)到H7N9 亞型AIV 核酸陽(yáng)性。

表1 樣品采集數(shù)量統(tǒng)計(jì) 單位：個(gè)或份

2.2 不同禽種檢測(cè)情況

2.2.1 雞 統(tǒng)計(jì)結(jié)果（表2）顯示：雞H7N9 亞型AIV 免疫抗體平均場(chǎng)群合格率和個(gè)體合格率分別為94.66%和91.51%，其中種禽場(chǎng)、商品代場(chǎng)、散養(yǎng)戶和活禽市場(chǎng)中的場(chǎng)群合格率分別為97.70%、95.83%、92.31%和87.93%，個(gè)體合格率分別為95.67%、92.30%、90.04% 和80.53%。種禽場(chǎng)與活禽市場(chǎng)之間的雞H7N9 亞型AIV 免疫抗體場(chǎng)群合格率和個(gè)體合格率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；在一活禽市場(chǎng)的1 份雞拭子樣品中檢測(cè)到H7N9 亞型AIV 核酸陽(yáng)性。

表2 雞H7N9 亞型AIV 檢測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2.2.2 水禽 統(tǒng)計(jì)結(jié)果（表3）顯示：水禽（鴨和鵝）H7N9 亞型AIV 免疫抗體平均場(chǎng)群和個(gè)體合格率分別為83.26%和81.86%，其中種禽場(chǎng)、商品代場(chǎng)、散養(yǎng)戶和活禽市場(chǎng)的場(chǎng)群合格率分別為91.30%、81.82%、86.67%和60.00%，個(gè)體合格率分別為92.67%、80.49%、83.69% 和69.91%；種禽場(chǎng)的免疫抗體平均場(chǎng)群合格率和個(gè)體合格率均最高，與其他場(chǎng)點(diǎn)相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。沒(méi)有在水禽拭子中檢測(cè)到H7N9亞型AIV核酸。

表3 水禽H7N9 亞型禽流感檢測(cè)情況

2.3 不同市州檢測(cè)情況

全省14 個(gè)市州H7N9 亞型AIV 免疫抗體平均場(chǎng)群合格率和個(gè)體合格率均在70%以上，整體免疫效果較好，但不同市州有一定的差異，最高的場(chǎng)群合格率和個(gè)體合格率分別達(dá)到98.80%和96.55%，最差的分別為79.55 和78.64%（圖1）。

圖1 不同市州H7N9 亞型AIV 免疫抗體合格率分布

3 討論

本次監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，2022 年湖南省H7N9 亞型禽流感免疫抗體水平較高，總個(gè)體合格率達(dá)到90.6%，遠(yuǎn)高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求（合格率≥70%），與其他省份的監(jiān)測(cè)情況相似[8-9]。雞和水禽的免疫抗體水平都在 80%以上，但水禽免疫抗體合格水平普遍低于雞。這可能與兩個(gè)方面有關(guān)系：一方面與疫苗株的免疫源性有關(guān)。研究[10]顯示，水禽禽流感免疫抗體維持時(shí)間較短，抗體水平下降速度較快。另一方面與免疫次數(shù)有關(guān)，如蛋鴨基本上免疫2 次禽流感疫苗，產(chǎn)蛋后不再進(jìn)行禽流感免疫，而蛋雞在產(chǎn)蛋前會(huì)進(jìn)行3 次禽流感免疫，并且產(chǎn)蛋后還會(huì)進(jìn)行2 次禽流感免疫。

從不同場(chǎng)點(diǎn)監(jiān)測(cè)情況看，種禽場(chǎng)免疫抗體水平最高，其次是商品代場(chǎng)和散養(yǎng)戶，活禽市場(chǎng)抗體水平最低。這主要有3 個(gè)方面的原因：一是湖南省大多數(shù)水禽場(chǎng)為中小規(guī)模，這些中小型水禽場(chǎng)場(chǎng)主和散養(yǎng)戶主普遍認(rèn)為水禽發(fā)生禽流感的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較低，因而對(duì)水禽進(jìn)行禽流感免疫的意識(shí)淡薄；二是散養(yǎng)戶禽流感免疫接種主要依靠村級(jí)防疫員在春秋季集中免疫，可能存在漏免現(xiàn)象，有的散養(yǎng)戶甚至拒絕免疫；三是進(jìn)入到活禽市場(chǎng)的家禽主要是淘汰的蛋雞、蛋鴨和肉禽，距離禽流感免疫時(shí)間較長(zhǎng)，其免疫抗體基本上處于較低水平。眾所周知，活禽市場(chǎng)在H7N9 亞型AIV 的傳播與擴(kuò)散中發(fā)揮著重要作用，同時(shí)在活禽市場(chǎng)中存在不同亞型AIV[11-12]。本次在活禽市場(chǎng)監(jiān)測(cè)到H7N9 亞型AIV 核酸陽(yáng)性，提示要進(jìn)一步加強(qiáng)活禽市場(chǎng)管理，降低人感染H7N9 亞型AIV 的風(fēng)險(xiǎn)。從不同市州監(jiān)測(cè)情況看，各市州有一定的差異，這可能與抽樣數(shù)量有關(guān)，本次監(jiān)測(cè)未進(jìn)行系統(tǒng)的采樣設(shè)計(jì)，導(dǎo)致各地采集樣品的代表性不足，不能真實(shí)反映各市州整體水平。

我國(guó)實(shí)施的H7N9 亞型禽流感強(qiáng)制免疫計(jì)劃，不但有效阻斷了H7N9 亞型AIV 在雞群中的流行，更是大大降低了人感染 H7N9 亞型AIV 的風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)前禽類(lèi)養(yǎng)殖、流通和屠宰環(huán)節(jié)中AIV 入侵風(fēng)險(xiǎn)持續(xù)存在，加上國(guó)外禽流感疫情嚴(yán)重，因此更應(yīng)做好禽流感強(qiáng)制免疫工作。同時(shí)，要加強(qiáng)禽流感監(jiān)測(cè)工作，對(duì)免疫不合格場(chǎng)及時(shí)指導(dǎo)其進(jìn)行補(bǔ)免，有效構(gòu)筑免疫屏障；對(duì)禽流感陽(yáng)性場(chǎng)所要指導(dǎo)其開(kāi)展消毒滅源等工作，消除病原的潛在威脅，并強(qiáng)化生物安全防護(hù)，不斷提升公共衛(wèi)生安全水平。

4 結(jié)論

監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)：2022 年湖南省H7N9 亞型禽流感免疫效果整體較好，場(chǎng)群合格率和個(gè)體免疫合格率都遠(yuǎn)超出國(guó)家要求，在飼養(yǎng)場(chǎng)禽群中也未檢出H7N9 亞型AIV 病原，因此在家禽中發(fā)生大規(guī)模H7N9 亞型禽流感疫情的風(fēng)險(xiǎn)較低。但水禽以及散養(yǎng)戶和活禽市場(chǎng)禽群的免疫抗體水平略低，且在活禽市場(chǎng)中仍檢出病原，提示疫情散發(fā)風(fēng)險(xiǎn)依然存在，需要繼續(xù)加強(qiáng)對(duì)家禽的免疫監(jiān)測(cè)工作，及時(shí)補(bǔ)免，同時(shí)做好檢疫監(jiān)督工作。