HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)在宮頸癌早期中的診斷效能分析

鐘桂艷 李芳 王艷

（1. 江西省贛州市贛縣區(qū)人民區(qū)醫(yī)院病理科，江西 贛州 341100；2. 江西省贛州市于都縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 贛州 342300；3. 江西省贛州市信豐縣贛南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院病理科，江西 贛州 341600）

宮頸癌也稱為子宮頸癌，是指發(fā)生在子宮陰道部以及宮頸管的惡性腫瘤，是女性常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率位于女性腫瘤的第二位，其死亡率極高，嚴(yán)重影響到女性的身體健康。近年來其發(fā)病率具有年輕化的趨勢(shì)，在我國(guó)每年有超過10 萬的新增病例，早期宮頸癌只要得到積極的治療，治愈率可達(dá)100%，5 年的存活率可達(dá)到80-90%，因此宮頸癌的早期篩查引起人們?cè)絹碓蕉嗟闹匾昜1]。目前，臨床上常用的檢測(cè)方法主要有：陰道鏡檢查、人乳頭瘤病毒（Human Papilloma Virus，HPV）分型檢查、液基薄層細(xì)胞學(xué)（Thin prep cytologic test，TCT）檢測(cè)、宮頸刮片、陰道鏡活檢等。目前，陰道鏡活檢是檢查宮頸細(xì)胞是否癌變最為準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，但由于其具有創(chuàng)操作，因此患者對(duì)其的接受度較低，所以需找尋一種高敏感度、無創(chuàng)傷的篩查方式。而TCT 檢測(cè)是采用液基薄層細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)宮頸細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分類診斷，與傳統(tǒng)的宮頸刮片巴氏涂片檢查相比明顯提高了標(biāo)本的滿意度以及宮頸異常細(xì)胞檢出率，且其操作簡(jiǎn)單、費(fèi)用低，對(duì)于宮頸細(xì)胞瘤變具有較高的特異性，對(duì)宮頸癌的早期診斷與篩查具有重要意義[2]。HPV 基因分型檢查可以在感染的最早期階段篩查出HPV，且其對(duì)于宮頸癌早期診斷具有較高敏感度，從而達(dá)到預(yù)防及篩查宮頸癌的醫(yī)學(xué)目的[3]?；诖?，為臨床應(yīng)用提供更多的證據(jù)，本文旨在分析HPV 基因分型結(jié)合TCT 檢測(cè)在宮頸癌早期診斷中的應(yīng)用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021 年6 月至2023 年1 月在我院進(jìn)行宮頸癌篩查患者236 例作為研究對(duì)象，平均年齡 32.34±5.45 歲；平均身體質(zhì)量指數(shù)23.01±1.44 kg·m-2。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，受試者或家屬已簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均有過性生活；（2）臨床資料無缺乏；（3）均可接受HPV 基因分型、TCT以及陰道鏡下活檢檢查；（4）無精神障礙，可以配合檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）正處于妊娠期、月經(jīng)期；（2）過往有宮頸手術(shù)史以及做過子宮切除術(shù)；（3）患有免疫性疾病或于治療前服用過免疫抑制劑；（4）檢查前進(jìn)行陰道用藥；（5）既往無婦科惡性腫瘤診斷史。

1.2 方法

TCT 檢測(cè)：在進(jìn)行檢查前的24 h 禁止性生活、禁止進(jìn)行陰道檢查、陰道灌洗以及陰道上藥等，避免干擾檢測(cè)結(jié)果。使用窺器進(jìn)入陰道暴露宮頸后，將子宮刷置于子宮頸管內(nèi)，達(dá)到子宮頸外口1 cm 左右，在子宮頸管內(nèi)旋轉(zhuǎn)數(shù)圈后取出，將脫落的細(xì)胞放入專用保存液中送檢，采集兩份，一份用于TCT 檢測(cè)進(jìn)行陽性判斷，一份用于HPV 基因分型檢測(cè)進(jìn)行陽性判斷。標(biāo)本采集均由同一位婦產(chǎn)科醫(yī)師進(jìn)行。

HPV 基因分型檢測(cè)：采用雜交捕獲-化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HPV，可以檢測(cè)出包括16、18 等13種高危亞型HPV 分型。將所有樣品恢復(fù)至室溫，提前開啟水浴鍋，水位高于樣本液位。使用人乳頭狀瘤病毒（HPV）核酸檢測(cè)試劑盒（國(guó)藥準(zhǔn)字3401442）進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)的陽性判定為：與標(biāo)準(zhǔn)陽性對(duì)照相比，相對(duì)光單位與標(biāo)準(zhǔn)品的比值≥1.0 為陽性診斷。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 分析患者手術(shù)病理結(jié)果

采用病理結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.2 對(duì)比HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)及聯(lián)合診斷早期宮頸癌效能

以活檢檢查為金標(biāo)準(zhǔn)，比較HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)以及聯(lián)合診斷早期宮頸癌效能，包括靈敏度、特異性、陽性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值。n 代表總例數(shù)，a 表示真陽性，b 表示假陽性，c 表示假陰性，d 表示真陰性。靈敏度=a/（a+c），特異度=d/（b+d），準(zhǔn)確率=（a+b）/例數(shù)，陽性預(yù)測(cè)值=a/（a+b），陰性預(yù)測(cè)值=d/（c+d）。

1.3.3 對(duì)比HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)以及聯(lián)合診斷早期宮頸癌的一致性分析

采用Kappa 一致性檢驗(yàn)評(píng)估HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)以及聯(lián)合診斷早期宮頸癌與病理學(xué)檢查結(jié)果的一致性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究數(shù)據(jù)均采用SPSS21.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X ±SD）描述，兩兩間使用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用n（%）表示，并采用χ2檢驗(yàn)；采用Kappa 一致性檢驗(yàn)評(píng)估HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)以及聯(lián)合診斷的一致性，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 手術(shù)病理結(jié)果

經(jīng)病理活檢結(jié)果顯示，宮頸上皮細(xì)胞癌變（Cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅰ級(jí)71例，CIN Ⅱ-Ⅲ級(jí)57 例，宮頸癌1 例。其中有58例被篩查出為宮頸癌高危人群。

2.2 診斷效能

HPV 基因分型的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值分別為：87.93%、94.21%、69.92%、87.93%、64.04%，TCT 檢測(cè)分別為53.45%、85.16%、78.81%、53.45%、85.16%，HPV 基因分型+TCT 檢測(cè)分別為93.10%、97.70%、96.61%、93.10%、93.44%，HPV 基因分型+TCT 檢測(cè)的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均高于HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)檢測(cè)（P＜0.05）。

2.3 一致性分析

HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)以及聯(lián)合診斷早期宮頸癌與病理學(xué)檢查結(jié)果的一致性Kappa 值分析表明，HPV 基因分型+TCT 檢測(cè)與病理檢查結(jié)果有極高的一致性。

表1 HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)及聯(lián)合診斷與手術(shù)病理結(jié)果（例）

表2 對(duì)比HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)與聯(lián)合診斷早期宮頸癌的診斷效能（%, n=236）

表3 對(duì)比HPV 基因分型、TCT 檢測(cè)單獨(dú)以及聯(lián)合診斷的一致性分析

3 討論

宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一，在全球范圍內(nèi)，每年約有20 多萬女性死于宮頸癌[4]。宮頸癌早期時(shí)可無明顯癥狀，也無特殊體征，往往出現(xiàn)最早的癥狀是陰道出血，開始常為少量的接觸性出血，絕經(jīng)后間斷性出血或白帶的增多，晚期可出現(xiàn)大量出血、惡病質(zhì)、消瘦、發(fā)熱、貧血，以及腫瘤侵犯所造成的周圍壓迫癥狀如下腹痛、腰痛等[5]。因此，篩查出宮頸癌高危人群對(duì)患者預(yù)防以及治療極其重要。TCT 檢測(cè)是宮頸病變檢查的第一步，其具有特異度高等優(yōu)勢(shì)，所以當(dāng)其檢測(cè)結(jié)果為良性時(shí)，后面的檢查則無需再做，其在篩查宮頸癌中起到了事半功倍的效果。

在本次研究中，TCT 檢測(cè)在宮頸癌早期診斷中的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率、陽性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值均與文獻(xiàn)報(bào)告中的基本一致[6]。TCT檢測(cè)在采集標(biāo)本與制備玻片技術(shù)上取得了重大突破，使其取材方便，明顯提高了對(duì)涂片的滿意度，使醫(yī)師閱片更加容易，從而提高了異常細(xì)胞的檢出率以及診斷早期宮頸癌的準(zhǔn)確性。但TCT 檢測(cè)的診斷結(jié)果易受到醫(yī)師的主觀判斷影響，所以可能出現(xiàn)假陰性等情況，導(dǎo)致其特異度高，但敏感度卻比較低[7]。因此，需結(jié)合其他輔助檢查對(duì)早期宮頸癌進(jìn)行診斷。

CIN 與宮頸癌發(fā)生病變的必然因素為生殖道HPV 的持續(xù)感染[8]。在CIN 患者中，大多數(shù)患者會(huì)患有HPV 感染，但一般認(rèn)為感染HPV 是一過性的，會(huì)隨著時(shí)間感染逐漸清除，但會(huì)有極小部分患者會(huì)發(fā)展為持續(xù)感染。在研究中，病理學(xué)檢查結(jié)果一致性較高，與李帆[9]等學(xué)者的研究結(jié)果相似，提示HPV 基因分型可以有效篩選出高級(jí)別CIN 以及宮頸癌病變。李帆學(xué)者發(fā)現(xiàn)，HPV 基因檢測(cè)可以有效篩選出宮頸癌高風(fēng)險(xiǎn)人群，具有準(zhǔn)確性高等優(yōu)點(diǎn)，其還可以對(duì)CIN 的轉(zhuǎn)歸進(jìn)行預(yù)測(cè)，但其同時(shí)也存在一些不足之處，HPV 基因分型結(jié)果呈陽性并不代表一定存在宮頸病變，也不能判斷其病變的程度。

在研究中，筆者發(fā)現(xiàn)HPV 基因分型聯(lián)合TCT 檢測(cè)的診斷效能高于HPV 基因分型與TCT檢測(cè)，病理學(xué)檢查結(jié)果一致性極強(qiáng)，HPV 基因分型聯(lián)合TCT 檢測(cè)可以提高宮頸癌早期的靈敏性和陰性預(yù)測(cè)值，但其特異度卻降低，分析原因在于：在診斷實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)中，靈敏度與特異度是一種矛盾體，兩者不能同時(shí)增高或降低。過往在研究宮頸癌早期篩查中同樣也發(fā)現(xiàn)，HPV基因分型聯(lián)合TCT 檢測(cè)會(huì)提高檢測(cè)宮頸細(xì)胞病變的靈敏度，但同樣其特異度也會(huì)降低，與本研究的研究結(jié)果相似[10]。

綜上所述，HPV 基因分型聯(lián)合TCT 檢測(cè)可以補(bǔ)全兩種方法單獨(dú)應(yīng)用的不足，還可提高宮頸癌早期診斷的靈敏度、檢出率，降低漏診、假陽性概率，可以在早期有效篩選宮頸上皮細(xì)胞病變。