周洪磊,林國明,陳 志,李 鈞
(1.福建省洋澤海洋生物科技有限公司, 福建 福州 350603; 2.中國科學院海洋研究所, 山東 青島 266071; 3.福建省淡水水產研究所, 福建 福州 350025)
巖蟲隸屬環(huán)節(jié)動物門Annelida、多毛綱Polychaeta、磯沙蠶科Eunicidae、巖蟲屬Marphysa,俗稱“紅蟲”,主要棲息于潮間帶和潮下帶的泥沙、礫石底質區(qū)域,是一種較為珍貴的海釣餌料之一,國內價格高達到600元·kg-1。此外,巖蟲具有一定的生態(tài)修復功能,可有效改善泥沙底質和促進有機質分解,同時巖蟲提取物還具有藥用價值可作為抗癌藥物研發(fā)的原材料。
近年來,由于價值高,過度采捕導致野生資源急劇減少,已影響到其資源的可持續(xù)利用和發(fā)展。目前,巖蟲規(guī)?;斯し庇难芯抗ぷ魃形慈〉猛黄菩赃M展,相關研究主要集中在形態(tài)分類學[1-2]、組織學[3-4]、人工養(yǎng)殖[5-7]、生物醫(yī)藥[8]等方面,生長和繁殖性能方面報道也較少,僅楊大佐等[9]開展了室內人工繁育的初步研究。因此,本研究開展了3種生物餌料對巖蟲生長及繁殖性能的試驗研究,以期為開展巖蟲人工繁育及增養(yǎng)殖提供基礎參考資料。
試驗用巖蟲于2022年12月取自福建洋澤海洋生物科技有限公司鑒江基地。試驗前,選取該基地同一批同池、外觀完整無傷、攝食正常、體質健壯、體重相當的巖蟲為試驗材料,平均體長(28.5±1.2)cm,平均體質量(2.7±0.7)g。
試驗在標記為A、B、C的3口相鄰水泥池內進行,每口水泥池內分別設置3個試驗筐(平行試驗),試驗筐為底部和四周有孔的塑料筐,長寬高為56 cm×38 cm×29 cm,筐內底部和四周縫上60目尼龍網,筐內鋪細沙20 cm。用紅磚將筐底部四角墊起懸空約30 cm。開展3組生物餌料試驗,分別為菲律賓蛤仔肉Ruditapesphilippinarum、牡蠣肉Perinereisaibuhitensis、南極磷蝦Perinereisaibuhitensis,營養(yǎng)成分見表1,設置3個平行,每天投喂150 g。每天投喂1次,下午17:00~18:00點投喂,投餌時水位控制在60 cm。為保持池內水質清新,每天早上7:00~8:00全部換水,清理池底及培養(yǎng)筐內沙面殘餌和糞便。定期測定試驗池溫度、pH等環(huán)境因子,觀察巖蟲攝食及排泄狀況。
試驗投喂的3種生物餌料首先切碎成2~5 mm大小的顆粒,每天傍晚均勻投喂到培養(yǎng)框中。試驗期間日常水位控制90 cm,自然水溫為9.5℃~27.5℃,鹽度為22~28,水體溶氧為大于5.0 mg·L-1,pH 7.5~8.4,氨氮 ≤ 0.5 mg·L-1,亞硝酸鹽 ≤ 0.1 mg·L-1。每筐放養(yǎng)50條巖蟲,巖蟲穩(wěn)定鉆進沙中后開始試驗,試驗從2022年12月25日至2023年5月22日,合計180 d。
試驗前測定各試驗組的巖蟲平均體質量,試驗結束時再次測量巖蟲的平均體質量,并按公式計算增重率、特定生長率,記錄各試驗組的產卵時間、產卵數、產卵次數。隨機挑選各組收集好的受精卵30個,在解剖鏡下測量平均卵徑;以出現三剛節(jié)疣足幼體為標準計算孵化率。
增重率= (W終末-W初始)/W初始×100%;
特定生長率=100%×(InW終末-InW初始)/180;
孵化率= 三剛節(jié)幼體數/受精卵數×100%。
采用 SPSS25.0統(tǒng)計分析軟件對數據進行單因素方差分析(One-wayANOVA)。當達到顯著差異水平(P<0.05),則進行Tukey多重比較。
巖蟲的攝食過程可分為尋食、取食和吞食3個階段。洞口周圍無食物時,巖蟲躲避在砂質洞中,洞口有食物時,快速將食物拖入洞中,食物于洞口較遠距離時,巖蟲會延伸身體,用顎齒夾住食物,用顎齒夾碎食物后吞食。投喂食物1 min后,即有巖蟲試探出洞,30 min內陸續(xù)有巖蟲出洞覓食。菲律賓蛤仔碎肉不會潰散,巖蟲會拖進洞內或在洞口攝食;南極磷蝦碎肉容易在水中漂動,巖蟲攝食相對花費時間;近江牡蠣肉更加細碎,巖蟲攝食碎屑更容易。
由表2可知,各試驗組的巖蟲存活率均為100%,經過180 d的投喂,各試驗組的重量均有不同程度增加。其中A組增重率最高,其次為B組,C組增重率最低,其中B組和C組增重率較為接近。A組特定生長率達0.475%,高于B、C兩組。
表2 3種生物餌料對巖蟲生長的影響
由表3可知,平均產卵量B組最高,其次為C組,A組最低,B組和C組的平均產卵量較為接近。至試驗結束止,各試驗組的產卵次數均為3次,各組每次產卵的時間間隔期大致相同,均在6~8 d內,差異較小。初次產卵時間B組早于A組和C組,其中C組最遲。
表3 3種生物餌料對巖蟲產卵數量、產卵次數及產卵間期的影響
由表4可知,各試驗組間平均卵徑差異不顯著(P<0.05),其中B組的最大,其次是A組,C組最小;平均孵化率各試驗組間差異顯著(P>0.05),B組最高,達90.67%,A組和B組較接近,分別為86.33%、76.00%。
表4 3種生物餌料對巖蟲卵徑和孵化率的影響
巖蟲與我國分布較廣的沙蠶都屬于潮間帶的底棲生物,但生活習性與繁殖習性均有所差異,目前沙蠶的全人工育苗技術已趨于成熟,而巖蟲的規(guī)?;缂夹g還未取得突破。在繁殖方面,沙蠶是一年生的,且繁殖季節(jié)沙蠶會變態(tài)成異沙蠶體,有群舞現象,巖蟲與沙蠶最大差異是巖蟲親體產卵后不死亡,可多年重復利用親本資源,優(yōu)勢明顯。
巖蟲具有極發(fā)達的消化盲囊,其黏膜突起形成了指狀絨毛,這極大地提高了消化吸收的功能[10]。在自然界中一般攝食小型底棲生物物和有機碎屑,人工養(yǎng)殖條件下一般投喂蛋白含量較高的蝦料,但投喂量控制不好容易污染水質。菲律賓蛤仔肉、牡蠣肉和南極磷蝦均是巖蟲適宜的生物餌料,本試驗中巖蟲對菲律賓蛤仔肉的攝食較快,投喂無剩余,牡蠣肉和南極磷蝦偶爾少量剩余,另外南極磷蝦破碎后,部分在水中漂浮,不利于巖蟲攝食。投喂菲律賓蛤仔肉(A組)巖蟲的增重率和特定生長率均最高,分別為135%和0.475%,其次為B組,C組最低。特定生長率越大代表其體質量增加越快,質量增加率越高。這與朱文博等[11]研究有所差異,其認為在促進短蛸Octopusocellatus生長方面菲律賓蛤仔肉不如蟹類。
由于不同餌料營養(yǎng)的組成及含量通常不同,因此,不同生物餌料對巖蟲繁殖性能的影響實質上是不同餌料營養(yǎng)對性腺發(fā)育的影響。餌料中對性腺發(fā)育密切相關的營養(yǎng)主要是脂類、氨基酸、維生素和其他一些微量元素,對性腺發(fā)育的質量起決定作用[12]。投喂的3種生物餌料營養(yǎng)成分[13-19]也存在一定的差異,粗蛋白含量及氨基酸種類等均存在一定的差異。南極磷蝦和菲律賓蛤仔的EPA+DHA含量較為接近,氨基酸含量也是甲殼動物南極磷蝦較多。產卵結果也表明,3種生物餌料對巖蟲繁殖性能影響有所差異,投喂牡蠣(B組)在2023年4月就開始陸續(xù)產卵,且平均產卵量最高。牡蠣具有較高的蛋白質和膽固醇,氨基酸組成與巖蟲相近,其營養(yǎng)也比較有利于巖蟲卵巢發(fā)育,在產卵量、產卵率、連續(xù)產卵率方面都有明顯優(yōu)勢。各試驗組平均卵徑差異不顯著,卵徑的大致范圍在275~285 μm,可能與其親本的種質資源有關,投喂牡蠣組的孵化率最高,達到了90.67%,說明前期的投喂餌料種類對孵化率影響較大,可以進一步研究餌料中具體成分的影響。研究也發(fā)現,水生動物的繁殖和生殖細胞的生長都需要相當數量的關鍵營養(yǎng)物質,例如高度不飽和脂肪酸(DHA、EPA)、磷脂等。巖蟲一般在冬季水溫7℃~8℃性腺細胞即開始發(fā)育,在福建地區(qū)一般4月份的水溫會陸續(xù)達到20℃以上,所以在育苗工作開展前,性腺培育工作不可或缺。樊曉旭等[20]研究了4種餌料曼氏無針烏賊Sepiellamaindroni繁殖性能的影響,姚衛(wèi)軍等[21]也指出,以混合投喂,比單一用烏賊或牡蠣投喂,親蝦性腺發(fā)育、受精卵孵化率和幼體變態(tài)率的效果更好。
除了攝食餌料中的營養(yǎng)物質對巖蟲繁殖性能有顯著影響外,水溫、光照和水質也能影響巖蟲的繁育效果。例如,Perez-Velazquez M等[22]研究了溫度對野生凡納濱對蝦Litopenaeusvannamei精子質量的影響;曹昆[23]認為鹽度和光照能有效誘導雌性克氏原螯蝦Procambarusclarkii性腺快速發(fā)育,鹽度和光照促進克氏原螯蝦性腺發(fā)育,其中光照影響較大;祝斐等[24]研究了光周期對松江鱸魚Preliminary生長和性腺發(fā)育的影響;王賽賽等[25]研究了復合益生菌對大口黑鱸Micropterussalmoides延后繁殖性能的影響。水質也是影響巖蟲繁殖的重要因素之一,在規(guī)模化生產過程中,巖蟲的育苗用水須經過24 h的沉淀和砂濾、二次消毒處理,同時要對育苗池、沙層、使用工具和場地進行全面清洗和消毒;親本引進前也需要進行消毒處理,同時從水中收集的受精卵要進行選優(yōu)和消毒清洗,提高孵化率。靳曉敏等[26]開展了日本對蝦(Penaeusjaponicus)的育苗,認為水質在很大程度上決定了蝦苗的成功率。近年來,種質退化問題日益嚴重,不合時宜的催產育苗、多代持續(xù)的近親交配繁殖,尤其是出自同一父、母本的小群體親本,造成優(yōu)良性狀出現衰退,這也是影響水產動物繁殖性能的主要因素之一。
巖蟲幼體在浮游期主要攝食海洋微藻,附底后則攝食一些動物性的生物餌料,是肉食性種類,目前養(yǎng)殖過程中主要是以冰鮮雜魚為主,存在儲存不便、營養(yǎng)單一、供應不穩(wěn)定等弊端;部分投喂蝦料,但蝦料的營養(yǎng)成分無法完全滿足巖蟲的營養(yǎng)需求,因此有必要尋求替代的專用的配合餌料。目前市場上暫無商品化的巖蟲餌料,主要原因:一是巖蟲養(yǎng)殖規(guī)模較小,目前無法形成一定的產業(yè)規(guī)模。二是投喂蝦料因長時間被海水浸泡或無攝食容易導致水質和底質惡化。李石磊等[10]研究表明,添加動物蛋白組飼料優(yōu)于投喂添加植物蛋白和單胞藻的組,投喂添加魚粉和蝦粉含量為30%~70%的配合飼料可以取得較好的巖蟲養(yǎng)殖效果。本研究中菲律賓蛤仔肉較適作為巖蟲日常投喂餌料,近江牡蠣肉適宜開發(fā)為巖蟲親本強化的生物餌料。下一步可探索巖蟲人工配合飼料中使用貝類蛋白來源原料的可行性。
經過6個月投喂,結果表明:各餌料組的成活率均為100%;增重率:A組 (135%)>B 組(112%)>C組 (106%);特定生長率:A組 (0.475%)>B組 (0.417%)>C組 (0.401%);B組開始產卵時間最早,平均產卵量最高。各試驗組平均卵徑差異不顯著,卵徑范圍:278~280 μm,各試驗組平均孵化率:B (90.67%)>A (86.33%)>C (76.00%)。試驗結果表明,菲律賓蛤仔肉較適作為巖蟲日常投喂餌料,近江牡蠣肉適宜開發(fā)為巖蟲親本強化的生物餌料。