2-甲氧基肉桂醛對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的影響

李慧歆，粟裕冬，董波

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250014；2.山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250021）

心血管疾病是全球范圍人類死亡的主要原因之一。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。╟oronary atherosclerotic heart disease，CHD），簡(jiǎn)稱冠心病，是心血管疾病中發(fā)病率最高、死亡風(fēng)險(xiǎn)最大的疾病之一。目前對(duì)于冠心病導(dǎo)致的血管堵塞，有效的非藥物治療手段當(dāng)屬經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療（percutaneous coronary intervention，PCI），它可以快速打開(kāi)阻塞動(dòng)脈并減少心臟損害［1-2］。然而有研究表明，PCI術(shù)后有5%～15%患者在1年內(nèi)會(huì)發(fā)生不良心血管事件［3-4］，其中再狹窄率可達(dá)3%～20%［5］。原因是介入過(guò)程中損傷了血管內(nèi)膜，導(dǎo)致多種細(xì)胞介質(zhì)釋放，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）發(fā)生了表型轉(zhuǎn)化，從收縮表型轉(zhuǎn)化為合成表型，并從中膜遷移到內(nèi)膜，使內(nèi)膜增厚，導(dǎo)致血管狹窄。細(xì)胞介質(zhì)中，血小板衍生生長(zhǎng)因子-BB（PDGF-BB）是發(fā)揮主要作用的介質(zhì)之一，PDGF-BB能夠和VSMCs表面的酪氨酸激酶受體結(jié)合，從而激活細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號(hào)通路，參與血管內(nèi)膜新生的發(fā)生和發(fā)展，進(jìn)而導(dǎo)致血管狹窄［6］。

肉桂是中醫(yī)學(xué)常用藥材，具有散寒止痛、溫經(jīng)通脈的功效。張仲景將胸痹的病機(jī)歸納為“陽(yáng)微陰弦”，治療以溫陽(yáng)通脈為主，因此肉桂可用于治療寒凝阻滯型冠心病［7］。2-甲氧基肉桂醛（2-methoxycinnamaldehyde，2-MCA）是肉桂中的有效成分之一?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，2-MCA具有抗炎［8］、抑制癌細(xì)胞增殖［9］、抗氧化應(yīng)激［10］等作用。但其是否能抑制VSMCs表型轉(zhuǎn)化，作用尚不明確。本研究采用PDGF-BB誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)化，并探究2-MCA對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)化的影響，以期為臨床預(yù)防血管內(nèi)膜新生提供依據(jù)。

1 試劑及儀器

1.1 試劑

純度99.42%葛根素（MCE公司，貨號(hào)：HYN0145）；DMEM高糖培養(yǎng)基、胎牛血清（美國(guó)Gibco公司，貨號(hào)：11995500、10099-141）；CCK8、結(jié)晶紫溶液（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，貨號(hào)：C0038、C0121）；BCA試劑盒（貨號(hào)：PC0020）、牛血清白蛋白（貨號(hào)：A8020）、Transwell-24膜嵌套（貨號(hào)：3422）購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司；重組鼠PDGF-BB（貨號(hào)：315-18）購(gòu)自美國(guó)Peprotech公司；兔抗Osteopontin多克隆抗體（貨號(hào)：22952-1-AP）、兔抗SMMHC多克隆抗體（貨號(hào)：21404-1-AP）、兔抗GAPDH多克隆抗體（貨號(hào)：10494-1-AP）購(gòu)自美國(guó)Proteintech Group公司；兔抗Smoothelin 多克隆抗體（貨號(hào)：A6745）購(gòu)自武漢愛(ài)博泰克（ABclonal）生物科技有限公司；兔抗α-SMA單克隆抗體（貨號(hào)：ab124964）、山羊抗兔IgG H&L （Alexa Fluor?488）（貨號(hào)：ab150077）購(gòu)自英國(guó)Abcam公司；辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔IgG（H + L）（貨號(hào)：ZB-2301）購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.2 儀器

1384超凈工作臺(tái)（美國(guó)Thermo Fisher公司）；Forma-Steri-Cycle 371恒溫二氧化碳培養(yǎng)箱（美國(guó)Thermo Fisher 公司）；Ni-E手動(dòng)正置熒光顯微鏡、Ti-S手動(dòng)倒置熒光顯微鏡（日本Nikon公司）；Multifuge X1R高性能通用臺(tái)式離心機(jī)（美國(guó)Thermo Fisher公司）；Synergy HI Microplate Reader連續(xù)波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio Tek儀器有限公司）；Amersham Imager 680超敏化學(xué)發(fā)光成像儀（美國(guó)GE公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)雄性SD大鼠（濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司），6周齡，體質(zhì)量（200±15）g，許可證號(hào)：SCXK（魯）20190003。

2 方法

2.1 原代細(xì)胞提取

將SD大鼠麻醉后處死，固定在手術(shù)臺(tái)上，取下主動(dòng)脈放進(jìn)含20% FBS的完全培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)移至超凈工作臺(tái)。將血管縱向剖開(kāi)，用鑷子將中、外膜分離，將中膜轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)皿中剪至針尖大小，再放到T25培養(yǎng)瓶中，使其均勻分布。沿瓶壁加入5 mL含20% FBS的完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中直立放置1.5 h后，緩慢放平，讓培養(yǎng)基完全浸沒(méi)組織塊。7 d后可見(jiàn)組織塊周圍有細(xì)胞爬出，3周后進(jìn)行傳代。待細(xì)胞傳至第3代時(shí)進(jìn)行鑒定。

2.2 原代細(xì)胞鑒定

將消化后的第3代VSMCs種在24孔板爬片上，貼壁后，用4%多聚甲醛固定15 min，PBS清洗3遍后，再加入0.1% Triton X-100通透20 min，清洗后再用5%BSA溶液封閉30 min。加入稀釋好的α-SMA抗體（1∶200） 4 ℃過(guò)夜。次日，室溫避光條件下用熒光二抗孵育1 h，PBS清洗后用含DAPI的封片液封片，于正置熒光顯微鏡下觀察拍照。

2.3 細(xì)胞活性檢測(cè)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的VSMCs，用胰酶消化后收集細(xì)胞接種于96孔板中，每組設(shè)6個(gè)復(fù)孔。①毒性檢測(cè)：待細(xì)胞貼壁后將細(xì)胞分為5組，分別加入含不同濃度2-MCA（0、100、200、400、800 μmol/L）培養(yǎng)基100 μL，放入37 ℃，5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。②增殖檢測(cè)：待細(xì)胞貼壁后將細(xì)胞分為對(duì)照組、PDGF-BB組（加入10 ng/mL PDGF-BB的培養(yǎng)基100 μL）和PDGF-BB + 2-MCA組（加入10 ng/mL PDGF-BB和100 μmol/L 2-MCA的培養(yǎng)基100 μL），放入37 ℃，5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。24 h后，每孔加入10 μL CCK8溶液，于37 ℃孵箱中培養(yǎng)2 h，取出后用多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)450 nm波長(zhǎng)處的吸光值（OD值）。

2.4 細(xì)胞劃痕檢測(cè)

將對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的VSMCs接種于6孔板中，待其密度達(dá)90%左右時(shí)，用無(wú)血清培養(yǎng)基饑餓12 h，再用20 μL槍頭在孔中劃3條豎線，用PBS洗凈脫落的細(xì)胞。對(duì)照組、PDGF-BB組和PDGF-BB + 2-MCA組分別用相應(yīng)的無(wú)血清培養(yǎng)基刺激24 h，刺激前后均于倒置顯微鏡下觀察同一位置，拍照記錄。

2.5 Transwell小室檢測(cè)

用無(wú)血清培養(yǎng)基將消化后的細(xì)胞稀釋成為2 × 105個(gè)/mL。取100 μL含細(xì)胞培養(yǎng)基加入小室上層，放入24孔板中，下室中加入600 μL含10% FBS的完全培養(yǎng)基，使濾膜完全浸入下層培養(yǎng)基中，在上室中分別加入PDGF-BB和2-MCA，使其濃度分別達(dá)到10 ng/mL和100 μmol/L。培養(yǎng)24 h后，取出小室，用PBS清洗2遍，4%多聚甲醛固定30 min，清洗后再用0.1%結(jié)晶紫染色30 min，用棉簽擦去小室內(nèi)殘余細(xì)胞，置于倒置顯微鏡下觀察拍照。

2.6 Western blot檢測(cè)表型轉(zhuǎn)化標(biāo)志物

將細(xì)胞分為對(duì)照組、PDGF-BB組和PDGF-BB +2-MCA組。相應(yīng)藥物刺激24 h后，配制裂解液（RIPA∶PMSF∶磷酸酶抑制劑 = 100∶1∶1）在冰上裂解VSMCs，30 min后在4 ℃條件下13 000 r/min離心15 min，收集蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)經(jīng)BCA檢測(cè)定量后，每孔上樣20 μg，用10% SDS-PAGE凝膠進(jìn)行電泳并轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，用5% BSA溶液在室溫下封閉1 h。然后按照分子量將膜裁開(kāi)，與相應(yīng)抗體的稀釋液（1∶1 000）在4 ℃搖床上孵育過(guò)夜，次日，TBST清洗3遍，每次10 min，然后與HRP結(jié)合的二抗稀釋液（1∶5 000）在室溫孵育1 h，TBST清洗3遍后，曝光、顯影，使用ImageJ軟件進(jìn)行定量分析。

2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。使用SPSS 26.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，滿足方差齊性的數(shù)據(jù)進(jìn)行多組間單因素方差分析（one-way ANOVA），各組結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。P＜ 0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 原代細(xì)胞鑒定

平滑肌肌動(dòng)蛋白α（alpha，smooth muscle actin，α-SMA）是VSMCs的特異性標(biāo)志物，常用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞鑒別。α-SMA顯綠色熒光，細(xì)胞核顯藍(lán)色熒光，細(xì)胞中可見(jiàn)明顯肌絲，提示從大鼠主動(dòng)脈中提取出來(lái)的原代細(xì)胞α-SMA表達(dá)陽(yáng)性，可證明該細(xì)胞確實(shí)為VSMCs。見(jiàn)圖1。

圖1 原代VSMCs鑒定（× 100）

3.2 細(xì)胞毒性檢測(cè)

分別用0、100、200、400、800 μmol/L的2-MCA處理VSMCs 24 h。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與0 μmol/L組比較，100 μmol/L的2-MCA對(duì)VSMCs的活性無(wú)明顯影響，200、400、800 μmol/L的2-MCA使VSMCs的細(xì)胞活性明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.000 1），因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇VCMCs濃度為100 μmol/L。見(jiàn)表1。

表1 不同濃度2-MCA處理24 h后細(xì)胞存活率比較（±s）

表1 不同濃度2-MCA處理24 h后細(xì)胞存活率比較（±s）

注：與0 μmol/L組比較，****P ＜ 0.000 1。

濃度/（μmol/L）0 100 200 400 800細(xì)胞活性/%101.69±1.73 97.55±3.69 84.7±0.91****41.94±2.38****18.64±0.90****n3 3 3 3 3

3.3 2-MCA抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs增殖

用PDGF-BB和100 μmol/L的2-MCA處理VSMCs 24 h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，PDGF-BB組細(xì)胞活性增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.000 1），與PDGF-BB組比較，2-MCA能明顯抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.01）。見(jiàn)表2。

表2 各組細(xì)胞活性情況比較（±s）

表2 各組細(xì)胞活性情況比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，####P ＜ 0.000 1；與PDGF-BB組比較，**P ＜ 0.01。

組別對(duì)照組PDGF-BB組PDGF-BB + 2-MCA組細(xì)胞活性/%100.00±3.13 206.26±8.73####181.13±2.19**n3 3 3

3.4 2-MCA抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移

用PDGF-BB和100 μmol/L的2-MCA處理劃痕細(xì)胞24 h后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，PDGF-BB組劃痕愈合明顯（P＜ 0.01），用100 μmol/L 2-MCA處理后，能明顯抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的劃痕愈合，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。Transwell結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，PDGF-BB組細(xì)胞遷移數(shù)明顯增多（P＜ 0.01），與PDGF-BB組比較，PDGF-BB + 2-MCA組細(xì)胞遷移數(shù)明顯減少（P＜ 0.01）。見(jiàn)表3和圖2、3。

表3 各組細(xì)胞遷移率比較（±s）

表3 各組細(xì)胞遷移率比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，##P ＜ 0.01；與PDGF-BB組比較，*P ＜ 0.05，**P ＜ 0.01。

遷移數(shù)/個(gè)31±4 75±9##40±12**組別對(duì)照組PDGF-BB組PDGF-BB+2-MCA組n3 3 3遷移率/%8.78±4.47 39.71±7.82##24.54±3.51*

圖2 2-MCA對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs劃痕的影響（× 40）

圖3 2-MCA對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移的影響（× 200）

3.5 2-MCA對(duì)VSMCs表型轉(zhuǎn)化的影響

平滑肌蛋白（smoothelin，SMTN）以及平滑肌肌球蛋白重鏈（smooth muscle myosin heavy chain，SMMHC）是VSMCs的收縮標(biāo)志物，骨橋蛋白（osteopontin，OPN）是合成標(biāo)志物。當(dāng)收縮標(biāo)志物減少，合成標(biāo)志物增多則說(shuō)明VSMCs發(fā)生了表型轉(zhuǎn)化。與對(duì)照組比較，PDGFBB能夠減少SMMHC和SMTN的蛋白表達(dá)（P＜ 0.05，P＜ 0.01），增加OPN的蛋白表達(dá)（P＜ 0.05），而2-MCA處理24 h后，OPN表達(dá)減少（P＜ 0.05），SMMHC和SMTN表達(dá)增多（P＜ 0.05）。見(jiàn)圖4。

圖4 2-MCA對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)化的影響

4 討論

PCI作為改善心肌血流灌注最有效的方法之一，其術(shù)后再狹窄的發(fā)生嚴(yán)重影響了治療的遠(yuǎn)期效果，對(duì)患者和家屬的經(jīng)濟(jì)及心理都產(chǎn)生了不可忽視的壓力。而由血管壁損傷引發(fā)的VSMCs表型轉(zhuǎn)化及內(nèi)膜新生在其中起著主要作用［11］。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈具有三層結(jié)構(gòu)，外膜的主要成分是纖維結(jié)締組織，中膜由平滑肌細(xì)胞組成，內(nèi)膜則由內(nèi)皮細(xì)胞組成。VSMCs在體內(nèi)是高度分化細(xì)胞，具有很強(qiáng)的可塑性，在生理狀態(tài)下處于收縮表型，能夠維持血管彈性，調(diào)控血壓和血流分布，增殖遷移能力弱［12］。然而內(nèi)皮損傷后，VSMCs直接暴露在血液中，某些活性介質(zhì)會(huì)使VSMCs的表型發(fā)生改變，從收縮表型轉(zhuǎn)化為高度增殖和分泌的合成表型［13］，大量增殖的同時(shí)向內(nèi)膜遷移并分泌細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）以修復(fù)血管。過(guò)度的修復(fù)導(dǎo)致了內(nèi)膜增生及血管重構(gòu)，最終導(dǎo)致了再狹窄的發(fā)生［14］。因此抑制VSMCs的表型轉(zhuǎn)化是緩解再狹窄的關(guān)鍵步驟。

PDGF是一種重要的有絲分裂原和趨化劑，表達(dá)在血管平滑肌細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞和成骨樣細(xì)胞中，并且在各種血管相關(guān)疾病如高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化和血管再狹窄的發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。正常血管壁在生理狀態(tài)下PDGF水平較低，當(dāng)內(nèi)膜受損時(shí)，血小板會(huì)釋放PDGF，誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)化、增強(qiáng)炎癥反應(yīng)和血管氧化應(yīng)激進(jìn)而導(dǎo)致血管病變［6］。PDGF-BB是PDGF家族中的一種亞型，能夠和PDGF-β受體結(jié)合，促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移，同時(shí)還有研究認(rèn)為，PDGF-BB是調(diào)控VSMCs表型轉(zhuǎn)化的最強(qiáng)因子［15］。因此本實(shí)驗(yàn)在參考部分文獻(xiàn)以及進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)后，選擇10 ng/mL作為建立PDGF-BB體外誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)化模型的濃度。

PCI術(shù)后再狹窄屬“胸痹”范疇?！靶乇浴币辉~最早見(jiàn)于《黃帝內(nèi)經(jīng)》，后由張仲景闡明了該病的病因病機(jī)，認(rèn)為素體陽(yáng)氣虧虛，寒凝血脈，是導(dǎo)致心脈痹阻，發(fā)為疼痛的主要原因，并創(chuàng)立了一系列溫陽(yáng)方劑，為后世胸痹的治療奠定了基礎(chǔ)。唐代孫思邈在《千金要方》對(duì)胸痹的辨治中，以臟腑為核心，開(kāi)辟了新的療法，延續(xù)了仲景溫陽(yáng)之法，并將其細(xì)化為溫補(bǔ)心陽(yáng)和溫補(bǔ)中焦，使治療更具有針對(duì)性［16］。而葉天士善用溫通之藥，曾言“若夫胸痹，則但因胸中陽(yáng)虛不運(yùn)，久而成痹”［17］。有研究顯示，清代以前歷代醫(yī)家治療胸痹所用藥物中，溫陽(yáng)藥居首位［18］。

肉桂味辛、溫，有補(bǔ)火助陽(yáng)、散寒止痛、溫經(jīng)通脈、引火歸元的功效。2-甲氧基肉桂醛是肉桂的有效成分之一。有研究發(fā)現(xiàn)，2-MCA能夠抑制TNF-α誘導(dǎo)的VSMCs增殖和遷移，其主要是通過(guò)NF-κB信號(hào)通路發(fā)揮作用的［19］。但是2-MCA對(duì)于PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)化的影響，并無(wú)相關(guān)研究發(fā)表。

本研究使用組織貼壁法從大鼠體內(nèi)提取原代VSMCs，并用α-SMA進(jìn)行鑒定，結(jié)果顯示提取的原代細(xì)胞α-SMA陽(yáng)性率較高，說(shuō)明用該方法提取的細(xì)胞純度較好，且大部分為收縮表型，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。為了確定2-MCA的安全濃度范圍，本研究采用CCK8法進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，100 μmol/L以內(nèi)的2-MCA在24 h內(nèi)對(duì)VSMCs無(wú)明顯毒性，不影響其存活率，因此選擇了100 μmol/L 2-MCA進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。CCK8結(jié)果顯示，PDGF-BB對(duì)VSMCs有明顯的促進(jìn)增殖作用，用100 μmol/L的2-MCA干預(yù)24 h后，細(xì)胞增殖率較PDGF-BB組有所下降，說(shuō)明2-MCA能夠有效抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖。劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，PDGF-BB對(duì)VSMCs劃痕的愈合有明顯的促進(jìn)作用，而將2-MCA作用于VSMCs后，能夠明顯減少劃痕恢復(fù)的距離。Transwell結(jié)果顯示，PDGF-BB能夠引起VSMCs遷移增加，2-MCA處理后，可以減少VSMCs的遷移數(shù)目，以上兩個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明2-MCA能夠有效抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs遷移。Western blot結(jié)果顯示，PDGF-BB處理24 h后，細(xì)胞內(nèi)合成標(biāo)志物OPN表達(dá)增多，收縮標(biāo)志物SMMHC和SMTN表達(dá)均降低，說(shuō)明PDGF-BB能夠使VSMCs發(fā)生表型轉(zhuǎn)化，發(fā)生表型轉(zhuǎn)化的VSMCs增殖及遷移能力均增強(qiáng)，這與前面實(shí)驗(yàn)中驗(yàn)證的PDGF-BB能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移的結(jié)論相吻合。在PDGF-BB基礎(chǔ)上加用100 μmol/L 2-MCA，VSMCs內(nèi)合成標(biāo)志物有所降低，而收縮標(biāo)志物有所升高，說(shuō)明2-MCA抑制了PDGF-BB誘導(dǎo)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的作用，基于此推測(cè)2-MCA是通過(guò)抑制VSMCs表型轉(zhuǎn)化來(lái)抑制其增殖和遷移的。

此外，除了PCI術(shù)后再狹窄，VSMCs的表型轉(zhuǎn)化與動(dòng)脈瘤和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展也有密切聯(lián)系。合成表型的VSMCs會(huì)導(dǎo)致血管張力減弱，在血流作用下逐漸擴(kuò)張為動(dòng)脈瘤［20］。有研究發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過(guò)程中，VSMCs至少占了泡沫細(xì)胞的50%，同時(shí)合成表型的VSMCs分泌的細(xì)胞外基質(zhì)也促進(jìn)了內(nèi)膜增厚，進(jìn)一步堵塞血管［21］。

綜上所述，本研究通過(guò)體外建立VSMCs合成表型的細(xì)胞模型，探究2-甲氧基肉桂醛對(duì)VSMCs的作用。結(jié)果顯示，2-MCA能夠抑制VSMCs的增殖和遷移，該作用主要是通過(guò)抑制VSMCs的表型轉(zhuǎn)化來(lái)實(shí)現(xiàn)的，因此研究2-MCA對(duì)VSMCs表型轉(zhuǎn)化的抑制作用，不僅對(duì)解決PCI術(shù)后再狹窄有幫助，還為主動(dòng)脈瘤、動(dòng)脈粥樣硬化等血管疾病的臨床治療提供了研究基礎(chǔ)。