血清腫瘤異常蛋白與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在宮頸癌中的表達(dá)水平及臨床意義探討

苗琴，劉亞敏

濟(jì)南市第八人民醫(yī)院病理科，山東濟(jì)南 271104

宮頸癌（cervical cancer，CA）是女性發(fā)病率、病死率均居于前列的惡性腫瘤，受到女性的廣泛關(guān)注[1]。CA的發(fā)病與初次性生活年齡、不良性行為、人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染等多種因素相關(guān)[2-3]。CA的預(yù)后與發(fā)現(xiàn)是否及時(shí)相關(guān)，早期CA患者的預(yù)后相對(duì)較好[4]。CA的篩查一般是通過腫瘤標(biāo)志物指標(biāo)、影像學(xué)，但其中依然有部分患者未能檢出，導(dǎo)致錯(cuò)過最佳的干預(yù)時(shí)機(jī)[5-6]。血清腫瘤異常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）是近年來腫瘤領(lǐng)域的新熱點(diǎn)，有機(jī)會(huì)成為腫瘤診斷的標(biāo)志物指標(biāo)[7]。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是調(diào)節(jié)神經(jīng)、血管形成的多肽生長(zhǎng)因子，在機(jī)體中分布較廣，可對(duì)多種細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化起到調(diào)節(jié)作用[8]。本研究選取2021年3月—2023年6月在濟(jì)南市第八人民醫(yī)院接受CA篩查的87例患者為研究對(duì)象，探討TAP與bFGF在CA中的表達(dá)情況及臨床意義?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇于本院接受CA篩查的87例受檢者為研究對(duì)象，其中37例經(jīng)病理學(xué)確診為CA，29例患者是非CA的上皮內(nèi)瘤變（intraepithelial neoplasia，IN）患者，21例健康者。受檢者年齡25～74歲，平均（54.82±14.91）歲；有性生活史72例，無性生活史15例；有生育史46例，無生育史41例。其中：CA患者年齡25～72歲，平均（55.19±12.71）歲；有性生活史31例，無性生活史6例；有生育史21例，無生育史16例。IN患者年齡28～74歲，平均（54.29±12.52）歲；有性生活史24例，無性生活史5例；有生育史17例，無生育史12例。健康者年齡25～71歲，平均（54.67±12.29）歲；有性生活史例17，無性生活史4例；有生育史8例，13無生育史例。對(duì)比分析3組受檢者的一般資料，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性?；颊呔炇鹬橥鈺?，本研究已通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①CA患者經(jīng)病理學(xué)診斷得到證實(shí)；②所有患者均接受TAP、bFGF的篩查。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①入組前已經(jīng)接受化療、放療、免疫治療者；②合并其他惡性腫瘤者；③合并嚴(yán)重精神性疾病者。

1.3 方法

①TAP 采集患者的空腹靜脈血，離心機(jī)分離血清。使用TAP試劑盒并按照操作步驟（上?？瓢┥铮┨幚?，再利用檢測(cè)傳統(tǒng)圖像分析儀進(jìn)行觀察，能夠發(fā)現(xiàn)不規(guī)則類型圓形晶體顆粒、顆粒為淡綠色、淡黃色、棕色，且中心存在屈光性，四周因混合物較多呈黑色或墨綠色為陽性；無顆粒檢出則為陰性。TAP凝聚物面積如＜121 μm2：視為正常，無明顯的凝聚物；凝聚物面積121～225 μm2：視為凝聚物較小，建議進(jìn)行腫瘤的進(jìn)一步排查；凝聚物面積＞225 μm2：視為凝聚物較大，建議進(jìn)行腫瘤的進(jìn)一步排查。

②bFGF 采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)，試劑購買自Santa Cruz公司，bFGF稀釋濃度為1∶500。采集的組織標(biāo)本使用多聚甲醛固定，石蠟包埋，制作成4 μm厚度的切片，切片后以磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer solution，PBS）沖洗，3 min，再以3%過氧化氫室溫孵育10 min，PBS沖洗3 min，加入5%牛血清孵育10 min。滴加一抗，在4℃下孵育過夜，沖洗后滴加二抗室溫孵育20 min，沖洗后加入鏈親和素-過氧化物酶孵育20 min，沖洗后以二氨基聯(lián)苯胺顯色，蘇木精復(fù)染，再經(jīng)脫水、透明、封片處理完成制片。使用顯微鏡對(duì)切片進(jìn)行觀察，陽性為細(xì)胞質(zhì)呈彌散的棕黃色，1個(gè)視野范圍內(nèi)陽性細(xì)胞≥10%；陰性為1個(gè)視野范圍內(nèi)陽性細(xì)胞＜10%。參考范圍：0～64 U/mL。

1.4 觀察指標(biāo)

①對(duì)比各組患者的TAP、bFGF表達(dá)情況。

②分析不同TAP、bFGF 的 CA患者臨床特征，包括年齡、FIGO分期、病理類型、浸潤(rùn)情況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（）表示，行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組受檢者TAP、bFGF對(duì)比

CA患者的TAP、bFGF的水平均高于IN患者、健康者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3組受檢者TAP、bFGF對(duì)比()

表1 3組受檢者TAP、bFGF對(duì)比()

組別CA（n=37）IN（n=29）健康者（n=21）tCA vs IN值PCA vs IN值tCA vs健康者值PCA vs健康者值tIN vs健康者值PIN vs健康者值TAP（μm2）251.26±25.96 135.15±12.93 56.93±8.53 22.015＜0.001 33.191＜0.001 24.144＜0.001 bFGF（U/mL）92.53±11.72 45.93±11.82 21.29±5.72 15.972＜0.001 26.077＜0.001 8.817＜0.001

2.2 TAP與CA患者臨床特征的表達(dá)分析

不同F(xiàn)IGO分期、浸潤(rùn)情況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移不同的宮頸患者TAP、bFGF對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 CA患者TAP、bFGF臨床特征的表達(dá)分析

3 討論

TAP是癌細(xì)胞異常增生過程中表現(xiàn)出的特征，由癌基因和抑癌基因突變后表達(dá)產(chǎn)生[9]。在腫瘤惡性病變的過程中，糖基轉(zhuǎn)移酶、糖苷酶等逐漸失去活性，或受到外部因素影響，導(dǎo)致失去活性的酶被再次激活，這期間的過程會(huì)引起“異常糖基化”[10]。本研究對(duì)TAP實(shí)施檢測(cè)，結(jié)果顯示CA組患者的TAP達(dá)到（251.26±25.96）μm2，提示CA患者大部分TAP呈陽性表達(dá)，同時(shí)凝聚物面積較大。王亞通等[11]的研究中也分析了CA患者的TAP檢出情況，其結(jié)果顯示陽性率為87.72%，再次證實(shí)CA患者的TAP大多呈陽性表達(dá)。TAP陽性表達(dá)說明異常糖基化的程度高，反映此過程與CA的發(fā)病、進(jìn)展密切相關(guān)。

bFGF屬于撕裂原活性的多肽因子，可促進(jìn)成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，進(jìn)而促進(jìn)組織異常增生和腫瘤新生血管形成[12]。機(jī)體正常狀態(tài)下bFGF呈陰性或弱陽性表達(dá)，而在腫瘤的形成和發(fā)展中，通過增加bFGF分泌可達(dá)到促進(jìn)腫瘤增殖的作用[13]；其次，bFGF可促進(jìn)新生血管形成，為腫瘤生長(zhǎng)提供更多能量，也能夠達(dá)到促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的作用[14]。本研究中CA患者的bFGF表達(dá)水平相較IN、健康者均更高（P＜0.05），提示bFGF也參與了CA的發(fā)病、發(fā)展過程。劉松格等[15]的研究中，CA組的bFGF的陽性率為88.14%、瘤變組為59.15%、對(duì)照組為6.00%，反映出bFGF在CA的發(fā)病、發(fā)展過程中扮演重要作用。

綜上所述，本研究結(jié)果表明CA患者大多TAP、bFGF呈現(xiàn)陽性表達(dá)，并且與臨床特征存在一定相關(guān)性，提示TAP、bFGF可作為CA診斷、病情評(píng)估、預(yù)后預(yù)測(cè)的重要參數(shù)。